延安產(chǎn)野生烏拉爾甘草品質(zhì)鑒定

★ 曾云飛 李（.延安市中醫(yī)藥研究所 陜西 延安 76000；2.貴州醫(yī)科大學(xué)藥用植物功效與利用國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 貴陽(yáng) 55004；3.貴州省中國(guó)科學(xué)院天然產(chǎn)物化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/貴州省天然藥物工程研究中心 貴陽(yáng) 55004）

甘草為豆科（Leguminosae）蝶形花亞科（Papilionatae Taub.）甘草屬（Glycyrrhiza）多年生草本植物，該屬在全世界分布有29種6變種，我國(guó)約有18種3變種［1］。2005年版《中華人民共和國(guó)藥典》收載的藥用甘草，即烏拉爾甘草（Glycyrrhiza uralensisFisch）、脹 果 甘 草（Glycyrrhiza inflateBatal）和光果甘草（Glycyrrhiza glabraL.），藥用器官為其根，別名：國(guó)老、甜草、烏拉爾甘草、甜根子等。甘草是一種補(bǔ)益中草藥，味辛、甘，性溫，歸脾、胃經(jīng)，氣微，味甜而特殊，具有補(bǔ)中益氣、清熱解毒、祛痰止咳、緩急止痛、緩和藥性等功效，功能主治清熱解毒、祛痰止咳等。甘草分布在中國(guó)西北、東北、華北地區(qū)，是干旱半干旱荒漠地區(qū)優(yōu)良生態(tài)先鋒植物［2］。最新醫(yī)學(xué)研究表明，甘草中的甘草酸具有抑制HIV［3］、SAS冠狀病毒的作用［4］，甘草素和異甘草素有抗?jié)兒徒獐d作用，能抑制單胺氧化酶，可治療精神病［5-6］。除藥用外，甘草還廣泛用于畜牧業(yè)、食品、保健品、飲料、煙草、化妝品等工業(yè)領(lǐng)域中［7］。

我國(guó)對(duì)甘草的采集與藥用已有四千多年的歷史，《神農(nóng)本草經(jīng)》中將其列入上品，爾后歷代本草皆有記載，素有“十方九草”“眾藥之王”的美譽(yù)。甘草為常用大宗藥材，其藥性平和，通行十二經(jīng)脈［8］，目前市場(chǎng)上流通的商品甘草以烏拉爾甘草為主流品種［9］。西北地區(qū)為甘草的主產(chǎn)區(qū)，內(nèi)蒙古中、西部及寧夏地區(qū)所產(chǎn)烏拉爾甘草品質(zhì)最好，被稱為“西草”。延安位于黃河中游，地處黃土高原，居陜西北部，面積為3.7萬(wàn)平方公里，海拔約800～1 200米，多數(shù)地區(qū)覆蓋有深厚風(fēng)成黃土。延安屬暖溫帶，年平均氣溫為7 ℃～10℃，全區(qū)無(wú)霜期在150～170 d左右，年平均降水量100 mm，每平方厘米的太陽(yáng)年輻射為90～140千卡，日照時(shí)數(shù)為1 400～2 900 h。陜北黃土高原區(qū)地域?qū)拸V，自然條件復(fù)雜，為各種植物的生存和多種植被類型的分布提供了優(yōu)越的條件，植物和植被資源較為豐富，藥用植物資源尤為突出［10］。延安的野生甘草質(zhì)地優(yōu)、粉質(zhì)大，被譽(yù)為“陜北的國(guó)老蓋三北”，但沒(méi)有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道延安產(chǎn)烏拉爾甘草的品質(zhì)。鑒于此，本實(shí)驗(yàn)以不同產(chǎn)地的烏拉爾甘草作為研究對(duì)象，采用高效液相色譜檢測(cè)方法，對(duì)5個(gè)產(chǎn)地不同的甘草樣品進(jìn)行分析，并以此為依據(jù)判定不同產(chǎn)地甘草樣品的優(yōu)劣。本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果將客觀的判定陜北野生烏拉爾甘草的品質(zhì)，為開(kāi)發(fā)陜北藥材提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品的采集 本實(shí)驗(yàn)所用甘草樣品于2016年8月份采自陜西延安城北楊家?guī)X山上，直徑為2～3 mm，經(jīng)延安市藥材公司技術(shù)人員鑒定為烏拉爾甘草，其他不同產(chǎn)地的烏拉爾甘草樣品均購(gòu)自淘寶網(wǎng)。

1.2 試劑及儀器 Waters 2489高效液相色譜儀，Sartorius 1/10萬(wàn)電子天平，F(xiàn)A2204B上海精科萬(wàn)分之一電子天平。

甘草苷、甘草酸銨（成都標(biāo)準(zhǔn)品有限公司，純度＞98%，＞98%，批號(hào)分別為140723、141109）；色譜純甲醇，色譜純乙腈，超純水，其他試劑均為分析純。

1.3 測(cè)定方法 以甘草酸銨、甘草苷為評(píng)價(jià)指標(biāo)，色譜條件和測(cè)定方法參照《中國(guó)藥典》（2015）甘草品質(zhì)測(cè)定方法。

以甘草酸銨、甘草苷為評(píng)價(jià)指標(biāo)，色譜條件和測(cè)定方法參照《中國(guó)藥典》（2020）甘草品質(zhì)測(cè)定方法。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)相A，以0.05 %磷酸溶液為流動(dòng)相B，按下表中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫；檢測(cè)波長(zhǎng)為237 nm。理論板數(shù)按甘草苷峰計(jì)算應(yīng)不低于5 000。

對(duì)照品溶液的制備 取甘草苷對(duì)照品、甘草酸銨對(duì)照品適量，精密稱定，加70 %乙醇分別制成每1 mL含甘草苷20 μg、甘草酸銨0.2 mg的溶液，即得（甘草酸重量=甘草酸銨重量/1.0207）。

供試品溶液的制備 取本品粉末（過(guò)三號(hào)篩）約0.2 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70 %乙醇100 mL，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250 W，頻率40 kHz）30 min，放冷，再稱定重量，用70 %乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。

本品按干燥品計(jì)算，含甘草苷（C21H22O9）不得少于0.50 %，甘草酸（C42H62O16）不得少于2.0 %。

2 結(jié)果

不同產(chǎn)地烏拉爾甘草根部及陜北烏拉爾甘草莖品質(zhì)鑒定色譜圖見(jiàn)圖1（由本實(shí)驗(yàn)室測(cè)定），結(jié)果見(jiàn)表1。依據(jù)《中國(guó)藥典》規(guī)定，甘草酸銨干燥品計(jì)算，甘草酸（C42H62O16）不得少于2.0 %，含甘草苷（C21H22O9）不得少于0.50 %。由表可知，甘肅產(chǎn)的甘草品質(zhì)最差，其甘草酸和甘草苷的含量分別為1.947 0 %和0.383 9 %，均未達(dá)到甘草飲片的最低要求。寧夏和新疆產(chǎn)烏拉爾甘草中甘草酸和甘草苷的含量均高于《中國(guó)藥典》的規(guī)定，內(nèi)蒙產(chǎn)烏拉爾甘草酸和甘草苷的含量分別為3.514 3 %和1.179 4 %，高于規(guī)定的最低值。所有的被測(cè)樣品中，延安產(chǎn)烏拉爾甘草根中甘草酸和甘草苷的含量最高，分別為6.627 7 %和2.493 9 %，高于藥典規(guī)定的最低值的3倍和6倍，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他產(chǎn)地的品質(zhì)。另外，陜北產(chǎn)甘草莖中甘草酸和甘草苷的含量均很低，分別為0.246 5 %和0.026 9 %，不能達(dá)到甘草的最低要求。

表1 不同產(chǎn)地甘草品質(zhì)鑒定結(jié)果

圖1 不同產(chǎn)地烏拉爾甘草HPLC圖

按貢濟(jì)宇等的甘草飲片等級(jí)評(píng)定（一等品：甘草苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)＞1.10 %，甘草酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)＞2.12 %，二等品：甘草苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)＞0.74 %～1.10 %，甘草酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)＞1.95 %～2.12 %，三等品：甘草苷＞0.65 %～0.74 %，甘草酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)＞1.88 %～1.95 %，等外品：甘草苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)＜0.65 %，甘草酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)＜1.88 %）［10］，延安產(chǎn)和內(nèi)蒙產(chǎn)甘草為一等品，寧夏和新疆產(chǎn)甘草的甘草酸含量均高于一等品的要求，但甘草苷的含量不能達(dá)到一等品的要求，甘肅產(chǎn)甘草甘草酸的含量達(dá)到了三等品，但甘草苷的含量為等外品。

3 討論

藥用植物是指醫(yī)學(xué)上用于防病、治病的植物，其植株的全部或部分供藥用或作為制藥工業(yè)的原料。野生藥用植物是指自然界生長(zhǎng)、未經(jīng)人工馴化栽培、具有藥用價(jià)值的一類植物，是極其寶貴的天然藥物種質(zhì)資源庫(kù)。甘草是《中國(guó)藥典》規(guī)定的主要品種，我國(guó)甘草資源豐富、儲(chǔ)量高、品質(zhì)優(yōu)良，甘草酸及多種黃酮類化合物含量高，有極廣的臨床應(yīng)用價(jià)值。然而，藥材產(chǎn)地不同、種類不同，品質(zhì)也參差不齊。本實(shí)驗(yàn)測(cè)定了西北不同產(chǎn)地的烏拉爾甘草的品質(zhì)，測(cè)定結(jié)果顯示除甘肅產(chǎn)烏拉爾甘草不能達(dá)到國(guó)家規(guī)定的最低標(biāo)準(zhǔn)外，其余產(chǎn)地的烏拉爾甘草均超過(guò)了最低標(biāo)準(zhǔn)，而延安產(chǎn)烏拉爾甘草品質(zhì)最佳，甘草酸和甘草苷的含量超過(guò)國(guó)家最低標(biāo)準(zhǔn)數(shù)倍。李成義等［11］報(bào)道了甘肅省金塔野生烏拉爾甘草（多年）中甘草酸和甘草苷的含量分別為6.85 %、4.39 %，栽培烏拉爾甘草（5年）甘草酸和甘草苷的含量分別為5.21 %和5.92 %。而本次測(cè)試中甘肅產(chǎn)烏拉爾甘草中甘草酸和甘草苷的含量卻僅為1.984 7 %和0.383 9 %，均沒(méi)有達(dá)到最低標(biāo)準(zhǔn)，可能是藥材并非出自甘肅，且生長(zhǎng)年限不夠所致。張澤生等［12］報(bào)道了新疆產(chǎn)十年以上甘草根主干部分甘草酸的含量為2.4 %，而本文所測(cè)新疆產(chǎn)甘草甘草酸的含量為3.283 7 %，高于文獻(xiàn)報(bào)道。李成義等［13］報(bào)道了甘肅金塔、內(nèi)蒙伊盟、寧夏靈武野生烏拉爾甘草中甘草酸的含量分別為6.85 %、4.80 %、1.80 %，甘草苷的含量分別為4.39 %、2.40 %、0.7 %，本次測(cè)試中內(nèi)蒙產(chǎn)甘草的數(shù)值略低于文獻(xiàn)報(bào)道，而寧夏產(chǎn)甘草的數(shù)值略高于文獻(xiàn)報(bào)道。雖然本次實(shí)驗(yàn)所用藥材除延安產(chǎn)烏拉爾甘草為本實(shí)驗(yàn)室實(shí)地采摘，其余均購(gòu)自網(wǎng)上，但除了甘肅產(chǎn)烏拉爾甘草外，其余產(chǎn)地的測(cè)試結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道相差不大，故本次測(cè)試的結(jié)果應(yīng)該是不同產(chǎn)地烏拉爾甘草的真實(shí)狀況。另外，甘草是以根入藥，本實(shí)驗(yàn)測(cè)試了延安產(chǎn)烏拉爾甘草莖中甘草酸和甘草苷的含量，結(jié)果顯示遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于國(guó)家的最低標(biāo)準(zhǔn)，故甘草莖不能作為甘草根的替代品。

近年來(lái)，隨著對(duì)甘草開(kāi)發(fā)利用的不斷深入，甘草的市場(chǎng)需求量劇增，野生甘草資源遭受了嚴(yán)重的破壞。據(jù)統(tǒng)計(jì)資料表明，建國(guó)初期全國(guó)甘草儲(chǔ)量約為200～250萬(wàn)噸，現(xiàn)有甘草儲(chǔ)量已下降到50～70萬(wàn)噸［14］。由于近幾十年的濫采亂挖和大面積墾荒，甘草資源不僅蘊(yùn)藏量逐年下降，經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量銳減，生態(tài)環(huán)境也遭到了極大的破壞，現(xiàn)存的野生甘草資源已無(wú)法滿足日益增長(zhǎng)的市場(chǎng)需求。延安土地廣袤、日照充足、黃土層深厚、晝夜溫差大，其野生藥材產(chǎn)量大、品質(zhì)好，有著極大的開(kāi)發(fā)潛力，且延安十年退耕還林，生態(tài)環(huán)境明顯改善，植被也得到了很好的恢復(fù)。中藥材經(jīng)濟(jì)的開(kāi)發(fā)有利于改善延安的原有經(jīng)濟(jì)模式，多方位、多角度、全面的調(diào)整延安的經(jīng)濟(jì)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)，為延安的經(jīng)濟(jì)快速、穩(wěn)步、可持續(xù)的發(fā)展提供契機(jī)。另外，延安地區(qū)大多數(shù)處于黃土高原的山區(qū)，地區(qū)經(jīng)濟(jì)發(fā)展很不平衡，尤其是邊遠(yuǎn)偏僻山區(qū)的經(jīng)濟(jì)一直處于落后狀態(tài)，中藥材經(jīng)濟(jì)的發(fā)展能夠兼顧全區(qū)不同地貌，使得邊遠(yuǎn)偏僻山區(qū)的經(jīng)濟(jì)走向良性發(fā)展的道路。內(nèi)蒙產(chǎn)甘草一直為甘草的道地藥材，而本次測(cè)試結(jié)果及文獻(xiàn)報(bào)道均顯示延安產(chǎn)甘草品質(zhì)優(yōu)于內(nèi)蒙產(chǎn)甘草。本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果為進(jìn)一步開(kāi)創(chuàng)延安品牌的野生藥材提供可能，為延安經(jīng)濟(jì)發(fā)展開(kāi)辟新的領(lǐng)域，調(diào)整延安產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)，促進(jìn)經(jīng)濟(jì)轉(zhuǎn)型，改變延安單一經(jīng)濟(jì)結(jié)構(gòu)模型，具有重要意義。