pH 急性脅迫對(duì)棘胸蛙蝌蚪行為、尾部皮膚色差及耗氧率、排氨率和窒息點(diǎn)的影響

劉哲宇，申屠琰，楊 程，朱衛(wèi)東，王志錚

（1.浙江海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院，舟山 316022；2.余姚市水產(chǎn)技術(shù)推廣中心，余姚 315400）

就養(yǎng)殖生產(chǎn)而言，養(yǎng)殖生物實(shí)質(zhì)上就是一臺(tái)以維系存活并促進(jìn)其生長為主要運(yùn)動(dòng)方式的“產(chǎn)肉機(jī)器”，其對(duì)養(yǎng)殖環(huán)境的感應(yīng)與適應(yīng)在宏觀水平上常通過對(duì)其行為、體色、呼吸、排泄等的調(diào)節(jié)來反映或體現(xiàn)。pH既是水生動(dòng)物最敏感的環(huán)境因子之一[1]，也是評(píng)價(jià)養(yǎng)殖水環(huán)境優(yōu)劣的必檢項(xiàng)[2]。因水生生物的光合作用和呼吸活動(dòng)，池塘水體pH 常波動(dòng)于6.6～10.2 之間[3-4]，故池養(yǎng)水產(chǎn)動(dòng)物常處于pH 脅迫狀態(tài)。研究表明，養(yǎng)殖水體易變的pH，不僅可直接影響水生動(dòng)物的載氧能力并麻痹其呼吸中樞，而且還可通過影響水中物質(zhì)的存在形式和遷移過程間接毒害水生動(dòng)物，從而導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)多種損傷癥狀[5-6]。因此，探究并確定目標(biāo)養(yǎng)殖對(duì)象適宜的水環(huán)境pH 范圍一直是水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物生理生態(tài)學(xué)研究的常規(guī)命題之一。棘胸蛙Quasipaa spinosa 素有“百蛙之王”之美譽(yù)，是一種我國南方丘陵山區(qū)極具養(yǎng)殖開發(fā)潛力的特有經(jīng)濟(jì)蛙種。為切實(shí)弄清棘胸蛙蝌蚪期養(yǎng)殖水體的適宜pH 范圍，本文作者在探究該蛙蝌蚪尾部皮膚和肝臟對(duì)養(yǎng)殖水體pH 抗氧化應(yīng)答特征的同時(shí)[7]，較系統(tǒng)開展了pH 急性脅迫對(duì)該蛙蝌蚪行為、尾部皮膚色差及耗氧率、排氨率和窒息點(diǎn)的影響研究，旨為該蛙蝌蚪的平原化安全高效培育提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

本研究所用棘胸蛙蝌蚪的來源、實(shí)驗(yàn)前馴養(yǎng)處理和實(shí)驗(yàn)個(gè)體的選擇要求與規(guī)格，以及實(shí)驗(yàn)水源和實(shí)驗(yàn)用水的pH 配置方法均完全同劉哲宇等[7]。

1.2 方法

1.2.1 蝌蚪行為及尾部皮膚色差值的觀測(cè)

以直徑32 cm的塑料盆為實(shí)驗(yàn)容器單元（實(shí)驗(yàn)實(shí)際容積為5 L），以2 000 ind·m-3為蝌蚪實(shí)驗(yàn)密度，以96 h 為實(shí)驗(yàn)周期，設(shè)置5.5、6.5、7、7.5、8.5 和9.5 等6 個(gè)pH 處理梯度(每一梯度設(shè)3 個(gè)重復(fù)），完全按朱衛(wèi)東等[8]的方法觀察并統(tǒng)計(jì)蝌蚪水層分布、集群狀況及個(gè)體移動(dòng)率，并于實(shí)驗(yàn)終了時(shí)刻測(cè)定各pH 處理梯度組實(shí)驗(yàn)蝌蚪（每一梯度各任測(cè)5 ind）尾部皮膚黑、白斑的表觀色澤。

1.2.2 蝌蚪耗氧率、排氨率的測(cè)定

以直徑32 cm的塑料盆為實(shí)驗(yàn)容器單元（實(shí)驗(yàn)實(shí)際容積為5 L），以2 000 ind·m-3為蝌蚪實(shí)驗(yàn)密度，以24 h為實(shí)驗(yàn)周期，設(shè)置5.5、6.5、7、7.5、8.5 和9.5 等6 個(gè)pH 處理梯度(每一梯度設(shè)3 個(gè)重復(fù)），按楊程等[9]的方法，以凌晨2：00 為實(shí)驗(yàn)起始時(shí)點(diǎn)，測(cè)算各pH 處理梯度組的OR (耗氧率)、NR (排氨率) 和O：N (氧氮比)。

1.2.3 蝌蚪窒息點(diǎn)的測(cè)定

以容量為500 mL的容量瓶(實(shí)驗(yàn)實(shí)際容積為50 mL)為呼吸室，設(shè)置5.5、6.5、7、7.5、8.5 和9.5 等6 個(gè)pH 處理梯度(每一梯度設(shè)3 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)均放入實(shí)驗(yàn)蝌蚪4 ind），將蝌蚪置于對(duì)應(yīng)實(shí)驗(yàn)pH 處理組的呼吸室后即刻開始實(shí)驗(yàn)，并按楊程等[9]的方法測(cè)定各pH 處理梯度組的窒息點(diǎn)。

1.3 數(shù)據(jù)處理使用

2 結(jié)果

2.1 行為

觀察發(fā)現(xiàn)，棘胸蛙蝌蚪的活動(dòng)區(qū)域、需氧壓力和運(yùn)動(dòng)頻率均與其所處水環(huán)境pH 存在密切關(guān)聯(lián)，主要表現(xiàn)為：(1)實(shí)驗(yàn)期間，pH 5.5～6.5 實(shí)驗(yàn)組的蝌蚪散游于水體近表面，pH 7.0 和9.5 實(shí)驗(yàn)組的蝌蚪散布于整個(gè)水體，均可見浮頭現(xiàn)象，而pH 7.5～8.5 實(shí)驗(yàn)組蝌蚪則集群游動(dòng)于整個(gè)水體，且未見有浮頭現(xiàn)象；(2) pH 5.5～7.0實(shí)驗(yàn)組蝌蚪的移動(dòng)頻率明顯高于其它實(shí)驗(yàn)組。綜上可知，就分布格局、集群行為、需氧壓力和移動(dòng)頻率觀，棘胸蛙蝌蚪偏好弱堿性環(huán)境，其適宜pH 范圍為7.5～8.5。

2.2 尾部皮膚色差

由表1 可見，盡管棘胸蛙蝌蚪尾部皮膚黑、白斑的表觀色澤A、B 值均無組間差異(P>0.05)，但其L 值卻與所處水環(huán)境pH 存在密切關(guān)聯(lián)，主要表現(xiàn)為：(1)黑、白斑L 值均以pH 5.5 和6.5 兩實(shí)驗(yàn)組為最大(P＜0.05)，pH 8.5 實(shí)驗(yàn)組為最?。≒＜0.05）；(2)pH 7.5 和9.5 兩實(shí)驗(yàn)組的黑、白斑L 值均無組間差異(P＜0.05)，且均顯著小于pH 7.0 實(shí)驗(yàn)組(P＜0.05)。綜上可知，用于表征尾部皮膚亮度的L 值呈酸性環(huán)境>中性環(huán)境>堿性環(huán)境(P＜0.05)，對(duì)pH 環(huán)境具指示作用，以pH 8.5 為最低(P＜0.05)。

表1 不同pH 條件下棘胸蛙蝌蚪尾部表觀色澤的L、A、B 值Tab.1 The Hunter L,A,B values of Q.spinosa tadpole tail in different pH

2.2 OR(耗氧率)

由圖1 可見，pH 對(duì)蝌蚪OR的影響主要表現(xiàn)為：(1)從時(shí)段OR 看，堿性環(huán)境下的OR 較酸性和中性環(huán)境高。其中，pH 5.5 與6.5 實(shí)驗(yàn)組間存在顯著差異的時(shí)段僅為06：00-10：00，兩者間的時(shí)段相似性達(dá)83.3%，而其與其它實(shí)驗(yàn)組的相似性則均為0；pH 6.5 與7.0 實(shí)驗(yàn)組間的時(shí)段相似性為100%，兩者與pH 7.5 實(shí)驗(yàn)組間的相似性分別為16.7%和33.3%，與pH 8.5 實(shí)驗(yàn)組間的相似性分別為33.3%和50%，而與pH 9.5 實(shí)驗(yàn)組間的相似性則分別為50%和67.7%；pH 7.5 與8.5 實(shí)驗(yàn)組間以及pH 8.5 與9.5 實(shí)驗(yàn)組間的時(shí)段相似性均為100%，而pH 7.5 與9.5 實(shí)驗(yàn)組間的時(shí)段相似性則降為83.3%，表明本研究所涉堿性環(huán)境與酸性和中性環(huán)境間時(shí)段OR 差異最大的為pH 7.5 實(shí)驗(yàn)組，而與pH 7.5 實(shí)驗(yàn)組時(shí)段OR 最為接近的則為pH 8.5實(shí)驗(yàn)組；(2)從晝均、夜均和日均OR 看，各實(shí)驗(yàn)組均呈夜均>晝均≈日均(P＜0.05)，與所涉酸性和中性范圍內(nèi)類似，堿性范圍內(nèi)的組間夜均、晝均和日均OR 相似性也均為100%，但其中僅pH 7.5 和8.5 兩實(shí)驗(yàn)組的夜均、晝均和日均OR 均顯著高于酸性和中性環(huán)境（P＜0.05），表明盡管本研究所設(shè)pH 范圍內(nèi)蝌蚪的耗氧晝夜節(jié)律尚未發(fā)生根本性改變，不同pH 性質(zhì)范圍內(nèi)的組間夜均、晝均和日均OR 均較穩(wěn)定，但仍改變不了弱堿性環(huán)境下蝌蚪夜均、晝均和日均OR 均明顯高企的事實(shí)。綜上可知，棘胸蛙蝌蚪的最適pH 為7.5，適宜范圍為7.5～8.5，當(dāng)所處水環(huán)境pH 偏離7.5～8.5 范圍時(shí)，其時(shí)段及夜均、晝均和日均OR 均會(huì)出現(xiàn)不同程度的下降。

圖1 pH 對(duì)棘胸蛙蝌蚪耗氧率的影響Fig.1 Effects of pH on oxygen consumption rate of Q.spinosa tadpole

2.3 NR (排氨率)

由圖2 可見，pH 對(duì)蝌蚪NR的影響主要表現(xiàn)為：（1）從時(shí)段NR 看，各實(shí)驗(yàn)組間的時(shí)段NR 均具較高的相似性。其中，pH 5.5 與6.5 實(shí)驗(yàn)組間的時(shí)段NR 相似性為100%，兩者與pH 7.0、7.5、9.5 實(shí)驗(yàn)組間的相似性均為88.3%，與pH 8.5 實(shí)驗(yàn)組間的相似性分別為33.3%和66.7%；pH 7.0、7.5 和9.5 實(shí)驗(yàn)組間的時(shí)段NR相似性均為100%，三者與pH 8.5 實(shí)驗(yàn)組間的相似性分別為66.7%、88.3%和88.3%，表明與酸性和中性環(huán)境間時(shí)段NR 差異最大的組別為pH 8.5 實(shí)驗(yàn)組；（2）從晝均、夜均和日均NR 看，各實(shí)驗(yàn)組均呈夜均＞晝均≈日均（P＜0.05），與所涉酸性和中性范圍內(nèi)類似，中性和堿性范圍內(nèi)的組間夜均、晝均和日均NR 相似性也均為100%，其中與酸性環(huán)境夜均、晝均和日均NR 差異最大的組別為pH 8.5 實(shí)驗(yàn)組，表明本研究所設(shè)pH范圍內(nèi)蝌蚪的排氨晝夜節(jié)律尚未發(fā)生根本性改變，不同pH 性質(zhì)范圍內(nèi)的組間夜均、晝均和日均NR 均較穩(wěn)定，但仍改變不了pH 由堿性轉(zhuǎn)為酸性時(shí)夜均、晝均和日均NR 均出現(xiàn)一定程度下降的事實(shí)。綜上可知，棘胸蛙蝌蚪的最適pH 為8.5。

圖2 pH 對(duì)棘胸蛙蝌蚪排氨率的影響Fig.2 Effects of pH on ammonia excretion rate of Q.spinosa tadpole

2.4 O：N (氧氮比)

由圖3 可見，pH 對(duì)蝌蚪O：N 值的影響主要表現(xiàn)為：(1)諸實(shí)驗(yàn)組中，夜均、晝均和日均O：N 值除pH 5.5實(shí)驗(yàn)組均低于16 外，其余均波動(dòng)于16.00～20.07 之間；(2)晝均O：N 值以pH 5.5 實(shí)驗(yàn)組最小(P＜0.05)，pH 7.5 實(shí)驗(yàn)組最大（P＜0.05），其余實(shí)驗(yàn)組間均無顯著差異(P>0.05)；(3)夜均O：N 值隨pH 上升呈階梯式穩(wěn)步上升趨勢(shì)，階梯式上升的臨界點(diǎn)分別為pH 6.5 和7.5(P＜0.05)；(4)日均O：N 以pH 7.5 和9.5 兩實(shí)驗(yàn)組最大(P＜0.05)，pH 5.5 實(shí)驗(yàn)組最小(P＜0.05)，其余實(shí)驗(yàn)組間均無顯著差異(P>0.05)；(5)除pH 7.5、8.5 兩實(shí)驗(yàn)組的O：N值呈晝均>夜均(P＜0.05)外，其余實(shí)驗(yàn)組間均呈夜均≈晝均(P>0.05)。綜上可知，諸實(shí)驗(yàn)組中晝均、夜均和日均O：N 值均以pH 5.5 實(shí)驗(yàn)組為最小(P＜0.05)，僅pH 7.5 實(shí)驗(yàn)組的晝均、夜均和日均O：N 值均不低于其它實(shí)驗(yàn)組，唯pH 7.5～8.5 范圍內(nèi)的O：N 值具晝夜差異(P＜0.05)。

圖3 pH 對(duì)棘胸蛙蝌蚪氧氮比的影響Fig.3 Effects of pH on ammonia excretion rate of Q.spinosa tadpole

2.5 窒息點(diǎn)

由圖4 可見，蝌蚪窒息點(diǎn)的水中氧含量隨pH 上升呈先降后升走勢(shì)，并于pH 7.5 時(shí)到達(dá)谷底(P＜0.05)；其中，與pH 6.5 實(shí)驗(yàn)組無顯著差異的僅為pH 9.5 實(shí)驗(yàn)組(P>0.05)，而與pH 7.0 實(shí)驗(yàn)組無顯著差異的僅為pH 9.5 實(shí)驗(yàn)組(P>0.05)。由此可知，蝌蚪所處水環(huán)境pH 偏離7.5 越遠(yuǎn)，其窒息點(diǎn)水中氧含量也就越高(P＜0.05)。

圖4 pH 對(duì)棘胸蛙蝌蚪窒息點(diǎn)的影響Fig.4 Effects of pH on the suffocation point of Q.spinosa tadpole

3 討論

3.1 棘胸蛙蝌蚪對(duì)pH 急性脅迫的應(yīng)答特征

蛙類是重要的環(huán)境指示生物，對(duì)水質(zhì)變化極為敏感[10]。據(jù)報(bào)道，薄且布有大量毛細(xì)血管的皮膚為無尾類蝌蚪的主要呼吸器官并兼具滲透壓調(diào)節(jié)等多種功能[11-12]，處于低氧水域中的蝌蚪皮膚往往有變薄和毛細(xì)血管增多的傾向[13-14]。這與棘胸蛙蝌蚪尾部皮膚L 值隨水溫升高而顯著增加(P＜0.05)的情形[8]相吻。故，可將尾部皮膚L 值作為指示棘胸蛙蝌蚪供氧壓力的顯性指標(biāo)，即供氧壓力隨尾部皮膚L 值的增大而增加，反之亦然。觀察發(fā)現(xiàn)，仿生態(tài)條件下飼養(yǎng)的棘胸蛙蝌蚪具聚群活動(dòng)的習(xí)性[15]。無疑，本研究pH 5.5～7.0范圍內(nèi)蝌蚪所表露的固有集群行為消失、移動(dòng)頻率加大、運(yùn)動(dòng)無序性和浮頭個(gè)體明顯增加的現(xiàn)象，與表1所示尾部皮膚L 值顯著大于pH 7.5～9.5 (P＜0.05)，圖1 所示夜均和日均OR 均顯著低于pH 7.5～9.5 (P＜0.05)，以及圖2 所示pH 由堿性轉(zhuǎn)為酸性時(shí)夜均、晝均和日均NR 均出現(xiàn)一定程度下降的情形相對(duì)應(yīng)，表明pH 5.5～7.0 范圍內(nèi)高企的皮膚供氧壓力已對(duì)其機(jī)體代謝產(chǎn)生負(fù)面影響，尤以對(duì)皮膚具高腐蝕性的酸性環(huán)境為甚。

研究發(fā)現(xiàn)，水生動(dòng)物OR 和NR 呈晝低高夜的變化特征與其晝伏夜出的生活習(xí)性密切相關(guān)[16-17]。由圖1、圖2 所示，各實(shí)驗(yàn)組的OR 和NR 均呈夜均>晝均(P＜0.05)，與其固有生活習(xí)性相符[8-9,18-19]，表明它們的耗氧和排氨晝夜節(jié)律均未發(fā)生根本性改變。但各實(shí)驗(yàn)組間在O：N(圖3)和窒息點(diǎn)(圖4)的應(yīng)答機(jī)制上卻不盡相同，主要表現(xiàn)為：(1)O：N 值系反映機(jī)體代謝底物利用狀況的重要生理指標(biāo)，當(dāng)取值3～16 時(shí)代謝底物完全為蛋白質(zhì)，50～60 時(shí)為等量的脂肪和蛋白質(zhì)，無窮大時(shí)則完全為脂肪和糖類[20]。由圖3 可見，除pH 5.5 實(shí)驗(yàn)組的代謝底物完全為蛋白質(zhì)外，其余各實(shí)驗(yàn)組均仍保持其常態(tài)下以蛋白質(zhì)為主、脂肪為輔的代謝底物利用模式[9.18]，諸實(shí)驗(yàn)組中僅pH 7.5 實(shí)驗(yàn)組的晝均、夜均和日均O：N 值均不低于其它實(shí)驗(yàn)組，唯pH 7.5～8.5 范圍內(nèi)的O：N 值具晝夜差異呈晝均>夜均(P＜0.05)，表明棘胸蛙蝌蚪機(jī)體代謝過程中脂肪動(dòng)員能力的強(qiáng)弱以及是否具有晝夜差異，系應(yīng)答其pH 是否處于適宜范圍的重要依據(jù)，即pH 環(huán)境越適宜，固有生活習(xí)性就越穩(wěn)定，機(jī)體脂肪動(dòng)員能力就越強(qiáng)，體內(nèi)產(chǎn)氨量就越小，反之亦然，由此也進(jìn)一步印證了牛春格等[18]所述該蛙蝌蚪具通過增強(qiáng)脂肪動(dòng)員以抑制蛋白質(zhì)水解和氨基酸代謝水平，從而主動(dòng)減少體內(nèi)產(chǎn)氨量的耐氨策略的可靠性；(2)窒息點(diǎn)系評(píng)價(jià)水生動(dòng)物耐低氧能力的重要指標(biāo)。由圖4 可見，pH 偏離7.5 越遠(yuǎn)，窒息點(diǎn)水中氧含量就越高，表明棘胸蛙蝌蚪血液載氧能力就越弱，皮膚供氧壓力也就越大，故窒息點(diǎn)亦可作為該蛙蝌蚪應(yīng)答其pH 是否處于適宜范圍的重要依據(jù)。綜上，上述有關(guān)O：N 和窒息點(diǎn)對(duì)pH 急性脅迫的應(yīng)答特征，既與pH 偏離7.5 時(shí)，棘胸蛙蝌蚪尾部皮膚ATP 酶和肝臟GSH 酶活力均呈顯著上升(P＜0.05)，尾部皮膚與肝臟的SOD 酶和CAT 酶活力均呈顯著下降(P＜0.05)的結(jié)果相符[7]，也揭示了皮膚供氧壓力與脂肪動(dòng)員能力對(duì)pH 急性脅迫的互助應(yīng)答效應(yīng)，即皮膚供氧壓力越小，脂肪動(dòng)員能力也就越強(qiáng)，固有生活習(xí)性也就越穩(wěn)定。

至于，pH 9.5 實(shí)驗(yàn)組尾部皮膚L 值顯著大于pH 6.5 實(shí)驗(yàn)組(P＜0.05)，而與pH 7.5 實(shí)驗(yàn)組無顯著差異(P>0.05)(表1)，窒息點(diǎn)水中氧含量與pH 6.5 實(shí)驗(yàn)組無顯著差異(P>0.05)，而顯著高于pH 7.5 實(shí)驗(yàn)組(P＜0.05)(圖4)，且其固有集群行為消失、運(yùn)動(dòng)無序性增加并伴有浮頭現(xiàn)象的原因，一方面可能與該實(shí)驗(yàn)組蝌蚪皮膚的受腐蝕程度弱于pH 6.5 實(shí)驗(yàn)組有關(guān)，另一方面應(yīng)與其喪失O：N 值晝夜節(jié)律導(dǎo)致皮膚供氧壓力有所增加有關(guān)。由此，進(jìn)一步表明O：N 值和窒息點(diǎn)在表征pH 適宜范圍上較尾部皮膚L 值更具準(zhǔn)確性。無疑，pH 7.5 較pH 8.5 更適宜棘胸蛙蝌蚪的原因亦同此理，盡管pH 7.5 實(shí)驗(yàn)組尾部皮膚的L 值顯著大于pH 8.5實(shí)驗(yàn)組(P＜0.05)(表1)。

3.2 pH 急性脅迫下棘胸蛙蝌蚪的內(nèi)穩(wěn)態(tài)保持機(jī)制

通過內(nèi)穩(wěn)態(tài)保持機(jī)制維系或擴(kuò)大生態(tài)幅，是動(dòng)物積極響應(yīng)外界環(huán)境脅迫以有效消除或降低由此引發(fā)的負(fù)面影響的重要手段，盡管該機(jī)制存在較明顯的局限性。行為調(diào)節(jié)和生理調(diào)節(jié)作為動(dòng)物內(nèi)穩(wěn)態(tài)保持機(jī)制的主要途徑，兩者在響應(yīng)外界環(huán)境變化并共同保持動(dòng)物內(nèi)穩(wěn)態(tài)上往往會(huì)形成“表里互通”的代償效應(yīng)。就本研究而言，pH 急性脅迫下維系OR 和NR 晝夜生理節(jié)律是棘胸蛙蝌蚪通過行為調(diào)節(jié)和生理調(diào)節(jié)保持內(nèi)穩(wěn)態(tài)的前提（圖1、圖2），而維系皮膚供氧水平和機(jī)體脂肪動(dòng)員能力間的適配性則是pH 急性脅迫下棘胸蛙蝌蚪內(nèi)穩(wěn)態(tài)保持機(jī)制的內(nèi)核，這與水溫[8-9]、氨氮[18,21]急性脅迫對(duì)棘胸蛙蝌蚪行為和生理影響效應(yīng)的研究結(jié)果相一致。

如上所述，盡管水溫、氨氮和pH 間在理化性質(zhì)上存在較明顯的差異，但它們?cè)诩赝茯蝌竭m宜范圍或最適點(diǎn)的形成機(jī)制上卻具明顯的相似性，即：(1)隨水溫上升，當(dāng)蝌蚪夜均、晝均和日均O：N 值均抵達(dá)峰值(P＜0.05)，窒息點(diǎn)水中含氧量脫離穩(wěn)定階段并顯著增加(P＜0.05)，各測(cè)定時(shí)段尾部皮膚ATP 酶活力持續(xù)處于峰值(P＜0.05)時(shí)，表明該水溫(24.5 ℃)已偏離最適水溫(23 ℃)[8-9]。也就是說，隨水溫繼續(xù)增加，即使OR和NR 晝夜節(jié)律不發(fā)生改變，但其皮膚供氧能力卻已無法有效保障機(jī)體進(jìn)一步動(dòng)員脂肪的需求；(2)隨氨氮質(zhì)量濃度增加，當(dāng)蝌蚪各測(cè)定時(shí)段尾部皮膚CAT 酶和肝臟GSH 酶、CAT 酶活力均持續(xù)處于峰值(P＜0.05)，晝均O：N 值處于峰值區(qū)氨氮質(zhì)量濃度上限時(shí)，表明此時(shí)已處于蝌蚪維系低毒興奮效應(yīng)和耐氨策略的臨界，該氨氮質(zhì)量濃度(14.70 mg·L-1)為其安全質(zhì)量濃度的上限[18,21]。也就是說，隨氨氮質(zhì)量濃度的繼續(xù)增加，即使其OR 和NR 晝夜生理節(jié)律尚未發(fā)生根本性改變，但其皮膚供氧能力卻已難以挽回脂肪動(dòng)員能力即將顯著回落的結(jié)果；(3)由表1、圖3 和圖4 可見，當(dāng)窒息點(diǎn)水中含氧量抵達(dá)谷底(P＜0.05)，晝均O：N 值處于峰值(P＜0.05)，各測(cè)定時(shí)段尾部皮膚ATP 酶和肝臟GSH 酶活力均持續(xù)處于谷底(P＜0.05)，尾部皮膚和肝臟的SOD 酶、CAT 酶活力均處于峰值(P＜0.05)時(shí)，該pH 為蝌蚪的最適pH(7.5)，即當(dāng)環(huán)境pH 偏離該值時(shí)，即使其OR 和NR 晝夜生理節(jié)律未發(fā)生根本性改變，也難以改變因皮膚供氧壓力的持續(xù)增加而導(dǎo)致其機(jī)體脂肪動(dòng)員能力顯著下降的事實(shí)。綜上可知，就以蛋白質(zhì)為主和脂肪為輔的代謝底物利用模式的棘胸蛙蝌蚪而言，維系皮膚供氧水平和機(jī)體脂肪動(dòng)員能力間的適配性既是保障其機(jī)體生理活動(dòng)正常運(yùn)行的重要基礎(chǔ)，更是其啟動(dòng)內(nèi)穩(wěn)態(tài)保持機(jī)制的源動(dòng)力。