肺結(jié)核患者痰中結(jié)核分枝桿菌檢驗的臨床價值及有效發(fā)揮

顧秋花

【摘 要】目的：分析肺結(jié)核患者痰中結(jié)核分枝桿菌檢驗的臨床價值以及臨床應(yīng)用。方法：將本所于2017年1月至2020年12月接收治療的肺結(jié)核患者100例作為本次研究對象，分為觀察組（活動性肺結(jié)核）和對照組（非活動性肺結(jié)核），對比分析兩組患者結(jié)核分枝桿菌陽性率，并分析在改良羅氏培養(yǎng)方法、痰中分枝桿菌培養(yǎng)以及抗酸染色涂片培養(yǎng)三種檢測方式下結(jié)核分枝桿菌陽性率。結(jié)果：相較于對照組，觀察組結(jié)核分枝桿菌陽性率明顯更低，對比統(tǒng)計學(xué)差異明顯（P<0.05）；三組不同檢驗方式對比，改良羅氏培養(yǎng)方法以及抗酸染色涂片培養(yǎng)法檢驗出的結(jié)核分枝桿菌陽性率明顯更低于痰中分枝桿菌培養(yǎng)法，對比統(tǒng)計學(xué)差異明顯（P<0.05），改良羅氏培養(yǎng)方法以及抗酸染色涂片培養(yǎng)法之間結(jié)核分枝桿菌陽性率對比無明顯差異（P>0.05）。結(jié)論：在肺結(jié)核患者的臨床治療中，利用痰中結(jié)核分枝桿菌檢驗將更有利于提高患者結(jié)核分枝桿菌陽性率，同時，活動性肺結(jié)核患者的結(jié)核分枝桿菌陽性率更高于非活動性肺結(jié)核患者，可見，痰中結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)對肺結(jié)核患者的早期檢出和治療有重要意義。

【關(guān)鍵詞】肺結(jié)核；結(jié)核分枝桿菌；臨床價值

肺結(jié)核主要發(fā)生于肺組織、器官等部位，屬于乙類法定報告?zhèn)魅静?，具有較高的發(fā)病率和死亡率。結(jié)核分枝桿菌主要經(jīng)由空氣傳播，其能夠在不同的環(huán)境下發(fā)生變異，而變異后其能夠適應(yīng)不同的外界環(huán)境，因此，加強對肺結(jié)核患者的檢出率，提高對疾病傳染的控制和治療十分關(guān)鍵。痰中結(jié)核分枝桿菌檢驗是目前最有效的監(jiān)測方式，監(jiān)測時間較短，能夠提高結(jié)核分枝桿菌的發(fā)現(xiàn)率，為臨床醫(yī)師對肺結(jié)核患者的診治提供依據(jù)。改良羅氏培養(yǎng)方法以及抗酸染色涂片培養(yǎng)法也可用于結(jié)核分枝桿菌的檢驗，目前，三種檢測方式在患者疾病檢驗中的有效性仍存在爭議。對此，本次研究將本院收治的肺結(jié)核患者作為研究對象，分析結(jié)核分枝桿菌監(jiān)測結(jié)果，旨在為臨床醫(yī)師提供可靠的診治依據(jù)，詳見下文所示。

1 資料和方法

1.1一般資料

將本所于2017年1月至2020年12月接收治療的肺結(jié)核患者100例作為本次研究對象，分為觀察組（活動性肺結(jié)核）和對照組（非活動性肺結(jié)核），其中觀察組50例，男性27例，女性23例，年齡34歲～67歲，平均年齡（51.4±1.4）歲；對照組50例，男性30例，女性20例，年齡39歲～63歲，平均年齡（51.3±1.1）歲。所有患者均經(jīng)由臨床影像學(xué)、手術(shù)病理學(xué)檢查確診為肺結(jié)核者；取樣前患者均知情研究；排除患有其他嚴重傳染疾病者；排除精神異常、臨床資料不完整者。兩組患者年齡等資料對比無明顯差異（P>0.05）。

1.2 方法

所有患者均于晨間取痰液，進行改良羅氏培養(yǎng)方法、痰中分枝桿菌培養(yǎng)以及抗酸染色涂片培養(yǎng)檢測，檢測方式如下?？顾崛旧科谱鳎簩⑷犹狄喝∵m量放置在消毒完成后的玻璃片上涂片后進行抗酸染色，涂片時需注意將痰膜涂成厚薄均勻，使用熒光顯微鏡對檢查結(jié)果進行觀察。改良羅氏培養(yǎng)方法：將取樣痰液取適量放置在羅氏培養(yǎng)基上接種，涂片時需注意將痰膜涂成厚薄均勻，可幫助提高陽性檢出率，將其放置在37℃的恒溫下培養(yǎng)4周～8周時間，利用顯微鏡對其檢測結(jié)果進行判定。痰中分枝桿菌培養(yǎng)：將取樣痰液先經(jīng)由離心沉淀處理，將涂片內(nèi)剩余的致病菌進行培養(yǎng)后，將酚紅指示劑和氫氧化鈉加入配置2mL菌液的無菌試管中，搖勻，37℃條件下進行水浴加熱，時間控制為15min，隨后加入硫酸，調(diào)和溶液至中性，隨后進行離心沉淀，接種培養(yǎng)，進行涂片染色鏡檢。

1.3 觀察指標

對比分析兩組患者結(jié)核分枝桿菌陽性率，并分析在改良羅氏培養(yǎng)方法、痰中分枝桿菌培養(yǎng)以及抗酸染色涂片培養(yǎng)三種檢測方式下結(jié)核分枝桿菌陽性率。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 20.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析。計數(shù)資料采用（%）表示，進行χ2檢驗，計量資料采用（χ±s）表示，進行t檢驗，P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 分析兩組患者結(jié)核分枝桿菌陽性率

相較于對照組，觀察組結(jié)核分枝桿菌陽性率明顯更低，對比統(tǒng)計學(xué)差異明顯（P<0.05），見表1。

2.2 三種檢測方式下結(jié)核分枝桿菌陽性率

三組不同檢驗方式對比，改良羅氏培養(yǎng)方法以及抗酸染色涂片培養(yǎng)法檢驗出的結(jié)核分枝桿菌陽性率明顯更低于痰中分枝桿菌培養(yǎng)法，對比統(tǒng)計學(xué)差異明顯（P<0.05），改良羅氏培養(yǎng)方法以及抗酸染色涂片培養(yǎng)法之間結(jié)核分枝桿菌陽性率對比無明顯差異（P>0.05），見表2。

3 討論

一般情況下，健康群眾在接觸到帶有結(jié)核分枝桿菌的飛沫、物體等物品時可導(dǎo)致自身發(fā)生感染，從而進一步發(fā)展成為肺結(jié)核病，但結(jié)核分枝桿菌是否感染和發(fā)病還取決于人體自身的免疫力以及吸入結(jié)核分枝桿菌的數(shù)量以及毒力大小等因素相關(guān)。部分患者由于感染結(jié)核分枝桿菌后免疫系統(tǒng)并不能有效對其進行清除和抑制細菌功效，導(dǎo)致細菌在人體內(nèi)大量繁殖，引起肺部炎癥，出現(xiàn)咳嗽、咳痰等癥狀，并逐漸發(fā)展成為活動性肺結(jié)核，具有一定的傳染性[1]。肺活動性肺結(jié)核患者并無相關(guān)的臨床癥狀和體征，多數(shù)情況下細菌檢測均為陰性，通常經(jīng)由影像學(xué)檢查確診。結(jié)核分枝桿菌是1882年由德國細菌學(xué)家發(fā)現(xiàn)并提出證明的人類結(jié)核病的病原菌，可侵犯人體的全身器官，但多引起肺結(jié)核疾病，是全球細菌感染性疾病致死的主要原因之一。結(jié)核分枝桿菌屬于寄生菌，需要在人體的活細胞內(nèi)寄生才能夠生存下去，該種細菌可經(jīng)由呼吸道進入肺泡，在肺泡中不斷繁殖，在人體免疫力低下時發(fā)生病變。結(jié)核分枝桿菌屬于放線菌目，分枝桿菌可分為分枝桿菌均屬，包括人型、牛型、非洲型和鼠型四種。肺結(jié)核病致病菌約有90%以上的分枝桿菌均為人型結(jié)核分枝桿菌，較少部分患者為牛型以及非洲型分枝桿菌[2]。結(jié)核分枝桿菌多行性典型為細長稍彎曲、兩端圓形的桿菌，痰液標本中結(jié)核分枝桿菌多呈現(xiàn)多形性。研究發(fā)現(xiàn)，結(jié)核分枝桿菌具有一定的抗酸性，其抗酸顏色呈紅色，能夠抵抗鹽酸酒精的脫色作用。此外，結(jié)核分枝桿菌在細菌培養(yǎng)檢測方法中普遍生長較為緩慢，在人體中具有較高的抵抗能力，干燥的結(jié)核桿菌1年～2年仍有毒性，但易被太陽直射或紫外線直接殺死。因此，目前如何提高結(jié)核分枝桿菌檢測準確率，快速分型，并解決抗酸結(jié)核分枝桿菌的快速分離已經(jīng)成為臨床上關(guān)注的重點。

痰中分枝桿菌培養(yǎng)依據(jù)分枝桿菌對營養(yǎng)和代謝所需要的條件，能夠營造出一個有利于分枝桿菌生長，而抑制其他細菌生長的環(huán)境，達到分離的目的。根據(jù)分枝桿菌培養(yǎng)基的不同，主要分為固體和液體培養(yǎng)，固體培養(yǎng)方法用固體培養(yǎng)基，酸性培養(yǎng)基，利用分枝桿菌有較厚的細胞壁，具有耐受酸或者堿等特征[3]。目前在國內(nèi)目前主要用堿性消化液處理，因此檢測所用培養(yǎng)基主要以酸性培養(yǎng)基為主，在將堿性消化液采取處理措施后可直接將消化液接種在酸性培養(yǎng)基上，利用酸性培養(yǎng)基幫助中和堿性標本處理液，分枝桿菌即可在酸性培養(yǎng)基內(nèi)生長。液體培養(yǎng)基也需先進行處理，但主要用于自動化分枝桿菌的培養(yǎng)系統(tǒng)，通過儀器檢測的是分枝桿菌生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的化學(xué)信號等的變化，自動監(jiān)測結(jié)果。但痰中分枝桿菌培養(yǎng)檢測時間較長，接種后一般固體培養(yǎng)基要2周～4周出陽性報告，8周出陰性報告，而液體培養(yǎng)基1周～2周出陽性報告，6周出陰性報告，因此等待的時間較長[4]。此外，晨痰標本檢驗方式是目前臨床上最主要的結(jié)核分枝桿菌檢測方式，這主要是由于晨痰更容易獲得，且不容易受到污染，在睡眠中人體的咳痰反射減弱，痰液在呼吸道內(nèi)積累，清晨時更容易取出[5]。在以往的臨床檢驗中多采用抗酸染色涂片培養(yǎng)法，該種方式操作簡便，費用較低，在一定程度上減輕了患者的經(jīng)濟負擔(dān)，但是由于抗酸染色涂片培養(yǎng)法在檢測時，如同時出現(xiàn)多種菌落，該種檢測方式只能顯示數(shù)量最多的菌種，因此，該種檢測方式具有一定的局限性，敏感性較低[6]。改良羅氏培養(yǎng)法是分離培養(yǎng)肺結(jié)核分枝桿菌常用的培養(yǎng)基，在培養(yǎng)完成后將其放置在顯微鏡下觀察，能夠給予細菌足夠的營養(yǎng)成分，為其提供良好的氮源，以此提高結(jié)核分枝桿菌檢出率[7]。在臨床檢驗中，由于結(jié)核分枝桿菌屬于抗酸性桿菌，因此其所需要營養(yǎng)要求更高，在有利的生長條件下生長也較為緩慢，使用改良羅氏培養(yǎng)法進行培養(yǎng)時不僅較為麻煩，同時所需的時間更長。改良羅氏培養(yǎng)法是將結(jié)核菌接種在改良的羅氏培養(yǎng)基上，結(jié)核菌能夠?qū)ε囵B(yǎng)基中的天門冬酰胺進行選擇性的消耗，利用高效液相色譜儀對培養(yǎng)基中的天門冬酰胺消耗量進行觀察，如出現(xiàn)一定量消耗時則證明結(jié)核菌存在。

綜上所述，在肺結(jié)核患者的臨床治療中，利用痰中結(jié)核分枝桿菌檢驗將更有利于提高患者結(jié)核分枝桿菌陽性率，同時，活動性肺結(jié)核患者的結(jié)核分枝桿菌陽性率更高于非活動性肺結(jié)核患者，可見，痰中結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)對肺結(jié)核患者的早期檢出和治療有重要意義。

參考文獻

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