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    結(jié)直腸癌與結(jié)直腸息肉患者血清IGFBP7水平比較及其診斷價值分析

    2021-10-29 08:11:02李淑婷劉楠李袁飛
    山東醫(yī)藥 2021年29期
    關(guān)鍵詞:孵育息肉良性

    李淑婷,劉楠,李袁飛

    1 山西醫(yī)科大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院,太原030000;2 山西醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院腫瘤科

    結(jié)直腸癌(CRC)是一種惡性實體腫瘤,在所有腫瘤類型中發(fā)病率(10.2%)居第三位、病死率(9.2%)居第二位[1]。由于CRC 起病隱匿,早期篩查方法缺乏特異性,導(dǎo)致早期診斷困難。研究表明,Ⅳ期CRC 的5年生存率僅為12.5%,而早期CRC 的5年生存率可達(dá)90%。因此,探索一種可靠的方法以增加早期診斷率將成為提高CRC 患者生存率的有效措施[2]。目前,活組織病理學(xué)檢查仍是診斷CRC的金標(biāo)準(zhǔn),但由于其具有侵入性,很難在無明顯特異性癥狀的早期階段接受這一檢查,易導(dǎo)致診斷延遲。血清生物標(biāo)志物由于具有簡單經(jīng)濟(jì)、非侵入性、可重復(fù)性等諸多優(yōu)勢在腫瘤早期診斷方面具有廣泛應(yīng)用前景,可能是改善CRC 早期診斷率的潛在方法。癌胚抗原(CEA)是臨床上最常用的早期診斷CRC 的腫瘤標(biāo)志物,但特異度、敏感度仍不夠理想。胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白7(IGFBP7)可通過抑制血管生成、誘導(dǎo)癌癥特異性衰老和凋亡發(fā)揮抑癌作用[3],有研究發(fā)現(xiàn)其在CRC患者中高于正常人,具有作為血清診斷標(biāo)志物的潛能[4]。本研究旨在觀察血清IGFBP7 水平在CRC 和結(jié)直腸息肉患者中是否存在差異,并以CEA 為標(biāo)準(zhǔn),進(jìn)一步分析血清IGFBP7對CRC的診斷價值。

    1 資料與方法

    1.1 臨床資料 經(jīng)山西醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)(倫理批準(zhǔn)號:2019GK049,日期:2019年2月20 日),收集2020年8 月—2021年3 月我院收治的CRC 患者及結(jié)直腸良性息肉患者。納入標(biāo)準(zhǔn):①既往未診斷過其他腫瘤;②接受胸部CT 及全腹CT檢查;③CRC 患者:經(jīng)組織病理學(xué)檢查確診為CRC且未接受過任何形式的抗癌治療;④結(jié)直腸良性息肉患者:檢查指標(biāo)沒有任何惡性腫瘤證據(jù);⑤均簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn):①嚴(yán)重肝腎功能不全;②臨床病理資料不全。共選取符合標(biāo)準(zhǔn)的CRC 患者46例(CRC 組)、結(jié)直腸良性息肉患者20 例(良性組)。CRC 組 男27 例、女19 例,年 齡27~91(63.41 ±13.31)歲,有吸煙史12例、飲酒史10例,腫瘤部位左半結(jié)腸11 例、右半結(jié)腸17 例、直腸18 例,腫瘤大?。?.58 ± 2.08)cm,組織學(xué)分級高分化7 例、中分化26 例、低分化8 例、不明確5 例,腫瘤浸潤深度Tis 4例、T12例、T22例、T327例、T47例、不明確4例,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移N020 例、N117 例、N26 例、不明確3 例,遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移M031 例、M115 例,TNM 分期早期16 例(0 期4例、Ⅰ期4 例、ⅡA 期8 例)、晚期25 例(ⅡB 期2 例、Ⅲ期8例、Ⅳ期15例)、不明確5例,CEA為(107.92 ±493.11)ng/mL。良性組男15 例、女5 例,年齡40~77(58.20 ± 9.47)歲,有吸煙史7 例、飲酒史6 例,CEA 為(2.11 ± 2.37)ng/mL。兩組性別、年齡、吸煙史、飲酒史比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義,CEA 水平兩組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    1.2 血清IGFBP7檢測方法 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗。采集兩組清晨空腹靜脈血,以2 500 r/min 離心10 min,取上清液,-80 ℃保存待檢。IGFBP7 試劑盒購自中國Boster公司。操作步驟:①樣本稀釋:以1∶2的比例稀釋血清樣本,配置標(biāo)準(zhǔn)曲線的標(biāo)準(zhǔn)濃度(0、625、1 250、2 500、5 000、10 000、20 000、40 000 pg/mL)。②加樣:將100 μL稀釋后的血清樣品加入酶標(biāo)板的每個孔中,37 ℃孵育90 min。③除去酶標(biāo)板中的液體,每孔加入100 μL 生物素標(biāo)記抗體,37 ℃孵育60 min。④加酶標(biāo)試劑:洗板3 次后,每孔加入100 μL親和素—過氧化物酶復(fù)合物,37 ℃孵育30 min。⑤顯色:洗滌5 次后,每孔加入90 μL TMB 顯色底物,37 ℃孵育15 min。⑥終止反應(yīng)及讀數(shù):加入終止液后5 min 內(nèi)讀取450 nm 波長下的光密度(OD)值。所有血清樣品均一式兩份測試,取平均值進(jìn)行分析。

    1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS25.0統(tǒng)計軟件。計量資料以± s表示,組間比較行Mann-Whitney U檢驗。繪制血清IGFBP7、CEA單獨及聯(lián)合診斷CRC的受試者工作特征(ROC)曲線,計算曲線下面積(AUC)、靈敏度、特異度等。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 兩組血清IGFBP7 水平比較 CRC 組、良性組血清IGFBP7 水平分別為(5.29 ± 2.13)、(3.92 ±1.71)ng/mL,早、晚期CRC 患者血清IGFBP7水平分別為(5.79 ± 2.69)、(5.18 ± 1.86)ng/mL,CRC 組及其早、晚期CRC 患者血清IGFBP7 水平均高于良性組(P均<0.05)。

    2.2 血清IGFBP7、CEA 對CRC 的診斷價值 ROC曲線分析結(jié)果見表1。

    表1 血清IGFBP7、CEA對CRC的診斷價值

    2.3 血清IGFBP7、CEA 對早期CRC 的診斷價值ROC曲線分析結(jié)果見表2。

    表2 血清IGFBP7、CEA對早期CRC的診斷價值

    3 討論

    胰島素樣生長因子(IGF)家族成員包括IGF、IGF 受體和IGF 結(jié)合蛋白(IGFBPs),其中IGFBPs 是與IGFs 共同進(jìn)化的同源蛋白,賦予IGF 調(diào)控系統(tǒng)的功能和組織特異性。IGFBP7 可與IGF 低親和力結(jié)合,在大多數(shù)正常組織中的蛋白質(zhì)和mRNA 水平上都有表達(dá),包括大腦、肝臟、胰腺和骨骼肌,并分泌入循環(huán)[5]。研究表明,IGFBP7 與多種信號通路及腫瘤有關(guān)。IGFBP7 可激活Ras-MEK-ERK、Ras-MAPK 及IRS-PI3K-AKT-mTOR 信號通路,起到誘導(dǎo)蛋白質(zhì)增殖、蛋白質(zhì)合成、抗凋亡、促進(jìn)細(xì)胞生長等多種不同效應(yīng)[6]。既往研究顯示,IGFBP7 在食管鱗癌、食管胃交界處腺癌、軟組織肉瘤等腫瘤患者血清中均檢測到升高[7-9];但也有研究顯示,IGFBP7 水平在肺癌患者血清中有所降低[10]??梢姡錓GFBP7在不同腫瘤中的水平有所不同,其水平變化對于不同腫瘤中是否具有特異性尚需要進(jìn)一步研究。

    有研究表明,IGFBP7在CRC腫瘤組織中的表達(dá)顯著高于正常結(jié)腸組織,且在CRC 的發(fā)生中起潛在的抑癌作用[11-13]。此外,IGFBP7 還被發(fā)現(xiàn)與CRC 的組織分化程度、腫瘤轉(zhuǎn)移、疾病預(yù)后密切相關(guān)[14]。目前,對IGFBP7 在CRC 血清水平的研究較少。本研究結(jié)果顯示,CRC患者IGFBP7水平與結(jié)直腸良性病變患者比較具有顯著統(tǒng)計學(xué)差異,且這種差異在CRC 早期即出現(xiàn),因此我們推測其能否作為一種新的血清腫瘤標(biāo)志物用于診斷CRC。本研究ROC 曲線可見,IGFBP7 診斷CRC 的AUC 為0.720,敏感度為67.4%,特異度為80.0%。但上述指標(biāo)如要作為一種診斷標(biāo)志物,其靈敏度并不樂觀。因此我們進(jìn)一步探討了IGFBP7 與CEA 聯(lián)合應(yīng)用對CRC 的診斷能力,結(jié)果提示聯(lián)合應(yīng)用可使優(yōu)勢互補(bǔ),提高診斷的準(zhǔn)確性。IGFBP7 與CEA 聯(lián)合應(yīng)用診斷CRC 的AUC為0.812,敏感度提高至89.1%,但特異度有所降低(60%)。更重要的是,我們發(fā)現(xiàn)在早期CRC 中,IGFBP7 診斷CRC 的AUC 為0.747,高于本研究中納入的CEA 數(shù)據(jù)。上述結(jié)果提示,血清IGFBP7 在CRC 診斷中有一定價值,其具有作為CRC 早期無創(chuàng)診斷性腫瘤標(biāo)記物的潛力,與CEA 聯(lián)合應(yīng)用可能提高診斷的準(zhǔn)確性。但限于樣本量較少,且我們的研究僅使用良性疾病作為對照,不能很好的代表所有非腫瘤患者,未來應(yīng)加入無息肉的正常人群進(jìn)行分析,其診斷價值也有待進(jìn)一步大規(guī)模臨床數(shù)據(jù)的驗證。

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