痔九味鎮(zhèn)痛膏對SD小鼠皮膚毛細血管通透性及小鼠痛覺反應時間的影響

李長壽，劉印明

(1.寧夏回族自治區(qū)中醫(yī)醫(yī)院暨中醫(yī)研究院，寧夏 銀川 750021；2.寧夏醫(yī)科大學，寧夏 銀川 750021)

隨著人們生活水平的提高及生活方式的轉變，肛腸疾病在逐步增多。肛腸疾病常導致患者疼痛難忍，嚴重影響人們的生活質量。痔九味鎮(zhèn)痛膏是我院肛腸科李長壽主任醫(yī)師經(jīng)多年研究，利用經(jīng)典方劑并結合現(xiàn)代臨床實際研制的肛腸疾病外用藥膏。經(jīng)臨床應用，在鎮(zhèn)痛及抗炎方面效果顯著。為了進一步研究其鎮(zhèn)痛作用和抗炎作用，本研究以SD小鼠模型為研究對象，觀察痔九味鎮(zhèn)痛膏對實驗小鼠的抗炎和鎮(zhèn)痛效果。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

清潔級SD小鼠80只，雄性，體質量(300±50)g，由寧夏醫(yī)科大學動物中心提供，動物合格證號：SCXK(寧)2015-0001。在寧夏醫(yī)科大學動物中心動物房適應性飼養(yǎng)1周后用于實驗。

1.2 藥物與試劑

實驗用藥劑采用經(jīng)驗方，由蘇木、乳香、沒藥、地龍、枯礬、紅花、黃柏、苦參、冰片組成，由寧夏回族自治區(qū)中醫(yī)醫(yī)院暨中醫(yī)研究院制劑室按照比例制備成膏方備用。實驗藥物及試劑：膚輕松(國藥準字號H32025258由常熟市星海制藥有限公司提供)；0.9%鹽水；10%水合氯醛；磷酸組胺；伊文氏蘭。

1.3 實驗儀器

游標卡尺；恒溫水浴鍋；722分光光度計；800型離心機；分析天平FA2104；儀器光鏡，生產(chǎn)廠家為德國LEICA公司。

1.4 統(tǒng)計學方法

2 實驗方法與結果

2.1 抗炎作用比較

2.1.1 痔九味鎮(zhèn)痛膏對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響 取雄性小鼠40只，體重28～30 g，隨機分為4組：①生理鹽水0.05 mL/耳；②膚輕松組：0.05 mL/耳；③痔九味鎮(zhèn)痛膏一組：0.025 g/耳；④痔九味鎮(zhèn)痛膏二組：0.05 g/耳。0.5 h后除去藥物，二甲苯0.05 mL涂于小鼠兩側耳背，30 min后處死小鼠，剪下左右兩耳，用打孔器(直徑相同)分別在同一部位取下圓耳片，扭力天平稱重，計算耳廓重量，并比較各組小鼠耳廓腫脹度。

結果顯示，與生理鹽水組相比，膚輕松組、痔九味一組、痔九味二組小鼠的耳廓腫脹度顯示有抑制作用；痔九味二組的效果顯示，高劑量狀態(tài)下對小鼠的耳廓腫脹度有明顯效果(P<0.05)。見表1。

表1 痔九味鎮(zhèn)痛膏對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響

2.1.2 痔九味鎮(zhèn)痛膏對大鼠皮膚毛細血管通透性的影響 取雄性大鼠20只，體重280～300 g，取其中符合實驗用大鼠12只，用8%硫化鈉在其背部涂抹脫毛，脫毛面積為1.5 cm。隨機分為4組：①生理鹽水組：生理鹽水0.05 mL/耳；②膚輕松組：0.05 mL/耳；③痔九味鎮(zhèn)痛膏組：0.05 g/耳。各組將藥物均勻涂于脫毛處，給藥0.5 h后除去藥物，然后在其給藥處皮下注射0.1%組胺0.05 mL/只，立即再次涂抹藥物(方法同前)，10 min后尾靜脈注射0.5%伊文思藍50 mg/kg(用水合氯醛輕度麻醉)，30 min后斷頭處死大鼠，洗去藥物后，取藍斑皮膚，置于7∶3的丙酮生理鹽水混合液5 mL中浸泡，并置入65 ℃溫箱中孵育48 h，取出于1 500 r /min離心10 min，取上清液，用722分光光度計620 nm處測其濾液的光密度。

結果顯示，膚輕松組與痔九味組的數(shù)值差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，但兩者OD值均少于生理鹽水組(P<0.05)。見表2。

表2 術后各組0.5%伊文氏藍OD值比較

2.2 鎮(zhèn)痛作用比較

2.2.1 熱板法 取40只小鼠，體重22～25 g，放入(55±0.5)℃恒溫水浴板上，測定其痛覺反應時間(指標為舔后足，以上不超過30 min為合格)。取合格小鼠40只隨機分為4組：①生理鹽水組：0.05 mL/足；②阿司匹林組：0.05 mL/足；③痔九味鎮(zhèn)痛膏一組：0.025 mL/足；④痔九味鎮(zhèn)痛膏二組：0.05 mL/足。除②組灌胃給藥外，其余各組將藥物均勻涂抹于小鼠足底部。測定給藥后1 h、2 h各小鼠的痛覺反應時間，并計算痛閾提高百分率。見表3。

表3 痔九味鎮(zhèn)痛膏對小鼠鎮(zhèn)痛作用的影響 (n=10)

痔九味鎮(zhèn)痛膏是經(jīng)多年研制的針對混合痔各期疼痛的外用膏劑，由本院制劑室按照規(guī)范的膏劑臨床加工流程完成，臨床應用效果明顯。為了進一步觀察痔九味鎮(zhèn)痛膏的抗炎作用和鎮(zhèn)痛效果，按照規(guī)范的動物實驗方法對該藥進行了對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響和對大鼠皮膚毛細血管通透性的影響研究，以評價該藥膏的抗炎作用。經(jīng)實驗，表1和表2的結果均顯示符合預期設計(P<0.05)。采用熱板法評價痔九味鎮(zhèn)痛膏對小鼠鎮(zhèn)痛的作用，經(jīng)實驗，表3的結果也與預期結果一致。

痔九味鎮(zhèn)痛膏由冰片[1-3]、醋乳香、醋沒藥[4]、蘇木[5]、黃柏[6]、苦參[7]、紅花[8]、枯礬、地龍[9]等九味中藥組成，這些藥物從不同的側面對疼痛發(fā)生的四個途徑產(chǎn)生積極的阻斷作用，從而有效達到抗炎鎮(zhèn)痛的效果。