氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜法測定辣椒中咪鮮胺及其代謝物殘留量

吳曉娜 董娟 董雪峰

摘 要：目的：建立氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜法測定辣椒中咪鮮胺及其代謝產(chǎn)物2，4，6-三氯苯酚殘留的分析方法。方法：樣品采用QuEChERS方法進行前處理，以氣質(zhì)聯(lián)用儀多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）進行測定，優(yōu)化質(zhì)譜檢測條件，采用外標(biāo)法定量。結(jié)果：咪鮮胺及2，4，6-三氯苯酚在0.1～2 μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，定量限分別為0.006 6 mg/kg和0.000 4 mg/kg，在低、中、高3個不同添加水平下，咪鮮胺的平均回收率在91.9%～118.3%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在1.82%～6.95%;2，4，6-三氯苯酚的平均回收率在85.1%～118.0%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在1.22%～7.64%。結(jié)論：建立的氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜法靈敏度高、準(zhǔn)確度和精密度良好，可用于辣椒中咪鮮胺及其代謝物殘留量的檢測。

關(guān)鍵詞：GC-MS/MS;咪鮮胺;2，4，6-三氯苯酚;辣椒

咪鮮胺是一種被廣泛使用的咪唑類殺菌劑，主要的作用機理是抑制細胞膜的重要成分麥角甾醇的生物合成，從而達到鏟除病害的目的[1]，它廣泛用于大田作物、水果蔬菜及各種經(jīng)濟作物病害的防治[2]，其對于辣椒的枯萎病也具有很好的防治效果[3]。通過對咪鮮胺的大量研究，普遍認(rèn)為咪鮮胺在進入環(huán)境后最終會降解成2，4，6-三氯苯酚[4-5]，而2，4，6-三氯苯酚的毒性較強，且不易降解，對環(huán)境安全會造成潛在隱患。目前對于咪鮮胺及2，4，6-三氯苯酚的檢測方法，樣品的前處理不僅復(fù)雜煩瑣，而且還會用到毒性較大的吡啶鹽酸鹽，不利于檢驗人員的健康和環(huán)境的安全。本文通過研究構(gòu)建了QuEChERS-氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜法測定辣椒中咪鮮胺及2，4，6-三氯苯酚殘留的方法，處理過程簡單快速，并具有較高的靈敏度和選擇性。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

乙腈、丙酮、醋酸、無水硫酸鎂、氯化鈉、PSA、C18、咪鮮胺標(biāo)準(zhǔn)品（北京海岸鴻蒙標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)技術(shù)有限責(zé)任公司，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)編號：GBW（E）081565，濃度100 μg/mL）、2，4，6-三氯苯酚標(biāo)準(zhǔn)品（北京海岸鴻蒙標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)技術(shù)有限責(zé)任公司，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)編號：SB05-059-2008，濃度100 μg/mL）。分析中所有試劑為分析純試劑，水為一級水。

1.2 儀器與設(shè)備

7890B-7000C氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀（AgilentTechnologies）、±0.01 g電子天平、均質(zhì)器、離心機和氮吹儀。

1.3 儀器條件

（1）色譜條件。色譜柱：VF-1701MS石英毛細管柱

（30 m×0.250 mm×0.25 μm）;柱箱程序升溫：40 ℃保持1 min，然后30 ℃/min升溫至130 ℃，再以5 ℃/min升溫至250 ℃，10 ℃/min升溫至300 ℃保持5 min;進樣口溫度：280 ℃;碰撞氣為氮氣，載氣為氦氣，純度≥99.999%;流速：1.2 mL/min;進樣量1 μL;進樣方式為不分流進樣。

（2）質(zhì)譜條件。離子源溫度：230 ℃;傳輸線溫度：

280 ℃;電離方式：EI;溶劑延遲：5 min;測定方式：多反應(yīng)監(jiān)測。

1.4 方法

稱取15 g試樣于50 mL離心管中，加入15 mL 1%醋酸乙腈溶液進行均質(zhì)提取，在離心管中加入鹽（6 g無水硫酸鎂，2 g氯化鈉），迅速混勻，渦旋振蕩1 min，4 000 r/min離心5 min。吸取離心結(jié)束的上清液8 mL進行凈化處理，加入凈化劑（1 500 mg硫酸鎂，400 mg PSA及400 mg C18），渦旋振蕩1 min，4 000 r/min離心5 min。吸取凈化完的溶液

2 mL于離心管中，進行濃縮，氮吹至近干，加入1 mL丙酮復(fù)溶，過濾膜，上機。

2 結(jié)果與分析

2.1 質(zhì)譜條件的優(yōu)化

對咪鮮胺以及2，4，6-三氯苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液進行全離子掃描。選擇碎片中豐度比較高的碎片離子作為定性定量母離子。咪鮮胺母離子碎片為：180（定量離子）、196（定性離子）;2，4，6-三氯苯酚母離子碎片為：196（定量離子）、132（定性離子）。檢測在不同碰撞能量下，母離子碎片的碰撞情況，得到母離子-子離子對，表1為優(yōu)化后的母離子-子離子對。

2.2 咪鮮胺及2，4，6-三氯苯酚定性、定量離子圖譜

圖1和圖2為優(yōu)化質(zhì)譜條件下咪鮮胺及2，4，6-三氯苯酚的定性、定量離子圖譜。

2.3 建立基質(zhì)校正曲線

吸取一定量的2，4，6-三氯苯酚和咪鮮胺標(biāo)準(zhǔn)溶液，以凈化后的辣椒基質(zhì)溶液為溶劑，配制基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液使其終濃度為0.1 μg/mL、0.2 μg/mL、0.5 μg/mL、1.0 μg/mL、2.0 μg/mL。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線得到線性回歸方程，結(jié)果見圖3和圖4。R2都在0.999以上，表明咪鮮胺及2，4，6-三氯苯酚在0.1～2 μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。以10倍信噪比計算方法的定量限（S/N=10），咪鮮胺為0.006 6 mg/kg，2，4，6-三氯苯酚為0.000 4 mg/kg。

2.4 回收率和精密度的測定

對辣椒樣品進行3水平，6平行實驗，選擇低、中、高3個不同濃度進行加標(biāo)實驗。計算加標(biāo)回收率以及精密度，結(jié)果見表2。

咪鮮胺的平均回收率在91.9%～118.3%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在1.82%～6.95%;2，4，6-三氯苯酚的平均回收率在85.1%～118.0%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在1.22%～7.64%。結(jié)果表明該方法具有較好的回收率及精密度，能夠滿足辣椒中咪鮮胺及代謝物殘留量的檢測。

3 結(jié)論

本文建立了辣椒中咪鮮胺及其代謝產(chǎn)物2，4，6-三氯苯酚殘留量的檢測方法。通過操作簡單的QuEChERS前處理方法，利用氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜儀對咪鮮胺及其代謝產(chǎn)物2，4，6-三氯苯酚殘留量進行了定性和定量分析。避免了復(fù)雜煩瑣的前處理程序以及毒性試劑的使用。通過該方法檢測，咪鮮胺和2，4，6-三氯苯酚的定量限分別為0.006 6 mg/kg和0.000 4 mg/kg，檢測靈敏度高;繪制的5個點的濃度曲線，線性良好;在3個不同添加水平下，均獲得了良好的回收率。因此，可采用該方法檢測辣椒中咪鮮胺及其代謝物2，4，6-三氯苯酚殘留量。

參考文獻

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