• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法研究紫草對(duì)癌癥疾病的作用機(jī)制*

    2021-11-02 07:55:54錢(qián)薇褚明亮
    中外醫(yī)學(xué)研究 2021年27期
    關(guān)鍵詞:紫草靶點(diǎn)癌癥

    錢(qián)薇 褚明亮

    癌癥為世界第二大死亡原因,其死亡率和發(fā)病率逐年攀升。臨床治療癌癥大多以手術(shù)治療和放化療為主,其預(yù)后大多較差,存在生存率低、復(fù)發(fā)率高、多并發(fā)癥等一系列問(wèn)題[1-2]。紫草是紫草科紫草屬植物,其功效為涼血活血、解毒透疹[3-4]?,F(xiàn)代中醫(yī)認(rèn)為痰濁較盛、結(jié)聚成塊為腫瘤的病因所在,紫草可涼血活血使熱毒癰瘍散去以達(dá)到其療效。現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)紫草可通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞程序性凋亡、調(diào)節(jié)細(xì)胞通路活性、誘導(dǎo)ROS、抑制血管生成等方面抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖[5]。但其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及機(jī)制少有報(bào)道。因此該研究將在網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的基礎(chǔ)上分析紫草的抗癌作用機(jī)制,為其運(yùn)用于臨床提供更多的研究思路。

    1 材料與方法

    1.1 軟件與數(shù)據(jù)庫(kù)

    UniProt數(shù)據(jù) 庫(kù)(https://www.uniprot.org/), 中藥系統(tǒng)藥理學(xué)分析平臺(tái)(TCMSP,https://tcmspw.com/tcmsp.php),DrugBank數(shù) 據(jù) 庫(kù)(http://www.drugbank.ca/),Cyto-scape 3.7.1 軟 件(https://cytoscape.org/),GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)(https://www.genecards.org/),String數(shù) 據(jù) 庫(kù)(https://stringdb.org/),Metascape數(shù) 據(jù) 庫(kù)(http://metascape.org/gp/index.html#/main/step1)。

    1.2 紫草活性成分和靶點(diǎn)篩選

    在TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)中收集紫草的化學(xué)成分,時(shí)間截至2021年1月。并以類藥性(drug-likeness,DL)≥0.18、口服生物利用度(oral bioavailability,OB)≥30%為條件篩選紫草的有效活性化合物,利用UniProt數(shù)據(jù)庫(kù)除去非人源基因,把相應(yīng)靶點(diǎn)蛋白名稱轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)的靶點(diǎn)的Uniprot ID。

    1.3 紫草活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

    通過(guò)TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)收集“1.2”項(xiàng)下紫草中的活性成分的對(duì)應(yīng)靶點(diǎn),利用Cyto-scape 3.7.1軟件構(gòu)建活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖。

    1.4 癌癥靶點(diǎn)信息的篩選

    在GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)中輸入“cancer”為疾病名稱,使Relevance score≥12.43進(jìn)行篩選,得到GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)癌癥相關(guān)靶點(diǎn)信息;并把“cancer”疾病關(guān)鍵詞輸入DrugBank數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行搜索,得到DrugBank數(shù)據(jù)庫(kù)癌癥相關(guān)靶點(diǎn)信息。將以上兩個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)篩選后獲得的靶點(diǎn)信息進(jìn)行合并。把Uniprot ID不具有的靶點(diǎn)去除,把相同Uniprot ID的不同靶點(diǎn)刪除,保留Uniprot ID的唯一靶點(diǎn)。利用在線韋恩將紫草的主要活性成分的預(yù)測(cè)靶點(diǎn)與癌癥相關(guān)靶點(diǎn)進(jìn)行交集分析并繪制韋恩圖,提取紫草和癌癥疾病的交集靶點(diǎn)。

    1.5 癌癥與紫草對(duì)共同靶點(diǎn)的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用(protein-protein interaction network,PPI)關(guān)系

    將癌癥與紫草素的交集靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING平臺(tái),選取>0.700作為蛋白之間相互作用的信度依據(jù),隱藏散在的節(jié)點(diǎn),最終得到癌癥與紫草對(duì)共同靶點(diǎn)的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)互作PPI圖。將篩選得到的互作靶點(diǎn)輸入Metascape數(shù)據(jù)庫(kù),在數(shù)據(jù)庫(kù)中完成KEGG通路富集。

    1.6 紫草抗癌活性成分-靶點(diǎn)-KEGG通路網(wǎng)絡(luò)圖構(gòu)建

    利用Cyto-scape 3.7.1軟件,在“1.3”項(xiàng)紫草活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)的基礎(chǔ)上連接各基因信號(hào)通路,構(gòu)建“紫草抗癌活性成分-靶點(diǎn)-KEGG通路”網(wǎng)絡(luò)圖。

    2 結(jié)果

    2.1 紫草活性成分、靶點(diǎn)篩選及網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

    利用TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)收集到紫草中包含51個(gè)活性成分,經(jīng)過(guò)篩選得到10個(gè)主要活性成分,見(jiàn)表1。對(duì)10個(gè)活性成分的對(duì)應(yīng)靶點(diǎn)進(jìn)行收集,共獲得83個(gè)藥物相關(guān)靶點(diǎn)。利用UniProt數(shù)據(jù)庫(kù)檢索83個(gè)靶點(diǎn)蛋白的對(duì)應(yīng)基因名并進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化檢索,去除暫無(wú)對(duì)應(yīng)基因名稱的蛋白和10個(gè)主要活性成分重復(fù)的蛋白,最后共獲得69個(gè)藥物靶點(diǎn)蛋白對(duì)應(yīng)基因,見(jiàn)圖1。

    圖1 紫草活性成分-靶點(diǎn)圖

    表1 紫草的10個(gè)活性化合物及其參數(shù)信息

    2.2 紫草藥物靶點(diǎn)-癌癥靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

    通過(guò)GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)中共獲得25 466個(gè)與癌癥相關(guān)的基因和靶點(diǎn)信息,經(jīng)Relevance score≥12.43篩選后獲得1 597個(gè)與癌癥相關(guān)的基因和靶點(diǎn)信息。后在DrugBank數(shù)據(jù)庫(kù)中收集了125個(gè)與癌癥相關(guān)的基因和靶點(diǎn)信息。將兩個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)的基因合并后除去46個(gè)重復(fù)基因,共獲得1 672個(gè)與癌癥相關(guān)的基因和靶點(diǎn)信息。運(yùn)用UniProt數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)83個(gè)紫草藥物靶點(diǎn)蛋白和1 672個(gè)癌癥相關(guān)所得蛋白靶點(diǎn)數(shù)據(jù)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化,通過(guò)在線韋恩獲得紫草藥物靶點(diǎn)與癌癥疾病靶點(diǎn)共有靶點(diǎn)15個(gè)(見(jiàn)圖2小橢圓形節(jié)點(diǎn))。

    利用Cyto-scape 3.7.1軟件構(gòu)建紫草活性成分靶點(diǎn)和癌癥靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)圖,見(jiàn)圖2。顯示共22個(gè)節(jié)點(diǎn)和44條邊。其中八邊形節(jié)點(diǎn)(ZC)代表紫草,大橢圓形節(jié)點(diǎn)(cancer)代表癌癥疾病,5個(gè)三角形節(jié)點(diǎn)代表有效活性成分,小橢圓形節(jié)點(diǎn)代表15個(gè)目標(biāo)靶點(diǎn)節(jié)點(diǎn),黑色的線條代表有效活性成分與目標(biāo)靶點(diǎn)之間相互作用關(guān)系。網(wǎng)絡(luò)圖中的節(jié)點(diǎn)的度值表現(xiàn)其與其他節(jié)點(diǎn)的相連性,節(jié)點(diǎn)的度值于節(jié)點(diǎn)的關(guān)鍵性呈正比。其中1-甲氧基乙酰紫草素(MOL007714)的度值(degree)最高,為10。

    圖2 紫草活性成分靶點(diǎn)和癌癥靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)據(jù)圖

    2.3 癌癥疾病與紫草對(duì)共同靶點(diǎn)的PPI分析

    將15個(gè)癌癥-藥物共同靶點(diǎn)上傳至STRING數(shù)據(jù)庫(kù),并設(shè)置高等置信度蛋白參數(shù)評(píng)分值>0.700,獲取相應(yīng)蛋白互相作用信息。網(wǎng)絡(luò)中共包含15個(gè)節(jié)點(diǎn),40條邊,平均節(jié)點(diǎn)度值5.33。將網(wǎng)絡(luò)信息TSV數(shù)據(jù)格式導(dǎo)入Cyto-scape 3.7.1軟件構(gòu)建各蛋白互相作用的PPI網(wǎng)絡(luò)后,進(jìn)行拓?fù)浞治觯渲蠩SR1、AR、PGR等基因的節(jié)點(diǎn)度值>8,明顯高于其他靶點(diǎn),見(jiàn)圖3。

    圖3 紫草治療癌癥疾病靶點(diǎn)蛋白互作PPI圖

    2.4 紫草治療癌癥疾病互作靶點(diǎn)KEGG通路分析

    通過(guò)KEGG通路分析,共獲得10條信號(hào)通路,見(jiàn)表2。使用Cyto-scape 3.7.1軟件,在“2.3”項(xiàng)紫草活性成分靶點(diǎn)和癌癥靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖(圖2)基礎(chǔ)上連接各基因信號(hào)通路,構(gòu)建出“紫草抗癌活性成分-靶點(diǎn)-KEGG通路”網(wǎng)絡(luò)圖(圖4)。從網(wǎng)絡(luò)圖中可以發(fā)現(xiàn)紫草的5個(gè)活性成分與12個(gè)靶點(diǎn)及10條通路之間有密切的相互關(guān)聯(lián)作用。篩選出其中靶點(diǎn)數(shù)較多的兩條通路,分別為癌癥通路(pathways in cancer)和雌激素信號(hào)通路(estrogen signaling pathway)。

    圖4 “活性成分-靶點(diǎn)-KEGG通路”網(wǎng)絡(luò)圖

    表2 紫草治療靶點(diǎn)相關(guān)通路信息

    3 討論

    研究先通過(guò)TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)挖掘,篩選得到紫草的10個(gè)有效活性成分,其中1-甲氧基乙酰紫草素、吡氟甲禾靈、甘露醇、谷甾醇和乙酰紫草素5種活性成分與癌癥疾病關(guān)聯(lián)度較高。特別是1-甲氧基乙酰紫草素和乙酰紫草素,兩者均為萘醌類化合物,具有抗腫瘤等多種藥理作用[5-9]。

    PPI蛋白互作網(wǎng)絡(luò)表明,AR、ESR1、PGR等基因的節(jié)點(diǎn)度值>8,明顯高于其他靶點(diǎn)(圖3),說(shuō)明紫草抗癌的核心潛在靶點(diǎn)可能為上述靶點(diǎn)。AR是典型的雄激素受體,參與乳腺癌、前列腺癌、膀胱癌等腫瘤疾病的發(fā)生發(fā)展,并與其預(yù)后及相關(guān)治療密切相關(guān)[10-13]。ESR1基因是ER家族中ERα類基因,雌激素通過(guò)與細(xì)胞內(nèi)的ER受體結(jié)合發(fā)揮其各種功能。研究表明紫草就可以通過(guò)ESR1抑制雌激素信號(hào)通路中的ER受體表達(dá),抑制子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞的增殖[14]。PGR,也稱為PR,為孕酮受體。PR和ER常常聯(lián)合出現(xiàn)在乳腺癌、前列腺癌、子宮內(nèi)膜癌等相關(guān)腫瘤疾病中,并共同作用調(diào)控腫瘤細(xì)胞的代謝、生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移等[15-19]。

    進(jìn)一步的KEGG通路分析發(fā)現(xiàn),紫草治療癌癥疾病是通過(guò)10條信號(hào)通路實(shí)現(xiàn)的(表2和圖4)。而其中的癌癥通路和雌激素信號(hào)通路與相關(guān)靶點(diǎn)的關(guān)系最為密切,分別為6個(gè)和5個(gè)(表2和圖4),由此可推測(cè)紫草可能主要通過(guò)以上2條通路發(fā)揮抑制腫瘤作用的。

    總之,該研究利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)對(duì)紫草進(jìn)行了多成分、多靶點(diǎn)、多通路的探究。研究結(jié)果初步指明了紫草中的有效活性成分及重要靶點(diǎn)通路,為進(jìn)一步的探究提供了良好的基礎(chǔ)。

    猜你喜歡
    紫草靶點(diǎn)癌癥
    維生素D受體或是糖尿病治療的新靶點(diǎn)
    中老年保健(2021年3期)2021-12-03 02:32:25
    腫瘤免疫治療發(fā)現(xiàn)新潛在靶點(diǎn)
    留意10種癌癥的蛛絲馬跡
    癌癥“偏愛(ài)”那些人?
    海峽姐妹(2018年7期)2018-07-27 02:30:36
    小兒紅屁股涂紫草油
    特別健康(2018年9期)2018-07-17 15:29:08
    對(duì)癌癥要恩威并施
    特別健康(2018年4期)2018-07-03 00:38:08
    不如擁抱癌癥
    特別健康(2018年2期)2018-06-29 06:13:42
    陶四翁燒毀假紫草
    心力衰竭的分子重構(gòu)機(jī)制及其潛在的治療靶點(diǎn)
    HPLC測(cè)定滇紫草及其兩個(gè)近緣種中乙酰紫草素的含量
    建设人人有责人人尽责人人享有的 | 欧美精品一区二区大全| 黑人高潮一二区| 一级毛片久久久久久久久女| 青春草国产在线视频| 国产探花在线观看一区二区| 寂寞人妻少妇视频99o| 99久久精品热视频| 男女视频在线观看网站免费| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 国产精品人妻久久久久久| 一区二区三区高清视频在线| 一级毛片电影观看 | 精品酒店卫生间| 2021天堂中文幕一二区在线观| 高清av免费在线| 2021少妇久久久久久久久久久| 国产av一区在线观看免费| 少妇熟女aⅴ在线视频| 亚洲精品,欧美精品| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 国产精品爽爽va在线观看网站| 特级一级黄色大片| 午夜视频国产福利| 直男gayav资源| 中文在线观看免费www的网站| 欧美成人精品欧美一级黄| 高清毛片免费看| 国产精品乱码一区二三区的特点| 日本午夜av视频| 偷拍熟女少妇极品色| 韩国av在线不卡| 成人午夜精彩视频在线观看| 2022亚洲国产成人精品| 天美传媒精品一区二区| 男人狂女人下面高潮的视频| 黄色配什么色好看| 精华霜和精华液先用哪个| 免费观看人在逋| 国产中年淑女户外野战色| 免费人成在线观看视频色| 日本黄色视频三级网站网址| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 日本一二三区视频观看| 精品久久久久久久久久久久久| 国产精品.久久久| eeuss影院久久| 嫩草影院新地址| 啦啦啦啦在线视频资源| 久久精品国产亚洲av涩爱| 村上凉子中文字幕在线| 超碰av人人做人人爽久久| 免费在线观看成人毛片| 伊人久久精品亚洲午夜| 日韩中字成人| 丰满少妇做爰视频| 亚洲精品一区蜜桃| 国内精品美女久久久久久| 97超视频在线观看视频| av女优亚洲男人天堂| 成人综合一区亚洲| 欧美又色又爽又黄视频| 岛国在线免费视频观看| 天堂影院成人在线观看| 精品一区二区三区人妻视频| 九色成人免费人妻av| 国产真实乱freesex| 啦啦啦韩国在线观看视频| 人妻夜夜爽99麻豆av| av又黄又爽大尺度在线免费看 | 免费观看精品视频网站| ponron亚洲| 变态另类丝袜制服| 桃色一区二区三区在线观看| 国产毛片a区久久久久| 久久精品国产自在天天线| 日日摸夜夜添夜夜爱| 久久久久久久国产电影| 亚洲电影在线观看av| 久久这里只有精品中国| 国产视频首页在线观看| 久久久久国产网址| 高清视频免费观看一区二区 | 久久久精品大字幕| 成人毛片60女人毛片免费| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 国产 一区精品| 免费观看性生交大片5| 亚洲国产成人一精品久久久| 熟女电影av网| 国产一区二区在线av高清观看| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 97超碰精品成人国产| 欧美日本亚洲视频在线播放| 一个人观看的视频www高清免费观看| 欧美成人午夜免费资源| 老司机影院毛片| 热99在线观看视频| 久久久久久伊人网av| 免费看日本二区| 日韩高清综合在线| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 高清日韩中文字幕在线| 国产视频首页在线观看| 天天躁日日操中文字幕| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 日韩三级伦理在线观看| 欧美性猛交黑人性爽| 日韩欧美精品免费久久| 国产麻豆成人av免费视频| 国产91av在线免费观看| 看黄色毛片网站| 白带黄色成豆腐渣| 亚洲乱码一区二区免费版| 日韩欧美精品v在线| 日韩成人av中文字幕在线观看| 国产成人freesex在线| 久久久久久九九精品二区国产| 97在线视频观看| a级毛色黄片| 伊人久久精品亚洲午夜| 男女下面进入的视频免费午夜| 淫秽高清视频在线观看| 午夜老司机福利剧场| 三级毛片av免费| 国产精品久久电影中文字幕| 免费观看精品视频网站| 国产成人freesex在线| 黄色配什么色好看| 中文字幕av成人在线电影| 亚洲自拍偷在线| 国产精品,欧美在线| 日日干狠狠操夜夜爽| 久久久国产成人免费| 亚洲av电影不卡..在线观看| 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | 99热这里只有精品一区| 国产午夜精品一二区理论片| 日本黄色视频三级网站网址| 高清日韩中文字幕在线| 国内精品宾馆在线| 不卡视频在线观看欧美| 国产精品一区二区三区四区久久| 婷婷色av中文字幕| 老司机影院毛片| 长腿黑丝高跟| 极品教师在线视频| 日韩欧美 国产精品| 欧美一区二区亚洲| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 国产免费福利视频在线观看| 久久99热这里只频精品6学生 | 亚洲国产精品sss在线观看| 天天躁日日操中文字幕| 日韩欧美在线乱码| 免费av毛片视频| 国产淫片久久久久久久久| 日韩成人伦理影院| 精品久久久久久电影网 | 国产三级在线视频| 春色校园在线视频观看| 国产成人午夜福利电影在线观看| 哪个播放器可以免费观看大片| 午夜福利在线观看吧| 成人午夜精彩视频在线观看| 久久久久久伊人网av| 国产美女午夜福利| 女人久久www免费人成看片 | 亚洲色图av天堂| 五月玫瑰六月丁香| 亚洲一区高清亚洲精品| 国语自产精品视频在线第100页| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 女人被狂操c到高潮| 色网站视频免费| 色哟哟·www| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 波野结衣二区三区在线| 最近视频中文字幕2019在线8| 国产精品久久电影中文字幕| 国产精品国产三级专区第一集| 欧美激情在线99| 丝袜喷水一区| 男人舔女人下体高潮全视频| 午夜激情欧美在线| 最近中文字幕2019免费版| 国国产精品蜜臀av免费| 在线播放国产精品三级| 91aial.com中文字幕在线观看| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 成人一区二区视频在线观看| 亚洲精品自拍成人| 欧美成人a在线观看| 老女人水多毛片| 神马国产精品三级电影在线观看| 男人的好看免费观看在线视频| 中文字幕av在线有码专区| 在线观看一区二区三区| 国产淫片久久久久久久久| 久久鲁丝午夜福利片| 国产高清视频在线观看网站| av线在线观看网站| 亚洲欧美精品专区久久| 国产精品一区www在线观看| 久久久久国产网址| 最近视频中文字幕2019在线8| 亚洲精品一区蜜桃| 精品一区二区三区人妻视频| 一区二区三区免费毛片| 久久这里有精品视频免费| 免费播放大片免费观看视频在线观看 | 级片在线观看| 亚洲欧美精品专区久久| 国产美女午夜福利| 熟女电影av网| 91在线精品国自产拍蜜月| 亚洲av成人精品一区久久| 成人三级黄色视频| 水蜜桃什么品种好| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 欧美性感艳星| 久久久a久久爽久久v久久| 亚洲自拍偷在线| 国产精品熟女久久久久浪| 特级一级黄色大片| 亚洲最大成人av| 国产乱人偷精品视频| 神马国产精品三级电影在线观看| 国产淫片久久久久久久久| 白带黄色成豆腐渣| 搡老妇女老女人老熟妇| 久久久久久久久中文| 久久久久久久久大av| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 欧美一区二区亚洲| 啦啦啦观看免费观看视频高清| www日本黄色视频网| av女优亚洲男人天堂| h日本视频在线播放| 国产亚洲最大av| 99久久成人亚洲精品观看| 久久久午夜欧美精品| 国产在视频线精品| 白带黄色成豆腐渣| 嫩草影院新地址| 国产欧美日韩精品一区二区| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 国产精品伦人一区二区| 久久久亚洲精品成人影院| 午夜福利在线观看吧| 国产伦一二天堂av在线观看| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 午夜老司机福利剧场| 伦精品一区二区三区| 亚洲18禁久久av| 欧美成人免费av一区二区三区| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 亚洲综合精品二区| 久久久久久久久久久免费av| 国产黄片视频在线免费观看| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 我的女老师完整版在线观看| 亚洲美女搞黄在线观看| 亚洲精品日韩av片在线观看| a级毛色黄片| 国产免费一级a男人的天堂| 丝袜美腿在线中文| 内射极品少妇av片p| 变态另类丝袜制服| 十八禁国产超污无遮挡网站| 国产精品久久久久久精品电影| 久久草成人影院| 精品人妻偷拍中文字幕| 欧美色视频一区免费| 免费av不卡在线播放| 深爱激情五月婷婷| 中文字幕制服av| 一个人看的www免费观看视频| eeuss影院久久| av在线播放精品| 亚洲不卡免费看| 国产精品国产高清国产av| 亚洲精品成人久久久久久| 精品免费久久久久久久清纯| 国产69精品久久久久777片| 麻豆成人av视频| 看非洲黑人一级黄片| 禁无遮挡网站| 波多野结衣巨乳人妻| 欧美日韩精品成人综合77777| 能在线免费看毛片的网站| 黄色欧美视频在线观看| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | 亚洲av成人av| 三级国产精品片| 18+在线观看网站| 日韩欧美在线乱码| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 欧美性猛交黑人性爽| 如何舔出高潮| 看免费成人av毛片| eeuss影院久久| 最近手机中文字幕大全| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 99热网站在线观看| 精品无人区乱码1区二区| 精品不卡国产一区二区三区| 国产视频首页在线观看| 国产大屁股一区二区在线视频| 中文欧美无线码| 卡戴珊不雅视频在线播放| 高清毛片免费看| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 精品久久久久久电影网 | 久久精品人妻少妇| 舔av片在线| 久久久久久久久久久丰满| 日本免费一区二区三区高清不卡| 好男人视频免费观看在线| 久久久久免费精品人妻一区二区| 五月玫瑰六月丁香| 国产v大片淫在线免费观看| 插逼视频在线观看| 成人特级av手机在线观看| 国产91av在线免费观看| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 男女国产视频网站| 国内精品宾馆在线| 18+在线观看网站| 午夜a级毛片| 亚洲五月天丁香| 国产色婷婷99| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 九九热线精品视视频播放| 国产v大片淫在线免费观看| 亚洲色图av天堂| 嫩草影院精品99| 乱码一卡2卡4卡精品| 午夜福利高清视频| 日日干狠狠操夜夜爽| 国产乱人偷精品视频| 亚洲精品亚洲一区二区| 一二三四中文在线观看免费高清| 国产高清三级在线| 91久久精品电影网| 免费看美女性在线毛片视频| av黄色大香蕉| 2022亚洲国产成人精品| 久久精品久久精品一区二区三区| 免费观看精品视频网站| 欧美bdsm另类| 午夜激情欧美在线| 国产免费一级a男人的天堂| 能在线免费看毛片的网站| 欧美+日韩+精品| 有码 亚洲区| 少妇人妻精品综合一区二区| 欧美最新免费一区二区三区| 一二三四中文在线观看免费高清| 女人久久www免费人成看片 | 成人午夜精彩视频在线观看| 中文字幕熟女人妻在线| 91精品一卡2卡3卡4卡| 男女国产视频网站| 亚洲成av人片在线播放无| 欧美一区二区国产精品久久精品| 人人妻人人看人人澡| 久久久久久久午夜电影| 国产精品人妻久久久久久| 中文字幕熟女人妻在线| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 全区人妻精品视频| 久久久久网色| 久久热精品热| 国产亚洲一区二区精品| 3wmmmm亚洲av在线观看| 在线播放国产精品三级| 国产精品人妻久久久影院| 国产色婷婷99| 九九热线精品视视频播放| kizo精华| 69人妻影院| 日本熟妇午夜| 丝袜美腿在线中文| 国产av码专区亚洲av| 国产精华一区二区三区| 欧美一区二区精品小视频在线| 国产美女午夜福利| 亚洲自拍偷在线| 91精品国产九色| 男人舔女人下体高潮全视频| 乱码一卡2卡4卡精品| 亚洲精品色激情综合| 亚洲av成人精品一区久久| 长腿黑丝高跟| 91精品一卡2卡3卡4卡| 国产精品女同一区二区软件| 国产毛片a区久久久久| 欧美成人a在线观看| 小说图片视频综合网站| 日韩亚洲欧美综合| 欧美又色又爽又黄视频| 晚上一个人看的免费电影| 成人国产麻豆网| av线在线观看网站| 亚洲国产欧美在线一区| 国产精品人妻久久久久久| 偷拍熟女少妇极品色| 少妇熟女aⅴ在线视频| 性插视频无遮挡在线免费观看| 小说图片视频综合网站| 精品一区二区三区视频在线| 国产av在哪里看| 亚洲一区高清亚洲精品| 草草在线视频免费看| 老女人水多毛片| 天堂√8在线中文| 亚洲人成网站在线观看播放| 搡老妇女老女人老熟妇| 在线观看66精品国产| 欧美成人一区二区免费高清观看| 我的老师免费观看完整版| 久久精品夜色国产| 国产精品无大码| 国产91av在线免费观看| 亚州av有码| 联通29元200g的流量卡| 乱人视频在线观看| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 春色校园在线视频观看| 男人舔奶头视频| 久久精品久久久久久久性| 精华霜和精华液先用哪个| 亚洲国产精品国产精品| 亚洲内射少妇av| 久久亚洲国产成人精品v| 免费观看性生交大片5| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 亚洲精品一区蜜桃| 99在线人妻在线中文字幕| 看黄色毛片网站| 天美传媒精品一区二区| 九九在线视频观看精品| 国产精品一区www在线观看| 久久99蜜桃精品久久| 免费黄网站久久成人精品| 国产精品一及| 美女被艹到高潮喷水动态| 激情 狠狠 欧美| 大香蕉久久网| 日韩亚洲欧美综合| 日本与韩国留学比较| 亚洲久久久久久中文字幕| 我的女老师完整版在线观看| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 亚洲av熟女| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 秋霞在线观看毛片| 男女下面进入的视频免费午夜| 久久久a久久爽久久v久久| 国产精品日韩av在线免费观看| 色5月婷婷丁香| 免费搜索国产男女视频| 国产一级毛片七仙女欲春2| 一级黄片播放器| 五月伊人婷婷丁香| 久久久久久久亚洲中文字幕| 国产视频首页在线观看| 三级经典国产精品| 成人性生交大片免费视频hd| 亚洲欧美精品专区久久| videos熟女内射| 久久久久久久午夜电影| 少妇高潮的动态图| 久久久久网色| 91av网一区二区| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 高清av免费在线| 特级一级黄色大片| 男人的好看免费观看在线视频| 又粗又爽又猛毛片免费看| 如何舔出高潮| 国产精品一区二区三区四区久久| 伦精品一区二区三区| 亚洲国产最新在线播放| 22中文网久久字幕| 亚洲国产成人一精品久久久| 亚洲av成人av| 免费看光身美女| 久久国内精品自在自线图片| 村上凉子中文字幕在线| 国产 一区 欧美 日韩| 男女国产视频网站| h日本视频在线播放| 麻豆成人午夜福利视频| 欧美日韩精品成人综合77777| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久 | 欧美3d第一页| 日韩欧美三级三区| 国产午夜精品论理片| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 日韩av在线免费看完整版不卡| 精品久久久久久成人av| 久久人人爽人人爽人人片va| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 亚洲av免费高清在线观看| 村上凉子中文字幕在线| 男女那种视频在线观看| 免费看美女性在线毛片视频| 亚洲国产高清在线一区二区三| 国产精品国产三级国产专区5o | 国产午夜精品一二区理论片| av卡一久久| 国产乱人视频| 午夜福利成人在线免费观看| 国产黄a三级三级三级人| 国内精品一区二区在线观看| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 男人舔女人下体高潮全视频| 免费一级毛片在线播放高清视频| 毛片一级片免费看久久久久| 男女啪啪激烈高潮av片| 国产精品永久免费网站| 亚洲最大成人av| 亚洲成人av在线免费| 在线免费观看不下载黄p国产| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 日韩大片免费观看网站 | 日韩高清综合在线| 成人性生交大片免费视频hd| 国产免费福利视频在线观看| 日韩亚洲欧美综合| 成人亚洲欧美一区二区av| 毛片一级片免费看久久久久| 国产毛片a区久久久久| 一级毛片久久久久久久久女| 欧美高清成人免费视频www| 国产精品爽爽va在线观看网站| 亚洲成av人片在线播放无| 亚洲av一区综合| 久久鲁丝午夜福利片| 美女内射精品一级片tv| 国产高清不卡午夜福利| 亚洲最大成人手机在线| 一区二区三区高清视频在线| 一级黄片播放器| 美女大奶头视频| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 亚洲国产精品专区欧美| 亚洲在线观看片| 亚洲欧洲日产国产| 尾随美女入室| 欧美zozozo另类| 一级黄色大片毛片| 国产亚洲av嫩草精品影院| 欧美精品一区二区大全| 桃色一区二区三区在线观看| 黄片wwwwww| 午夜久久久久精精品| 国产成年人精品一区二区| 麻豆一二三区av精品| 国产精品女同一区二区软件| 九草在线视频观看| 亚洲欧美一区二区三区国产| 亚洲综合色惰| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 91在线精品国自产拍蜜月| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 直男gayav资源| 偷拍熟女少妇极品色| 三级国产精品欧美在线观看| 亚洲av电影不卡..在线观看| 91久久精品国产一区二区三区| 熟女电影av网| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 亚洲精品国产成人久久av| 中文亚洲av片在线观看爽| 久久草成人影院| 久久久久久国产a免费观看| .国产精品久久| 欧美3d第一页| 精品久久久久久久久av| 最近中文字幕2019免费版| 国产一级毛片在线| 久久精品综合一区二区三区| 人体艺术视频欧美日本| 一级av片app| 97在线视频观看| 亚洲中文字幕日韩| 亚洲av不卡在线观看| 亚洲最大成人av| 大话2 男鬼变身卡| 成年av动漫网址| 久久久精品欧美日韩精品| 日本黄大片高清| 欧美高清性xxxxhd video| 国产av不卡久久| av天堂中文字幕网| 亚洲精品456在线播放app| 久久久久久久午夜电影| 全区人妻精品视频| 中文字幕免费在线视频6| 听说在线观看完整版免费高清| 精品一区二区三区人妻视频| 国产精品永久免费网站| 搡老妇女老女人老熟妇| 亚洲精品自拍成人|