下調(diào)NLRP3在2型糖尿病中表達(dá)對(duì)胰島素抵抗模型脂肪細(xì)胞炎癥反應(yīng)及自噬的影響*

沙依拉·海米提 阿地拉·阿里木 阿不拉江·玉孫 王新玲 張穗鄉(xiāng)

(1.新疆自治區(qū)人民醫(yī)院內(nèi)分泌科，新疆 烏魯木齊 830000；2.新疆醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，新疆 烏魯木齊 830000)

寡聚化結(jié)構(gòu)域樣蛋白受體3(NOD family,pyrin domain containing-3,NLRP3)是NOD家族中研究最為成熟的成員之一，同時(shí)也是生物體內(nèi)表達(dá)最為廣泛、生物作用作為多樣的一類炎性小體[1-2]。近年來大量研究證實(shí)NLRP3在2型糖尿病(type-2 diabetes mellitus disease,T2DM)的發(fā)病機(jī)制中起著至關(guān)重要的作用[3-6]。T2DM是以胰島素抵抗(insulin resistance,IR)與慢性炎癥為主要特征的代謝紊亂性疾病[7]。其中，機(jī)體的脂肪組織作為體內(nèi)最大的能量?jī)?chǔ)備系統(tǒng)，其不僅在血糖控制及脂類代謝過程中發(fā)揮著重要的作用，還能通過內(nèi)分泌功能參與調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫代謝過程[8-11]。但關(guān)于NLRP3對(duì)T2DM中發(fā)生IR的脂肪細(xì)胞的作用尚不明確。本文研究了NLRP3在脂肪細(xì)胞發(fā)生IR條件下的作用，有望為靶向NLRP3的T2DM治療提供新的啟迪。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 選取2018年3月～2019年5月在新疆自治區(qū)人民醫(yī)院內(nèi)分泌科初診為T2DM的患者60例,設(shè)為T2DM組。另選取同期本院體檢中心的健康正常體檢者60例作為正常對(duì)照組(Normal組)。T2DM的診斷標(biāo)準(zhǔn)參考中華醫(yī)學(xué)會(huì)糖尿病分會(huì)制定的《中國(guó)2型糖尿病防治指南(2017年)》[12]。T2DM組納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合上述糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)。②無合并心腦血管、肝腎、呼吸系統(tǒng)及胃腸等其他系統(tǒng)疾病或惡性腫瘤。③非妊娠期或哺乳期婦女。④3月內(nèi)未發(fā)生酮癥酸中毒或高滲性昏迷。⑤6月內(nèi)未服用任何降糖藥物治療。本研究對(duì)象均簽署知情同意書，并經(jīng)新疆自治區(qū)人民醫(yī)院倫理委員會(huì)審核、批準(zhǔn)。

1.2 細(xì)胞系及主要試劑 前脂肪細(xì)胞3T3-L1株購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海細(xì)胞庫；地塞米松，胰島素(insulin)、異丁基甲基黃嘌呤(isobutylmethylxanthine,IBMX)(美國(guó)Sigma公司)；Trizol、BCA試劑盒、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒(美國(guó)Thermo 公司)；實(shí)時(shí)定量PCR試劑盒(廣州瑞博生物公司)；轉(zhuǎn)染試劑脂質(zhì)體Lipofectamine3000 (美國(guó)Invitrogen公司)；靶向下調(diào)NLRP3表達(dá)的小干擾RNA(si-NLRP3)及其陰性對(duì)照序列(si-negative control,si-NC)(上海吉瑪生物公司);油紅O染色試劑盒(武漢博士德生物公司)；葡萄糖氧化酶試劑盒(江蘇碧云天生物公司)；大鼠抗Beclin1、GAPDH單克隆抗體(美國(guó)Santa Cruz公司)；大鼠抗LC3B多克隆抗體、大鼠抗p62單克隆抗體(美國(guó)Cell Signaling Technology公司)；辣根過氧化酶標(biāo)記(HRP)的兔抗大鼠IgG(武漢博士德生物科技公司)；PCR引物(上海生工)；其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。電泳槽、電泳儀及化學(xué)發(fā)光熒光成像系統(tǒng)(美國(guó)Bio-Bad公司)。

1.3 檢測(cè)方法

1.3.1 生化指標(biāo)檢測(cè) 所有研究對(duì)象均隔夜禁食8～10 h后采集肘靜脈血進(jìn)行檢測(cè)各項(xiàng)生化指標(biāo)。采用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)所有患者的血糖指標(biāo)：空腹血糖值(FPG)、餐后2 h血糖(2 h PG)，糖化血紅蛋白(HbA1c)；。采用放射免疫法測(cè)定空腹胰島素水平(FINS)。根據(jù)FPG與FINS計(jì)算IR指數(shù)(HOMA-IR)，計(jì)算公式：HOMA-IR =[(FPG×FINS)/22.5]；根據(jù)受試者身高體重計(jì)算體質(zhì)量(BMI)，BMI=體重(kg)/身高2(m2)。

1.3.2 酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA) 參考NLRP3、白介素1β(interlukin-1β,IL-1β)、白介素18(interlukin-18,IL-18)的ELISA檢測(cè)試劑盒使用說明方法檢測(cè)相應(yīng)樣本中的上述細(xì)胞因子表達(dá)。實(shí)驗(yàn)單獨(dú)進(jìn)行3次。

1.3.3 細(xì)胞的培養(yǎng)及誘導(dǎo)分化 參照文獻(xiàn)[13]培養(yǎng)前脂肪細(xì)胞3T3-L1并誘導(dǎo)其分化為成熟脂肪細(xì)胞，方法如下：常規(guī)復(fù)蘇3T3-L1前脂肪細(xì)胞，使用含有10%FBS的DMEM/HG培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，置于37 ℃、5% CO2飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)融合至90%以上時(shí)，在上述培養(yǎng)基中加入0.5 mmol/L IBMX、1 μmol/L地塞米松、10 μg/mL Insulin進(jìn)行誘導(dǎo)分化，同上條件培養(yǎng)48 h,更換為10 μg/mL Insulin與10% FBS的DMEM/HG培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)48 h,再將培養(yǎng)基更換為10% FBS的DMEM/HG培養(yǎng)基進(jìn)行持續(xù)培養(yǎng)，48 h更換培養(yǎng)基1次。選擇誘導(dǎo)分化8 d至12 d的3T3-L1細(xì)胞進(jìn)行成熟脂肪細(xì)胞的鑒定。

1.3.4 油紅O染色 收集生長(zhǎng)狀態(tài)良好的經(jīng)誘導(dǎo)分化后的3T3-L1細(xì)胞，PBS離心洗滌細(xì)胞后，在室溫下將其固定于1 mL 10%的甲醛溶液中2 h,PBS再次洗滌細(xì)胞后，室溫下晾干細(xì)胞，加入0.3%油紅染色溶液250 μl于室溫下避光染色1 h,60%異丙醇充分漂洗后置于顯微鏡下觀察，拍照。

1.3.5 IR模型的建立 將方法1.3.3中誘導(dǎo)分化的成熟脂肪細(xì)胞3T3-L1分為正常對(duì)照組(記為A組)與IR模型組(記為B組)，A組使用含10% FBS DMEM/HG的常規(guī)培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，B組使用含1 μmol/L地塞米松與10% FBS的DMEM/HG培養(yǎng)基進(jìn)行誘導(dǎo)IR,兩組細(xì)胞按上述條件培養(yǎng)48 h后，收集兩組細(xì)胞培養(yǎng)上清液。使用含100 nmol/L Insulin的常規(guī)培養(yǎng)基處理上述不同條件培養(yǎng)48 h后的A、B組細(xì)胞30 min,收集各組細(xì)胞培養(yǎng)上清液。參考葡萄糖氧化酶試劑盒使用方法檢測(cè)所收集的上清液中葡萄糖含量，以未接種細(xì)胞的空白培養(yǎng)基作為葡萄糖含量的基礎(chǔ)值，所測(cè)結(jié)果減去每組基礎(chǔ)值即為每組葡萄糖消耗量。

1.3.6 細(xì)胞轉(zhuǎn)染及分組 分別取生長(zhǎng)狀態(tài)良好的3T3-L1脂肪細(xì)胞，細(xì)胞計(jì)數(shù)后，按2×105個(gè)/mL接種于24孔板中進(jìn)行IR模型誘導(dǎo)后，加入100 μl Opti-MEM溶液，并根據(jù)LipofectamineTM3000說明書方法將si-NLRP3、si-NC轉(zhuǎn)染入細(xì)胞中。將轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞置于37 ℃、5% CO2恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)8 h后即可進(jìn)行檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率及后續(xù)相關(guān)實(shí)驗(yàn)。將轉(zhuǎn)染后的3T3-L1脂肪細(xì)胞分為四組，分別為si-NC組，即轉(zhuǎn)染si-NC的3T3-L1細(xì)胞；si-NLRP3組，即轉(zhuǎn)染si-NLRP3的3T3-L1細(xì)胞；IR-si-NC組，即在IR模型中轉(zhuǎn)染si-NC的3T3-L1細(xì)胞；IR-si-NLRP3組，即在IR模型中轉(zhuǎn)染si-NLRP3的3T3-L1細(xì)胞。

1.3.7 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-PCR) 取方法1.3.6不同處理的各組3T3-L1細(xì)胞，TRIzol法提取細(xì)胞中總RNA,分光光度計(jì)檢測(cè)濃度與純度后，根據(jù)逆轉(zhuǎn)錄試劑說明書逆轉(zhuǎn)錄為cDNA,再按照RT-PCR試劑說明書及預(yù)實(shí)驗(yàn)確定的反應(yīng)時(shí)間與溫度進(jìn)行實(shí)時(shí)定量，RT-PCR反應(yīng)條件為：95 ℃(30 s)預(yù)變性后，變性95 ℃(7 s)→退火60 ℃(30 s)→72 ℃(15 s)，40個(gè)循環(huán)周期。RT-PCR引物序列為：NLRP3-上游：5′-AGAAGAGACCACGGCAGAAG-3′,NLRP3-下游：5′-CCTTGGACCAGGTTCAGTGT-3′；GAPDH-上游:5′-GCATTGTGGAAGGGCTCATG-3′，GAPDH-下游:5′-TTGCTGTTGAAGTCGCAGGAG-3′。以GAPDH為內(nèi)參，采用2-ΔΔCt方法分析NLRP3 mRNA的表達(dá)。上述實(shí)驗(yàn)單獨(dú)重復(fù)3次。

1.3.8 Western blot實(shí)驗(yàn) 取方法1.3.6不同處理的各組3T3-L1細(xì)胞，RIPA細(xì)胞裂解液及蛋白酶抑制劑進(jìn)行提取細(xì)胞中的總蛋白。BCA法進(jìn)行蛋白定量后，將蛋白樣品進(jìn)行加熱變性。取30 μg的蛋白進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)電泳進(jìn)行蛋白分離，采用濕轉(zhuǎn)法將分離的蛋白轉(zhuǎn)至PVDF膜上，5%的脫脂牛奶于室溫下封閉2 h后,分別加入LC3B(1∶300)、Beclin1(1∶300)、p62(1∶300)、GAPDH (1∶1000)一抗，4 ℃搖床孵育過夜。TBST溶液清洗3次，5 min/次，以辣根酶標(biāo)記的二抗(1∶5000)室溫孵育1 h,以TBST溶液清洗3次，5 min/次。最后均勻滴加ECL發(fā)光液后于凝膠成像儀進(jìn)行曝光拍照。Image J軟件測(cè)定條帶灰度值，以目標(biāo)蛋白與內(nèi)參GAPDH的比值作為其相對(duì)含量。以上實(shí)驗(yàn)單獨(dú)重復(fù)3次。

2 結(jié)果

2.1 兩組受試者一般資料比較 T2DM組與Normal組在性別、年齡及BMI方面相比，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，而FPG、2 h PG、HbA1c、FINS及HOMA-IR相比，T2DM組較Normal組均明顯增加，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P<0.05)，見表1。

表1 兩組受試者的一般臨床資料比較Table 1 General clinical data of the two groups

2.2 NLRP3在T2DM患者血清中的表達(dá) 與Normal組相比，NLRP3在T2DM組血清中的表達(dá)顯著增加 (P<0.01)，見圖1。

圖1 NLRP3在兩組患者血清中的表達(dá)Figure 1 The expression level of NLRP3 in serum of T2DM patients increased significantly注：與Normal組相比，①P<0.01

2.3 成熟脂肪細(xì)胞分化的鑒定 油紅O染色進(jìn)行鑒定誘導(dǎo)后3T3-L1細(xì)胞，觀察顯示前脂肪細(xì)胞3T3-L1呈長(zhǎng)梭形貼壁生成，而誘導(dǎo)后細(xì)胞形狀變圓，體積增大，經(jīng)油紅O染色觀察可見細(xì)胞核周圍有大量脂滴環(huán)繞，呈“戒環(huán)狀”。見圖2。

圖2 油紅O染色觀察3T3-L1前脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化Figure 2 Induced differentiation of 3T3-L1 pre-adipocytes was observed by oil red O staining注：黑色箭頭指示3T3-L1脂肪細(xì)胞中脂滴呈“戒環(huán)狀”

2.4 脂肪細(xì)胞IR模型的鑒定 應(yīng)用葡萄糖氧化酶法鑒定3T3-L1細(xì)胞的IR模型，結(jié)果顯示3T3-L1脂肪細(xì)胞經(jīng)DEX培養(yǎng)48 h后與Normal組相比，IR模型組細(xì)胞的上清液中葡萄糖消耗量顯著降低 (P<0.05)，再經(jīng)胰島素刺激后與Normal組相比，IR模型組細(xì)胞的上清液中葡萄糖消耗量亦明顯降低 (P<0.05)。提示成功建立了3T3-L1脂肪細(xì)胞的IR模型，見圖3。

圖3 3T3-L1脂肪細(xì)胞IR模型的鑒定Figure 3 Identification of insulin resistance model of 3T3-L1 adipocytes注：A.Normal組；B.IR模型組。與Normal組相比，①P<0.01

2.5 轉(zhuǎn)染si-NLRP3后IR模型中脂肪細(xì)胞對(duì)NLRP3的表達(dá) RT-PCR結(jié)果顯示，與si-NC組相比，si-NLRP3組與IR-si-NLRP3組的3T3-L1細(xì)胞中NLRP3 mRNA的表達(dá)均顯著降低 (P<0.05)，而IR-si-NC組細(xì)胞中NLRP3 mRNA的表達(dá)明顯升高 (P<0.05)，提示IR能夠促進(jìn)NLRP3 mRNA的表達(dá)，而轉(zhuǎn)染si-NLRP3后能夠顯著降低其表達(dá)，見圖4。

圖4 RT-PCR檢測(cè)各組細(xì)胞中NLRP3 mRNA的表達(dá)Figure 4 The expression level of NLRP3 mRNA in each group was detected by RT-PCR注：與si-NC組細(xì)胞相比，①P<0.05

2.6 下調(diào)NLRP3表達(dá)對(duì)IR模型中脂肪細(xì)胞炎癥因子表達(dá)的影響 ELISA檢測(cè)各組3T3-L1細(xì)胞種炎癥因子IL-1β、IL-18的表達(dá)水平，結(jié)果顯示與si-NC組相比，IR-si-NC組與IR-si-NLRP3組中IL-1β、IL-18表達(dá)均顯著增加 (P<0.05)，而si-NLRP3組無顯著變化(P>0.05)；與IR-si-NC組相比，IR-si-NLRP3組中IL-1β、IL-18表達(dá)均明顯降低 (P<0.05)，見表2。

表2 各組脂肪細(xì)胞對(duì)炎癥因子IL-1β、IL-18的表達(dá)Table 2 The expression of IL-1β and IL-18 in adipocytes of each group

2.7 下調(diào)NLRP3表達(dá)對(duì)IR模型中脂肪細(xì)胞對(duì)葡糖糖攝取的影響 葡萄糖氧化酶-過氧化物酶法檢測(cè)結(jié)果顯示，與si-NC組細(xì)胞相比，IR-si-NC組與IR-si-NLRP3組中葡萄糖消耗量顯著降低 (P<0.05)，而si-NLRP3組無顯著變化(P>0.05)；但與IR-si -NC組相比，IR-si-NLRP3組中脂肪細(xì)胞對(duì)葡萄糖消耗量顯著增加 (P<0.05)，見圖5。

圖5 各組脂肪細(xì)胞對(duì)葡萄糖消耗量的檢測(cè)Figure 5 The detection of glucose consumption in adipocytes注：與si-NC組相比，①P<0.05;與IR-si-NC組相比，②P<0.05

2.8 下調(diào)NLRP3表達(dá)對(duì)IR模型中脂肪細(xì)胞自噬的影響 Western blot檢測(cè)各組細(xì)胞中自噬相關(guān)蛋白LC3B與Beclin1和p62的表達(dá)，結(jié)果表明在si-NC組與si-NLRP3組3T3-L1細(xì)胞中自噬標(biāo)志性分子LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值及Beclin-1蛋白較IR-si-NC組與IR-si-NLRP3組顯著增加 (P<0.05)，而p62蛋白明顯降低 (P<0.05)；但與IR-si-NC組相比，IR-si-NLRP3組細(xì)胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值及Beclin-1蛋白明顯增加 (P<0.05)，p62蛋白顯著降低 (P<0.05)，見圖6。

圖6 Western blot檢測(cè)各組脂肪細(xì)胞中自噬相關(guān)蛋白表達(dá)Figure 6 The expression of autophagy related proteins in adipocytes was detected by Western blot注：與si-NC組細(xì)胞相比，①P<0.05;與IR-si-NC組細(xì)胞相比，②P<0.05

3 討論

T2DM作為一種能量代謝障礙相關(guān)的代謝綜合征，其同樣也是一種由慢性炎癥引起的炎癥性疾病，胰島β功能損害及IR是引起T2DM的兩大重要病理特征[14]。目前T2DM在全世界范圍內(nèi)呈流行現(xiàn)象，尤其在我國(guó)，有數(shù)據(jù)報(bào)道每10個(gè)成年人中就有1個(gè)糖尿病患者，嚴(yán)重危害人們的健康及社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展[15]。而NLRP3作為能夠在細(xì)胞內(nèi)與凋亡相關(guān)斑點(diǎn)蛋白(caspase recruitment domain,ASC)和半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)相互結(jié)合形成具有生物活性炎性小體，并激活下游促炎因子IL-1β與IL-18等的分泌，從而參與T2DM的發(fā)生發(fā)展。同時(shí)，Oslowski團(tuán)隊(duì)與Lenner團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)由代謝紊亂而引起的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激能夠誘導(dǎo)胰島β細(xì)胞中硫氧還原蛋白相互作用蛋白的表達(dá)，而后者又能通過抑制NLRP3炎癥小體的活化及下游IL-1β的分泌，從而促進(jìn)胰島β細(xì)胞的存活[16-17]。此外，大量學(xué)者在NLRP3炎性小體活化的信號(hào)通路上利用基因敲除小鼠研究證實(shí)，飲食誘導(dǎo)的NLRP3炎癥小體活化是引起IR及糖耐量受損的主要“幕后推手”[18-19]。本實(shí)驗(yàn)通過觀察對(duì)比T2DM患者與正常對(duì)照組血清NLRP3的表達(dá)，結(jié)果表明NLRP3在T2DM患者血清中的表達(dá)異常增加，這與上述文獻(xiàn)的結(jié)果一致，提示NLRP3可能與T2DM的發(fā)生發(fā)展具有相關(guān)性。

機(jī)體脂肪細(xì)胞主要通過調(diào)控葡萄糖的運(yùn)輸能力來影響脂質(zhì)的存儲(chǔ)及相關(guān)細(xì)胞因子的分泌，而脂肪細(xì)胞的功能障礙會(huì)造成其對(duì)胰島素的敏感性降低[20]。大量研究證實(shí)在T2DM中脂肪細(xì)胞發(fā)生了IR[9]。同時(shí)，脂肪細(xì)胞的IR將顯著降低其對(duì)葡萄糖的吸收及利用，進(jìn)一步促進(jìn)脂肪組織在其他組織或器官的異常累積，降低其對(duì)胰島素的敏感性，最終形成系統(tǒng)性的IR[21]。有學(xué)者報(bào)道在肥胖及高脂血癥患者的脂肪組織中NLRP3的表達(dá)較健康人群明顯增加，通過降低NLRP3炎性小體的表達(dá)能夠下調(diào)脂肪細(xì)胞對(duì)促炎因子IL-1β及IL-18表達(dá)[10-11]，而IL-1β與IL-18是T2DM中重要的促炎因子[5]。本研究通過誘導(dǎo)前脂肪細(xì)胞3T3-L1分化為成熟脂肪細(xì)胞，并利用地塞米松誘導(dǎo)其形成IR模型以模擬T2DM中脂肪細(xì)胞的狀態(tài)，并應(yīng)用siRNA技術(shù)下調(diào)NLRP3在脂肪細(xì)胞中的表達(dá)，ELISA實(shí)驗(yàn)證實(shí)下調(diào)脂肪細(xì)胞中NLRP3的表達(dá)能顯著降低IR模型中的脂肪細(xì)胞對(duì)IL-1β、IL-18的分泌，并促進(jìn)其對(duì)葡萄糖的攝取，這與其他學(xué)者的研究報(bào)道相似，均表明下調(diào)脂肪細(xì)胞中NLRP3表達(dá)能抑制其對(duì)下游IL-1β、IL-18的分泌水平，并促進(jìn)其對(duì)葡萄糖的利用。

自噬是廣泛存在于真核細(xì)胞內(nèi)的一種具有自我保護(hù)作用的生理現(xiàn)象，其基本的功能是保證細(xì)胞的活力，負(fù)責(zé)細(xì)胞器的更新。Zhang Y等[22]學(xué)者最近提出NLRP3可以通過其特殊的分子結(jié)構(gòu)域與自噬啟動(dòng)蛋白Beclin1相互作用，負(fù)向調(diào)控細(xì)胞的自噬水平。在本研究中我們檢測(cè)IR模型的脂肪細(xì)胞的自噬水平，結(jié)果表明下調(diào)細(xì)胞中NLRP3表達(dá)能夠顯著促進(jìn)細(xì)胞的自噬水平，同時(shí)自噬相關(guān)蛋白Beclin1表達(dá)顯著增加。LC3-Ⅰ脂質(zhì)化并形成膜結(jié)合的LC3-Ⅱ是自噬體形成的關(guān)鍵步驟，同時(shí)也被用來作為自噬發(fā)生的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，而LC3-Ⅱ與LC3-Ⅰ比值能夠有效反應(yīng)兩者之間的動(dòng)態(tài)轉(zhuǎn)換過程。p62是細(xì)胞內(nèi)自噬過程中特異性底物及調(diào)節(jié)蛋白，同時(shí)也被用來作為衡量自噬的完成情況[23]。下調(diào)IR模型中脂肪細(xì)胞的NLRP3表達(dá)能顯著促進(jìn)LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值的增加及降低p62蛋白水平，這提示下調(diào)NLRP3能夠促進(jìn)IR模型中脂肪細(xì)胞的自噬水平。

4 結(jié)論

NLRP3在T2DM中的表達(dá)顯著增加，通過下調(diào)胰島素抵抗模型中脂肪細(xì)胞NLRP3表達(dá)能夠有效降低其對(duì)炎癥因子IL-1β、IL-18的分泌，促進(jìn)其對(duì)葡萄糖的攝取，并增加細(xì)胞的自噬水平。