痰TB-DNA、分枝桿菌核酸、涂片找抗酸桿菌檢驗對肺結核的診斷分析

楊慧敏，程祥

（喀什地區(qū)第一人民醫(yī)院 檢驗科，新疆 喀什 844000）

0 引言

在臨床中，對于結核病來說，其是因為結核分枝桿菌復合群所引發(fā)的慢性感染性疾病，在各類感染性疾病中，其總的病死率處于第一位[1]。對于肺結核而言，其是出現(xiàn)在肺組織、支氣管等有關位置中的結核，共包括了肺實質方面的結核、結核性胸膜炎等。而想要控制好結核病，其最為核心的環(huán)節(jié)就是控制好各類傳染源，所以，盡早發(fā)現(xiàn)并對結核病患者進行相對應的診治是十分關鍵的[2]?，F(xiàn)階段，在我國，結核病的總發(fā)現(xiàn)率較低，為此，找到更為精準、更為科學、更為高效的檢測方式，對于盡早防控結核病是十分有必要的[3]。本研究特選取喀什地區(qū)第一人民醫(yī)院300例肺結核患者，分析并研究檢測痰結核分枝桿菌脫氧核糖核酸（TB-DNA）、分枝桿菌核酸、涂片找抗酸桿菌的應用效果與價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料。選取2020年1月至2021年3月于喀什地區(qū)第一人民醫(yī)院接收并對其進行檢測的300例肺結核患者，把痰結核菌培養(yǎng)當作對照，對全部患者均進行痰TBDNA、分枝桿菌核酸、涂片找抗酸桿菌檢測。男182例、118例；年齡19～64歲，平均（41.50±13.56）歲。對全部患者都進行痰結核菌培養(yǎng)，陽性193例、陰性107例，而其中，一同進行痰TB-DNA檢測、分枝桿菌核酸檢測、涂片找抗酸桿菌檢測的患者依次是282例、242例、296例。

1.2 方式。采集標本：對全部患者都進行痰TB-DNA、分枝桿菌核酸、涂片找抗酸桿菌檢測。對于血液標本來說，需要在患者住院的當天或是第2 d進行采集，并把其放進肝素抗凝管，在采集結束的2 h中，進行分枝桿菌核酸檢測；選出10 mL的胸腔穿刺液標本，把其放進滅菌試管，馬上進行痰TB-DNA檢測；對于涂片找抗酸桿菌檢測來說，在早晨，把深咳膿性痰液當作標本，并把其放進無菌容器，進行送檢。檢測方式：全部患者的痰標本都已經達標，對于痰TB-DNA、分枝桿菌核酸而言，需要應用聚合酶鏈式反應方式對其進行檢測，借助氫氧化鈉溶液對痰液進行稀釋，把2 mL放進離心管，設定好12000 r/min，進行5 min的離心，棄去上清液，進行沉淀并加好50μL的DNA提取液，進行混勻，處于100℃的恒溫水浴鍋，放10 min，在逐步得到冷卻直到室溫后，應用相一致的轉速，進行5 min的離心，把上清液放進聚合酶鏈式反應管，設定好8000 r/min，進行幾秒的離心，放進聚合酶鏈式反應儀器，進行加熱、裂解，提出DNA，借助實時定量聚合酶鏈式反應技術明確TBDNA，檢測最終的結果在送檢的第二天能夠得到；對于涂片找抗酸桿菌而言，需要借助直接涂片進行抗酸染色而得到，處于顯微鏡下，觀察并檢測抗酸桿菌染色載玻片，并對其最終的結果進行記錄，檢測最終的結果在送檢的第二天能夠得到；對于痰結核菌培養(yǎng)而言，需要應用改良羅氏培養(yǎng)方式，對菌種進行鑒別，對體現(xiàn)出陽性的標本來說，需要明確分枝桿菌的類型，最終的結果需要2～8周能夠得到。

1.3 數(shù)據(jù)分析處理。研究獲取的所有數(shù)據(jù)均統(tǒng)一采用SPSS 22.0統(tǒng)計進行分析與處理；計數(shù)數(shù)據(jù)統(tǒng)一采用[%（n）]代表，采用χ2檢驗組間差異，計量數(shù)據(jù)統(tǒng)一采用（±s）代表，組間差異行t檢驗；P＜0.05表示差異有意義。

2 結果

2.1 檢測結果。經分析表1、表2、表3中的數(shù)據(jù)可知：痰TB-DNA檢測結果、分枝桿菌核酸檢測結果、涂片找抗酸桿菌檢測結果。

表1 痰TB-DNA檢測結果[n（%）]

表2 分枝桿菌核酸檢測結果[n（%）]

表3 涂片找抗酸桿菌檢測結果[n（%）]

2.2 總陽性率。經分析表4中的數(shù)據(jù)可知：把痰結核菌培養(yǎng)當作對照，在進行痰TB-DNA、分枝桿菌核酸、涂片找抗酸桿菌檢測后，痰分子生物學、痰結核菌培養(yǎng)間具有較為良好的一致性，P＜0.05。

表4 總陽性率[n（%）]

3 討論

在我國，肺結核總的發(fā)生率較高，這類患者的各項監(jiān)管、診治為社會甚至是國家均給予了許多負擔，所以，肺結核患者的各項早期診治是臨床中急需進行處理的核心性問題[4]。以往臨床中在對肺結核患者進行診斷期間，所應用的金標準共包括了痰涂片找到抗酸桿菌、改良羅氏結核菌培養(yǎng)，但是，前者的總陽性率不夠理想、標本較易被污染、無法辨別出結核及肺結核桿菌等，而后者所需的培養(yǎng)周期范圍于4～8周，所需的時間較久，且因為部分患者僅會出現(xiàn)干咳，不具有痰液，所以，其痰液標本無法達標，較難立即對肺結核進行診斷，也較難盡早對這類患者的病情進行評估[5]?，F(xiàn)階段，在各項新興的分子生物學技術得到極大地發(fā)展后，使得聚合酶鏈式反應變成了臨床中應用十分普遍的檢測方式，對于痰TB-DNA而言，其能夠對痰液中所具有的結核桿菌核酸進行定量性檢測，對于分枝桿菌核酸而言，其能夠對痰結核分枝桿菌進行定性性檢測，由于核酸處于痰液標本中是十分穩(wěn)定的，所以，以上各類檢測方式均可以更為準確、更為迅速地檢出結核桿菌，降低由于標本被污染而引發(fā)的各類誤差。

在我國，對分子生物學檢測方式較少進行具有較大樣本量的分析與研究，在本次研究中，在肺結核患者中，痰TB-DNA的總陽性率、分枝桿菌核酸的總陽性率較痰涂片找抗酸桿菌的總陽性率顯著更高，P＜0.05；由此證明，痰TB-DNA、分枝桿菌核酸對于總陽性率均具有十分理想的改善效果、價值，且較痰涂片找抗酸桿菌、痰結核菌培養(yǎng)顯著更優(yōu)，最為關鍵的是可以更為迅速地檢出結核分枝桿菌，且可以辨別出結核分枝桿菌、分枝桿菌，對肺結核患者的各項早期診斷是十分關鍵的。對于聚合酶鏈式反應來說，其是處于基因水平上，對結核分枝桿菌進行檢測，而TB-DNA定量性檢測還可以檢出痰液中核酸的總濃度，以對各項抗結核治療給予更多的參照，現(xiàn)階段，在我國已經把這兩類分子生物學檢測方式歸至相應的診斷標準中，特別是對痰涂片找抗酸桿菌體現(xiàn)出陰性的肺結核患者來說更是十分關鍵的。

綜上所述，肺結核檢測工作中應用痰TB-DNA、分枝桿菌核酸較之于痰結核菌培養(yǎng)、涂片找抗酸桿菌能夠改善患者總檢出率，可以檢出患者是否被肺結核所感染，促進其疾病康復。