• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    基于密度泛函理論下多肽光譜性質(zhì)研究

    2021-10-17 01:34:42楊云帆胡建波劉永剛劉強強徐建潔郭騰霄
    光譜學(xué)與光譜分析 2021年10期
    關(guān)鍵詞:激發(fā)態(tài)殘基吸收光譜

    楊云帆, 胡建波, 劉永剛, 2*, 劉強強, 張 航, 徐建潔, 郭騰霄

    1. 西南科技大學(xué)環(huán)境友好能源材料國家重點實驗室, 四川 綿陽 621010 2. 中國工程物理研究院激光聚變研究中心, 四川 綿陽 621010 3. 四川輕化工大學(xué)化學(xué)與環(huán)境工程學(xué)院, 四川 自貢 643002 4. 中國工程物理研究院流體物理研究所, 四川 綿陽 621900 5. 國民核生化災(zāi)害防護國家重點實驗室, 北京 102205

    引 言

    多肽分子是由多種氨基酸殘基構(gòu)成, 其中酪氨酸、 色氨酸、 苯丙氨酸在紫外可見區(qū)域有熒光效應(yīng)[1], 多肽也是蛋白質(zhì)的組成單元和功能單元, 參與人體的生命活動, 具有出色的生物相容性和化學(xué)可修飾性, 因此在納米藥物制備, 熒光探針等領(lǐng)域有著良好的應(yīng)用前景[2-3]。 紫外-可見吸收光譜與熒光光譜是研究生物分子的重要手段, 可利用其對分子精細結(jié)構(gòu)進行表征, 在探究不同體系的狀態(tài)變化, 反應(yīng)歷程等動力學(xué)問題時, 起到了重要的作用。

    由于泛函的精確度和作用范圍的不斷提升, 密度泛函理論(DFT)[4]和含時密度泛函理論(TDDFT)[5]成為研究分子基態(tài)與激發(fā)態(tài)性質(zhì)最常用的方法。 隨著電子結(jié)構(gòu)理論研究的不斷完善, 模擬計算對激發(fā)能(ΔE)和躍遷矩(譜強度)的預(yù)測變得越來越準(zhǔn)確[6], 計算小體系有機分子的紫外-可見吸收光譜和熒光光譜與實驗值的吻合程度越來越高。 國內(nèi)外對于小體系有機分子的激發(fā)態(tài)光譜的理論計算做了大量的研究, 通過不同的方法, 在對小體系的激發(fā)態(tài)進行計算時, 可以擬合出與實驗結(jié)果吻合度很高的吸收與發(fā)射光譜, 國內(nèi)外的研究者對三種氨基酸的基態(tài)構(gòu)型和熒光光譜進行了理論計算研究; Boo和Ryu等[7]對有機分子Di-9H-fluoren-9-yldimethylsilane的構(gòu)型對其熒光光譜的影響做了理論計算研究; Dai等[8]對有機分子A100 MOF的熒光光譜和紫外-可見吸收光譜進行了理論計算, 并探究其發(fā)光機理。 但當(dāng)計算的對象體系較大(多肽等生物大分子)時, 通過傳統(tǒng)的TDDFT理論來計算其激發(fā)態(tài)光譜較為困難, 關(guān)于激發(fā)態(tài)性質(zhì)的密度泛函研究鮮有報道。

    采用TDDFT/TDA高精度量子化學(xué)計算方法解決TDDFT計算大體系物質(zhì)激發(fā)態(tài)困難的問題, 選取多肽模擬物生長激素釋放肽-6(GHRP-6)和催產(chǎn)素(Oxytocin)作為較大體系的激發(fā)態(tài)理論計算研究對象, 通過TDDFT/TDA對多肽的激發(fā)態(tài)進行計算, 建立了適用于多肽類物質(zhì)的紫外可見光譜和熒光光譜計算模型, 為較大體系多肽類物質(zhì)的光譜研究提供參考與借鑒。

    圖1 生長激素釋放肽-6(a)與催產(chǎn)素(b)的2D結(jié)構(gòu)圖

    1 實驗部分

    采用BP86, B3LYP/def2-SVP(def2/J, def2-SVP/C)計算條件, 為更加充分地考慮分子間弱相互作用, 添加基于BJ阻尼的D3色散矯正[9], 在此條件下優(yōu)化GHRP-6和Oxytocin的基態(tài)幾何結(jié)構(gòu), 并且通過頻率分析確定沒有虛頻, 優(yōu)化的各收斂限度為: 能量變化(Energy Change): 5.000 0×10-6Eh; 最大梯度變化(Max. Gradient): 3.000 0×10-4Eh·bohr-1; 均方根梯度變化(RMS Gradient): 1.000 0×10-4Eh·bohr-1; 最大位移(Max. Displacement): 4.000 0×10-3bohr; 均方根位移(RMS Displacement): 2.000 0×10-3bohr。 達到各收斂限度且振動分析無虛頻即證明優(yōu)化完成的結(jié)構(gòu)為分子的最穩(wěn)定形態(tài)。 激發(fā)態(tài)計算采用相同計算條件, 在不影響計算精度的情況下, 引入RI積分近似和Tamm-Dancoff近似(TDA)來縮短計算時間。 利用該方法對多肽進行幾何優(yōu)化和激發(fā)態(tài)計算, 以上計算過程在ORCA[10]程序包下進行。

    在對激發(fā)態(tài)性質(zhì)進行計算時, 當(dāng)缺乏計算資源或者研究對象的體系較大時, 研究電子躍遷過程將極大的增加計算耗時。 因此對于多肽類物質(zhì)這種較大體系的分子, 計算其激發(fā)態(tài)性質(zhì)時, 采用TDA近似來加速激發(fā)態(tài)計算過程。 對于完整的TDDFT, 含有非赫米特特征值問題[11],

    (1)

    式(1)中,A,B為旋軌Hessian矩陣,X,Y為特征函數(shù), 為相應(yīng)的特征值。 由于解出這一問題比較耗時, Hirata and Head-Gordon就提出了Tamm-Dancoff近似, 忽略其中B矩陣的貢獻。 將兩個特征值問題轉(zhuǎn)化為一個,

    At=ωTDAt

    (2)

    由此,X被t取代,ω被ωTDA取代。 此近似會稍微高估激發(fā)能, 但大大減少計算成本, 在對較大體系, 如大多數(shù)生物分子進行激發(fā)態(tài)計算時, 使用此近似可以在節(jié)省計算時間的同時保證計算精度, 得到與實驗值吻合較高的計算結(jié)果。

    1.1 紫外-可見吸收光譜

    當(dāng)光波作用在物質(zhì)上時, 物質(zhì)內(nèi)部的電子將吸收光子能量, 產(chǎn)生從基態(tài)躍遷至激發(fā)態(tài)的電子能級躍遷, 在電子能級躍遷的過程中伴隨著振動能級和轉(zhuǎn)動能級躍遷, 因此, 紫外可見吸收光譜為“帶狀光譜”。 電子能級躍遷所需能量較大, 一般會落在紫外可見區(qū)域(200~800 nm)。 電子躍遷符合量子化規(guī)則, 因此紫外-可見吸收光譜具有“指紋性”特征, 可以利用紫外-可見吸收光譜對物質(zhì)做定性定量分析。 研究中對優(yōu)化完成的多肽的結(jié)構(gòu)進行激發(fā)態(tài)的單點能計算, 得到與實驗值波長范圍相同的所有激發(fā)態(tài)能級的躍遷能, 獲得分子的紫外-可見吸收光譜[12]。

    1.2 熒光光譜

    光學(xué)吸收或發(fā)射過程中, 熒光是由自旋允許的單重態(tài)到單重態(tài)的躍遷發(fā)射產(chǎn)生。

    S1→S0+hv

    (3)

    分子熒光的強度受分子結(jié)構(gòu)中的剛性平面影響較大, 在組成多肽的多種氨基酸中, 具有熒光效應(yīng)的主要是三種芳香族氨基酸(色氨酸, 酪氨酸, 苯丙氨酸), 三種氨基酸中均存在的離域π鍵, 其熒光主要由π→π*輻射躍遷產(chǎn)生。 多肽類物質(zhì)的熒光發(fā)射符合Kasha規(guī)則, 對于熒光光譜的計算, 通過優(yōu)化多肽分子第一激發(fā)態(tài)(S1)的結(jié)構(gòu), 根據(jù)S1結(jié)構(gòu)的分子前線軌道, 預(yù)測熒光發(fā)射波長的范圍; 計算第一激發(fā)態(tài)到基態(tài)的躍遷能, 得到分子的熒光光譜。

    2 結(jié)果與討論

    2.1 基態(tài)結(jié)構(gòu)優(yōu)化與振動分析

    通過DFT方法優(yōu)化GHRP-6和Oxytocin兩種肽氣相的幾何結(jié)構(gòu), 優(yōu)化得到的幾何結(jié)構(gòu)見圖2(a), 圖3(a), 對優(yōu)化后的結(jié)構(gòu)進行振動分析, 確認(rèn)沒有虛頻, 表明該結(jié)構(gòu)為基態(tài)最穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)[圖2(b)]。 GHRP-6含有6個氨基酸殘基, Oxytocin含有9個氨基酸殘基。

    圖2 GHRP-6優(yōu)化后的分子結(jié)構(gòu)圖(a)和振動光譜圖(b)

    圖3 催產(chǎn)素優(yōu)化后的分子結(jié)構(gòu)圖與振動光譜圖

    根據(jù)優(yōu)化后的結(jié)構(gòu), 得到兩者多肽中芳香族氨基酸的環(huán)與相連原子的二面角, 如表1所示, GHRP-6結(jié)構(gòu)中存在兩個熒光貢獻基團(色氨酸, TRP), 其二面角更接近平面, Oxytocin上有一個熒光貢獻基團(酪氨酸, TYR), 其二面角為14.37°, 與GHRP-6相比, 結(jié)構(gòu)的剛性平面程度和共軛程度更差。

    表1 多肽結(jié)構(gòu)中芳香族氨基酸與相連原子的二面角

    2.2 紫外-可見吸收光譜理論模型建立

    以優(yōu)化完成后的分子結(jié)構(gòu)為對象, 用TDDFT方法計算兩種肽類物質(zhì)的單重態(tài)的激發(fā)態(tài)躍遷能, 得到兩種肽類物質(zhì)的紫外-可見吸收光譜, 并與實驗結(jié)果進行比較。 通過對比計算結(jié)果, 及其他研究者的工作, 得出了以下結(jié)論[6, 13-14]: 當(dāng)計算對象的體系越大, 剛性平面程度越低時, 應(yīng)選取Hartree-Fock(HF)交換成份越高的泛函進行計算。 采用不含HF成份的BP86泛函計算6個氨基酸殘基的GHRP-6的紫外-可見吸收光譜與實驗值吻合程度最高; 采用HF成份為20%的B3LYP計算9個氨基酸殘基的Oxytocin與實驗值吻合程度最高。 計算結(jié)果見圖4(a,b)。

    從圖4可以看出, 計算得到的紫外-可見吸收光譜與實驗值基本吻合, 實驗測得的GHRP-6的紫外-可見吸收光譜最大吸收波長為279 nm, 計算得到的最大吸收波長為282 nm, 誤差為3 nm, 誤差百分比小于2%[見圖4(a)]; Oxytocin紫外-可見吸收光譜的實驗值為275 nm, 計算值為269 nm, 誤差為6 nm, 誤差百分比小于3%[見圖4(b)]。 圖4(a)中的240~320 nm范圍內(nèi)的吸收峰為GHRP-6的本征吸收峰, 由分子結(jié)構(gòu)中π→π*軌道躍遷產(chǎn)生, GHRP-6分子收到光子激發(fā)后, 氨基酸殘基中的離域π鍵被激發(fā)躍遷至反鍵軌道, 產(chǎn)生279 nm的紫外吸收本征吸收峰; 催產(chǎn)素的紫外-可見吸收光譜中[圖4(b)], 主要貢獻為結(jié)構(gòu)中酪氨酸上的π→π*軌道躍遷。 在200~240 nm范圍內(nèi)存在的吸收譜帶是由于電子躍遷過程中相互碰撞引起二次躍遷產(chǎn)生的, 不屬于分子的本征吸收峰。 由此通過實驗驗證了該方法建立紫外-可見吸收光譜理論模型的準(zhǔn)確性和可行性。

    圖4 GHRP-6(a)和Oxytocin(b)紫外-可見吸收光譜的計算值和實驗值

    2.3 熒光光譜理論模型建立

    采用兩種方法計算多肽類物質(zhì)的熒光光譜: (1)根據(jù)分子前線軌道圖中芳香族氨基酸的π*→π軌道躍遷間的gap值, 預(yù)測分子的熒光峰位置; (2)對單重態(tài)第一激發(fā)態(tài)進行優(yōu)化, 獲得結(jié)構(gòu)的第一激發(fā)態(tài)到基態(tài)的輻射能量, 根據(jù)高斯展寬得到多肽類物質(zhì)的熒光光譜。

    通過計算得到GHRP-6, Oxytocin的分子前線軌道能量, GHRP-6中位于色氨酸殘基的π*→π軌道躍遷為GHRP-6產(chǎn)生熒光的主要貢獻; Oxytocin中位于酪氨酸殘基的π*→π軌道躍遷為Oxytocin產(chǎn)生熒光的主要貢獻。 如圖5(a)所示, GHRP-6中色氨酸殘基上的π*→π軌道間的gap值為3.58 eV, 計算得到產(chǎn)生熒光的波長為346 nm, 與實驗值360 nm間誤差為14 nm, 誤差百分比約為4%; 如圖5(b)所示Oxytocin中酪氨酸殘基上的π*→π軌道間的gap值為4.18 eV, 計算得到產(chǎn)生熒光的波長為296 nm, 與實驗值312 nm間誤差為16 nm, 誤差百分比約為5%。 通過此方法, 可以模擬出分子中產(chǎn)生熒光的主要貢獻位置, 在不考慮電子相關(guān)的情況下, 可以較為準(zhǔn)確的預(yù)測出分子發(fā)出熒光所在的波長范圍, 對分子熒光的理論計算和實驗具有指導(dǎo)意義。

    圖5 GHRP-6(a)和Oxytocin(b)分子前線軌道的π*→π躍遷

    通過計算得到GHRP-6和Oxytocin從第一激發(fā)態(tài)躍遷到基態(tài)的躍遷能, 通過高斯展寬后得到的熒光光譜。 GHRP-6熒光光譜計算值為368 nm, 實驗值為360 nm, 與實驗值的誤差為8 nm, 誤差百分比小于3%; Oxytocin熒光光譜計算值為305 nm, 實驗值為312 nm, 與實驗值的誤差為7 nm, 誤差百分比小于3%。 GHRP-6產(chǎn)生熒光的發(fā)射波長與色氨酸產(chǎn)生的熒光波長近似, 說明GHRP-6產(chǎn)生熒光的主要貢獻為色氨酸殘基上的π*→π軌道躍遷, 色氨酸殘基與相連原子的二面角為7.08°, 2.54°, 分子的共平面程度較高, 呈現(xiàn)較強的剛性平面結(jié)構(gòu), 會增加熒光強度。 GHRP-6分子結(jié)構(gòu)受到紫外吸收本征激發(fā)光的照射, 分子被激發(fā)后, 躍遷至單重第一激發(fā)態(tài)(S1)的π*軌道, 當(dāng)分子躍遷回基態(tài)(S0)的 π軌道時, 即發(fā)出360 nm波長的熒光。 Oxytocin熒光峰位置與酪氨酸產(chǎn)生的熒光波長相似, Oxytocin產(chǎn)生熒光的主要貢獻為酪氨酸殘基上的π軌道躍遷, 酪氨酸殘基與其相連的原子的二面角為14.37°, 剛性平面程度相比于色氨酸較低, 熒光強度弱于色氨酸。

    通過對GHRP-6的激發(fā)態(tài)計算, 證明可以通過本計算方法針對較大體系的多肽類物質(zhì), 計算其激發(fā)態(tài)下的紫外吸收光譜和熒光光譜, 分析其激發(fā)態(tài)下電子光譜的發(fā)生機理, 且與實驗值吻合程度較高, 誤差均在5%以內(nèi)。 由此理論和實驗結(jié)果驗證了采用密度泛函理論計算建立熒光光譜理論模型的可行性。

    圖6 GHRP-6(a)和Oxytocin(b)的熒光光譜的計算值和實驗值

    3 結(jié) 論

    采用DFT與TDDFT方法, 在不影響計算精度的情況下引入TDA, RI等近似, 對較大體系的多肽類物質(zhì)進行激發(fā)態(tài)計算, 得到紫外吸收光譜與熒光光譜的理論計算模型, 研究其結(jié)構(gòu)性質(zhì)與發(fā)光機理。 并與實驗值對比得到如下結(jié)論:

    (1)通過計算GHRP-6和Oxytocin的紫外-可見吸收光譜, 并與實驗值進行比較, 實驗測得的GHRP-6的紫外-可見吸收光譜最大吸收波長為279 nm, 計算得到的最大吸收波長為282 nm, 誤差為3 nm, 誤差百分比小于2%; Oxytocin紫外-可見吸收光譜的實驗值為275 nm, 計算值為269 nm, 誤差為6 nm, 誤差百分比小于3%。 可以看出紫外-可見吸收光譜計算結(jié)果與實驗值吻合程度較高, 該模型能準(zhǔn)確計算得到多肽類物質(zhì)等較大體系分子的紫外-可見吸收光譜。

    (2)根據(jù)分子前線軌道理論, 探究多肽基態(tài)到激發(fā)態(tài)的電子軌道躍遷類型, GHRP-6產(chǎn)生熒光的發(fā)射波長與色氨酸產(chǎn)生的熒光波長相近, 說明GHRP-6產(chǎn)生熒光的主要貢獻為色氨酸殘基上的π→π*軌道躍遷, Oxytocin熒光峰位置與酪氨酸產(chǎn)生的熒光波長相近, Oxytocin產(chǎn)生熒光的主要貢獻為酪氨酸殘基上的π→π*軌道躍遷。 可通過該方法分析激發(fā)態(tài)下電子光譜的發(fā)光機理, 預(yù)測分子熒光發(fā)射的波長范圍, 分析激發(fā)態(tài)光學(xué)性質(zhì)。

    (3)通過計算GHRP-6和Oxytocin的熒光光譜, 并與實驗值進行比較, GHRP-6熒光光譜計算值為368 nm, 實驗值為360 nm, 與實驗值的誤差為8 nm, 誤差百分比小于3%; Oxytocin熒光光譜計算值為305 nm, 實驗值為312 nm, 與實驗值的誤差為7 nm, 誤差百分比小于3%。 通過實驗驗證了利用該方法建立熒光光譜模型的準(zhǔn)確性和可行性。

    利用密度泛函理論研究了較大體系的多肽類物質(zhì)激發(fā)態(tài)下的紫外-可見吸收光譜和熒光光譜, 建立了理論計算模型, 并與實驗對比, 驗證了模型的可行性, 為較大體系的多肽類物質(zhì)的光譜實驗提供理論依據(jù)。

    猜你喜歡
    激發(fā)態(tài)殘基吸收光譜
    基于各向異性網(wǎng)絡(luò)模型研究δ阿片受體的動力學(xué)與關(guān)鍵殘基*
    “殘基片段和排列組合法”在書寫限制條件的同分異構(gòu)體中的應(yīng)用
    激發(fā)態(tài)和瞬態(tài)中間體的光譜探測與調(diào)控
    原子吸收光譜分析的干擾與消除應(yīng)用研究
    淺析原子吸收光譜法在土壤環(huán)境監(jiān)測中的應(yīng)用
    茶油氧化過程中紫外吸收光譜特性
    蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)序列與殘基種類間關(guān)聯(lián)的分析
    莧菜紅分子基態(tài)和激發(fā)態(tài)結(jié)構(gòu)與光譜性質(zhì)的量子化學(xué)研究
    基于支持向量機的蛋白質(zhì)相互作用界面熱點殘基預(yù)測
    單鏡面附近激發(fā)態(tài)極化原子的自發(fā)輻射
    亚洲中文字幕日韩| 午夜日韩欧美国产| 水蜜桃什么品种好| 午夜免费成人在线视频| 午夜福利在线免费观看网站| 国产极品粉嫩免费观看在线| 国产成人免费无遮挡视频| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 中亚洲国语对白在线视频| 日韩欧美一区视频在线观看| cao死你这个sao货| 日韩大码丰满熟妇| 狂野欧美激情性xxxx| 99久久99久久久精品蜜桃| 色老头精品视频在线观看| 97在线人人人人妻| 成年人免费黄色播放视频| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 欧美在线一区亚洲| 午夜激情久久久久久久| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 日韩视频在线欧美| 亚洲一码二码三码区别大吗| 亚洲国产欧美在线一区| 99久久99久久久精品蜜桃| 日日夜夜操网爽| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 黄色成人免费大全| 亚洲成人国产一区在线观看| 国产一区二区三区综合在线观看| 日韩有码中文字幕| 淫妇啪啪啪对白视频| 青青草视频在线视频观看| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 亚洲午夜理论影院| 久久国产亚洲av麻豆专区| a级毛片黄视频| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 国产在线观看jvid| 99国产综合亚洲精品| 亚洲精华国产精华精| 后天国语完整版免费观看| 国产一区二区 视频在线| av电影中文网址| 亚洲精品中文字幕在线视频| 亚洲第一av免费看| 国产高清激情床上av| avwww免费| 国产在线观看jvid| 最新美女视频免费是黄的| 夜夜爽天天搞| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 满18在线观看网站| 亚洲人成77777在线视频| 久久国产精品大桥未久av| 国产精品.久久久| 亚洲精品美女久久av网站| 考比视频在线观看| 国产高清激情床上av| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 一个人免费看片子| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 亚洲中文字幕日韩| 欧美精品亚洲一区二区| 一二三四在线观看免费中文在| 国产精品久久久久久精品电影小说| 五月天丁香电影| 美女福利国产在线| 怎么达到女性高潮| 夫妻午夜视频| 欧美黄色淫秽网站| 免费观看a级毛片全部| 在线观看免费日韩欧美大片| 色精品久久人妻99蜜桃| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 亚洲av日韩精品久久久久久密| www.999成人在线观看| 精品人妻在线不人妻| 精品一区二区三卡| 99国产精品一区二区三区| 色视频在线一区二区三区| 久久久久国产一级毛片高清牌| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 窝窝影院91人妻| 在线播放国产精品三级| 精品国产乱码久久久久久小说| 免费看十八禁软件| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 亚洲性夜色夜夜综合| 一二三四社区在线视频社区8| 欧美午夜高清在线| 考比视频在线观看| 97在线人人人人妻| 午夜精品国产一区二区电影| 亚洲三区欧美一区| 亚洲中文字幕日韩| 国产在线精品亚洲第一网站| 日韩中文字幕视频在线看片| 亚洲成a人片在线一区二区| 人人妻人人澡人人看| 99香蕉大伊视频| 视频区图区小说| 中亚洲国语对白在线视频| 国产欧美亚洲国产| 一二三四在线观看免费中文在| 老司机午夜福利在线观看视频 | 午夜视频精品福利| 热re99久久国产66热| 大码成人一级视频| 亚洲黑人精品在线| 两个人免费观看高清视频| 激情视频va一区二区三区| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 日韩中文字幕视频在线看片| 在线观看免费日韩欧美大片| 91av网站免费观看| 黄片小视频在线播放| 精品国产一区二区三区四区第35| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 悠悠久久av| 下体分泌物呈黄色| 午夜日韩欧美国产| 亚洲 欧美一区二区三区| 制服人妻中文乱码| 欧美一级毛片孕妇| 日本av免费视频播放| 十八禁网站网址无遮挡| 欧美黑人精品巨大| 免费黄频网站在线观看国产| 自线自在国产av| 婷婷成人精品国产| 亚洲精品国产区一区二| 亚洲五月色婷婷综合| 亚洲专区国产一区二区| 久久久久网色| 搡老熟女国产l中国老女人| 首页视频小说图片口味搜索| 最新的欧美精品一区二区| 男女下面插进去视频免费观看| 免费观看人在逋| 亚洲,欧美精品.| 国产一卡二卡三卡精品| 午夜福利,免费看| 考比视频在线观看| 久久久精品免费免费高清| 新久久久久国产一级毛片| 五月天丁香电影| 亚洲av成人一区二区三| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 日韩一区二区三区影片| 男男h啪啪无遮挡| 国产高清国产精品国产三级| 中文字幕色久视频| 国产成人av教育| 精品福利永久在线观看| 人成视频在线观看免费观看| 中文字幕人妻丝袜制服| 在线天堂中文资源库| 日本黄色日本黄色录像| 一进一出好大好爽视频| 免费在线观看影片大全网站| 老熟妇仑乱视频hdxx| 悠悠久久av| 男人舔女人的私密视频| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 老熟女久久久| 久久人人97超碰香蕉20202| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 欧美 日韩 精品 国产| 少妇粗大呻吟视频| 国产一区二区三区视频了| 久久婷婷成人综合色麻豆| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 无遮挡黄片免费观看| 精品一区二区三卡| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 1024香蕉在线观看| 亚洲男人天堂网一区| 99国产精品免费福利视频| 国产精品九九99| 亚洲精品美女久久av网站| 美女高潮到喷水免费观看| 久久久国产精品麻豆| 日本黄色日本黄色录像| 日本av免费视频播放| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 国产精品99久久99久久久不卡| 色婷婷av一区二区三区视频| 99热国产这里只有精品6| 亚洲人成电影免费在线| aaaaa片日本免费| 首页视频小说图片口味搜索| 欧美中文综合在线视频| www.熟女人妻精品国产| 在线播放国产精品三级| 国精品久久久久久国模美| 亚洲 欧美一区二区三区| 久久 成人 亚洲| 高清av免费在线| 黄色a级毛片大全视频| 精品高清国产在线一区| 又黄又粗又硬又大视频| 下体分泌物呈黄色| 国产亚洲精品一区二区www | 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| kizo精华| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 精品欧美一区二区三区在线| 亚洲国产av新网站| 色综合欧美亚洲国产小说| 桃花免费在线播放| 成人18禁在线播放| 亚洲精品国产色婷婷电影| av一本久久久久| 国产精品 欧美亚洲| 久久久久国产一级毛片高清牌| 日韩中文字幕视频在线看片| av国产精品久久久久影院| 一二三四在线观看免费中文在| 国产精品久久久久久精品古装| 精品视频人人做人人爽| 国产在线免费精品| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 午夜福利免费观看在线| 香蕉丝袜av| 久久久久久久久久久久大奶| 日韩欧美免费精品| 亚洲av电影在线进入| 国产男女超爽视频在线观看| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 久久午夜亚洲精品久久| 麻豆av在线久日| 久久久久久久大尺度免费视频| 大型黄色视频在线免费观看| 麻豆成人av在线观看| 亚洲五月色婷婷综合| 手机成人av网站| 成人特级黄色片久久久久久久 | 狠狠狠狠99中文字幕| 黄频高清免费视频| 在线永久观看黄色视频| 一个人免费看片子| 男女无遮挡免费网站观看| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 宅男免费午夜| 国产精品二区激情视频| 久久久精品免费免费高清| 黄片小视频在线播放| 欧美日本中文国产一区发布| 嫩草影视91久久| 欧美 日韩 精品 国产| 纯流量卡能插随身wifi吗| 亚洲第一av免费看| 免费黄频网站在线观看国产| 在线观看人妻少妇| 日韩视频在线欧美| 少妇被粗大的猛进出69影院| 欧美黑人精品巨大| 国产在线视频一区二区| 成年动漫av网址| 嫩草影视91久久| 国产一区二区三区视频了| 嫩草影视91久久| 精品国产一区二区三区四区第35| 一二三四社区在线视频社区8| 国产主播在线观看一区二区| 叶爱在线成人免费视频播放| 51午夜福利影视在线观看| 最近最新免费中文字幕在线| 亚洲天堂av无毛| 欧美精品一区二区免费开放| svipshipincom国产片| 欧美精品av麻豆av| 美女福利国产在线| 精品福利观看| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 真人做人爱边吃奶动态| 欧美黄色淫秽网站| 蜜桃在线观看..| 免费黄频网站在线观看国产| 久久狼人影院| 欧美变态另类bdsm刘玥| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 久久毛片免费看一区二区三区| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 日韩成人在线观看一区二区三区| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 欧美精品啪啪一区二区三区| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 亚洲专区国产一区二区| 麻豆乱淫一区二区| 少妇被粗大的猛进出69影院| av有码第一页| 国产亚洲精品久久久久5区| 中文欧美无线码| 一本色道久久久久久精品综合| 99国产精品99久久久久| 真人做人爱边吃奶动态| 国产精品免费视频内射| 新久久久久国产一级毛片| 波多野结衣av一区二区av| 老司机在亚洲福利影院| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 在线永久观看黄色视频| 亚洲性夜色夜夜综合| 18在线观看网站| 夜夜夜夜夜久久久久| 亚洲情色 制服丝袜| 成人永久免费在线观看视频 | 精品亚洲成国产av| 欧美黑人精品巨大| 五月开心婷婷网| 18禁国产床啪视频网站| 国产亚洲一区二区精品| 国产精品亚洲一级av第二区| 女性被躁到高潮视频| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 亚洲欧美色中文字幕在线| 十八禁网站网址无遮挡| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 99精品欧美一区二区三区四区| 999精品在线视频| videos熟女内射| a级片在线免费高清观看视频| 99国产精品免费福利视频| 丁香六月天网| 少妇粗大呻吟视频| 欧美黑人精品巨大| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 久久久久视频综合| 欧美国产精品一级二级三级| 午夜日韩欧美国产| 在线观看66精品国产| 九色亚洲精品在线播放| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 免费黄频网站在线观看国产| 91精品三级在线观看| 丝袜美腿诱惑在线| 国产精品九九99| kizo精华| 亚洲男人天堂网一区| 国产免费现黄频在线看| 一区二区三区精品91| 一进一出抽搐动态| 国产极品粉嫩免费观看在线| 国产av又大| 亚洲性夜色夜夜综合| 免费人妻精品一区二区三区视频| 亚洲国产av新网站| 色在线成人网| kizo精华| 精品国产乱码久久久久久男人| 亚洲精品乱久久久久久| 国产精品av久久久久免费| 岛国毛片在线播放| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 国产淫语在线视频| 日本欧美视频一区| 视频区欧美日本亚洲| 香蕉国产在线看| 一级片'在线观看视频| 一本大道久久a久久精品| 国产亚洲一区二区精品| 精品一品国产午夜福利视频| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 一级,二级,三级黄色视频| 国产麻豆69| 婷婷丁香在线五月| 欧美黄色淫秽网站| 99九九在线精品视频| 多毛熟女@视频| 丰满饥渴人妻一区二区三| 在线天堂中文资源库| 桃红色精品国产亚洲av| 大码成人一级视频| 成年女人毛片免费观看观看9 | 成人黄色视频免费在线看| 美女扒开内裤让男人捅视频| 欧美日韩成人在线一区二区| 日本精品一区二区三区蜜桃| 99久久国产精品久久久| √禁漫天堂资源中文www| 美女福利国产在线| 久久ye,这里只有精品| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 亚洲欧美一区二区三区久久| 中文字幕制服av| 人妻一区二区av| 亚洲专区字幕在线| 国产精品一区二区免费欧美| 一级黄色大片毛片| 久久久国产欧美日韩av| 精品久久久久久久毛片微露脸| 久9热在线精品视频| 怎么达到女性高潮| 成人永久免费在线观看视频 | 不卡av一区二区三区| 久久久久久久大尺度免费视频| 日本欧美视频一区| 午夜福利免费观看在线| 久久精品91无色码中文字幕| 夫妻午夜视频| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 国产亚洲精品一区二区www | 一级,二级,三级黄色视频| 99久久精品国产亚洲精品| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 老司机亚洲免费影院| 在线 av 中文字幕| 亚洲伊人色综图| 久久婷婷成人综合色麻豆| 久久久欧美国产精品| 母亲3免费完整高清在线观看| 亚洲av第一区精品v没综合| 麻豆国产av国片精品| 国精品久久久久久国模美| 日本黄色视频三级网站网址 | 免费人妻精品一区二区三区视频| 99在线人妻在线中文字幕 | 色精品久久人妻99蜜桃| 亚洲熟妇熟女久久| 色综合婷婷激情| 精品一区二区三区av网在线观看 | 啦啦啦免费观看视频1| 日韩视频一区二区在线观看| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 中文字幕色久视频| 精品一区二区三区av网在线观看 | 可以免费在线观看a视频的电影网站| 人人妻人人澡人人看| 久久ye,这里只有精品| 一本综合久久免费| 下体分泌物呈黄色| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 高潮久久久久久久久久久不卡| 男女边摸边吃奶| 国产97色在线日韩免费| 久久久精品94久久精品| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 国产一卡二卡三卡精品| 国产单亲对白刺激| 中文字幕精品免费在线观看视频| 999久久久国产精品视频| 老熟妇仑乱视频hdxx| 99国产精品免费福利视频| 视频区欧美日本亚洲| 亚洲精品自拍成人| 伦理电影免费视频| 超碰97精品在线观看| 精品人妻1区二区| 视频在线观看一区二区三区| 91大片在线观看| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 中文字幕人妻熟女乱码| 在线观看免费高清a一片| 亚洲五月色婷婷综合| 老熟女久久久| 国产又色又爽无遮挡免费看| 在线观看一区二区三区激情| 水蜜桃什么品种好| 午夜91福利影院| 高清欧美精品videossex| netflix在线观看网站| 美女视频免费永久观看网站| 亚洲精品一二三| 欧美成狂野欧美在线观看| 天堂8中文在线网| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 国产91精品成人一区二区三区 | 无人区码免费观看不卡 | 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 在线天堂中文资源库| 在线观看免费午夜福利视频| 亚洲情色 制服丝袜| 国产日韩欧美在线精品| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 色综合欧美亚洲国产小说| 老熟妇仑乱视频hdxx| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 一进一出抽搐动态| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 国产午夜精品久久久久久| 高清毛片免费观看视频网站 | 电影成人av| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 久久久国产欧美日韩av| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 在线观看66精品国产| 老熟女久久久| 最近最新免费中文字幕在线| av电影中文网址| 悠悠久久av| 性色av乱码一区二区三区2| 国产精品免费大片| 精品久久久精品久久久| 国产欧美日韩精品亚洲av| 日本一区二区免费在线视频| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 老熟妇仑乱视频hdxx| 亚洲性夜色夜夜综合| 色综合欧美亚洲国产小说| 在线av久久热| netflix在线观看网站| 亚洲人成77777在线视频| 中文字幕制服av| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 午夜福利免费观看在线| 中文字幕人妻丝袜制服| 99热国产这里只有精品6| 又紧又爽又黄一区二区| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 91成人精品电影| 亚洲七黄色美女视频| 日韩中文字幕视频在线看片| 成人国产一区最新在线观看| 亚洲人成电影免费在线| 欧美黄色片欧美黄色片| 欧美变态另类bdsm刘玥| 99香蕉大伊视频| 久久久精品94久久精品| 免费黄频网站在线观看国产| 亚洲精华国产精华精| 黄片播放在线免费| 91字幕亚洲| 久久精品成人免费网站| 高潮久久久久久久久久久不卡| 91字幕亚洲| 亚洲av美国av| 大码成人一级视频| 一级黄色大片毛片| 久久久水蜜桃国产精品网| 1024视频免费在线观看| 美女国产高潮福利片在线看| 1024香蕉在线观看| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 久久久精品94久久精品| 麻豆乱淫一区二区| 国产精品.久久久| 久9热在线精品视频| 国产99久久九九免费精品| 乱人伦中国视频| 国产亚洲欧美精品永久| 最黄视频免费看| 丝袜美足系列| 精品亚洲成国产av| 99riav亚洲国产免费| 欧美日韩av久久| 国产av一区二区精品久久| 99国产精品一区二区蜜桃av | 久久国产亚洲av麻豆专区| 久久久欧美国产精品| 国产av又大| 我要看黄色一级片免费的| 一个人免费在线观看的高清视频| 两人在一起打扑克的视频| 黄片播放在线免费| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 一夜夜www| 久久精品国产综合久久久| 91九色精品人成在线观看| 乱人伦中国视频| 99国产精品一区二区蜜桃av | 欧美 日韩 精品 国产| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 久久久久久久久久久久大奶| svipshipincom国产片| 人妻 亚洲 视频| 日本一区二区免费在线视频| 国产老妇伦熟女老妇高清| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 国产99久久九九免费精品| 成人特级黄色片久久久久久久 | 国产高清国产精品国产三级| 老司机在亚洲福利影院| 日本黄色日本黄色录像| av网站在线播放免费| 中文字幕精品免费在线观看视频| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 少妇被粗大的猛进出69影院| 日本一区二区免费在线视频| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 精品视频人人做人人爽| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 97人妻天天添夜夜摸| 91av网站免费观看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 乱人伦中国视频| 一夜夜www| 亚洲成人手机| 欧美精品啪啪一区二区三区| 嫩草影视91久久| 视频在线观看一区二区三区| 高潮久久久久久久久久久不卡| 久久久久网色| 久久久水蜜桃国产精品网| 人妻久久中文字幕网| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 夫妻午夜视频| 中文字幕制服av| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 黄色a级毛片大全视频| 又黄又粗又硬又大视频| 精品少妇黑人巨大在线播放| 亚洲综合色网址| 考比视频在线观看| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 国产av又大|