水翁花化學成分、藥理作用研究進展

羅 清，戴衛(wèi)波

(廣州中醫(yī)藥大學附屬中山中醫(yī)院，廣東 中山 528400)

水翁花為桃金娘科水翁屬植物水翁Cleistocalyxoperculatus(Roxb.)Merr.et Perry的干燥幼嫩花蕾，始載于《嶺南采藥錄》，記名為水翁花?！稄V東中藥志》稱其為水雍花，廣東地區(qū)又叫水榕，具有清熱解暑、生津止渴、去濕消滯的功效[1]，中華本草記載其可用于感冒發(fā)熱、細菌性痢疾、急性胃腸炎、消化不良的治療[2]。水翁花主要分布于廣東、海南、廣西、福建等省區(qū)?，F(xiàn)代研究表明，水翁花含有黃酮類、酚類、三萜類、木脂素、甾醇、揮發(fā)油等多種成分，具有抗炎、解熱鎮(zhèn)痛、抗內(nèi)毒素、降血糖、保肝及降血糖等多種藥理活性。本文對近年來水翁花的化學成分和藥理作用研究進展進行全面綜述，為水翁花資源的進一步開發(fā)利用提供參考。

1 化學成分

水翁花化學成分研究始于20世紀90年代，其花顯黃酮苷、酚類、氨基酸、糖類反應[3]。近年研究發(fā)現(xiàn)其花還含有三萜類、木脂素、甾醇、揮發(fā)油等多種成分。

1.1 黃酮類

張鳳仙[4]從水翁花花蕾的乙醇提取物中分離得到三個黃酮類化合物，分別為5，7-二甲基黃烷酮(去甲氧基莢果蕨醇)、7-羥基-5甲氧基-6，8-二甲基黃烷酮和2′，4′-二羥基-6′-甲氧基-3′，5′-二甲基查耳酮，以下簡稱(DMC)。劉文君等[5]從水翁花70%乙醇提取物中分離得到2′，4′-二羥基-6′-甲氧基-3′，5′-二甲基查耳酮(DMC)外，還得到一個新化合物，鑒定為(Z)-6-羥基-4-甲氧基5，7-二甲基橙酮，分子式為C18H16O4，該化合物含量極低，具有抗炎活性。見表1。

表1 水翁花中黃酮類成分

1.2 酚酸類

張鳳仙[4]從花蕾的酒精提取物中提取得到2個酚酸類成分：沒食子酸乙酯和沒食子酸。見表2。

表2 水翁花中酚類成分

1.3 三萜類

向燦輝等[6]采用硅膠柱色譜粗分水翁花中的齊墩果酸類成分，以高速逆流色譜法和高壓制備色譜法進行分離和純化，首次從水翁花蕾中得到齊墩果酸，2α、3β-齊墩果酸以及3β-反式對羥基肉桂酰氧基-2α-羥基齊墩果酸3個五環(huán)三萜成分。見表3。

表3 水翁花中三萜類成分

1.4 揮發(fā)油

陳健等[7]采用水蒸汽蒸餾和超臨界CO2萃取技術提取水翁花揮發(fā)油，運用GC-MS法進行分析，兩種方法分離出的成分均為39種。其中1～16號化合物在兩種方法中都分離得到，17～39在水蒸汽蒸餾中分離得到，40～62在CO2萃取技術中分離得到。見表4。

表4 水翁花中揮發(fā)油類成分

續(xù)表4

1.5 木脂素及甾醇類

張鳳仙[4]從花蕾的乙醇提取物中分離得到一種木脂素桂皮酸以及甾醇類β-谷甾醇。

2 藥理作用

近年來對水翁花的藥理研究較多，且逐漸深入，研究發(fā)現(xiàn)其具有多種藥理活性，如抗炎、解熱鎮(zhèn)痛、抗內(nèi)毒素、降血糖及保肝等。

2.1 抑菌作用

水翁花對化膿性球菌和腸道致病菌均有較強的抑制作用[1]。

2.2 對膜脂氧化和神經(jīng)細胞氧化損傷的保護作用

盧艷花[8]研究發(fā)現(xiàn)水翁花水提取物不僅對小鼠肝微粒體膜脂氧化有很強的抑制作用，而且對H2O2誘導的PC12神經(jīng)細胞的氧化損傷亦有很強的保護作用，顯示出較強的抗氧化特性。其不僅能作用于細胞外，還能進入細胞，在細胞內(nèi)發(fā)揮氧化作用，提示水翁花可能可以用于治療與氧化有關的腦部疾病。

2.3 強心作用

在小鼠心臟灌注系統(tǒng)中，水翁花提取物能抑制Na+/K+-ATPases的活性，增強心臟的收縮功能，同時降低了心臟的收縮頻率[9]。

2.4 抗炎、解熱抗鎮(zhèn)痛作用

程少璋等[10]研究發(fā)現(xiàn)水翁花能顯著抑制酵母混懸液致大鼠發(fā)熱反應，明顯提高熱板的痛閾值和抑制冰醋酸所致扭體反應，亦能顯著抑制腹腔毛細血管通透性的增高及二甲苯所致小鼠耳廓腫脹度，說明水翁花具有較好的解熱、抗炎、鎮(zhèn)痛作用。

2.5 抗內(nèi)毒素作用

羅清等[11-12]采用內(nèi)毒素致小鼠休克死亡法觀察水翁花的抗內(nèi)毒素作用，發(fā)現(xiàn)水翁花水提液可顯著減少內(nèi)毒素所致大鼠死亡數(shù)，能顯著降低血清中NO和TNF-α含量，從而表現(xiàn)出良好的抗內(nèi)毒素所致休克死亡作用。

2.6 提高脂肪細胞的葡萄糖攝取率

金曉輝等[13]發(fā)現(xiàn)水翁花中的DMC能以劑量依賴性的方式對PPARγ產(chǎn)生激活作用，促進脂肪細胞分化，顯著提高脂肪細胞的葡萄糖攝取率，并且提高脂肪細胞中PPARγ靶基因的表達，說明DMC能通過激活PPARγ促進脂肪細胞的葡萄糖攝取。

2.7 抑制胰脂肪酶和α-淀粉酶活性

張麗娜等[14]利用胰脂肪酶和α-淀粉酶體外篩選模型研究水翁花各提取物對胰脂肪酶和α-淀粉酶活性的抑制作用，發(fā)現(xiàn)其水、乙醇、石油醚、乙酸乙酯提取物及單體DMC均對胰脂肪酶有抑制作用，抑制效果從高到低依次為DMC、石油醚、乙酸乙酯和乙醇提取物，且抑制作用與pH值密切相關，在pH=8.0時效果最佳，且其抑制類型為非競爭性抑制。水提物、醇提物和DMC對胰α-淀粉酶活性具有抑制作用，石油醚、乙酸乙酯作用稍低，水提物和DMC抑制胰α-淀粉酶活力的IC50為73.1 μg/mL和69.35 μg/mL，pH=7.0時抑制效果最佳。Lineweaver-Burk圖表明水翁花水提物及醇提物對胰α-淀粉酶活性的抑制作用為競爭性抑制。

2.8 降血糖作用

羅穎娣等[15]研究發(fā)現(xiàn)水翁花中單體DMC可以修復氧化受損的MIN6細胞胰胰島素分泌功能，抑制H2O2誘導的細胞凋亡，其作用是通過保護線粒體功能和降低胞內(nèi)ROS實現(xiàn)的。胡迎春[16]研究顯示，DMC在飽腹狀態(tài)時能抑制葡萄糖在小腸內(nèi)的運轉(zhuǎn)，逆轉(zhuǎn)慢性葡萄糖性損傷的胰島β細胞分泌胰島素。10 μM DMC能促進3T3-L1細胞對葡萄糖的攝??；在3T3-L1細胞中，DMC能調(diào)節(jié)PPAR-γ和C/EBP-α的表達，從而調(diào)節(jié)細胞分化；低濃度(5 μmol/L和2.5 μmol/L)DMC能促進脂肪細胞的分化，而高濃度DMC(10 μmol/L和20 μmol/L)則抑制3T3-L1脂肪細胞的分化。這些結(jié)果均顯示DMC用于治療高血糖的潛在可能性。

2.9 逆轉(zhuǎn)肝癌多藥耐藥

黃海涯[17]研究發(fā)現(xiàn)水翁花中DMC在體內(nèi)外均可有效逆轉(zhuǎn)BEL-7402/5-FU的耐藥性，作用機制為促進細胞凋亡，增加Caspase-3蛋白酶活性，增加胞內(nèi)抗癌藥物含量，以及下調(diào)多藥耐藥基因蛋白質(zhì)表達等。

2.10 抗炎保肝

玉萬國[18]采用CCl4誘導小鼠急性肝炎損傷建立LPS誘導(48 h)Kupffer Cell慢性炎癥損傷模型，研究水翁花中單體DMC的抗炎保肝生物活性。結(jié)果表明，DMC能夠持續(xù)抑制LPS誘導的Kupffer Cell胞內(nèi)前期炎癥因子(TNF-α、IL-1β)和中期炎癥因子(IL-6、iNOS)的轉(zhuǎn)錄與表達，從而預防和治療肝炎相關疾病。

2.11 誘導肝癌細胞SMMC-7721凋亡

葉春林等[19]研究水翁花中DMC體外誘導人肝癌細胞SMMC-7721凋亡的作用及其分子機制，發(fā)現(xiàn)DMC能誘導SMMC-7721細胞凋亡，其凋亡機制可能與c-myc基因和hTERT的mRNA以及蛋白質(zhì)的表達降低有關。

2.12 對過氧化氫誘導神經(jīng)細胞凋亡的影響

于廣周等[20]構(gòu)建PCl2氧化應激損模型，采用不同濃度水翁花提取物干預H2O2誘導的PCl2細胞。結(jié)果表明，經(jīng)水翁花提取物處理后，PCL2細胞凋亡率降低，SOD活性增強，miR-422a、Bcl表達上調(diào)，Bax表達下調(diào)，說明水翁花可通過上調(diào)miR-422a表達對H2O2誘導的PCl2細胞損傷發(fā)揮保護作用。

2.13 對人胰腺癌細胞株的影響

Tuan Huynh等[21]發(fā)現(xiàn)水翁花中DMC對PANC-1和MIA-PACA2細胞具有濃度依賴性細胞毒性，IC50值分別為(10.5±0.8)μmol/L和(12.2±0.9)μmol/L，DMC激活caspase-3導致PANC-1凋亡，同時誘導Caspase-3和蛋白9的蛋白水解，降解Caspase-3底物蛋白，增強BAK蛋白水平，同時減弱Bcl-2在PANC-1細胞中的表達，說明DMC可以作為一種潛在的化療藥物抑制人類胰腺癌細胞增殖。

3 討論

水翁花在廣東地區(qū)作為涼茶原料使用。近10年來，關于水翁花的研究較多，且逐漸深入，目前已從水翁花中分離得到黃酮、酚類、木脂素、三萜等10多種非揮發(fā)性成分，50多個揮發(fā)性成分，其中花蕾含精油0.18%[1]。水翁花中的活性成分DMC可提高脂肪細胞的葡萄糖攝取率、抑制胰脂肪酶和胰α-淀粉酶活性、降低血糖、誘導肝癌細胞MMC-7721凋亡、逆轉(zhuǎn)多藥耐藥性等，在降脂、降血糖、減肥、抗腫瘤藥物開發(fā)方面具有良好的前景，本綜述缺乏水翁花代謝組學方面的研究，應更加深入地研究水翁花藥理活性的物質(zhì)基礎，為其開發(fā)新藥奠定基礎。