lncRNA-FTX與腦膠質(zhì)瘤病人預(yù)后的相關(guān)性分析

胡 榮 趙 武 張亞森 李苑奇

腦膠質(zhì)瘤是臨床常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤，雖然目前認為膠質(zhì)瘤的發(fā)生與生活環(huán)境、遺傳因素、免疫功能異常等有關(guān)[1]，但確切發(fā)病機制仍不清楚。近年來，研究發(fā)現(xiàn)長鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，lncRNA）可通過表觀遺傳修飾、轉(zhuǎn)錄以及轉(zhuǎn)錄后水平，對蛋白編碼基因表達進行調(diào)控，介導(dǎo)細胞凋亡、增殖和遷移過程，與腫瘤發(fā)生、發(fā)展有關(guān)[2]。龍翔宇等[3]發(fā)現(xiàn)lncRNA FTX 與肝癌細胞侵襲、遷移密切相關(guān)。本文探討lncRNA FTX 表達水平與腦膠質(zhì)瘤病人生存預(yù)后的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 納入標準：術(shù)后病理檢查證實為腦膠質(zhì)瘤；年齡≥18 歲；術(shù)前無放療、化療；病例資料齊全。排除標準：患其他原發(fā)性腫瘤；既往有顱腦損傷史；既往有精神病史；患病毒性肝炎、自身免疫性疾病等基礎(chǔ)疾病。

前瞻性收集2016年1月至2018年1月收治的腦膠質(zhì)瘤88例（46例獲得瘤旁組織），其中男47例，女41例；年齡28～73歲，平均（45.95±12.44）歲。本研究方案獲醫(yī)院倫理委員會批準。

1.2 lncRNA FTX 的檢測 采用實時逆轉(zhuǎn)錄PCR 檢測lncRNA FTX 表達水平。利用Trizol 法提取總RNA，測定RNA 濃度與純度，逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，行實時PCR擴增，引物序列：①lncRNA FTX 正向序列為5'-CAAAGCTGGTCCTGTGCCTG-3'，反 向 為5'-ATTGAGTGTGGCATCACCTCC-3'；②以GAPDH為參照，正向序列為5'-CCCACTCCTCCACCTTTGAC3'，反向為5'-ATGAGGTCCACCACCCTGTT-3'。PCR 條件：預(yù)變性95 ℃、30 s；熱循環(huán)95 ℃、5 s，60 ℃、34 s，40個循環(huán)。2-△△CT法計算lncRNA FTX相對表達量。以腦膠質(zhì)瘤組織lncRNA FTX 表達水平均值為界分為高表達組（n=57）和低表達組（n=31）。

1.3 隨訪 術(shù)后隨訪3 年，采用門診、微信或電話隨訪，每3個月隨訪1次。主要觀察指標為無進展生存期、總生存期。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 20.0軟件分析；計數(shù)資料行χ2檢驗；計量資料以表示，行t檢驗；采用多因素Cox 比例回歸風(fēng)險模型檢驗生存預(yù)后的危險因素；P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 腦膠質(zhì)瘤組織lncRN AFTX 的表達水平 腦膠質(zhì)瘤組織lncRNA FTX表達水平[（7.54±2.15）]明顯高于瘤旁組織[（2.65±0.69）；P＜0.001]。

2.2 腦膠質(zhì)瘤病人生存預(yù)后的影響因素 單因素分析顯示W(wǎng)HO分級、腫瘤切除程度、lncRNA FTX表達水平、術(shù)后輔助放/化療與術(shù)后死亡有關(guān)（P＜0.05，表1）。多因素Cox 比例回歸風(fēng)險模型分析顯示，WHO分級Ⅲ～Ⅳ級、腫瘤未全切除、lncRNA FTX高表達是腦膠質(zhì)瘤病人生存預(yù)后不良的獨立危險因素（P＜0.05），術(shù)后輔助放/化療是生存預(yù)后的保護性因素（P＜0.05）。見表2。

表1 本文88例腦膠質(zhì)瘤生存預(yù)后影響因素的單因素分析

表2 本文88 例腦膠質(zhì)瘤病人生存預(yù)后影響因素的多因素Cox比回歸風(fēng)險模型分析

2.3 lncRNA FTX表達水平與腦膠質(zhì)瘤病人生存預(yù)后的關(guān)系 生存曲線分析顯示，高表達組無進展生存期（15.10 個月）和總生存期（20.24 個月）較低表達組（分別為18.96、25.53個月）明顯縮短（P＜0.05，圖1）。

圖1 生存曲線分析lncRNA FTX表達水平與腦膠質(zhì)瘤無進展生存期的關(guān)系

圖2 生存曲線分析lncRNA FTX表達水平與腦膠質(zhì)瘤總生存期的關(guān)系

3 討論

腦膠質(zhì)瘤在45～55歲人群中患病率較高。由于腫瘤呈浸潤性生長，腫瘤全切除率低，術(shù)后復(fù)發(fā)風(fēng)險高，預(yù)后較差。既往研究認為腦膠質(zhì)瘤發(fā)生與分子生物學(xué)改變有關(guān)[4]。研究表明lncRNA 在轉(zhuǎn)錄前、轉(zhuǎn)錄后可對下游基因表達進行調(diào)控，從而參與腫瘤發(fā)生、進展[5]。有研究發(fā)現(xiàn)lncRNA FTX 在骨肉瘤組織中呈高表達，明顯增強骨肉瘤細胞的侵襲性與遷移能力[6]。本文結(jié)果顯示lncRNA FTX在腦膠質(zhì)瘤中的表達水平較瘤旁組織明顯增高。

有學(xué)者以結(jié)直腸癌病人為研究對象，發(fā)現(xiàn)結(jié)直腸癌組織lncRNA FTX 呈高表達，能通過作用于miR-215，在結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮作用[7]。還有學(xué)者發(fā)現(xiàn)lncRNA FTX 能激活叉頭框因子A2，抑制肺癌細胞的遷移、增殖[8]。這表明lncRNA FTX 在不同腫瘤中的作用機制可能不同，通過不同作用路徑發(fā)揮抑癌或促癌作用。研究發(fā)現(xiàn)lncRNA FTX 可通過調(diào)節(jié)miR-342-3p表達，參與腦膠質(zhì)瘤細胞的侵襲與增殖，而敲除lncRNA FTX 后，明顯抑制膠質(zhì)瘤細胞侵襲與增殖[9，10]。本研究發(fā)現(xiàn)lncRNA FTX 高表達組無進展生存期（15.10 個月）和總生存期（20.24個月）較低表達組（分別為18.96、25.53個月）明顯縮短（P＜0.05）。

總之，腦膠質(zhì)瘤lncRN AFTX 呈高表達，且與病人不良生存預(yù)后密切相關(guān)。