石墨消解-原子熒光法同時測定血中砷、汞和銻

容桂紅 鐘毓娟 劉姍姍 金 賀

(1.桂林醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院 桂林 541001;2. 桂林醫(yī)學(xué)院檢驗學(xué)院，桂林 541001)

砷、汞和銻均是自然界中有毒污染元素，可經(jīng)呼吸道、消化道和皮膚吸收而在人體內(nèi)累積危害人體健康，且人體不易去除體內(nèi)的這些有毒元素。近年來，因長期使用劣質(zhì)化妝品、口服、誤吸入及礦冶煉過程中長期接觸等原因引起的砷、汞和銻中毒事件屢有發(fā)生，而血液檢測為人體內(nèi)砷、汞和銻急慢性中毒及鑒別提供數(shù)據(jù)依據(jù)[1]。

目前，樣品中的砷、汞、銻一般采用分光光度法、熒光法、原子吸收法和原子熒光法等，其中原子熒光法具有操作簡便、檢出限低、干擾少、靈敏度和準(zhǔn)確度高等優(yōu)點(diǎn)[2-4]。本實驗采用自動石墨消解儀對血液樣品進(jìn)行消解，原子熒光法同時測定血液中砷、汞、銻的含量，方法將復(fù)雜繁瑣的樣品前處理步驟進(jìn)行程序化自動處理，適用于大批量樣本的檢測，實驗結(jié)果令人滿意。

1 實驗部分

1.1 實驗設(shè)備和試劑

北京吉天AFS-8230型原子熒光光度計，砷、汞、銻空心陰極燈；睿科 GDA-72型全自動石墨消解儀；密理博 Milli-plus 2150型純化水系統(tǒng)；高純氬氣(純度≥99.99%)。

砷、汞、銻標(biāo)準(zhǔn)貯備液(濃度均為1000mg/L)，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心；分析純：氫氟酸、高氯酸、抗壞血酸、硫脲，優(yōu)級純：硝酸、硼氫化鉀、氫氧化鈉，國藥集團(tuán)上?；瘜W(xué)試劑公司。

稱取抗壞血酸、硫脲各5g到100mL容量瓶中，去離子水定容，配制5%抗壞血酸-硫脲混合溶液。

儀器載流液為5%硝酸，還原劑為硼氫化鉀(5g/L)+氫氧化鈉(10g/L)溶液，現(xiàn)用現(xiàn)配。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線系列及儀器工作條件

準(zhǔn)確移取1.0mL砷、汞、銻標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液，置于100mL容量瓶中，用5%稀硝酸溶液定容并混勻；再移取1.0mL上述溶液置于100mL量瓶中，加5%稀硝酸溶液定容配制濃度為100μg/L標(biāo)準(zhǔn)中間液。

分別精密量取一定量的上述標(biāo)準(zhǔn)中間液，用5%稀硝酸溶液稀釋配制砷、汞、銻濃度分別為0.00、0.40、0.80、2.00、5.00、10.0、25.0μg/L標(biāo)準(zhǔn)曲線系列溶液。

原子熒光光度計儀器工作參數(shù)見表1。

表1 儀器工作參數(shù)

1.3 樣品處理

吸收2mL血樣于自動石墨消解罐中，蓋緊消解罐置于消解儀中，按表2消解程序進(jìn)行前處理。將消解液轉(zhuǎn)移于25mL具塞比色管中，加入5mL 5%抗壞血酸-硫脲混合溶液，用5%稀硝酸定容混勻待測。

表2 石墨消解程序

2 結(jié)果與討論

2.1 消解方法的選擇

血液的前處理一般采用電熱板濕法消解、微波消解法等，電熱板濕法消解操作步驟繁瑣，酸用量大，樣品易受污染，且敞口式消解會對易揮發(fā)元素的造成損失；微波消解操作步驟簡單、速度快，但趕酸轉(zhuǎn)移過程復(fù)雜，不適宜大批量樣品的分析[5-7]。全自動石墨消解法方法將前處理步驟進(jìn)行自動程序化，消解和趕酸環(huán)節(jié)均在密閉環(huán)境中，對分析人員和外環(huán)境影響極小，適用于大批量樣本的檢測[8，9]。本文對加標(biāo)濃度為5.00、μg/L的加標(biāo)樣品分別采用微波消解和自動石墨消解進(jìn)行前處理分析，檢測結(jié)果的回收率見表3。實驗結(jié)果表明，自動石墨爐消解法與微波消解法相比，可自動化添加酸試劑和進(jìn)行趕酸處理，提高了分析檢測效率，樣品測定結(jié)果回收率更高。

表3 石墨消解法與微波消解法測定結(jié)果回收率比較

2.2 線性曲線與方法檢出限

將砷、汞、銻標(biāo)準(zhǔn)曲線系列溶液按上述儀器工作條件下進(jìn)行測定，以各元素濃度為橫坐標(biāo)，對應(yīng)的熒光強(qiáng)度為縱坐標(biāo)計算曲線方程。根據(jù)儀器設(shè)定的工作條件，對試劑空白連續(xù)測定11次，計算其標(biāo)準(zhǔn)偏差。 按DL=3SD/K(DL為檢出限，SD為標(biāo)準(zhǔn)偏差，K為校正曲線斜率)計算方法的檢出限[10]。砷、汞、銻相應(yīng)的線性方程、相關(guān)系數(shù)及方法檢出限見表4。

表4 各元素線性范圍、線性方程、相關(guān)系數(shù)和檢出限

2.3 方法精密度試驗

分別移取2mL含砷、汞、銻濃度為1.00μg/L和4.00μg/L血樣溶液各6份置于自動石墨消解罐中，按1.3樣品處理步驟消解后進(jìn)樣分析，進(jìn)行方法精密度試驗。由表5可知，砷、汞、銻的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于3%，方法精密度較好。

表5 方法精密度試驗

2.4 方法加標(biāo)回收率試驗

對同一血液樣品加入3種濃度砷、汞、銻標(biāo)準(zhǔn)溶液，應(yīng)用本方法對樣品進(jìn)行加標(biāo)回收試驗，結(jié)果見表6。實驗結(jié)果表明，砷、汞、銻的加標(biāo)回收率為92.0%～105.0%，結(jié)果令人滿意。

表6 加標(biāo)回收結(jié)果試驗

3 結(jié)論

本實驗建立了采用全自動石墨消解法將血液樣品進(jìn)行消解處理，原子熒光法定量檢測血中砷、汞、銻含量的分析方法。實驗對樣品前處理方法進(jìn)行了選擇，并考察了方法的線性、檢出限、加標(biāo)回收率和重復(fù)性等參數(shù)。實驗表明，本方法具有自動化程度高、操作簡便、污染小、檢出限低、測定結(jié)果回收率和精密度較好等優(yōu)點(diǎn)，適用于大批量血樣中砷、汞、銻等微量元素殘留的監(jiān)測。