荔枝蝽 Tessaratoma papillosa卵黃原蛋白及受體的序列及時(shí)空表達(dá)分析

程林 韓順財(cái) 蔣敬濤 李海超 彭凌飛

摘要：【目的】為荔枝蝽Tessaratorria papillosa的產(chǎn)卵繁殖行為提供分子層面的理論基礎(chǔ)，并為荔枝蝽防治的靶點(diǎn)篩選提供有益思路?！痉椒ā坎捎棉D(zhuǎn)錄組測(cè)序的方法，對(duì)荔枝蝽小同發(fā)育時(shí)期及組織進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序。通過篩選荔枝蝽的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)和分子克隆的方法獲得荔枝蝽卵黃原蛋白及其受體基因，并利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（ qRT-PCR）分析其在小同發(fā)育階段和組織部位的時(shí)空表達(dá)情況?！窘Y(jié)果】獲得荔枝蝽3個(gè)卵黃原蛋白基因（Tpapi Vgl，Tpopi Vg2，Tpapi Vg3）和1個(gè)卵黃原受體蛋白基因（Tpapi_VgRs）。對(duì)4個(gè)基因進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)其均具有典型的保守結(jié)構(gòu)域，是典型的昆蟲Vg和VgRs基因。從進(jìn)化關(guān)系看，荔枝蝽的Vg和VgRs基因的分子進(jìn)化與物種之問的進(jìn)化關(guān)系較為匹配。qRT-PCR結(jié)果顯示Vgl基因在雌蟲各個(gè)組織中表達(dá)量都比較高，雄成蟲中儀在淋巴液中表達(dá)量較高，而Vg2和Vg3基因儀在雌蟲脂肪體中較高表達(dá)。VgRs的表達(dá)與Vg的表達(dá)部位基本一致，在雌蟲卵巢中表達(dá)量最高，其次是雌蟲、雄蟲淋巴液和若蟲的脂肪體當(dāng)中，在若蟲觸角、雄蟲觸角和雄蟲精巢中也有少量表達(dá)?！窘Y(jié)論】獲得了荔枝蝽3個(gè)卯黃原蛋白基因和1個(gè)卵黃原蛋白受體基因，對(duì)其結(jié)構(gòu)和進(jìn)化關(guān)系進(jìn)行探討，并對(duì)其時(shí)空表達(dá)情況進(jìn)行分析，為后續(xù)對(duì)荔枝蝽新防治靶標(biāo)的篩選奠定基礎(chǔ)，

關(guān)鍵詞：卵黃原蛋白;卵黃原受體蛋白;轉(zhuǎn)錄組;進(jìn)化分析;表達(dá)量分析

中圖分類號(hào)：S 435

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1008-0384（ 2021） 07-0793-13

Sequences and Spatiotemporal Expressions of Vitellogenin and Vitellogenin Receptor

Genes of Tessaratoma papillosa

CHENG Lin l， HAN Shuncai I. JIANG Jingtao l， LIHaichao 2， PENG Lingfei l*

（1.Biological Control Research Institute，F(xiàn)ujian Agriculture and Fores trv University/China Fruit Flv Research and C ontror

Center of FAO/IAEA/Key Laboratory of Biopesticide and Chemical Biology，Ministy of Education/State Key Laboratory ofEcological Pest Control for Fujian and Taiwan Crops，F(xiàn)uzhou，F(xiàn)ujian 350002，China：2.Key Laboratory of Insect Developmentarand Evolutionary Biology/Centerfor Excellence m Molecular Plant Sciences/lnstitute of Plant Physiology and Ecology，Chinese Acaderriy of Sciences，Shanghai 200032，China）

Abstract： 【Objective】 Molecular information associated with the oviposition and reproduction of Tessaratoma papillosawas studied for control of the pest on Iychee trees. 【Method】Transcriptome sequencing of T papillosa in various tissues anddevelopmental stages was conducted. The vitellogenin and vitellogenin receptor genes were obtained by screening thetranscriptome database and applying molecular cloning methods. Temporal and spatial expressions of the genes were analyzedusing qRT-PCR【Result】Three vitellogenin genes （i.e.，，papi_ Vg1，Vg2，and Vg3） and one receptor gene，T papi VgRs，were obtained after screening Homologous analysis showed the genes contained conserved domains typical in the Vg and VgRsof insects. The molecular evolution of Vg and VgRs of T. papillosa paralleled that of the species. The temporal and spatialexpressions of Vgl shown by qRT-PCR were relatively high in all female tissues， but only the lymphatic fluid in adult males.whereas those of Vg2 and Vg3 highly expressed only in female adipose tissue. The expression of VgRs， as well as Vg， washighest in female ovary， followed by female， male lymph fluid， nymph adipose tissue. and minute in nymph antenna， maleantenna. and male testis.【Conclusion】 The structures and evolution of the 3 vitellogenin genes and one vitellogenin receptorgene were analyzed. The information on the spatiotemporal expressions of the genes would aid target selection in study for thecontrol of T. papillosa.

Key words： Vitellogenin gene： vitellogenin receptor gene; transcriptome; evolutionary analysis; gene expression

0 引言

【研究意義】荔枝蝽Tessaratoma papillosa隸屬于半翅目Hemiptera荔蝽科Tessaratomidae，是我國(guó)及東南亞等地荔枝、龍眼產(chǎn)區(qū)的重要害蟲。荔枝蝽以成蟲和若蟲刺吸危害果樹幼枝、嫩芽、花和幼果，導(dǎo)致果樹嫩枝萎蔫、落花落果。成、若蟲臭腺分泌物還可灼傷植株幼嫩部位，造成枯死，同時(shí)還可傳播龍眼鬼帚病[1-2]，荔枝蝽常年危害嚴(yán)重，造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。在發(fā)生嚴(yán)重年份，荔枝、龍眼可減產(chǎn)20%～30%，甚至部分地區(qū)減產(chǎn)達(dá)到70%～80%，甚至絕收[3]?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】卵黃原蛋白（vg）是一類大分子糖脂復(fù)合蛋白，廣泛存在于非哺乳類性成熟卵生雌性動(dòng)物的血淋巴、脂肪體和卵中，是幾乎所有卵生動(dòng)物卵黃蛋白的前體，能為正在發(fā)育的胚胎提供氨基酸、脂肪、碳水化合物、維生素和微量元素等營(yíng)養(yǎng)和功能性物質(zhì)[4-8]。目前已知的昆蟲卵黃原蛋白序列約30條，主要有蜚蠊目的美洲大蠊Periplanetaamericana[9]，德國(guó)小蠊Blattella gerrrianica[10];鱗翅目的柞蠶Anthereapernyi[11]，野桑蠶Bombyxmandarina[12]，眉紋天蠶蛾Samia cynthia，綠尾大蠶蛾Actiasningpoana，半目大蠶蛾Antheraea yamamai，舞毒蛾Lymantria dispar;膜翅目的意大利蜜蜂Apis mellifera[13]，蚜小蜂Aphytissp.;雙翅目的埃及伊蚊Aedes aegypti[14]，瘧蚊Anopheles sp.;半翅目的褐飛虱Nilaparvata lugens[15]等。昆蟲卵黃原蛋白一般在雌性成蟲的脂肪體合成，隨后進(jìn)入血淋巴，經(jīng)血淋巴運(yùn)輸?shù)铰殉?，與膜上卵黃原蛋白受體結(jié)合，經(jīng)胞吞作用，使卵黃原蛋白進(jìn)入卵巢細(xì)胞，并行使功能[7-8.16-17]。昆蟲卵黃原蛋白的mRNA全長(zhǎng)大約為6 000 bp，在整個(gè)加T過程中，經(jīng)蛋白水解，在完全變態(tài)昆蟲和不完全變態(tài)昆蟲中切割成兩段或多個(gè)小的片段[7，l7-18]。根據(jù)卵黃原蛋白前體被切割的形式，可以將其分為三類：①?zèng)]有被酶切的蛋白前體，僅含有一個(gè)大分子量亞基[7];②酶切為一個(gè)大分子量的亞基（ >180 ku）和一個(gè)小分子量的亞基（ <50 ku），絕大多數(shù)完全變態(tài)昆蟲中的vg蛋白前體屬于這一類型[7.19];③酶解為幾個(gè)分子量約為80～110 ku的多肽，大部分不完全變態(tài)昆蟲中的vg蛋白前體屬于這一類型[17]。昆蟲的卵黃原蛋白受體（ VgRs）屬于低密度脂蛋白受體家族成員，昆蟲的VgRs具有LDLR（low density lipoproteinreceptor）家族典型的保守結(jié)構(gòu)域[17.20-21]。一般來(lái)說，VgRs在成蟲羽化前的卵巢中合成，隨后經(jīng)過血淋巴運(yùn)輸?shù)铰殉才c卵黃原蛋白結(jié)合，昆蟲的VgRs具有卵巢特異性，是卵黃原蛋白Vg的專一性胞吞作用受體，可介導(dǎo)vg進(jìn)入昆蟲卵母細(xì)胞，而后沉淀積累形成昆蟲生殖必需的卵黃蛋白[8.22]。VgRs與昆蟲卵巢激活，卵黃發(fā)生，卵子形成密切相關(guān)，同時(shí)在昆蟲信息交流、社會(huì)分化、行為構(gòu)建以及免疫調(diào)控等行為過程中起到至關(guān)重要的作用?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】荔枝蝽新成蟲大規(guī)模發(fā)生以后，由于抗藥性強(qiáng)[23]，在采取化學(xué)防治時(shí)不能產(chǎn)生較好的防治效果。而通過人T釋放平腹小蜂Anastatus fulloi進(jìn)行生物防治較為可行，但平腹小蜂抗寒能力較弱，容易被農(nóng)藥殺傷，野外種群需要較多營(yíng)養(yǎng)使種群復(fù)壯，需要在防治時(shí)錯(cuò)峰噴灑農(nóng)藥才能產(chǎn)生較好的防治效果[24]。在愈加重視食品安全和綠色植保的今天，篩選出新的荔枝蝽防治靶標(biāo)迫在眉睫。本研究通過分子生物學(xué)技術(shù)，從基因?qū)用娣治隼笾︱淼漠a(chǎn)卵過程。【擬解決的關(guān)鍵問題】通過轉(zhuǎn)錄組獲得荔枝蝽卵黃原蛋白及其受體基因序列，并分析其進(jìn)化關(guān)系、結(jié)構(gòu)和時(shí)空表達(dá)情況。為了解荔枝蝽產(chǎn)卵的生理過程提供分子層面的信息，同時(shí)亦可為從卵期防控荔枝蝽的發(fā)生奠定理論基礎(chǔ)。

1材料與方法

1.1供試?yán)ハx

野外蟲源采白福建省福清市龍眼果園內(nèi)，將荔枝蝽雌、雄成蟲若蟲分別保存等待解剖處理。

1.2荔枝蝽的解剖與處理

荔枝蝽的解剖采用蠟盤解剖法，解剖時(shí)先用剪刀剪去翅、足、中胸小盾片和腹側(cè)板，隨后自腹部?jī)蓚?cè)剪開，再橫向在消化道上方剪斷前胸背板，并用鑷子掀開背板，用昆蟲針將剩余的組織固定在蠟盤中，注入清水至淹沒蟲體，在昆蟲雙目解剖鏡下解剖，取得荔枝蝽雌雄成蟲和若蟲的脂肪體、中腸，雌雄成蟲的卵巢和精巢、若蟲和雄成蟲觸角[25]。解剖后得到的組織置于1.5 mL離心管中，在80℃冰箱保存，樣品來(lái)源及名稱如表1所示。

1.3 RNA抽提及全長(zhǎng)cDNA的擴(kuò)增

總RNA的提取使用TRIz01.RJ Reagent（ Invitrogen）進(jìn)行，并嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)手冊(cè)要求進(jìn)行。在1 mL TRIz01中加入用研磨柱（使用前用DEPC浸泡并高溫滅菌）充分研磨的液氮速凍過的樣品，充分混勻，并室溫靜置5 min。在混合溶液中加入200 uL氯仿，充分震蕩混勻，并室溫靜置5 min（氯仿要在陰涼避光處保存，避免暴露空氣中被陽(yáng)光照射產(chǎn)生毒氣）。將混合溶液用4℃低溫離心機(jī)離心15 min，12 000 r·mm-1。離心后溶液分為3層，下層為有機(jī)相、中層為白色界面、上層為水相，RNA全部在水相中溶解。將上層溶液轉(zhuǎn)移至新的離心管中，加入500 uL預(yù)冷的異丙醇（無(wú)水乙醇），充分震蕩混勻，置于80℃超低溫冰箱靜置30 min，使RNA沉淀。將樣品取出后，4℃，12 000 r·mm-1，高速離心10 min，倒掉上清，注意不要將沉淀倒出。用500 uL預(yù)冷的無(wú)RNase 75%乙醇洗滌沉淀，渦旋儀震蕩10 s，充分溶解沉淀中的鹽離子。4℃，12 000 r·mm-1，高速離心5 min，小心吸取上清后在室溫下靜置5 min，使沉淀干燥，加入適量無(wú)RNase ddH20溶解沉淀，即可得到總RNA樣品。在分光光度計(jì)下檢測(cè)吸光度，1%瓊脂凝膠電泳檢測(cè)總RNA質(zhì)量， 80℃保存待用。

使用試劑盒ReverTra Ace?qPCR RT Master Mixwith gDNA Remover（ TOYOBO），并按照說明書進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。初次使用時(shí)，將試劑盒中的4×DNMaster Mix與gDNA Remover按照50：1的比例混合。將2 ug RNA樣品在65℃水浴鍋中熱變性5 min，立即置于冰上冷卻。在冰上配制反應(yīng)液（ RNA template，2ug;4×DN Master Mix（ gDNA Remover），4uL;Nuclease-free Water補(bǔ)足16 UL;在加入5×RT MasterMix II，4uL），將反應(yīng)液輕輕混勻后，在37℃條件下孵育5 min。

將配置好的反應(yīng)液輕輕混勻后，按照以下程序進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)（37℃，15 min;50℃，5 min;98℃，5 min）。反應(yīng)結(jié)束后，將樣品稀釋10倍放置在20℃?zhèn)溆谩?/p>

1.4 PCR擴(kuò)增

引物設(shè)計(jì)及全長(zhǎng)序列擴(kuò)增：用Geneious R11軟件設(shè)計(jì)引物，本試驗(yàn)所用引物見表2。以荔枝蝽cDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，反應(yīng)體系：cDNAtemplate 2uL;2×PCR MIX 25 uL; Primer F luL;Primer R luL; Nuclease-free Water 21 uL。用高保真Taq酶（Takara）擴(kuò)增目標(biāo)片段全長(zhǎng)序列，反應(yīng)程序?yàn)椋?5℃1 min. 95℃30 s，58℃30 s，72℃1 mm.72℃7 min，4℃保存，反應(yīng)結(jié)束后，將樣品進(jìn)行測(cè)序反應(yīng)，測(cè)序委托上海鉑尚生物技術(shù)有限公司進(jìn)行。

1.5基因序列的生物信息分析

利用ORF finder預(yù)測(cè)ORF全長(zhǎng)（https：//www.ncbi.nlm.nih.gov/orffinder/），利用SignalP5.0進(jìn)行信號(hào)肽預(yù)測(cè)（http：//www.cbs.dtu.dk/services/SignalP/），EXPASY{十算pl/Mw（ https：//web.expasy.org/compute pi/），利用SMART軟件分析基因的蛋白結(jié)構(gòu)域（http：//smart.embl-heidelberg.de/），用Clustal X v2.1軟件對(duì)荔枝蝽3個(gè)卵黃原蛋白的氨基酸序列進(jìn)行同源比對(duì)分析，利用MEGAX軟件，建立NJ樹（Bootstrap值1000）進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化分析。

1.6 實(shí)時(shí)定量PCR（Real-time quantitative PCR，qRT-PCR）

qRT-PCR反應(yīng)使用試劑盒為SYBR?Premix ExTaq rM II（ Takara），所有操作過程使用的試劑均放置在冰上進(jìn)行。反應(yīng)所用的PCR 96孑L板或八連管為熒光定量試驗(yàn)專用，引物見表3。

按如下組分配置反應(yīng)液：cDNA template 2uL;SYBR? R.Premix Ex Taq rM 11 12.5 uL; PCR ForwardPrimer（ 10 umol-L-l）1uL; PCR Reverse Primer（ 10umol.L-1）1uL; Nuclease-free Water 8.5 uL。整個(gè)過程保持在冰上進(jìn)行（通常模板量在100 ng以下，引物終濃度為0.4 umol·L-1時(shí)結(jié)果通常較好），輕輕混勻，避免產(chǎn)生氣泡。采用兩步法PCR程序進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR反應(yīng)，反應(yīng)體系如下：95℃30 s，95℃5s，60℃30 s，40個(gè)循環(huán)。

為了消除個(gè)體差異，每個(gè)試驗(yàn)組的樣品為3個(gè)同一組織RNA反轉(zhuǎn)錄的cDNA等量混合，作為一個(gè)樣品池進(jìn)行檢測(cè)。每個(gè)樣品3次重復(fù)，其表達(dá)水平分析選用18S rRNA的表達(dá)量進(jìn)行均一化處理。反應(yīng)結(jié)束后根據(jù)Real Time PCR的擴(kuò)增曲線和溶解曲線判斷引物質(zhì)量。數(shù)據(jù)分析參照2 -△ACT法進(jìn)行[26]。數(shù)據(jù)間的差異顯著性分析通過T.Test進(jìn)行，通過計(jì)算均值與數(shù)據(jù)間的標(biāo)準(zhǔn)偏差（SD）得到相應(yīng)結(jié)果。

2結(jié)果與分析

2.1 Vg基因全長(zhǎng)序列CDS的獲得及分析

通過篩選荔枝蝽的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)（數(shù)據(jù)未發(fā)表）獲得3個(gè)vg序列和1個(gè)VgRs序列，其mRNA分別為Vgl 5 764 bp，Vg2 6 216 bp，Vg3 6 278 bp和VgRs3 239 bp，將其分別命名為T papi Vgl，T papi_Vg2，T papi Vg3，T papi VgRs，將獲得的序列進(jìn)行PCR擴(kuò)增，隨后測(cè)序驗(yàn)證，最終將獲得的序列進(jìn)行ORF預(yù)測(cè)，蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)分析，信號(hào)肽，等電點(diǎn)等分析，結(jié)果如表4所示。

隨后，用SMART軟件分析了4個(gè)基因的蛋白結(jié)構(gòu)域，結(jié)果顯示，荔枝蝽3個(gè)vg蛋白包含了卵黃原蛋白的3個(gè)典型結(jié)構(gòu)域，一個(gè)完整的Vitellogenin_NSupperfamliy domain，一個(gè)DVF1943結(jié)構(gòu)域和一個(gè)VWD結(jié)構(gòu)域，所不同的是，Vg2在DUF1943結(jié)構(gòu)域前面，包含一個(gè)low complexity（ 774-785）結(jié)構(gòu)域，而Vg3在VWD結(jié)構(gòu)域之后，包含一個(gè)low complexity（ 1752-1756）結(jié)構(gòu)域，卵黃原受體蛋白包含了8個(gè)LDLRA，3個(gè)EGF，7個(gè)LY和1個(gè)GRAM結(jié)構(gòu)域（圖1）。

2.2序列一致性及進(jìn)化分析

用Clustal X v2.1軟件對(duì)荔枝蝽3個(gè)卵黃原蛋白的氨基酸序列進(jìn)行同源比對(duì)分析（圖2），結(jié)果顯示3個(gè)卵黃原蛋白之間序列一致性為59.73%，其中 T papi_Vgl與T papi_ Vg2的序列一致性為50%，T papi_Vgl與T papi_Vg3的序列一致性為42%，T papi_Vg2與T papi_Vg3的序列一致性為45%。

隨后，利用34個(gè)其他物種昆蟲vg蛋白和28個(gè)其他物種昆蟲的VgRs蛋白分別進(jìn)行進(jìn)化樹分析（表5、6），利用MEGAX軟件，建立NJ樹（Bootstrap值1 000）（圖3），結(jié)果顯示，在所獲得的具有全長(zhǎng)的37個(gè)vg蛋白中序列之中，卵黃原蛋白分成3個(gè)大群，其中荔枝蝽的3個(gè)卵黃原蛋白與蝽科的豆類點(diǎn)蜂緣蝽Riptortus pedestris和大眼長(zhǎng)蝽Geocorispallidipennis聚集在了一支上，其次是負(fù)蝽科的大田負(fù)蝽Lethocerus deYrolli盲蝽科的綠盲蝽Lygus lucorum和黑肩綠盲蝽Cyrtorhinus lividipennis聚集在一起。還發(fā)現(xiàn)，鱗翅目的荔枝蒂蛀蟲Conopomorphasinensis與綠盲蝽Lygus lucorum的Aluco Vg2蛋白很好地聚集在一起，隨后與其他半翅目昆蟲灰飛虱Laodelphax striatellus、褐飛虱Nilaparvata lugens和油蟬Graptopsaltria nigrofuscata聚集形成了一個(gè)大群。說明宿主可能會(huì)改變昆蟲的一些基因序列，從而產(chǎn)生進(jìn)化中的相似性。其次，鱗翅目昆蟲除了荔枝蒂蛀蟲Conopomorphasinensis之外的其他昆蟲聚集形成一個(gè)大群，膜翅目昆蟲和半翅目的煙粉虱Bemisiatabaci以及脈翅目的大草蛉Chrysopa septempunctata聚集形成一個(gè)大群。

同樣，對(duì)T papi_ VgRs的進(jìn)化樹分析（圖4）結(jié)果顯示，29個(gè)VgRs分別聚集，主要分為兩大類，鱗翅目與雙翅目昆蟲聚集為一個(gè)大類，而荔枝蝽與半翅目其他昆蟲煙粉虱B.tabaci、灰飛虱T.striatellus、褐飛虱Ⅳ.lugens和白背飛虱Sogatellafurcifera聚集在一起，隨后與鞘翅目、蜚蠊目和嚙蟲目昆蟲聚集形成一個(gè)大群，同目昆蟲的VgRs進(jìn)化關(guān)系更為接近，E值絕大多數(shù)都在50以上，說明VgRs與物種進(jìn)化一致。

2.3荔枝蝽vg及VgRs基因的時(shí)空表達(dá)分析

用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（ qRT-PCR）檢測(cè)荔枝蝽14個(gè)不同發(fā)育階段的不同組織中的vg基因和VgRs基因的表達(dá)情況（圖5、6），結(jié)果表明，Vgl基因在各個(gè)組織中表達(dá)量相對(duì)比較高，尤其是在雄成蟲淋巴液、雌蟲、雌蟲脂肪體、雌蟲中腸和卵巢中，而Vg2和Vg3基因僅在雌蟲脂肪體中較高表達(dá)。VgRs的表達(dá)量，與vg的表達(dá)部位基本一致，在雌蟲卵巢中，表達(dá)量最高，其次是雌蟲，雄蟲淋巴液和若蟲的脂肪體當(dāng)中，在若蟲觸角，雄蟲觸角和雄蟲精巢中，也有少量表達(dá)。

3討論與結(jié)論

卵黃原蛋白基因是編碼昆蟲和許多其他卵生生物卵內(nèi)的主要蛋白一卵黃蛋白前體。在昆蟲中，vg基因以性別、組織和階段特異性的方式在脂肪體內(nèi)和卵巢外表達(dá)。在生殖階段，vg蛋白mRNA大量表達(dá)，然后被翻譯，分泌到血淋巴中，并最終通過受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用被發(fā)育中的卵母細(xì)胞吸收。Vgs以卵黃蛋白（Vn）的形式儲(chǔ)存，卵黃蛋白（Vn）是發(fā)育中的胚胎的主要營(yíng)養(yǎng)儲(chǔ)備[27]。

Vgs和VgRs已在許多脊椎動(dòng)物和無(wú)脊椎動(dòng)物中被廣泛鑒定，并且昆蟲的Vgs和VgRs得到了廣泛的研究，在蜚蠊目、直翅目、鞘翅目、雙翅目、鱗翅目、半翅目和膜翅目等昆蟲中均有相關(guān)基因被報(bào)道。通常，昆蟲vg的氨基酸結(jié)構(gòu)和組成高度保守[27]。它通常具有20個(gè)殘基的信號(hào)肽，N端區(qū)域的脂質(zhì)結(jié)合結(jié)構(gòu)域（ LPD N），C端區(qū)域的von Willebrand因子D型結(jié)構(gòu)域（ VWD）[27]，以及未知的功能域（ DUF1943）。

本研究通過篩選荔枝蝽T papillosa的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)（數(shù)據(jù)另文發(fā)表），利用分子克隆的方法獲得了荔枝蝽3個(gè)vg基因和1個(gè)VgRs基因，在序列結(jié)構(gòu)方面荔枝蝽與其他報(bào)道的昆蟲Vgs相似，3個(gè)荔枝蝽vg基因均含有20 bp左有的信號(hào)肽，并且均具有3個(gè)典型的vg蛋白的功能結(jié)構(gòu)域，高度保守的卵黃蛋白原結(jié)構(gòu)域LPD N和VWFD結(jié)構(gòu)域[28]。以及目前僅在少數(shù)昆蟲中（例如果斑螟Cadra cautella和白背飛虱S furcifera等）被報(bào)道發(fā)現(xiàn)的未知功能的DUF1943結(jié)構(gòu)域[29-32]。同時(shí)，3個(gè)荔枝蝽vg蛋白序列也具有不同的特征，例如：Vg2在DUF1943結(jié)構(gòu)域N端區(qū)域包含一個(gè)low complexity（ 774-785）結(jié)構(gòu)域，而Vg3在VWD結(jié)構(gòu)域之后，C端區(qū)域的包含一個(gè)lowcomplexity（1752-1756）結(jié)構(gòu)域。

對(duì)其他昆蟲物種的研究結(jié)果顯示，vg蛋白的基因數(shù)量因昆蟲而異[33]。例如，意大利蜜蜂A.mellifera[34]、佛羅里達(dá)弓背蟻Campotusfloridanus[35]，家蠶B.mori[36]和德國(guó)小蠊B.germanica[37]僅有1個(gè)vg基因，而美洲大蠊P.americana[38]帶有2個(gè)vg基因。最近的研究表明，褐飛虱N.lugens具有3個(gè)vg基因[39]。目前，埃及伊蚊A.aegypti[40]和阿根廷蟻Linepithema humile[35.41]中基因數(shù)最高的是5個(gè)。這些基因數(shù)差異被認(rèn)為是基因復(fù)制事件的結(jié)果。本研究在荔枝蝽中發(fā)現(xiàn)的3個(gè)vg基因，序列一致性為59.73%，T.papi Vgl與其他物種的結(jié)構(gòu)相似性最高，具有比價(jià)保守的3個(gè)功能結(jié)構(gòu)域，與在NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中獲得的幾種蝽科昆蟲的序列一致性相對(duì)較高，而T.papi Vg2與T.papi Vg3中均在不同的位置中插入了一個(gè)low complexity結(jié)構(gòu)域，LCRs功能域是常見的通過減數(shù)分裂形成的重組事件，這些區(qū)域的動(dòng)態(tài)多樣化和無(wú)中間的變異和多態(tài)性水平較高，被認(rèn)為是物種間表型變異的重要來(lái)源[42]，這一結(jié)構(gòu)特征，可能說明T papi Vg2與T.papi Vg3是在長(zhǎng)期的進(jìn)化過程中，由T papi_ Vgl基因復(fù)制及變異而來(lái)的，基因復(fù)制是基因組進(jìn)化的重要機(jī)制，并且是基因表達(dá)模式和功能進(jìn)化新穎的重要手段[43]。因此，這3個(gè)基因在具有類似的生理功能的同時(shí)，發(fā)生了什么樣的改變，值得進(jìn)一步探討。

對(duì)荔枝蝽VgRs序列的分析表明，它由多個(gè)保守的模塊化元件組成，與其他昆蟲VgRs相似，并且是LDLR超家族的典型成員[17]。鱗翅目中的VgRs的特征是在兩個(gè)LBD結(jié)構(gòu)域中存在11個(gè)富含半胱氨酸的LDLRA重復(fù)，其中在第一和第二LBD結(jié)構(gòu)域中分別為4個(gè)和7個(gè)重復(fù)。但是，LDLRA重復(fù)序列的數(shù)量和排列方式與其他昆蟲順序有很大不同。蜚蠊目和雙翅目中有5和8個(gè)LDLRA重復(fù)序列，膜翅目中有2個(gè)、4個(gè)和8個(gè)重復(fù)序列，鞘翅目有8個(gè)重復(fù)序列[44-45]。與鱗翅目昆蟲VgRs相比，荔枝蒂蛀蟲C.sinensis在2個(gè)EGF前體結(jié)構(gòu)域中的EGF/鈣結(jié)合樣重復(fù)序列的數(shù)量和排列都不同。通常，在第1個(gè)EGF前體結(jié)構(gòu)域中出現(xiàn)了2個(gè)或3個(gè)類似EGF的重復(fù)序列，但在荔枝蒂蛀蟲VgRs中多了1個(gè)額外的重復(fù)序列[46]。本研究在荔枝蝽中發(fā)現(xiàn)，T.papi VgRs包含了8個(gè)LDLRA、3個(gè)EGF、7個(gè)LY和1個(gè)GRAM結(jié)構(gòu)域，這與半翅目昆蟲的結(jié)構(gòu)域較為類似。

本研究獲得的4個(gè)基因，均具有典型的保守結(jié)構(gòu)域，是典型的昆蟲vg和VgRs基因，通過構(gòu)建兩個(gè)系統(tǒng)進(jìn)化樹，推斷了3個(gè)荔枝蝽vg基因和1個(gè)荔枝蝽VgRs基因與其他目昆蟲Vgs和VgRs的進(jìn)化關(guān)系。從進(jìn)化關(guān)系來(lái)看，vg和VgRs基因的分子進(jìn)化與物種之間的進(jìn)化關(guān)系較為匹配，不論是荔枝蝽vg基因還是荔枝蝽VgRs基因均與半翅目昆蟲較好地聚集在一起，從荔枝蝽vg基因進(jìn)化樹來(lái)看，先后與蝽科、負(fù)蝽科、盲蝽科昆蟲聚集在一個(gè)大支上，荔枝蝽VgRs基因進(jìn)化樹也很好地支持這一結(jié)果，這一結(jié)論也很好地說明荔枝蝽的vg和VgRs基因具有較為保守的功能。

同時(shí)，發(fā)現(xiàn)荔枝蒂蛀蟲C.sinensis的Vg2基因在分子進(jìn)化水平上沒有和鱗翅目其他昆蟲顯示出更為接近的關(guān)系，反而是聚集在與荔枝蝽更為接近的半翅目分支上，其與綠盲蝽的Vg2和荔枝蝽的Tpapi Vg2在進(jìn)化關(guān)系上更為接近，但在VgRs基因支序圖中并沒有和半翅目在相近的分支，根據(jù)vg基因的功能特征，推測(cè)其原因可能是在長(zhǎng)期的進(jìn)化過程中，由于昆蟲長(zhǎng)期取食專一性宿主，在遺傳變異的過程中，對(duì)生殖相關(guān)的卵黃原蛋白造成了相應(yīng)的結(jié)構(gòu)變異造成的。VgRs基因由于具有極強(qiáng)的卵巢特異性，所以可能在昆蟲生殖系統(tǒng)的進(jìn)化中由于不同目昆蟲生殖方式及轉(zhuǎn)運(yùn)物質(zhì)的需求不同，從而產(chǎn)生了不同的基因結(jié)構(gòu)變異。因此，這些基因可能的功能，還需要進(jìn)一步的深入研究。

卵黃原蛋白的結(jié)構(gòu)、合成、攝取過程與激素的調(diào)控激勵(lì)是昆蟲生理學(xué)研究的熱點(diǎn)之一，昆蟲卵黃原蛋白基因存在著明顯的分子多態(tài)性，同一種昆蟲也存在幾個(gè)編碼卵黃原蛋白的基因，因此，常常被作為分子進(jìn)化研究的對(duì)象，同時(shí)，卵黃原蛋白作為昆蟲體內(nèi)的貯藏蛋白，為胚胎發(fā)育提供營(yíng)養(yǎng)，這為害蟲防治提供了新的思路，4種殺蟲劑對(duì)荔枝蒂蛀蟲C.sinensis產(chǎn)卵的亞致死作用的研究結(jié)果表明，在測(cè)試的各種殺蟲劑中，對(duì)荔枝蒂蛀蟲的毒性各不相同，毒死蜱的LCso為0.23 mg·kg-l、p一氯氰菊酯的為20.00 mg·kg-l、苯甲依氨菌素（ EB）對(duì)產(chǎn)卵率，存活率和卵巢有明顯的負(fù)影響，LC30劑量下荔枝蒂蛀蟲C.sinensis的發(fā)育和交配率有顯著的影響[46]。進(jìn)一步的研究表明，在EB暴露后24、48和72 h，CsVg和CsVgR的轉(zhuǎn)錄水平受到不同程度的損害，這一結(jié)果與亞致死濃度EB-下荔枝蒂蛀蟲的減少是一致的[46]。一些殺蟲劑可以通過破壞昆蟲的脂肪體，從而抑制vg的合成，如印楝素處理可以導(dǎo)致溪岸蚰嫂Labidurariparis脂肪體細(xì)胞解體[47]，硫丹處理也會(huì)破壞劍角蝗Poekilocerus pictus的脂肪體[48]，同樣，SfVg和SfVgR沉默抑制了白背飛虱S.furcifera的卵巢發(fā)育、產(chǎn)卵數(shù)和孵化率。噻蟲嗪LCio顯著抑制了SfVg-like和SfVgR的表達(dá)。相反，三唑磷LC 25顯著促進(jìn)了白背飛虱Sfurcifera中SfVg、SfVg-1ike和SfVgR的表達(dá)，并增加了卵黃蛋白原的含量。因此，殺蟲劑可以通過改變SfVg和SfVgR的表達(dá)來(lái)調(diào)節(jié)白背飛虱的繁殖，從而影響白背飛虱Sfurcifera的種群密度。這些發(fā)現(xiàn)有助于加深對(duì)殺蟲劑對(duì)害蟲繁殖和復(fù)發(fā)的影響的分子機(jī)制的理解奠定基礎(chǔ)，可以說，昆蟲的vg基因，已成為潛在的害蟲控制和鑒定的新靶點(diǎn)[49]。

vg基因的調(diào)節(jié)在轉(zhuǎn)錄水平上直接受激素控制。參與vg基因轉(zhuǎn)錄的激素是保幼激素（JH）、蛻皮類固醇和一些神經(jīng)肽?？傮w上根據(jù)vg基因轉(zhuǎn)錄的激素調(diào)節(jié)系統(tǒng)，可以將昆蟲分為3類：（i）僅使用JH進(jìn)行vg基因轉(zhuǎn)錄的昆蟲，如鞘翅目和不完全變態(tài)昆蟲;（ii）同時(shí)需要JH和蛻皮類固醇來(lái)調(diào)節(jié)vg的昆蟲，如雙翅目昆蟲;（ iii）需要JH、蛻皮類固醇和其他激素來(lái)調(diào)節(jié)其生殖生物學(xué)的昆蟲，如鱗翅目昆蟲。然而為什么昆蟲物種在使用不同的激素來(lái)控制其生殖生理方面會(huì)發(fā)生分歧尚不清楚[25]。本研究獲得了vg和VgRs基因在荔枝蝽不同組織中的時(shí)空表達(dá)情況，均顯示其在卵巢和雌蟲脂肪體中的高效高表達(dá)的現(xiàn)象，這與其他的昆蟲的表達(dá)模式類似，所不同的是，T papi Vg2和T.papi Vg3在卵巢中并沒有出現(xiàn)顯著的高表達(dá)趨勢(shì)，在雌蟲脂肪體中，呈現(xiàn)特異的高表達(dá)特性。這從另一個(gè)角度說明，這兩個(gè)基因在結(jié)構(gòu)域產(chǎn)生變異之后，功能亦隨之發(fā)生了變化，這些現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)，為更好地理解荔枝蝽Tpapillosa的產(chǎn)卵繁殖行為提供了基因?qū)用娴睦碚摶A(chǔ)，同時(shí)亦可為荔枝蝽防治的靶點(diǎn)篩選提供一些有益的思路。

參考文獻(xiàn)：

[1] 陳景耀，柯沖，陳菁瑛荔枝鬼帚病的初步調(diào)查及傳病試驗(yàn)[J]植物病理學(xué)報(bào)，1992 （1）：26

CHEN J Y，KE C， CHEN J Y A preliininary study on the incidenceand transinission of litchi witches broom [J] Acto PhyopathologicaSinica. 1992 （1） 26 （in Chinese）

[2] 許長(zhǎng)藩，陳景耀，夏雨華，等荔枝蝽傳播龍眼鬼帚病的研究[J]植物病理學(xué)報(bào)，1994，2（2）：60-64

xu C F，CHEN J Y，XIA Y H，et al On transmission of Longyanwitches broom byTessaratoma papillosa（Drury）[J].ActaPhytopathologico Sinica，1994，2 （2）：6064. （in Chinese）

[3] 黎榮欣，趙冬香，王玉沽，等荔枝蝽防治研究進(jìn)展[J]熱帶作物學(xué)報(bào)，2013，34 （1）：195200

LI R X，ZHAO D X.WANG Y J et al Research progress ofcontrolling Tessaratoma popillosa（Drury） [J]. Chinese Journal ofTropical Crops. 2013. 34（1）：195200.（ in Chinese）

[4] AMDAM G v，PAGE JR R E，F(xiàn)ONDRK M K，et al Hormoneresponse to bidirectional selection on social behavior[J]Evolution&Development. 2010. 12（5）：428436

[5]戈林泉，吳進(jìn)才.昆蟲卵黃蛋白及其激素調(diào)控的研究進(jìn)展[J].昆蟲知識(shí)，2010，47 （2）：236-246

GE L Q，WU J C Research progress in insect vitellin and its hormoneregulation EJl. Chinese Bulletin of Entomology，2010，47（2）：236246. （in Chinese）

[6] MATOZZO v，GAGNEF MARIN M G，et al_Vitellogenin as abiomarker of exposure to estrogenic compounds in aquaticinve11ebrates：AreⅥew[J].Environment International，2008. 34 （4）：531-545

[7] TUFAIL M TAKEDA M Molecular characteristics of insectvitellogenins[J]Journal of Insect Physiology，2008. 54 （12）：14471458

[8] TUFAIL M TAKEDA M Insect vitellogenin/lipophorin receptors：Molecular structures. role in oogenesis， and regulatoryinechanisms[J]Journol of Insect Physiology，2009，55 （2）：87103

[9] TUFAIL M. TAKEDA M Molecular cloning. characterization andregulation of the cockroach vitellogenin receptor during oogenesis EJl .Insect Molecular Biology. 2005. 14 （4） ： 389401 .

[IO] CIUDAD L. PIULACHS M D. BELLES X Systemic RNAi of thecockroach vitellogenin receptor results in a phenotype slmllar to thatof the Drosopbila yolkless mutaIlt [J]. The FEBS Journal. 2006.273 （2） ： 325335.

[11] LIU Q N， ZHU B J. LIU C L. et al. Characterization of vitellogeninreceptor （VgR） from the Chinese oak silkworm. Antheraeo pernyi [J].Bulletin of lnsectology， 2011. 64 （2） ： 167-174

[12] QIAN C. FU W W. WEI G Q. et al. Identification and expressionanalysis of vitellogenin receptor from the wild silkworm. Bombyxmondarina [J]. Archives of Insect Biocbemistry and Physiology. 2015.89 （4） ： 181-192

[13] WEINSTOCK G M. ROBINSON G E. GIBBS R A. et al Insights intosocial insects from the genome of the honeybee Apis mellifera [J].Nature. 2006. 443 （7114）： 931-949

[14] CHO K H. RAIKHEL A S Organizanon and developmentalexpression of the mosquito vitellogenin receptor gene [J]. InsectMolecular Biology. 2001. 10 （5）： 465474

[15] LU K. SHU Y. ZHOU J. et al. Molecular characterization and RNAinterference analysis of vitellogenin receptor from Niloparvata lugens（Stal） [J]. Journol of lnsect Physiology， 2015. 73 ： 20-29

[16] BROWN M S. GOLDSTEIN J L. A receptor - mediated pathway forcholesterol hoineostasis （Nobel lecture） [J]. Angeivandte ChemieInternotional Edition in English. 1986. 25 （7）： 583602

[17] SAPPINGTON T W. RAIKHEL A S Molecular characteristics ofinsect vitellogenins and vitellogenin receptors [J]. Insect Biocbemistryand Molecular Biology. 1998. 28 （5-6） ： 277300

[18] TUFAIL M. TAKEDA M Vitellogenin of the cockroach， Leucophaeamaderae： Nucleotide sequence. structure and analysis of processing inthe fat bodv and oocytes [J]. Insect Biochemistry and MolecularBiology， 2002. 32 （ll） ： 1469-1476.

[19] HIRAI M. WATANABE D. KIYOTA A. et al Nucleotide sequence ofvitellogenin mRNA in the bean bug， Riptortus clavatus： Analysis ofprocessing in the fat bodv and ovary [J]. Insect Biochemistry andMolecular Biology. 1998. 28 （8）： 537-547

[20] RAIKHEL A S. DHADIALLA T S Accumulation of yolk proteins inmsect oocytes EJl. Annual Review of Entomology. 1992. 37： 217-251.

[21] SNIGIREVSKAYA E S. RAIKHEL A S. Receptor-mediatedendocytosis of yolk proteins iii insect oocytes[J] Progress invitellogenesis[J]. Reproductive biology of invertebrates. 2005. 12（PartB）： 199-228.

[22] ROEHRKASTEN A. FERENZ H J. Role of the lysine and arginineresidues of vitellogenin in high affmity binding to vitellogeninreceptors in locust oocyte membranes [J]. Biochimica et BiopbysicoActa. 1992. 1133 （2）： 160-166的研究[J].昆蟲學(xué)報(bào)，1973. 16 （l）： 15-24

ZHANG W Q， LIU X Q. Studies on the seasonal changes of thephysical properties and the reducing power of the haemolymph of thelvchee stinkbug，Tessorotoma papillsoa drury （Heiniptera：Pentatomidae） [J]. Acto entomologico sinica. 1973.16 （I） ： 1524. （in Chinese）

[24]佘春仁.潘蓉英 .占德祥 .等 .利用平腹小蜂防治荔若枝技術(shù)問題探時(shí) [J].福建農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 1997. 26 （4）： 441-445.

SHE C R. PAN R Y. GU D X. et al. Several technological problems ofapplying Anastatus sp. to control Tessaratoma papillosa [J]. Journalof Fujion Agricultural University. 1997， 26 （4）： 441-445 （inChinese ）

[25]佘春仁，潘蓉英荔枝蝽的解剖及其在測(cè)報(bào)的應(yīng)用[J].福建學(xué)院學(xué)報(bào)，1993（1）：59-63

SHE C R. PAN R Y. Svstematic dissection for forecasting the pestTessaratoma popillosa Drury [J].Journal of Fujian Agriculturalcollege. 1993 （l） ： 59-63 （in Chinese）

[26] LIVAK K J. SCHMITTGEN T D Analysis of relative gene expressiondata using real-time quantitative PCR and the 2- AACI method [J].Methods. 2001. 25 （4） ： 402-408.

[27] TUFAIL M. NAGABA Y. ELGENDY A M. et al. Regulation ofvitellogenin genes in insects [J]. Entomological Science， 2014.17（3） ： 269-282.

[28] UPADHYAY S K. sINGH H. DIXIT S. et al. Molecularcharacterization of vitellogenin and vitellogenin receptor of Bemisiatabaci [J]. PLoS One. 2016. ll （5） ： e0155306.

[29] HU K. TIAN P. TANG Y. et al. Molecular characterization ofvitellogenin and its receptor in Sogotella furcifera， and their functionm oocvte maturation [J]. Frontiers in Physiology， 2019.10： 1532

[30] ROBERTSON J L. PREISLER H K. Pesticide bioassays witharthropods[M]. CRC Press. 1992： 127

[31] THOMPSON J R. BANASZAK L J. Lipid-protem mteractions mlipovitellin [J]. Biochemistry. 2002， 41 （30） ： 93989409.

[32] HUSAIN M. RASOOL K G. TUFAIL M. et al RNAi-mediatedsilencing of vitellogenin gene curtails oogenesis in the almond mothCadra cautella [J]. PIoS one. 2021. 16（2）： e0245928.

[33] MORANDIN C. HAVUKAINEN H. KULMUNI J， et al. Not only foregg yolk -fimctional and evolutionary insights from expression.selection. and stmctural analyses of Formica ant vitellogenins [J].Molecular Biology and Evohition. 2014. 3l （S）： 2181-2193.

[34] PIULACHS M D. GUIDUGLI K R. BARCHUK A R. et al Thevitellogenin of the honey bee. Apis mellifera： Structural analysis of thecDNA and expression studies [J]. Insect Biochemistry and MolecularBiology. 2003.33（4）： 459-465

[35] CORONA M. LIBBRECHT R. WURM Y. et al. Vitellogeninunderwent subfunctionalization to acquire caste and behavioralspecific expression in the harvester ant Pogonomyrmex borbatus [J].PLoS Genetics. 2013. 9（8）：el003730.

[36] YANO K. SAKURAI M T. WATABE S. et al. Structure andexpression of mRNA for vitellogenin in Bombyx mori[J]. Biochimicaet Biophysica Acta. 1994. 1218（l）：1-10

[37] MARTIN D. PIULACHS M D. COMAS D. et al. Isolation andsequence of a partial vitellogenin cDNA from the cockroach. Blottellagermanica （L） （DicO-optera， Blattellidae）. and characterization of thevitellogenin gene expression [J]. Archives of Insect Biochemistry andPhysiology. 1998. 38 （3）：137-146

[38] TUFAIL M. HATAKEYAMA M. TAKEDA M. Molecular evidencefor two vitellogenin genes and processing of vitellogenins in theAmerican cockroach， Periplaneta americano [J]. Arcbives of InsectBiochemistry and Physiology， 2001. 48（2）： 7280

[39] SHEN Y. CHEN Y Z. LOU Y H. et al Vitellogenin and vitellogenin-like genes in the brown planthopper [J]. Frontiers in Physiology.2019. 10： 1181.

[40] ROMANS P. TU Z. KE Z. et al. Analysis of a vitellogenin gene of themosquito， Aedes aeglpti and comparisons to vitellogenins from otherorgaiusms[J]. Insect Biochemistry and Molecular Biology. 1995.25（8） ： 939-958

[41] SMITH C D. ZIMIN A. HOLT c， et al. Draft genome of the globallywidespread and invasive Argentine ant （Linepithema bumile）[J]Proceedings of the National Academy of Sciences. 2011. lO8（14）：5673-5678.

[42] COLETTA A. PINNEY J W. SOLIS D Y W. et al. Low-complexityregious within protein sequences have position-dependent roles EJl .BMC Sy'stems Biology. 2010， 4 （l）： 1-13

[43] LYNCH M. CONERY J S The evolutionarv fate and consequences ofduplicate genes [J]. Science. 2000. 290（5494） ： 1151-1155

[44] CONG L. YANG W J. JIANG X Z. et al. The essential role ofvitellogenin receptor in ovary development and vitellogenin uptake inBoctrocera dorsalis （hendel）[J]. International Journal of MolecularSciences. 2015. 16 （8） ： 18368-18383.

[45] ZHANG W. MA L. XIAO H. et al Molecular characterization andfuiiction analvsis of the vitellogenin receptor from the cottonbollworm. Helicoverpa armigera （Hubner） （Lepidoptera. Noctuidae）[J]. PIoS ONE. 2016. 11 （5）： e0155785.

[46] YAO Q. XU S. DONG Y Z. et al. Characterization of vitellogenin andvitellogenin receptor of Conopomorpba sinensis Bradlev and theirresponses to sublethal concentrations of insecticide [J]. Frontiers inPhysiology. 2018. 9：1250.

[47] SAYAH F. FAYET C. IDAOMAR M. et al. Effect of azadirachtin onvitellogenesis ofLabidura riparia （Insect Dermaptera） [J]. Tissue andCell. 1996. 28 （6）：741-749

[48] AMIR M Histopathological effect of some toxicants on the femalereproductive system of Sarcophago ruficornis Fabricius （Diptera：Sarcophagidae） [J]. Cibtech Journal of Zoology ISSN， 2014. 3（2）：231938831

[49] ZHOU C. YANG X B. YANG H. et al Effects of sublethalconcentrations of insecticides on tlie fecundity of Sogatello furcifero（Hemiptera： Delphacidae） via the regulation of vitellogenin and itsreceptor [J]. Journal oflnsect Science. 2020. 20（5）： 14.

收稿日期：2021-0401初稿;2021-0505修改稿

作者簡(jiǎn)介：程林（ 1996-），男，碩士研究生，研究方向：昆蟲生態(tài)與害蟲綜合治理（ E-mail： 76782253l@qq.com）

通信作者：彭凌飛（ 1982-），男，博士，講師，研究方向：昆蟲分類與系統(tǒng)學(xué)、害蟲防治（ E-mail： lingfeipeng@fafu edu.cn）

基金項(xiàng)目：福建省昆蟲生態(tài)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放課題（FIE201703）