雞肉參種子萌發(fā)條件的研究

周麗貞，王石華

（麗江師范高等專科學(xué)校，云南麗江 674100）

雞肉參（Incarvillea mairei（Levl.）Grierson）屬于紫葳科角蒿屬植物，多年生草本，葉基生，無莖，花冠紫紅色或粉紅色，主要分布于云南的中甸、麗江，以及四川和青海海拔2400～4500m 的高山草坡中[1]，由于花大色艷，具有較高的觀賞價值[2]。另外，雞肉參也是傳統(tǒng)的民間用藥，將根入藥，具有補(bǔ)血、調(diào)經(jīng)、健胃的功效，也可用于骨折腫痛、貧血、消化不良，而麗江民間則代替生地用來治療產(chǎn)后少乳，體虛等[1-3]。對角蒿屬及雞肉參的成分研究表明，其中主要含有生物堿、萜類、植物甾醇、糖類、香豆素，槲皮素、槲皮苷等成分[4-6]。對小鼠抗應(yīng)激作用的試驗表明，雞肉參有明顯的耐缺氧、耐高溫、耐低溫和抗疲勞等抗應(yīng)激作用[7]。雞肉參主要以野生分布，為規(guī)?；门c生產(chǎn)，有必要對其進(jìn)行系統(tǒng)的馴化栽培研究。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試大花雞肉參種子采自麗江甘海子野生植株的成熟莢果，經(jīng)自然干燥，開裂，取出種子進(jìn)行培養(yǎng)試驗。

1.2 試驗方法

試驗采用培養(yǎng)皿培養(yǎng)。在培養(yǎng)皿底部鋪一層定性濾紙，每個培養(yǎng)皿放置50 粒種子，10mL 蒸餾水進(jìn)行培養(yǎng)。試驗以赤霉素濃度（GA3），處理時間，培養(yǎng)溫度為試驗因素，采用L9（34）正交表安排實驗（見表1），每個處理設(shè)3 個重復(fù)。將供試種子分別在赤霉素溶液濃度50 mg/L，100mg/L，200 mg/L中進(jìn)行處理，處理時間分別為1h，3h，6h，再放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，溫度分別為10℃，20℃，25℃，以8h 光照16h 黑暗的條件進(jìn)行培養(yǎng)。每天記錄發(fā)芽數(shù)并補(bǔ)充蒸餾水。培養(yǎng)8 d 后統(tǒng)計發(fā)芽勢和發(fā)芽指數(shù)，19 d 后統(tǒng)計發(fā)芽率，以種子芽長達(dá)到種子長度的一半為發(fā)芽標(biāo)準(zhǔn)。

表1 雞肉參種子萌發(fā)條件正交實驗設(shè)計

發(fā)芽率(germination percentage)——N1／N×100(N1為19 d 后發(fā)芽的種子數(shù)量；N 為供試種子數(shù)量)。

發(fā)芽勢（germination potential）——N2／N×100(N2為8 d 后發(fā)芽的種子數(shù)量；N 為供試種子數(shù)量)。

發(fā)芽指數(shù)（germination index）——ΣGt／Dt(式中：Gt 為Dt 天的發(fā)芽數(shù)；Dt 為發(fā)芽天數(shù))。

試驗數(shù)據(jù)采用Excel 和Spss 數(shù)據(jù)處理軟件進(jìn)行處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 各效應(yīng)對種子萌發(fā)的影響

不同赤霉素濃度處理下，隨赤霉素濃度增加雞肉參種子萌發(fā)率增加，而發(fā)芽勢和發(fā)芽指數(shù)呈先降后增的趨勢（圖1）說明，赤霉素能夠促進(jìn)雞肉參種子萌發(fā)，且隨著濃度增加，作用加強(qiáng)，而增加赤霉素處理濃度，可提高發(fā)芽勢和發(fā)芽指數(shù)。隨赤霉素溶液浸泡時間增加，雞肉參種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)整體呈增加趨勢，表明赤霉素處理時間的延長可提高促進(jìn)雞肉參種子萌發(fā)的作用。對溫度而言，隨著培養(yǎng)溫度的增加，雞肉參種子發(fā)芽率和發(fā)芽指數(shù)都呈降低趨勢，但對發(fā)芽勢的影響是先增后降，說明較高溫度（25℃）能夠在短時間內(nèi)促進(jìn)雞肉參種子萌發(fā)，但長時間的較高溫度不利于種子萌發(fā)?？傮w而言，雞肉參種子萌發(fā)需要一定的溫度（＞10℃），但高溫或長時間較高溫度不利于種子萌發(fā)。而較高濃度赤霉素溶液和較長時間的浸泡能夠提高種子的發(fā)芽率和發(fā)芽態(tài)勢。

圖1 各效應(yīng)的邊際均值估算

2.2 不同處理對發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)的影響

通過實驗結(jié)果的差異性分析（見表2）可知，赤霉素濃度、浸泡時間、培養(yǎng)溫度的變化對發(fā)芽指數(shù)無明顯影響（p＞0.05）；對發(fā)芽率有一定的影響（p＜0.05），對發(fā)芽勢有明顯影響（p＜0.01）。其中高赤霉素濃度（200mg/L）較短時間處理或相對低赤霉素（100mg/L）濃度長時間處理后，在低溫下培養(yǎng)能夠顯著提高雞肉參種子的發(fā)芽率，其發(fā)芽率分別是92%和90%。處理2 與處理9 的發(fā)芽勢相對較高，而低溫處理下的發(fā)芽勢均較弱，在第8d 均未發(fā)芽，在第12d 后才逐漸增加了發(fā)芽的種子數(shù)量，并達(dá)到最大的發(fā)芽率。

表2 不同處理間差異性分析

2.3 試驗組最優(yōu)組合分析

通過正交試驗極差分析結(jié)果可知，獲得大花雞肉參種子高萌發(fā)率的最優(yōu)組合為A3B3C1，即高赤霉素濃度及較長的處理時間，并在相對低溫（10℃）下進(jìn)行培養(yǎng)；而提高發(fā)芽勢和發(fā)芽指數(shù)的最優(yōu)組合分別為：A1B3C2和A3B2C1。

表3 正交試驗極差分析結(jié)果

3 結(jié)論與討論

雞肉參（I.mairei（Levl.）Grierson）具有良好的觀賞價值和藥用保健價值，但目前多為野生分布，對雞肉參栽培研究具有一定的前瞻性意義。赤霉素對種子發(fā)芽具有促進(jìn)作用[8]，且能在干旱脅迫下促進(jìn)種子萌發(fā)，提高種子發(fā)芽指標(biāo)，這主要是赤霉素能夠提高可溶性蛋白質(zhì)和可溶性糖類，以及一些有利于抵抗干旱的物質(zhì)如過氧化物酶等[9-10]，并能在一定程度上修復(fù)植物的細(xì)胞膜[11]。但不同的植物種類對赤霉素浸種最適濃度表現(xiàn)不同，有的較低，有的較高，即使在同屬不同種植物中也有類似表現(xiàn)[12-14]。試驗通過效應(yīng)曲線分析得出，赤霉素溶液浸種能夠促進(jìn)雞肉參萌發(fā)，并提高發(fā)芽勢和發(fā)芽指數(shù)，在試驗濃度范圍內(nèi)，隨赤霉素濃度增加，雞肉參種子萌發(fā)各指標(biāo)增加。杜鵑花科植物的一些種類[15-18]及大葉水芹[19]的赤霉素浸種試驗中，則表現(xiàn)為隨濃度增加，各指標(biāo)先增加后降低；高于最適濃度時，對地稔種子則有抑制作用[20]。對雞肉參種子的處理中，并無類似情況，但更高的赤霉素濃度溶液處理雞肉參種子是否有抑制作用則需要進(jìn)一步的試驗研究。

溫度是種子萌發(fā)的必要條件之一，雞肉參種子在實驗溫度區(qū)間內(nèi)（10～25℃），隨溫度增加，種子萌發(fā)率下降，在10～20℃范圍內(nèi)發(fā)芽勢和發(fā)芽指數(shù)快速增加，至20～25℃時發(fā)芽勢和發(fā)芽指數(shù)逐漸降低，使得最終高溫下的發(fā)芽率低于低溫條件的發(fā)芽率，高溫抑制雞肉參種子的發(fā)芽率，這可能與雞肉參原生生長海拔較高有關(guān)，類似情況也發(fā)現(xiàn)于黃杯杜鵑的相關(guān)試驗中[18]。

通過赤霉素濃度、浸種時長、溫度三因素正交處理發(fā)現(xiàn)，赤霉素低濃度短時浸泡對雞肉參種子萌發(fā)的促進(jìn)作用不明顯，而高濃度或較高濃度溶液的長時間浸泡處理能夠明顯促進(jìn)其種子萌發(fā)，說明赤霉素作用需要一定的時間，而且較低濃度的作用也可通過延長處理時間達(dá)到較高濃度的作用效果，即赤霉素對種子萌發(fā)的促進(jìn)作用具有累積性。

綜合以上分析，雞肉參種子萌發(fā)時期相對低溫（10～20℃）對提高種萌發(fā)率有利，但高溫能在短時間內(nèi)提高雞肉參種子的發(fā)芽勢和發(fā)芽指數(shù)。赤霉素能夠提高雞肉參種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢和發(fā)芽指數(shù)，且隨濃度增加、浸泡時間加長，作用效果增加。通過正交分析得出，提高發(fā)芽率的最優(yōu)組合為A3B3C1；提高發(fā)芽勢和發(fā)芽指數(shù)的最優(yōu)組合分別為：A1B3C2和A3B2C1。