不同亞單位圓環(huán)病毒 II型疫苗免疫效果的比較研究

馮 凱，王景成，劉國(guó)民，宋慶慶，李志杰（金宇保靈生物藥品有限公司 010030）

豬圓環(huán)病毒是圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬的DNA病毒，根據(jù)其基因型的不同可分為1 型豬圓環(huán)病毒、2 型豬圓環(huán)病毒和3型圓環(huán)病毒。1 型豬圓環(huán)病毒通常不會(huì)對(duì)豬造成任何危害，而2 型豬圓環(huán)病毒則具有較大的致病性，3型豬圓環(huán)病毒尚未采集到活毒，具體致病情況尚不明了。

PCV-2感染后會(huì)出現(xiàn)斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）、豬皮炎腎病綜合征（PDNS）、豬呼吸系統(tǒng)混合疾病、繁殖障礙綜合征等。現(xiàn)“豬圓環(huán)病毒病”（PCVD）的含義是指群體病或是與PCV-2相關(guān)的疾病。PCVD中，PMWS對(duì)養(yǎng)豬業(yè)造成的危害最為嚴(yán)重，在歐洲每年可造成養(yǎng)豬業(yè)約6億歐元的損失。因此，預(yù)防豬圓環(huán)病毒病就顯得十分重要，而疫苗免疫是目前預(yù)防豬圓環(huán)病毒病的最有效措施。

目前，國(guó)內(nèi)普遍使用的豬圓環(huán)病毒2型相關(guān)疫苗主要分為兩類(lèi)：全病毒滅活疫苗以及基因工程疫苗，其中，基因工程疫苗又分為以大腸桿菌為載體的基因工程疫苗（原核表達(dá)）和以昆蟲(chóng)桿狀病毒為載體的基因工程疫苗（真核表達(dá)）。

為了探究疫苗的免疫效果以及國(guó)內(nèi)外疫苗之間的差異，筆者選擇了一家規(guī)模化豬場(chǎng)進(jìn)行了全程的對(duì)比實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)詳情如下：

1 豬場(chǎng)選擇

本次實(shí)驗(yàn)選擇山東省濟(jì)寧市一家規(guī)模豬場(chǎng)，母豬存欄600頭。該場(chǎng)一直選擇進(jìn)口亞單位圓環(huán)病毒II型滅活疫苗進(jìn)行豬群免疫，種豬每年3次普免，仔豬14日齡肌注1次，均為1頭份/次。

2 試驗(yàn)方法

2.1 分組：選擇同批13窩仔豬，每窩挑選8頭體重接近的仔豬，平均分成兩組，打上耳標(biāo)：打左側(cè)耳標(biāo)的仔豬為免疫國(guó)產(chǎn)亞單位圓環(huán)病毒II型滅活疫苗組，記為A組；打右側(cè)耳標(biāo)的仔豬為免疫進(jìn)口亞單位圓環(huán)病毒II型滅活疫苗組，記為B組。

2.2 免疫：14日齡免疫，仔豬頸部肌肉一側(cè)注射勃林格的藍(lán)耳苗，另一側(cè)圓環(huán)疫苗和勃林格支原體疫苗混合注射。

2.3 試驗(yàn)豬頭數(shù)：A組合計(jì)52頭，B組合計(jì)50頭。

2.4 試驗(yàn)期間兩組仔豬由同一人員管理，飼養(yǎng)在同一棟豬舍中，并且每組仔豬均勻分布舍內(nèi)向陽(yáng)面及背陰面，飼料飼喂均一致。

2.5 稱重：斷奶重（逐頭稱重）、70日齡重（逐頭稱重）、出欄重。

2.6 采血：試驗(yàn)期間于仔豬2周齡（2W）、4周齡（4W）、7周齡（7W）、10周齡（10W）、13周齡（13W）、16周齡（16W）、20周齡（20W）、出欄時(shí)采集豬只血清，其中，除出欄時(shí)豬只血清外，其他周齡血清檢測(cè)豬圓環(huán)抗體情況，出欄時(shí)豬只血清檢測(cè)血液病毒載量?？贵w檢測(cè)使用金邁詩(shī)豬圓環(huán)病毒2型ELISA抗體檢測(cè)試劑盒，批號(hào)：20190219。血液病毒載量檢測(cè)使用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）定量法方法檢測(cè)。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 斷奶數(shù)據(jù)

斷奶時(shí)根據(jù)耳標(biāo)標(biāo)識(shí)逐頭進(jìn)行稱重，具體統(tǒng)計(jì)結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 仔豬斷奶時(shí)體重統(tǒng)計(jì)及數(shù)據(jù)處理

3.2 70日齡保育轉(zhuǎn)育肥數(shù)據(jù)

70日齡時(shí)轉(zhuǎn)群時(shí)根據(jù)耳標(biāo)標(biāo)識(shí)逐頭進(jìn)行稱重，具體統(tǒng)計(jì)結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 仔豬70日齡保育轉(zhuǎn)育肥時(shí)體重統(tǒng)計(jì)及數(shù)據(jù)處理

根據(jù)采集到的數(shù)據(jù)，對(duì)70日齡時(shí)豬只的死淘情況及造肉成本進(jìn)行分析，結(jié)果如表3。

表3 仔豬70日齡時(shí)數(shù)據(jù)分析

如上表所示，保育階段兩組仔豬均存在一頭傷亡。仔豬70日齡斷奶時(shí)，免疫A疫苗組仔豬保育階段平均造肉成本為130.76元/頭，料肉比為1.46，而免疫B疫苗組仔豬保育期平均造肉成本為138.86元/頭，料肉比為1.55。造肉成本差異為8.1元/頭，而料肉比相差0.09, 根據(jù)行業(yè)大數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果，體重為100kg育肥豬每0.1料肉比成本差異約30元。

3.3 出欄時(shí)數(shù)據(jù)

育肥豬出欄時(shí)根據(jù)耳標(biāo)分組稱重結(jié)果及數(shù)據(jù)分析結(jié)果如表4。

表4 育肥豬出欄時(shí)體重統(tǒng)計(jì)及數(shù)據(jù)處理

如上表所示該批次試驗(yàn)豬只出欄時(shí)，兩組仔豬均存在2頭豬只傷亡。出欄均重差異為1.12kg/頭，按當(dāng)前市售價(jià)19元/kg計(jì)算，A組每頭育肥豬利潤(rùn)比B組多21.28元，效益差異顯著。如果考慮到不同產(chǎn)品的價(jià)格差異，A組每頭育肥豬的利潤(rùn)比B組多30多元。

3.4 抗體檢測(cè)數(shù)據(jù)

按照實(shí)驗(yàn)方案每組共計(jì)采集血清70份血清用于抗體檢測(cè)，檢測(cè)及分析結(jié)果如表5。

表5 不同生長(zhǎng)階段豬只圓環(huán)抗體情況

根據(jù)檢測(cè)數(shù)據(jù)繪制抗體消長(zhǎng)曲線如圖1，發(fā)現(xiàn)：A組豬只隨著抗體的消長(zhǎng)，于16周齡時(shí)S/P值突然升高，懷疑豬只在13～16周齡之間感染圓環(huán)病毒野毒；B組豬只隨著抗體的消長(zhǎng)，于13周齡時(shí)S/P值突然升高，懷疑豬只在10～13周齡之間感染圓環(huán)病毒野毒，A組豬只的抗體比B組豬只抗體多保護(hù)約3～6周時(shí)間。

圖1 不同組豬只圓環(huán)抗體消長(zhǎng)曲線

3.5 出欄時(shí)血液病毒載量檢測(cè)數(shù)據(jù)

按照實(shí)驗(yàn)方案每組共計(jì)采集血清10份血清用于抗原檢測(cè)，檢測(cè)及分析結(jié)果如表6。

表6 出欄時(shí)豬只血液中病毒載量檢測(cè)結(jié)果（copies/mL＊）

通過(guò)對(duì)表6中數(shù)據(jù)的比對(duì)分析，發(fā)現(xiàn)A組與B組豬只出欄時(shí)血液中病毒載量均在103-106copies/mL之間，差異不大。

4 結(jié)論與討論

本實(shí)驗(yàn)從探究疫苗的免疫效果以及國(guó)內(nèi)外疫苗之間差異的角度出發(fā)，在保證其他條件均不變的前提下，使用不同廠家的圓環(huán)疫苗，進(jìn)行仔豬育肥全程的生長(zhǎng)性能統(tǒng)計(jì)，得到A組每頭育肥豬整體利潤(rùn)（加入疫苗成本）比B組多30多元。這一結(jié)果從抗體消長(zhǎng)曲線得到證實(shí)，同樣的飼養(yǎng)環(huán)境下，A組豬只比B組豬只感染環(huán)境中圓環(huán)病毒野毒晚約3～6周，說(shuō)明A組豬只的免疫效果要優(yōu)于B組豬只。

此外，在2周齡免疫圓環(huán)疫苗后，A組和B組的豬只4周時(shí)的抗體水平均呈下降趨勢(shì)，懷疑免疫時(shí)間過(guò)早，受到母源抗體干擾。這個(gè)檢測(cè)結(jié)果帶來(lái)一個(gè)問(wèn)題：當(dāng)前圓環(huán)疫苗普遍建議14日齡免疫是否妥當(dāng)，筆者認(rèn)為，養(yǎng)殖場(chǎng)應(yīng)該切實(shí)按照本場(chǎng)豬只母源抗體的消長(zhǎng)情況確定具體的免疫日齡，而不是盲目地采用同樣的免疫程序。

通過(guò)對(duì)出欄豬只血液病毒載量的檢測(cè)，懷疑本豬場(chǎng)圓環(huán)病毒感染壓力較大，環(huán)境中圓環(huán)病毒野毒含量較高，雖仔豬受到野毒感染時(shí)間不同，隨著飼養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，最終導(dǎo)致全群受到感染。建議豬場(chǎng)按照不同胎次、不同妊娠階段對(duì)母豬群進(jìn)行隨機(jī)采樣，仔豬按照10日齡、12日齡、14日齡、16日齡、18日齡、20日齡、22日齡、24日齡、26日齡、28日齡分組進(jìn)行隨機(jī)采樣，綜合評(píng)估豬場(chǎng)圓環(huán)病毒野毒感染壓力及母源抗體消長(zhǎng)情況，確定最終的免疫程序。

本結(jié)果為廣大養(yǎng)殖戶選擇圓環(huán)疫苗提供了一定的實(shí)踐依據(jù)。