• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    基于Mono Trap方法對醬油氣味活性成分的分析

    2021-11-04 02:47:56王逍君宋煥祿
    關(guān)鍵詞:嗅聞醬油氣味

    王逍君, 孟 琦, 宋煥祿

    (北京工商大學(xué) 食品與健康學(xué)院, 北京 100048)

    醬油是我國傳統(tǒng)發(fā)酵調(diào)味品,是以大豆或脫脂大豆輔以小麥、麩皮等為原料,經(jīng)多種微生物協(xié)同發(fā)酵,制得的具有特殊風(fēng)味與顏色的液體調(diào)味品[1-3]。氣味特征是影響醬油品質(zhì)高低的重要因素之一。目前,國內(nèi)外對醬油香氣成分的富集方法主要有頂空固相微萃取(HS- SPME)法[4-6]、溶劑輔助風(fēng)味蒸發(fā)(SAFE)法[7-10]、液液萃取(LLE)法[11]、同時蒸餾萃取(SDE)法[12]、攪拌棒吸附萃取(SBSE)法[13]、動態(tài)頂空制樣(DHS)[12]等,其中固相微萃取(SPME)法和液液萃取法使用最為廣泛。SPME簡單無需使用有機試劑,但對于高沸點低揮發(fā)性氣味化合物的萃取效果不佳;SDE在煮沸樣品的過程中會導(dǎo)致樣品中原有氣味活性物質(zhì)的分解或生成新的氣味化合物[14],其分析結(jié)果無法保證醬油中原有氣味成分的真實性;SBSE受涂層材料的限制,對氣味活性化合物的吸附效果有限。

    固相萃取整體捕集劑(monolithic material sorptive extraction,Mono Trap)是一種新型萃取材料,集硅膠、活性炭、十八烷基硅烷特性為一體的高交聯(lián)性吸附劑。Mono Trap硅膠骨架里混合了活性炭,對極性物質(zhì)、低沸點物質(zhì)、芳烴具有較好的吸附作用,可吸附分散在任何基質(zhì)中的高揮發(fā)性、低揮發(fā)性、極性、非極性、液態(tài)及氣態(tài)物質(zhì)[15]。Lu等[16]應(yīng)用Mono Trap對常見亞洲鯉魚肉的特征氣味物質(zhì)進行了研究,結(jié)果顯示化合物的萃取效果良好;Fu等[17]利用Mono Trap結(jié)合GC- MS和電子鼻建立熱氧化體系,研究中華絨螯蟹中關(guān)鍵脂類物質(zhì);Jang等[18]對Mono Trap結(jié)合GC- MS測定馬纓丹香氣化合物的萃取條件進行了優(yōu)化。但是,將Mono Trap新型萃取材料應(yīng)用于醬油氣味活性成分的研究還較少。

    本研究以高鹽稀態(tài)釀造醬油為研究對象,使用Mono Trap結(jié)合熱脫附以及GC- O- MS對氣味活性化合物進行萃取與分析,通過優(yōu)化萃取條件建立分析方法;同時使用SPME萃取相同醬油樣品并進行GC- O- MS分析,將Mono Trap與SPME的分析結(jié)果進行對比。研究結(jié)果將為進一步深入探究醬油的風(fēng)味成分提供一定的理論支持與幫助。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    高鹽稀態(tài)釀造醬油,千禾味業(yè)食品股份有限公司;C6~C30的正構(gòu)系列烷烴,色譜純,美國Sigma公司;Mono Trap(RGPS- TD、RSC18- TD、RGC18- TD),日本島津- GL Sciences公司。

    1.2 儀器與設(shè)備

    7890A- 7000B型GC- MS聯(lián)用儀、DB- Wax色譜柱,美國Agilent公司;Sniffer 9000型嗅聞儀,瑞士Brechbuhler公司;多功能自動進樣器(multipupose sampler,MPS)、熱脫附系統(tǒng)(thermal desorption system,TDS)、PTV冷卻型進樣口(cooled injection system,CIS)、玻璃襯管,德國Gerstel公司;MYP19- 2型恒溫磁力攪拌器,上海梅穎浦儀器儀表制造有限公司。

    1.3 實驗方法

    1.3.1萃取條件的正交試驗設(shè)計

    Mono Trap方法是一種較為新型的樣品前處理方法。為確定最佳的萃取條件,參照趙謀明等[5]以及顧賽麒等[19]的方法并稍作修改,設(shè)計L9(34)正交試驗(見表1),確定Mono Trap方法的最優(yōu)萃取條件。Mono Trap使用前在250 ℃ TDS中老化1 h,載氣流量1.2 mL/min。

    表1 正交試驗因素與水平Tab.1 Factors and levels of orthogonal experiment

    1.3.2萃取方法

    1.3.2.1 固相微萃取方法

    參照趙謀明等[5]對醬油的萃取方法并稍作修改。樣品使用前放于原商品包裝瓶中不開封,于4 ℃冰箱保存。實驗時,準確量取10 mL醬油于40 mL頂空瓶中,加入1 μL 2-甲基-3-庚酮(0.816 μg/μL)作為內(nèi)標物。45 ℃下保溫平衡20 min,用75 μm CAR/PDMS萃取頭在45 ℃下萃取40 min,萃取結(jié)束后在GC進樣口230 ℃下解析5 min。2個樣品間萃取頭250 ℃老化10 min,以防止樣品間相互污染。

    1.3.2.2 固相萃取整體捕集劑萃取方法

    將1個Mono Trap RGPS- TD(MTRGPS- TD)放入樣品瓶中,使其完全浸入到醬油液體中,置于恒溫磁力攪拌器上進行吸附萃取,待萃取完畢后,將MTRGPS- TD取出,用超純水沖洗后再用濾紙吸干水分,最后將MTRGPS- TD置于熱脫附裝置中解吸附,進行GC- O- MS分析。

    1.3.3GC-O-MS分析條件

    GC條件:色譜柱DB- Wax(30 m×0.25 mm, 0.25 μm);載氣為99.999%氦氣,流量1 mL/min;升溫程序為初始溫度40 ℃,保持3 min,以5 ℃/min速率升溫到200 ℃,再以10 ℃/min升至230 ℃,保持5 min;進樣方式為不分流。

    MS條件:電子轟擊(EI)離子源,電離能量70 eV;離子源溫度230 ℃,四極桿溫度150 ℃,檢測器溫度250 ℃;掃描模式為全掃模式,質(zhì)量掃描范圍m/z40~500。

    TDS條件:不分流模式;熱解吸程序為起始溫度40 ℃,60 ℃/min升到260 ℃,保持5 min。

    CIS條件:液氮制冷,起始溫度-50 ℃,平衡1 min,12 ℃/s升至250 ℃,保持1 min。

    嗅聞儀條件:Sniffer 9000型嗅聞儀傳輸線溫度250 ℃,嗅聞口用氮氣探入超純水瓶補充水蒸氣,嗅聞口溫度200 ℃。每個小組成員在嗅聞前都經(jīng)過培訓(xùn),以便熟悉各種氣味描述。5名小組成員快速準確記錄從嗅聞口中感受到的流出物的氣味特征和時間。

    1.3.4揮發(fā)性化合物定性與定量分析

    揮發(fā)性化合物的定性通過與NIST11譜庫進行比較。同時根據(jù)相同色譜條件下標準品保留時間和相同色譜條件下C6~C30正構(gòu)烷烴的保留時間計算檢測物質(zhì)的保留指數(shù)(RI),并與文獻報道的RI進行比對。定量分析方法以對醬油中揮發(fā)性化合物進行分離鑒定時添加的質(zhì)量濃度0.816 μg/μL的2-甲基-3-庚酮為內(nèi)標物,通過內(nèi)標物的峰面積與氣味活性化合物的峰面積比值計算各物質(zhì)的含量。

    1.4 數(shù)據(jù)處理

    采用Microsoft Excel 2010計算各氣味化合物的相對含量,使用Origin軟件對各化合物的含量繪制熱圖并進行分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 Mono Trap方法萃取參數(shù)的正交優(yōu)化結(jié)果

    在食品風(fēng)味化學(xué)分析中,將樣品的儀器分析結(jié)果與感官評價相結(jié)合能夠更為準確地反映出實驗方法對樣品風(fēng)味特征的還原度。因此,在優(yōu)化Mono Trap方法萃取參數(shù)時,使用GC- O- MS來驗證萃取化合物的氣味活性,以保證方法優(yōu)化結(jié)果的有效性。在此基礎(chǔ)上檢測到的氣味活性化合物的峰面積能夠代表萃取方法對化合物的萃取量。在保證GC- O- MS嗅聞得到的樣品氣味屬性符合樣品實際氣味特征的前提下,檢測得到的氣味活性化合物的數(shù)量與峰面積可以反映出萃取條件的優(yōu)劣。因此,本研究以嗅聞到的氣味活性物質(zhì)總數(shù)和這些物質(zhì)的峰面積為優(yōu)化指標。

    萃取條件優(yōu)化的正交試驗結(jié)果及分析見表2、表3。捕集劑種類、萃取時間、萃取溫度都對氣味化合物的吸附萃取結(jié)果有影響,因素水平組合為A3B3C2時,Mono Trap方法具有較佳的萃取效果。

    表2 Mono Trap方法正交試驗結(jié)果Tab.2 Results of orthogonal experiment for Mono Trap method

    表3 正交試驗方差分析Tab.3 Analysis of variance of orthogonal experiment

    同時,極差分析和方差分析結(jié)果表明,3個因素對Mono Trap 吸附萃取醬油氣味化合物的影響由大到小依次為捕集劑種類、萃取溫度、萃取時間。根據(jù)嗅聞到的氣味物質(zhì)總數(shù),最終選定固相萃取整體捕集劑RGC18- TD、萃取時間60 min、萃取溫度50 ℃為本研究中Mono Trap方法后續(xù)使用的優(yōu)化萃取方法。

    2.2 驗證實驗結(jié)果

    使用優(yōu)化后的Mono Trap方法對醬油重復(fù)萃取3次,計算嗅聞到的氣味化合物總峰面積,并對3次重復(fù)實驗之間的相對標準偏差(relative standard deviation,RSD)進行計算,驗證方法的可重復(fù)性。醬油中含量較高、帶有顯著花香、蜂蜜味的苯乙醇是醬油典型氣味特征的代表化合物。因此,本研究以苯乙醇為例,計算實驗方法的加標回收率。向2個醬油樣品中分別加入2種不同質(zhì)量濃度的苯乙醇標準溶液10 μL(1 000、5 000 μg/mL),采用GC- MS對其進行分析,計算加標回收率[見式(1)],對優(yōu)化得出的Mono Trap方法的有效性進行驗證。

    (1)

    加標回收率結(jié)果如表4。高添加量下,該方法對苯乙醇的回收率為112.52%;低添加量下,該方法對苯乙醇的回收率為109.12%,均在80%~120%,說明該方法的可重復(fù)性和準確度良好,適用于醬油的氣味化合物分析。

    表4 醬油中苯乙醇的加標回收率Tab.4 Recoveries of phenylethyl alcohol in soy sauce

    2.3 Mono Trap和SPME方法對醬油中氣味活性物質(zhì)的鑒定比較

    分別通過Mono Trap和SPME方法將醬油樣品中的揮發(fā)性成分提取出來,進行GC- O- MS分析。2種方法從醬油樣品中共鑒定出61種氣味活性成分,見表5。其中醇類11種、醛類7種、酮類5種、呋喃及呋喃酮類6種、含硫化合物4種、酯類11種、酚類3種、吡嗪類11種、有機酸類2種、其他化合物1種。不同萃取方式下香氣活性化合物含量熱圖見圖1。其中使用SPME方法共嗅聞到55種氣味活性化合物,質(zhì)量濃度共計3.05 mg/L;使用Mono Trap方法共嗅聞到56種化合物,質(zhì)量濃度共計12.63 mg/L。醬油的氣味活性物質(zhì)多為極性化合物,例如醇、酸、呋喃酮和酚類化合物等。Mono Trap方法的捕集劑中包含有ODS C18成分,其對極性化合物的吸附能力較強,這也可能是這種方法能夠檢測出更多氣味活性物質(zhì)的原因之一。

    醬油中含有豐富的醇類化合物。其中乙醇的含量最高,是發(fā)酵過程中由酵母代謝產(chǎn)生的代表性氣味活性物質(zhì)。除此之外,具有花香氣味的苯乙醇,被認為是醬油的關(guān)鍵氣味活性物質(zhì)。由表5和圖1可知,Mono Trap方法共檢測到的這兩種醇類化合物的含量分別是SPME方法檢測到的1.6倍和4.6倍。從檢測到的醇類化合物整體來看,Mono Trap方法共檢測到醇類氣味活性化合物9種,總質(zhì)量濃度為4.42 mg/L;SPME共檢測到11種,總質(zhì)量濃度為2.18 mg/L。因此,就醇類化合物而言,Mono Trap方法捕捉或富集化合物的能力更強。

    表5 Mono Trap與SPME方法對醬油樣品中氣味活性成分鑒定結(jié)果Tab.5 Identification results of odor-active components in soy sauce samples by Mono Trap and SPME

    續(xù)表5

    *1~61的數(shù)字編號分別對應(yīng)表5中相應(yīng)序號的化合物。SPME1~SPME3、Mono Trap1~Mono Trap3為3次平行實驗。圖1 不同萃取方式下醬油香氣活性化合物的含量熱圖Fig.1 Heat map of odor-active compounds in soy sauce

    酯類化合物具有典型的水果特征。醬油中含有多種酯類化合物,以乙酸乙酯為主,其次為乳酸乙酯等。這些化合物主要由發(fā)酵過程中生成的有機酸和醇類物質(zhì)通過酯化反應(yīng)生成,是醬油風(fēng)味中的代表物質(zhì)。表5中,Mono Trap和SPME方法檢測到酯類氣味活性化合物的種類和數(shù)量基本相同,Mono Trap方法萃取到的總物質(zhì)含量稍低于SPME。Mono Trap和SPME方法對酯類氣味活性化合物種類方面的萃取能力相差不大,但SPME富集到的化合物含量更高,這可能是由于酯類化合物揮發(fā)性較高,因此在樣品的頂部空間比樣品內(nèi)部能萃取到更多的化合物。

    醛、酮類氣味活性化合物一般具有麥芽味、青草味、甜味等[20],如2-甲基丁醛、3-甲基丁醛、苯甲醛、苯乙醛等。Mono Trap方法中共檢測到醛、酮類氣味活性物質(zhì)12種,總質(zhì)量濃度6.24 mg/L;SPME共檢測到醛、酮類氣味活性物質(zhì)10種,總質(zhì)量濃度0.25 mg/L。就醛、酮類化合物而言,Mono Trap方法能富集到的物質(zhì)含量更高。

    醬油中有機酸類物質(zhì)主要為乙酸,其次還有丙酸、丁酸等。酸類物質(zhì)具有酸香,可中和醬油的咸味,還可與酵母代謝產(chǎn)生的醇類反應(yīng)生成酯類化合物。Mono Trap方法共檢測到酸類氣味活性物質(zhì)2種,總質(zhì)量濃度1.15 mg/L;SPME方法共檢測到酸類氣味活性物質(zhì)1種,總質(zhì)量濃度0.11 mg/L。就酸類化合物而言,Mono Trap方法檢測到的化合物含量均高于SPME方法。

    酚和吡嗪類化合物在醬油中含量較低,但卻是醬油中非常重要的氣味化合物,能貢獻烤香、煙熏味。Mono Trap方法共檢測到酚、吡嗪類氣味活性物質(zhì)13種,共370.61 μg/L;SPME方法共檢測到酚、吡嗪類氣味活性物質(zhì)14種,共80.47 μg/L。就酚、吡嗪類化合物而言,Mono Trap方法萃取到的氣味化合物的含量高于SPME方法。

    呋喃和呋喃酮類物質(zhì)對醬油氣味特征的形成至關(guān)重要,尤其是2,5-二甲基-4-羥基-3(2H)-呋喃酮和5-甲基-2-乙基-4-羥基-3(2H)-呋喃酮,這2種化合物具有焦糖香,在水溶液中呈現(xiàn)出典型的醬油類氣味特征,但由于其相對分子質(zhì)量較大,揮發(fā)性相對較低,很難通過SPME方法檢測出結(jié)果。由表5可知,這2種化合物僅在Mono Trap方法中檢測到。就總體而言,Mono Trap方法共檢測到這類氣味活性物質(zhì)6種,總質(zhì)量濃度204.25 μg/L;SPME方法共檢測到呋喃類氣味活性物質(zhì)4種,總質(zhì)量濃度34.24 μg/L。因此, Mono Trap方法在呋喃酮類化合物的萃取及物質(zhì)含量的富集上較SPME更具優(yōu)勢,可以更好地吸附萃取具有典型醬油氣味特征的化合物。

    3 結(jié) 論

    本研究將Mono Trap技術(shù)、熱脫附和GC- O- MS分析相結(jié)合,鑒定了醬油中的氣味活性物質(zhì);以Mono Trap捕集劑類型、萃取時間和萃取溫度為參數(shù)通過正交試驗,優(yōu)化確定了適用于醬油氣味活性成分分析的Mono Trap方法的萃取條件,即捕集劑RGC18- TD、萃取時間60 min、萃取溫度50 ℃。實驗結(jié)果表明:與經(jīng)典分析方法SPME相比,使用Mono Trap-GC- O- MS分析方法可以檢測出更多具有醬油氣味特征的化合物。定量分析顯示:Mono Trap方法在提取氣味活性物質(zhì)方面具有萃取量大和回收率高的特點,特別是醇、醛、酸、酮、吡嗪、酚類等化合物的萃取濃度都比SPME方法高。在酯類化合物方面,SPME和Mono Trap方法的萃取能力幾乎相同。因此,在醬油的香氣成分萃取上,Mono Trap方法比SPME更有優(yōu)勢。這可以歸因于醬油的大部分香氣活性化合物均為極性化合物,而Mono Trap對極性化合物的吸附能力更強,有效吸附面積更大,特別是可以吸附到更多的揮發(fā)性相對較弱的關(guān)鍵氣味活性化合物,例如呋喃酮類化合物。這一方法有望成為今后醬油氣味活性成分分析的有效研究方法之一。

    猜你喜歡
    嗅聞醬油氣味
    基于嗅聞墻訓(xùn)練工作犬嗅覺作業(yè)效果評價
    好的畫,通常都有氣味
    文苑(2020年7期)2020-08-12 09:35:58
    詞牌:相見歡
    飛天(2020年4期)2020-04-17 14:48:24
    不同類型新疆風(fēng)干牛肉揮發(fā)性風(fēng)味成分差異分析
    肉類研究(2018年4期)2018-08-14 09:29:24
    買醬油
    氣味來破案
    買醬油
    故事大王(2016年10期)2016-11-07 15:30:12
    買醬油
    北京清醬肉誘導(dǎo)氧化及哈敗氣味分析
    肉類研究(2016年2期)2016-03-12 15:49:09
    我把醬油打回來啦
    99在线人妻在线中文字幕 | 久久国产精品大桥未久av| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 最新美女视频免费是黄的| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 精品久久久久久久久久免费视频 | 女人被狂操c到高潮| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 午夜福利视频在线观看免费| 久久久久久免费高清国产稀缺| 午夜91福利影院| 老司机深夜福利视频在线观看| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 18在线观看网站| 国产三级黄色录像| 女性生殖器流出的白浆| www.999成人在线观看| 日韩视频一区二区在线观看| 黄频高清免费视频| 大香蕉久久网| 成人亚洲精品一区在线观看| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 国产精品偷伦视频观看了| 亚洲精品自拍成人| 亚洲男人天堂网一区| 啪啪无遮挡十八禁网站| 极品教师在线免费播放| 久久久久久久精品吃奶| 国产亚洲精品久久久久5区| 欧美乱妇无乱码| 精品欧美一区二区三区在线| 欧美一级毛片孕妇| 久久草成人影院| √禁漫天堂资源中文www| 精品国产乱子伦一区二区三区| 免费av中文字幕在线| 欧美人与性动交α欧美软件| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 国产精品永久免费网站| 99精品久久久久人妻精品| 最近最新免费中文字幕在线| 人成视频在线观看免费观看| 桃红色精品国产亚洲av| 老司机午夜十八禁免费视频| svipshipincom国产片| 丁香六月欧美| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 麻豆乱淫一区二区| 动漫黄色视频在线观看| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 99热网站在线观看| 精品第一国产精品| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 亚洲色图av天堂| 自线自在国产av| 国产精品影院久久| 精品人妻熟女毛片av久久网站| cao死你这个sao货| 操美女的视频在线观看| 亚洲色图综合在线观看| 欧美日韩精品网址| 国产日韩欧美亚洲二区| 精品视频人人做人人爽| 男女床上黄色一级片免费看| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 最新的欧美精品一区二区| 欧美乱妇无乱码| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 另类亚洲欧美激情| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 99国产精品免费福利视频| 亚洲少妇的诱惑av| 亚洲国产精品一区二区三区在线| e午夜精品久久久久久久| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 一区二区三区精品91| 后天国语完整版免费观看| 老司机午夜十八禁免费视频| 午夜成年电影在线免费观看| 欧美色视频一区免费| 精品视频人人做人人爽| 一区福利在线观看| 久久狼人影院| 男女床上黄色一级片免费看| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 亚洲精品自拍成人| 又大又爽又粗| 首页视频小说图片口味搜索| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 大型黄色视频在线免费观看| 新久久久久国产一级毛片| 国产又爽黄色视频| 亚洲熟妇中文字幕五十中出 | 丝瓜视频免费看黄片| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 免费人成视频x8x8入口观看| 中文字幕人妻熟女乱码| 国产熟女午夜一区二区三区| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 午夜日韩欧美国产| 亚洲色图av天堂| 9热在线视频观看99| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 国产高清视频在线播放一区| 涩涩av久久男人的天堂| av中文乱码字幕在线| 精品视频人人做人人爽| 午夜免费观看网址| av线在线观看网站| 夫妻午夜视频| 最新美女视频免费是黄的| 在线国产一区二区在线| 天堂俺去俺来也www色官网| 91成人精品电影| av视频免费观看在线观看| 国产欧美日韩精品亚洲av| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 韩国av一区二区三区四区| 亚洲欧美激情在线| 日本五十路高清| 99国产精品免费福利视频| 这个男人来自地球电影免费观看| 美女 人体艺术 gogo| 黄色丝袜av网址大全| 手机成人av网站| 国产日韩欧美亚洲二区| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 极品教师在线免费播放| 热99久久久久精品小说推荐| 国产成人免费无遮挡视频| 9色porny在线观看| 美女福利国产在线| 又紧又爽又黄一区二区| 99re在线观看精品视频| 五月开心婷婷网| 国产精品 国内视频| 中文欧美无线码| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 免费一级毛片在线播放高清视频 | 女人久久www免费人成看片| 成人免费观看视频高清| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 黄片小视频在线播放| 极品教师在线免费播放| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 欧美乱妇无乱码| av网站在线播放免费| 美女福利国产在线| 一级毛片精品| 久久久久国产精品人妻aⅴ院 | 国产精品一区二区在线观看99| 黄色丝袜av网址大全| 搡老乐熟女国产| 欧美久久黑人一区二区| 精品久久久精品久久久| 欧美日韩av久久| 波多野结衣av一区二区av| 免费观看人在逋| 久久草成人影院| 久久久久国产精品人妻aⅴ院 | 免费看十八禁软件| 国产高清videossex| 午夜福利影视在线免费观看| av线在线观看网站| 亚洲人成77777在线视频| 免费观看a级毛片全部| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 香蕉国产在线看| 新久久久久国产一级毛片| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 波多野结衣av一区二区av| 男女床上黄色一级片免费看| 男人的好看免费观看在线视频 | 国产在视频线精品| 一本大道久久a久久精品| 国产乱人伦免费视频| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 搡老熟女国产l中国老女人| av中文乱码字幕在线| 一个人免费在线观看的高清视频| tocl精华| 大码成人一级视频| 视频区欧美日本亚洲| 久久久久久久久久久久大奶| 欧美黄色淫秽网站| 91老司机精品| 国产免费男女视频| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 亚洲视频免费观看视频| 大陆偷拍与自拍| 国产色视频综合| 人人澡人人妻人| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 一区二区日韩欧美中文字幕| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 精品无人区乱码1区二区| 色综合婷婷激情| 久久久久久人人人人人| 丰满的人妻完整版| 男人的好看免费观看在线视频 | tube8黄色片| 国产欧美日韩精品亚洲av| 欧美乱妇无乱码| www.熟女人妻精品国产| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 美女 人体艺术 gogo| 国产在线精品亚洲第一网站| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 午夜福利一区二区在线看| 免费在线观看完整版高清| 18禁美女被吸乳视频| 夜夜夜夜夜久久久久| 久久 成人 亚洲| 亚洲三区欧美一区| 一区福利在线观看| 女人久久www免费人成看片| 在线看a的网站| 无人区码免费观看不卡| 夫妻午夜视频| av免费在线观看网站| 他把我摸到了高潮在线观看| a级毛片在线看网站| 伦理电影免费视频| 人人澡人人妻人| а√天堂www在线а√下载 | 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 国产精品98久久久久久宅男小说| 一区二区日韩欧美中文字幕| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 精品一区二区三区av网在线观看| 亚洲专区中文字幕在线| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 首页视频小说图片口味搜索| 欧美乱码精品一区二区三区| 丝瓜视频免费看黄片| 午夜亚洲福利在线播放| svipshipincom国产片| 精品国产超薄肉色丝袜足j| av有码第一页| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 成人永久免费在线观看视频| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 日韩大码丰满熟妇| 性少妇av在线| 真人做人爱边吃奶动态| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 国产一区在线观看成人免费| 天堂中文最新版在线下载| 在线观看免费午夜福利视频| 在线观看一区二区三区激情| 天堂√8在线中文| 桃红色精品国产亚洲av| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 久久久久久免费高清国产稀缺| 午夜福利免费观看在线| 国产精品亚洲av一区麻豆| 色老头精品视频在线观看| 精品人妻在线不人妻| 国产黄色免费在线视频| 亚洲avbb在线观看| 久久国产精品影院| 国产精品九九99| 女人精品久久久久毛片| 99国产精品一区二区三区| 老熟女久久久| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 老司机午夜十八禁免费视频| 看免费av毛片| 欧美成人午夜精品| 欧美激情 高清一区二区三区| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 国产成人av激情在线播放| 亚洲色图综合在线观看| 亚洲色图av天堂| 人妻 亚洲 视频| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 精品一区二区三区av网在线观看| 韩国精品一区二区三区| 女人久久www免费人成看片| 热99re8久久精品国产| 国产av精品麻豆| 男人操女人黄网站| 国产麻豆69| 国产激情久久老熟女| 国产亚洲av高清不卡| 午夜免费观看网址| 精品免费久久久久久久清纯 | 亚洲伊人色综图| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 国产精品av久久久久免费| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 热re99久久精品国产66热6| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 精品国产一区二区三区四区第35| 老鸭窝网址在线观看| 国产高清国产精品国产三级| 超碰97精品在线观看| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 国产精品 欧美亚洲| 不卡av一区二区三区| 一区二区日韩欧美中文字幕| 久久九九热精品免费| 9色porny在线观看| 欧美 日韩 精品 国产| 国产亚洲精品久久久久5区| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 99在线人妻在线中文字幕 | 夜夜躁狠狠躁天天躁| 麻豆成人av在线观看| 亚洲第一青青草原| 在线观看免费午夜福利视频| 午夜91福利影院| 久久狼人影院| 国产黄色免费在线视频| 操出白浆在线播放| 国产成人精品无人区| 精品欧美一区二区三区在线| 国产精品一区二区精品视频观看| 国产一卡二卡三卡精品| av福利片在线| 欧美人与性动交α欧美软件| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 久久久久久久久久久久大奶| 俄罗斯特黄特色一大片| 国产亚洲欧美精品永久| 午夜久久久在线观看| netflix在线观看网站| 久久久国产欧美日韩av| 久久中文字幕一级| 亚洲免费av在线视频| 97人妻天天添夜夜摸| 免费高清在线观看日韩| 国产在线精品亚洲第一网站| www.自偷自拍.com| 久久久久国内视频| 高清欧美精品videossex| 亚洲第一青青草原| 成在线人永久免费视频| 老司机福利观看| 亚洲三区欧美一区| 俄罗斯特黄特色一大片| 高潮久久久久久久久久久不卡| 涩涩av久久男人的天堂| 中文字幕人妻丝袜制服| 色综合欧美亚洲国产小说| 亚洲三区欧美一区| 亚洲片人在线观看| 91精品国产国语对白视频| 黄色成人免费大全| 午夜福利免费观看在线| 久久久久精品国产欧美久久久| 国产亚洲精品一区二区www | 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 又黄又粗又硬又大视频| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 成人手机av| 窝窝影院91人妻| 国产一区有黄有色的免费视频| 一级,二级,三级黄色视频| 怎么达到女性高潮| 十八禁高潮呻吟视频| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 正在播放国产对白刺激| 午夜免费成人在线视频| 黄片大片在线免费观看| 欧美乱码精品一区二区三区| 免费在线观看完整版高清| av网站在线播放免费| 日韩中文字幕欧美一区二区| 国产日韩欧美亚洲二区| 黄色 视频免费看| 欧美激情极品国产一区二区三区| 黑人猛操日本美女一级片| 在线观看免费视频日本深夜| 国产男女超爽视频在线观看| 亚洲成国产人片在线观看| 午夜日韩欧美国产| 午夜免费观看网址| 亚洲免费av在线视频| 欧美日韩黄片免| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 男人的好看免费观看在线视频 | 中文字幕制服av| 亚洲av熟女| 美女福利国产在线| 亚洲熟妇中文字幕五十中出 | 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 国产精品影院久久| 十八禁人妻一区二区| 不卡av一区二区三区| 露出奶头的视频| 看免费av毛片| 国产主播在线观看一区二区| 十八禁人妻一区二区| 黑人操中国人逼视频| 精品一品国产午夜福利视频| 国产97色在线日韩免费| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 亚洲片人在线观看| 欧美日韩福利视频一区二区| 国产1区2区3区精品| 国产蜜桃级精品一区二区三区 | 久久婷婷成人综合色麻豆| 欧美日韩乱码在线| 日日夜夜操网爽| 精品久久久久久,| 日本wwww免费看| 激情在线观看视频在线高清 | 国产成人免费无遮挡视频| 日本欧美视频一区| 交换朋友夫妻互换小说| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 国产精品一区二区免费欧美| 新久久久久国产一级毛片| 亚洲一区二区三区欧美精品| 在线观看舔阴道视频| 免费在线观看完整版高清| 成熟少妇高潮喷水视频| 三上悠亚av全集在线观看| 日韩大码丰满熟妇| 老司机亚洲免费影院| 亚洲中文av在线| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 精品久久久久久,| 精品一区二区三区四区五区乱码| 999久久久精品免费观看国产| cao死你这个sao货| 99久久99久久久精品蜜桃| 十八禁网站免费在线| 久久久久精品国产欧美久久久| 在线视频色国产色| 美女 人体艺术 gogo| 身体一侧抽搐| 久久精品91无色码中文字幕| 中文字幕精品免费在线观看视频| 日本黄色日本黄色录像| 午夜成年电影在线免费观看| 精品亚洲成国产av| 午夜老司机福利片| 久久 成人 亚洲| 午夜两性在线视频| 欧美日韩一级在线毛片| 国产亚洲精品第一综合不卡| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 国产91精品成人一区二区三区| 黄色怎么调成土黄色| 国产午夜精品久久久久久| 亚洲欧美一区二区三区久久| 大型av网站在线播放| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 久久性视频一级片| 丝袜在线中文字幕| 极品人妻少妇av视频| 在线观看一区二区三区激情| 国产片内射在线| 十八禁网站免费在线| 亚洲成人手机| 亚洲av熟女| 中文亚洲av片在线观看爽 | 午夜影院日韩av| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 深夜精品福利| 亚洲中文日韩欧美视频| 亚洲七黄色美女视频| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | av网站免费在线观看视频| 欧美日韩av久久| 欧美精品一区二区免费开放| 日本五十路高清| 亚洲精品国产一区二区精华液| 精品乱码久久久久久99久播| 午夜日韩欧美国产| 免费人成视频x8x8入口观看| 激情视频va一区二区三区| 免费在线观看黄色视频的| 午夜影院日韩av| 欧美国产精品一级二级三级| 久久久久精品人妻al黑| 一本大道久久a久久精品| 中国美女看黄片| 欧美 日韩 精品 国产| 国产97色在线日韩免费| 一进一出好大好爽视频| 一级毛片高清免费大全| 亚洲av第一区精品v没综合| 欧美成人午夜精品| 人人妻人人澡人人看| 国产真人三级小视频在线观看| 国产精品一区二区在线不卡| 国产成人精品在线电影| 国产精品国产高清国产av | 国产日韩欧美亚洲二区| www.熟女人妻精品国产| 成人免费观看视频高清| 女性被躁到高潮视频| 在线观看免费日韩欧美大片| 午夜免费成人在线视频| 男女高潮啪啪啪动态图| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 午夜激情av网站| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 91成年电影在线观看| 美女福利国产在线| 国产精品久久久久成人av| 人妻一区二区av| svipshipincom国产片| 一a级毛片在线观看| 99久久综合精品五月天人人| 韩国av一区二区三区四区| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 欧美国产精品一级二级三级| 一区福利在线观看| 亚洲国产中文字幕在线视频| 日韩欧美国产一区二区入口| 视频区图区小说| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 日韩成人在线观看一区二区三区| 身体一侧抽搐| 99re在线观看精品视频| bbb黄色大片| 美女视频免费永久观看网站| 嫁个100分男人电影在线观看| 又紧又爽又黄一区二区| 啪啪无遮挡十八禁网站| 岛国在线观看网站| 欧美激情极品国产一区二区三区| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 1024香蕉在线观看| 午夜成年电影在线免费观看| 国产野战对白在线观看| 午夜精品在线福利| 国产精品一区二区精品视频观看| 一个人免费在线观看的高清视频| 国产三级黄色录像| √禁漫天堂资源中文www| 啦啦啦免费观看视频1| 国产日韩欧美亚洲二区| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 久久久久久久久免费视频了| 丰满的人妻完整版| 久久久国产成人精品二区 | 大片电影免费在线观看免费| 涩涩av久久男人的天堂| 三级毛片av免费| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 久99久视频精品免费| 不卡一级毛片| 成年人黄色毛片网站| 9热在线视频观看99| 91成年电影在线观看| 黄色毛片三级朝国网站| 中文字幕制服av| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 黄色 视频免费看| 女警被强在线播放| 丝瓜视频免费看黄片| 国产区一区二久久| 在线观看一区二区三区激情| 国产男女内射视频| 另类亚洲欧美激情| 精品久久久久久久久久免费视频 | 成人国产一区最新在线观看| 操美女的视频在线观看| 在线观看一区二区三区激情| 多毛熟女@视频| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 国产成人免费无遮挡视频| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 性色av乱码一区二区三区2| 欧美日韩精品网址| 桃红色精品国产亚洲av| 在线观看免费视频日本深夜| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 亚洲精品一二三| 午夜福利影视在线免费观看| 欧美日韩视频精品一区| 99re在线观看精品视频| 美女福利国产在线| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 免费观看精品视频网站| 老鸭窝网址在线观看| 婷婷精品国产亚洲av在线 | 午夜福利在线免费观看网站| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 色老头精品视频在线观看| 三级毛片av免费| 亚洲,欧美精品.| 757午夜福利合集在线观看| 黄色片一级片一级黄色片| 18禁国产床啪视频网站| 免费日韩欧美在线观看| 一进一出抽搐动态| 国产免费av片在线观看野外av| 黑人操中国人逼视频| 久久午夜亚洲精品久久| av在线播放免费不卡| 国产成人精品久久二区二区免费| 欧美日韩成人在线一区二区| 国产xxxxx性猛交| 成人精品一区二区免费| 欧美日韩成人在线一区二区| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 热re99久久国产66热| 两性夫妻黄色片|