• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    補(bǔ)腎解毒通絡(luò)方阻止白血病復(fù)發(fā)機(jī)制的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析

    2021-10-09 08:53:40孫維龍許鑫欣陶霞施偉鵬竺佳范晨陽(yáng)李帝萱楊向東
    中醫(yī)藥信息 2021年6期
    關(guān)鍵詞:小鼠數(shù)據(jù)庫(kù)分析

    孫維龍,許鑫欣,陶霞,施偉鵬,竺佳,范晨陽(yáng),李帝萱,楊向東

    (天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院,國(guó)家中醫(yī)針灸臨床醫(yī)學(xué)研究中心,天津 300381)

    臨床中化療是成人急性白血?。ˋL)治療的主要選擇,但預(yù)后通常不容樂(lè)觀[1-2]。急性髓細(xì)胞性白血?。ˋML)和急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL)的長(zhǎng)期緩解率水平很低,尤其ALL 的長(zhǎng)期緩解率僅為30%~40%,化療后復(fù)發(fā)仍是困擾AL 治療的重要問(wèn)題[3-4]。在骨髓中,對(duì)造血干細(xì)胞(HSC)的增殖、分化、存活和歸巢起支持作用的最小解剖結(jié)構(gòu)是骨髓微環(huán)境(即龕)。這個(gè)微環(huán)境由骨細(xì)胞、血管周細(xì)胞、骨內(nèi)膜細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、巨噬細(xì)胞以及間充質(zhì)干細(xì)胞等共同構(gòu)成[5]。其中,間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)與HSC 的關(guān)系尤為密切,它可以通過(guò)物理支持和分泌可溶性因子來(lái)調(diào)控HSC 的維持和分化,是龕中的關(guān)鍵元素[6]。在白血病進(jìn)程中,白血病干細(xì)胞(LSC)會(huì)通過(guò)“劫持”作用將龕改造為適合LSC 生長(zhǎng)并改變HSC 功能的環(huán)境[7]。不同的細(xì)胞因子利用多種途徑實(shí)現(xiàn)了這種作用,并由此介導(dǎo)了LSC的動(dòng)員、歸巢和耐藥性,最終成為臨床復(fù)發(fā)的重要原因[8]。針對(duì)被“劫持”龕的治療,可能為治療白血病復(fù)發(fā)提供新的研究方向[9]。

    現(xiàn)代中醫(yī)藥作為中國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的發(fā)展和延伸,是我國(guó)臨床醫(yī)學(xué)的重要組成部分。癌癥的臨床治療中,中醫(yī)藥憑借增效減毒、預(yù)防復(fù)發(fā)、延長(zhǎng)生存時(shí)間等多方面的優(yōu)勢(shì),發(fā)揮著獨(dú)特的補(bǔ)充作用[10]。其中,補(bǔ)腎解毒通絡(luò)方對(duì)于延長(zhǎng)復(fù)發(fā)難治白血病患者生存周期的效果顯著[11]。在前期研究中,筆者證明了補(bǔ)腎解毒通絡(luò)方(BSJDTLF)對(duì)輻射后小鼠的MSC 具有修復(fù)作用,并能在MSC 與K562 細(xì)胞的共培養(yǎng)中下調(diào)白血病相關(guān)基因[12]。這為研究BSJDTLF 的藥理機(jī)制提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

    隨著實(shí)驗(yàn)技術(shù)與信息技術(shù)的發(fā)展,中醫(yī)藥的研究已經(jīng)從傳統(tǒng)的“單一藥物”“單一靶點(diǎn)”過(guò)渡到“多組分”“多靶點(diǎn)”的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究模式。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)在中藥靶點(diǎn)預(yù)測(cè)、生物活性化合物篩選、毒性評(píng)價(jià)、機(jī)制研究等方面發(fā)揮了巨大的作用,為中醫(yī)藥復(fù)方的研究提供了新的策略[13-14]。同時(shí),基于高通量測(cè)序技術(shù)的發(fā)展,蛋白組學(xué)、基因組學(xué)也越來(lái)越多參與疾病研究,尤其是腫瘤的研究中[15-16]。其中蛋白組學(xué)可以實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞和組織內(nèi)復(fù)雜的蛋白質(zhì)進(jìn)行全面的定性和定量分析,較為全面的覆蓋不同樣本中蛋白質(zhì)的變化關(guān)系[17]。因此,高通量蛋白組學(xué)可以從側(cè)面驗(yàn)證網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的篩選成果。在本研究中,筆者首先基于質(zhì)譜分析明確BSJDTLF 的化合物成分,再通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)與蛋白質(zhì)組學(xué)相結(jié)合的方法,研究BSJDTLF 與白血病之間的關(guān)系,并對(duì)其作用機(jī)制、靶點(diǎn)進(jìn)行預(yù)測(cè)。具體研究流程見圖1。

    圖1 研究分析的流程圖

    1 材料和方法

    1.1 BSJDTLF中化合物的鑒定

    1.1.1 BSJDTLF的藥物組成

    組方:全蝎10 g,僵蠶10 g,鹿角片15 g,龜甲15 g,白附子10 g,人參10 g,枸杞子10 g,滑石10 g,青黛5 g,甘草5 g。藥物來(lái)源于天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院中藥房。

    1.1.2 BSJDTLF的樣品制備

    取復(fù)方藥粉10 g加100 mL水煎煮30 min,煎煮后約得50 mL提取液,在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀45 ℃水浴上濃縮至一定體積后的復(fù)方濃縮液,將濃縮液放入培養(yǎng)皿中,在-80 ℃冰箱預(yù)冷凍后,放入凍干機(jī)至過(guò)夜凍干,取出凍干后的樣品密封保存待用。精確稱取10.00 mg 樣品至離心管中,加入1 mL 超純水溶解,離心(14 000 rpm/min,20 min,4 ℃),取上清液100 μL至進(jìn)樣小瓶中,以超純水作為空白溶劑,進(jìn)樣。

    1.1.3 質(zhì)譜條件

    質(zhì)譜分析在Thermo Fisher Q-Orbitrap MS(QExative)系統(tǒng)下完成,離子源為高能電噴霧離子源(HESI 源),掃描模式為Full-ms/ dd-ms2,正負(fù)離子模式下同時(shí)采集。源參數(shù):源噴霧電壓(spray voltage)正離子為3.5 kV,負(fù)離子為2.8 kV,毛細(xì)管溫度(capillary temperature)320 ℃,離子源加熱溫度(probe heater temperature)350 ℃,鞘氣(sheath gas,N2)為35,輔助氣(auxiliary gas,N2)為10,S-lens 水平為50 V,碰撞能量為20、40、60 V,掃描范圍為m/z 100~1 500,分辨率為70 000。

    1.1.4 質(zhì)譜儀器

    超高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀UHPLC-/ESI-QOrbitrap MS(美國(guó)Thermo Fisher Scientific);3K15 型高速離心機(jī)(美國(guó)Sigma 公司);KQ-250E 型超聲波清洗儀(昆山市超聲儀器有限公司);AX 205 型十萬(wàn)分之一天平(瑞士Mettler Toledo 公司);BP121S 型萬(wàn)分之一天平(德國(guó)Sartorius 公司);XW-80A 型渦旋混合器(上海滬西分析儀器廠);日本東京理化EYELA 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀DPE-2150(山東愛博科技貿(mào)易有限公司)。

    1.1.5 數(shù)據(jù)處理與分析

    將采集到的原始數(shù)據(jù)利用Xcalibur(4.2,Thermo-Fisher Scientific)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)記錄、分析及處理,化合物的鑒定是基于文獻(xiàn)基礎(chǔ),根據(jù)化合物的質(zhì)荷比、二級(jí)碎片進(jìn)行。

    1.2 化合物相關(guān)靶點(diǎn)的收集

    質(zhì)譜結(jié)果中化合物的相關(guān)靶點(diǎn)是在TCMSP(https://tcmspw.com/tcmsp.php)與CTD(http://ctdbase.org/)兩個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)檢索得到的。檢索結(jié)果通過(guò)Uniprot(https://www.uniprot.org/)數(shù)據(jù)庫(kù)統(tǒng)一為基因名稱。并對(duì)統(tǒng)一名稱后的靶點(diǎn)與化合物對(duì)應(yīng)關(guān)系進(jìn)行了合并,并刪除了重復(fù)項(xiàng)。

    1.3 已知白血病相關(guān)靶點(diǎn)的收集

    通過(guò)“l(fā)eukemia”為關(guān)鍵詞在NCBI(https://www.ncbi. nlm. nih. gov/gene/)于GENE CARD(https://www.genecards. org/)兩個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行了搜索,去除了搜索結(jié)果中的重復(fù)基因,整合了兩個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)共有的2 864個(gè)靶點(diǎn)。

    1.4 蛋白質(zhì)組學(xué)

    實(shí)驗(yàn)中的蛋白質(zhì)組學(xué)測(cè)定是委托天津舍維斯生物技術(shù)有限公司進(jìn)行(項(xiàng)目編號(hào):QLSWS003-20190614001),采用了由ABSCIEX公司研發(fā)的iTRAQ技術(shù)。

    1.5 GO、KEGG和關(guān)鍵子網(wǎng)絡(luò)的分析

    首先使用STRING(https://string-db.org/)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行了PPI 分析,并得到了相關(guān)靶點(diǎn)的功能和通路富集。隨后,將PPI 關(guān)系導(dǎo)入Cytoscape 3.7.1 中進(jìn)行了網(wǎng)絡(luò)圖的繪制,使用MCODE 插件對(duì)其核心子網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行篩選。

    1.6 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

    7 周 齡 的 雄 性BALB/c 小 鼠,SPF 級(jí),體 質(zhì) 量(22±2)g,北京華阜康科技股份有限公司,許可證編號(hào)SCXK-20190008。飼養(yǎng)于中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所動(dòng)物中心SPF級(jí)屏障內(nèi),給予常規(guī)飲食,定期更換墊料。

    1.7 分組及給藥方法

    采用隨機(jī)分組法分為給藥組與對(duì)照組(n=6),給藥組給予BSJDTLF(以10 g/50 mL 的濃度制作水煎劑)灌胃,每天1 次,每次0.2 mL。對(duì)照組給予生理鹽水(NS)灌胃每天1 次,每次0.2 mL。4 周后統(tǒng)一處死小鼠,并提取MSC。

    1.8 小鼠MSC的提取和培養(yǎng)

    在無(wú)菌條件下從小鼠骨髓中提取髓內(nèi)細(xì)胞,使用針對(duì)小鼠MSC 的選擇培養(yǎng)液MesenCult 套裝(STEMCELL CAT#05513)配合貼壁法對(duì)MSC 進(jìn)行純化培養(yǎng)。所用MSC均遵照以上方法進(jìn)行了3次傳代。

    2 結(jié)果

    2.1 BSJDTLF中化合物的鑒定

    BSJDTLF 的水溶液10 g/50 mL,經(jīng)過(guò)濃縮、凍干制取上機(jī)樣本。隨后使用超高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀對(duì)樣本進(jìn)行檢測(cè)。將采集到的原始數(shù)據(jù)利用Xcalibur(4.2,Thermo-Fisher Scientific)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)記錄、分析及處理。其中化合物的鑒定是基于文獻(xiàn)的基礎(chǔ),根據(jù)化合物的質(zhì)荷比、二級(jí)碎片進(jìn)行的。通過(guò)準(zhǔn)確的分子離子質(zhì)量及二級(jí)碎片進(jìn)行分析,數(shù)據(jù)精度誤差閾值在5 ppm以內(nèi),共鑒定出182個(gè)化合物,鑒定結(jié)果見圖2。

    圖2 正、負(fù)離子模式下的水提物總離子流圖

    2.2 BSJDTLF中化合物的靶點(diǎn)

    使用TCMSP與CTD數(shù)據(jù)庫(kù)[18],在數(shù)據(jù)庫(kù)中檢索與質(zhì)譜結(jié)果中182個(gè)化合物相關(guān)的靶點(diǎn),將這些靶點(diǎn)結(jié)果通過(guò)Uniprot及DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)統(tǒng)一為基因名稱。去除重復(fù)項(xiàng)后,共得到與其中100種化合物相關(guān)的1 969個(gè)靶點(diǎn)。

    2.3 BSJDTLF與白血病相關(guān)靶點(diǎn)的篩選

    以“l(fā)eukemia”為關(guān)鍵字,分別在NCBI GENE 與GENE CARD 數(shù)據(jù)庫(kù)中檢索,其中,在NCBI 中檢索到29 693 個(gè)結(jié)果,在GENE CARD 檢索到15 655 個(gè)結(jié)果。為了增強(qiáng)疾病與基因的相關(guān)性,筆者對(duì)兩個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)的檢索結(jié)果進(jìn)行了交集比對(duì),再去除重復(fù)項(xiàng)后,共得到了2 864個(gè)共有靶點(diǎn)作為白血病相關(guān)靶點(diǎn)使用。隨后,將在TCMSP與CTD數(shù)據(jù)庫(kù)得到的BSJDTLF中化合物相關(guān)基因(1 969個(gè))與2 864個(gè)白血病相關(guān)靶點(diǎn)進(jìn)行比對(duì),共篩選到了623個(gè)靶點(diǎn)。這些靶點(diǎn)可能揭示BSJDTLF 作用于白血病、延緩復(fù)發(fā)的具體機(jī)制。見圖3。

    圖3 BSJDTLF中化合物1 969個(gè)靶點(diǎn)與NCBI和GENE CARD中白血病相關(guān)基因的交集

    2.4 BSJDTLF給藥小鼠MSC的蛋白質(zhì)組學(xué)分析

    通過(guò)質(zhì)譜與數(shù)據(jù)庫(kù)分析篩選到了623 個(gè)BSJDTLF作用于白血病的可能靶點(diǎn)。但是這種基于已有實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)庫(kù)分析可能存在偏差,為了進(jìn)一步驗(yàn)證BSJDTLF對(duì)于MSC 的作用關(guān)系,本研究采用iTRAQ(isobaric tagsf or relative and absolute quantitation)技 術(shù) 對(duì)BSJDTLF 灌胃小鼠及NS 灌胃小鼠的MSC 進(jìn)行了蛋白質(zhì)組學(xué)分析,以明確其產(chǎn)生差異的靶點(diǎn)。iTRAQ 是一種相對(duì)和絕對(duì)定量的高通量分析方法,目前被廣泛的運(yùn)用到癌癥,尤其是白血病的研究中[19-20]。

    將未經(jīng)處理的7 周齡BALB/c 小鼠隨機(jī)分為兩組(n=6),分別給予BSJDTLF 和NS灌胃(0.2 mL/d)。給藥28 d 后,處死小鼠并提取骨髓細(xì)胞,使用選擇培養(yǎng)液,通過(guò)貼壁法對(duì)小鼠的MSC 進(jìn)行了選擇性擴(kuò)增。在得到滿足蛋白質(zhì)組學(xué)實(shí)驗(yàn)所需數(shù)量的細(xì)胞后,使用iTRAQ 技術(shù)將兩組樣本進(jìn)行了高通量蛋白質(zhì)組學(xué)測(cè)定。對(duì)兩組的蛋白質(zhì)組學(xué)數(shù)據(jù)進(jìn)行比對(duì)后,共得到了728 個(gè)差異蛋白(差異性>1.2)。這些差異蛋白為進(jìn)一步分析BSJDTLF 作用于白血病的潛在靶點(diǎn)提供了實(shí)驗(yàn)證據(jù)。

    2.5 BSJDTLF潛在靶點(diǎn)的分析

    將數(shù)據(jù)庫(kù)中BSJDTLF 與白血病相關(guān)的623 個(gè)靶點(diǎn)同蛋白組學(xué)產(chǎn)生差異的728 個(gè)蛋白進(jìn)行了比對(duì)、分析。再去除重復(fù)結(jié)果后,共得到了50 個(gè)共表達(dá)的基因(見圖4)。這50 個(gè)共表達(dá)基因可能成為揭示BSJDTLF 作用途徑的潛在靶點(diǎn)。在篩選出補(bǔ)腎解毒的潛在靶點(diǎn)后,通過(guò)STRING 對(duì)這些靶點(diǎn)進(jìn)行了PPI 與功能、通路的富集分析,隨后使用Cytoscape 對(duì)個(gè)網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行了優(yōu)化。見圖5。

    圖4 數(shù)據(jù)庫(kù)、疾病相關(guān)基因、蛋白質(zhì)組學(xué)的結(jié)果進(jìn)行交集比對(duì)圖

    圖5 50個(gè)潛在靶點(diǎn)的PPI網(wǎng)絡(luò)圖

    通過(guò)Cytoscape,同時(shí)也構(gòu)建出了這50個(gè)潛在靶點(diǎn)與BSJDTLF 中化合物的關(guān)系,這些靶點(diǎn)共與29種化合物相對(duì)應(yīng)。見圖6。

    圖6 潛在靶點(diǎn)與相關(guān)化合物的網(wǎng)絡(luò)圖

    此外,本研究還使用STRING 對(duì)潛在靶點(diǎn)進(jìn)行了GO 條目下功能注釋的富集分析。從細(xì)胞組分(cellular component,CC)、分 子 功 能(molecular function,MF)、生物過(guò)程(biological process,BP)三個(gè)部分描繪了潛在靶點(diǎn)的功能富集(見圖7)。在這三個(gè)方面本研究著重于BP 部分的功能富集,其中在“strength”值排名前15 的條目中包含了腫瘤壞死因子產(chǎn)生、調(diào)控 及 自噬細(xì) 胞 相關(guān)(GO:0032640、GO:1903265、GO:0048102)。見表1。

    表1 功能富集中與生物過(guò)程有關(guān)的排名前15的條目

    圖7 潛在靶點(diǎn)的功能富集分析圖

    在KEGG通路富集分析中,選取了排名前15的通路,錯(cuò)誤發(fā)生率(false discovery rate)均<0.01。通路中包含了與慢性白血?。╩mu05220)、凋亡(mmu04215)、急性白血病(mmu05221)、VEGF(mmu04370)相關(guān)的通路。見表2。

    表2 通路富集中排名前15的KEGG通路

    2.6 潛在靶點(diǎn)K-Core核的分析

    選取Cytoscape3.7.1 中的MCODE 插件對(duì)50 個(gè)潛在靶點(diǎn)進(jìn)行K-Core 分析。K-Core 是一種分解相互作用的網(wǎng)絡(luò)關(guān)系的拓?fù)浞治?,可以在?fù)雜的網(wǎng)絡(luò)關(guān)系結(jié)構(gòu)中尋找到重要的節(jié)點(diǎn)[21]。在置信度>15,KCore為2的條件下,篩選出了潛在靶點(diǎn)PPI網(wǎng)絡(luò)中的核心子網(wǎng)絡(luò)(見圖8)。這個(gè)核心子網(wǎng)絡(luò)中,包含了10 個(gè)靶點(diǎn):Mmp2、Stmn1、Icam1、Creb1、App、Alb、Cdk1、Dnmt1、Fth1、Rela。通過(guò)中心性計(jì)算,Icam1、Alb、Rela 三個(gè)靶點(diǎn)的中介中心性最高。這個(gè)核心子網(wǎng)絡(luò)中的節(jié)點(diǎn),尤其是Icam1、Alb、Rela 及相關(guān)基因可能是BSJDTLF的作用靶點(diǎn)。

    圖8 50個(gè)潛在靶點(diǎn)的K-Core

    3 討論

    在本研究中,首先通過(guò)液相色譜質(zhì)譜分析BSJDTLF 中的化學(xué)成分,共發(fā)現(xiàn)182 種化合物。在TCMSP 和CTD 中將這些化合物的靶點(diǎn)進(jìn)行檢索,得到了與之相關(guān)的1 969個(gè)靶點(diǎn)。將1 969個(gè)靶點(diǎn)與白血病相關(guān)靶點(diǎn)和蛋白質(zhì)組學(xué)的差異蛋白進(jìn)行了比對(duì),篩選出50 個(gè)潛在靶點(diǎn)。最后,對(duì)這些潛在靶點(diǎn)進(jìn)行了功能富集、通路富集、PPI和K-Core方面的數(shù)據(jù)分析。

    在功能富集分析中,首先著重于BP 部分的內(nèi)容。此部分排名前15 的條目中,發(fā)現(xiàn)了與腫瘤壞死因子(TNF)相關(guān)的富集(GO:0032640、GO:1903265)。TNF被證明與白血病的關(guān)系密切,它參與白血病發(fā)生的所有步驟,包括細(xì)胞轉(zhuǎn)化、增殖、血管生成和髓外浸潤(rùn)[22]。尤其在白血病干細(xì)胞(LSC)對(duì)骨髓微環(huán)境的改造中,TNF 與其他因子共同誘導(dǎo)了MSC 的改變[23]。抑制TNF-1α 的表達(dá)可以增強(qiáng)化療對(duì)白血病干細(xì)胞的作用,減少耐藥性,因此TNF 可以作為白血病治療的靶點(diǎn)[24]。在中醫(yī)藥的有關(guān)研究中,有證據(jù)表明人參皂苷可以對(duì)白血病細(xì)胞的TNF 產(chǎn)生影響,從而抑制LSC 的增殖[25]。

    在KEGG 分析中,除去慢性白血病(mmu05220)、急性白血病(mmu05221)的相關(guān)通路,VEGF 信號(hào)通路(mmu04370)也應(yīng)引起重視。在非腫瘤化的龕中,VEGF 參與介導(dǎo)MSC 的增殖與分化,對(duì)機(jī)體的功能修復(fù)起到正向作用[26-27]。然而在被白細(xì)胞作用的微環(huán)境中,VEGF 產(chǎn)生了異常的上調(diào)[28]。這種上調(diào)介導(dǎo)的血管重塑構(gòu)建了針對(duì)HSC 的“陷阱”,使得MSC 對(duì)HSC 的支持作用減弱,同時(shí)又保護(hù)了LSC 免于化療殺傷[29]。而對(duì)于VEGF 的靶向治療大多數(shù)基于已有藥物的聯(lián)合用藥[30-31]。這些藥物雖然可以抑制白血病中VEGF 的分泌,延長(zhǎng)了患者的生存時(shí)間[32]。但是,針對(duì)VEGF 的靶向藥物或減緩聯(lián)合用藥副作用的研究仍有很大的空間[32]。

    在PPI分析中,使用K-Core對(duì)潛在靶點(diǎn)互作網(wǎng)絡(luò)的核心子網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行了篩選,這個(gè)子網(wǎng)絡(luò)共包含了10 個(gè)節(jié) 點(diǎn):Mmp2、Stmn1、Icam1、Creb1、App、Alb、Cdk1、Dnmt1、Fth1、Rela。其中,Icam1、Rela 是兩個(gè)中介中心節(jié)點(diǎn)。Icam1(即CD54),可被IL-1 和TNF 誘導(dǎo),并被巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞表達(dá)[33-34]。在白血病中,Icam1 也被證實(shí)與白血病細(xì)胞對(duì)龕的改造相關(guān),白血病細(xì)胞會(huì)分泌刺激因子增強(qiáng)Icam1 的分泌水平,從而促進(jìn)其與龕的黏附[35]。但是,針對(duì)Icam1 的靶向治療研究進(jìn)展并不順利,這源于其在正常的龕和腫瘤化的龕中扮演的不同角色[36]。Rela(p65)是NF-κB的結(jié)合因子,在研究中被證明與MSC 的增殖、分化關(guān)系密切[37]。在癌癥環(huán)境下,Rela 的激活可以促進(jìn)MSC 的腫瘤化[38]。白血病的臨床治療中,伊馬替尼耐藥白血病細(xì)胞內(nèi)的Rela 的表達(dá)水平明顯上調(diào)[39]。針對(duì)Rela的靶向治療可能為白血病提供一種新的治療方案[40]。此外,也有文獻(xiàn)報(bào)道在急性白血病中Rela 與TNF 存在高度相關(guān)性[41]。這與筆者在功能富集分析結(jié)果中出現(xiàn)TNF的相關(guān)條目相對(duì)應(yīng)。

    相關(guān)實(shí)驗(yàn)文獻(xiàn)驗(yàn)證了筆者篩選的潛在靶點(diǎn)與白血病的相關(guān)性以及在白血病治療中的潛在價(jià)值。針對(duì)疾病多靶點(diǎn)的調(diào)控研究是近年來(lái)中醫(yī)藥研究的主要方向之一,在多種癌癥的治療方面取得了進(jìn)展[42-43]。同時(shí),中藥在疾病中的雙向調(diào)節(jié)作用也被越來(lái)越多的研究證明[44]。中藥的雙向調(diào)節(jié)作用是否會(huì)在多靶點(diǎn)的調(diào)控中發(fā)揮獨(dú)特的作用,這種調(diào)節(jié)能否運(yùn)用到白血病的治療中?這為今后的研究提出了方向。

    綜上所述,本研究通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)與蛋白組學(xué)相結(jié)合的方法,從理論和實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證方面篩選出了BSJDTLF 的潛在靶點(diǎn)。還通過(guò)文獻(xiàn)挖掘,分析結(jié)果中的功能富集、通路富集和PPI 節(jié)點(diǎn)在白血病中的作用。這些研究為進(jìn)一步揭示BSJDTLF 的作用機(jī)制提供了科學(xué)依據(jù)。在后續(xù)的研究中,筆者將利用白血病小鼠模型對(duì)篩選出的潛在結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證。

    4 結(jié)論

    本研究使用來(lái)自多個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)的BSJDTLF 相關(guān)靶標(biāo)以及通過(guò)Cytoscape 構(gòu)建了中藥復(fù)方化合物-靶點(diǎn)-疾病的關(guān)系網(wǎng)絡(luò),篩選網(wǎng)絡(luò)中的關(guān)鍵節(jié)點(diǎn),預(yù)測(cè)了補(bǔ)腎解毒通絡(luò)方阻止白血病復(fù)發(fā)的具體機(jī)制,為進(jìn)一步的研究提供了科學(xué)基礎(chǔ)。

    猜你喜歡
    小鼠數(shù)據(jù)庫(kù)分析
    隱蔽失效適航要求符合性驗(yàn)證分析
    小鼠大腦中的“冬眠開關(guān)”
    電力系統(tǒng)不平衡分析
    電子制作(2018年18期)2018-11-14 01:48:24
    米小鼠和它的伙伴們
    數(shù)據(jù)庫(kù)
    電力系統(tǒng)及其自動(dòng)化發(fā)展趨勢(shì)分析
    數(shù)據(jù)庫(kù)
    數(shù)據(jù)庫(kù)
    數(shù)據(jù)庫(kù)
    加味四逆湯對(duì)Con A肝損傷小鼠細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用
    少妇的逼好多水| 久久这里有精品视频免费| 国产午夜精品一二区理论片| 日韩一本色道免费dvd| 亚洲国产精品sss在线观看| 久久精品综合一区二区三区| 亚洲国产最新在线播放| 国产综合懂色| 国产一区二区三区综合在线观看 | 亚洲av在线观看美女高潮| 日韩成人伦理影院| 亚洲成人精品中文字幕电影| 超碰av人人做人人爽久久| 最近的中文字幕免费完整| 国产乱人偷精品视频| 国产精品不卡视频一区二区| 亚洲精品自拍成人| 亚洲最大成人av| 亚洲四区av| 久久久久久久久久久丰满| 国产伦一二天堂av在线观看| 免费看光身美女| 国产又色又爽无遮挡免| 国产色爽女视频免费观看| 婷婷色av中文字幕| a级毛色黄片| 久热久热在线精品观看| 精品人妻一区二区三区麻豆| 国产一区有黄有色的免费视频 | 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 麻豆久久精品国产亚洲av| 久久久亚洲精品成人影院| 亚洲乱码一区二区免费版| av播播在线观看一区| 七月丁香在线播放| 国产精品精品国产色婷婷| 亚洲四区av| 真实男女啪啪啪动态图| 熟女电影av网| 亚洲av.av天堂| videossex国产| av线在线观看网站| 亚洲电影在线观看av| 亚洲国产av新网站| 国产在视频线精品| 国产高清三级在线| 欧美精品一区二区大全| 国产视频首页在线观看| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 久久热精品热| 国产精品一区二区在线观看99 | 肉色欧美久久久久久久蜜桃 | 免费av观看视频| 亚洲在久久综合| 搞女人的毛片| h日本视频在线播放| 国产精品久久久久久久电影| 国产乱人视频| 国产 一区精品| 亚洲国产精品专区欧美| 丰满人妻一区二区三区视频av| 亚洲国产欧美人成| 天美传媒精品一区二区| 一二三四中文在线观看免费高清| 好男人在线观看高清免费视频| 久久人人爽人人片av| 亚洲国产精品国产精品| 九草在线视频观看| 亚洲美女视频黄频| 好男人在线观看高清免费视频| 国产探花在线观看一区二区| 国产极品天堂在线| 欧美zozozo另类| 亚洲国产成人一精品久久久| 看免费成人av毛片| 26uuu在线亚洲综合色| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 国产成人精品一,二区| 永久网站在线| 国产精品一区二区三区四区久久| 久99久视频精品免费| 日韩电影二区| 亚洲精品国产av蜜桃| 国产精品熟女久久久久浪| 男女那种视频在线观看| 日本黄大片高清| 国产亚洲91精品色在线| 一级黄片播放器| 欧美高清成人免费视频www| 蜜臀久久99精品久久宅男| 淫秽高清视频在线观看| 中文字幕制服av| 大香蕉久久网| 亚洲av男天堂| 国产黄色视频一区二区在线观看| 国产成人freesex在线| 日本色播在线视频| 两个人视频免费观看高清| 老司机影院成人| 午夜福利视频1000在线观看| 亚洲欧美精品专区久久| 国产精品无大码| 日本wwww免费看| 久久久久久久午夜电影| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 亚洲va在线va天堂va国产| 亚洲精品第二区| 一级av片app| 国产高清三级在线| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 国产免费一级a男人的天堂| 美女大奶头视频| 亚洲av福利一区| 久久6这里有精品| 人妻少妇偷人精品九色| 欧美成人午夜免费资源| 欧美日本视频| 久久久久久久久久久免费av| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 一个人免费在线观看电影| 嘟嘟电影网在线观看| 成年版毛片免费区| 我的女老师完整版在线观看| 亚洲人与动物交配视频| 搞女人的毛片| 亚洲精品视频女| 国产亚洲5aaaaa淫片| 成人性生交大片免费视频hd| 午夜精品一区二区三区免费看| 国产av码专区亚洲av| 26uuu在线亚洲综合色| 激情 狠狠 欧美| 日韩 亚洲 欧美在线| 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | 高清在线视频一区二区三区| 国产精品久久久久久久久免| 国产一区有黄有色的免费视频 | 中文资源天堂在线| 成人二区视频| 亚洲人成网站高清观看| 内射极品少妇av片p| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 高清午夜精品一区二区三区| 22中文网久久字幕| 少妇被粗大猛烈的视频| 日韩av不卡免费在线播放| 久久久久精品久久久久真实原创| 日韩欧美精品v在线| 亚洲国产欧美在线一区| 国产精品嫩草影院av在线观看| 天堂俺去俺来也www色官网 | 久久99精品国语久久久| 久久韩国三级中文字幕| 国产一区有黄有色的免费视频 | 国产亚洲精品久久久com| 波多野结衣巨乳人妻| 亚洲自拍偷在线| 好男人视频免费观看在线| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | 尾随美女入室| 日韩大片免费观看网站| 国产69精品久久久久777片| 岛国毛片在线播放| 久久久久久久午夜电影| 日韩欧美国产在线观看| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 久久精品久久精品一区二区三区| 中文字幕久久专区| 国产一区二区在线观看日韩| 最近2019中文字幕mv第一页| 最近中文字幕2019免费版| 国产成人福利小说| 亚洲人成网站在线播| 色网站视频免费| 国产黄a三级三级三级人| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 啦啦啦中文免费视频观看日本| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 精品国内亚洲2022精品成人| 婷婷色综合大香蕉| 成人av在线播放网站| 特级一级黄色大片| 国产成人91sexporn| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 亚洲色图av天堂| 亚洲av成人av| 国产91av在线免费观看| 午夜日本视频在线| 2021少妇久久久久久久久久久| 看黄色毛片网站| 黄片wwwwww| 男人和女人高潮做爰伦理| kizo精华| 国产成年人精品一区二区| a级毛色黄片| 久久久久久久久久人人人人人人| 一级二级三级毛片免费看| 九九爱精品视频在线观看| 人妻夜夜爽99麻豆av| 一夜夜www| 久久久久久久亚洲中文字幕| 男人舔女人下体高潮全视频| 亚洲成人久久爱视频| 亚洲在久久综合| 亚州av有码| 啦啦啦啦在线视频资源| 国产精品综合久久久久久久免费| 美女内射精品一级片tv| 日韩一区二区视频免费看| 婷婷色综合大香蕉| 人妻系列 视频| 人体艺术视频欧美日本| 成人漫画全彩无遮挡| 又爽又黄a免费视频| 日韩精品青青久久久久久| 国产高清有码在线观看视频| 少妇的逼水好多| 26uuu在线亚洲综合色| 久久久久网色| 欧美日韩综合久久久久久| 亚洲av成人av| 日韩欧美精品免费久久| 亚洲精品国产av成人精品| 亚洲精品日韩av片在线观看| 国产成人免费观看mmmm| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 特大巨黑吊av在线直播| 一个人看视频在线观看www免费| 欧美精品一区二区大全| 亚洲av免费在线观看| 男插女下体视频免费在线播放| 别揉我奶头 嗯啊视频| h日本视频在线播放| 亚洲欧洲国产日韩| 好男人视频免费观看在线| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 精品国产露脸久久av麻豆 | 天美传媒精品一区二区| 欧美 日韩 精品 国产| 久久久久国产网址| 精品国产三级普通话版| 久久韩国三级中文字幕| 极品少妇高潮喷水抽搐| 亚洲欧美精品自产自拍| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 婷婷色综合www| 欧美高清成人免费视频www| 久久久久久久久大av| 麻豆av噜噜一区二区三区| 亚洲电影在线观看av| 日本爱情动作片www.在线观看| 成年女人在线观看亚洲视频 | 一级毛片我不卡| 亚洲性久久影院| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 国产91av在线免费观看| 精品人妻视频免费看| 精品欧美国产一区二区三| 色综合色国产| 观看美女的网站| 日韩一区二区视频免费看| 久久久久久伊人网av| 亚洲成人一二三区av| 边亲边吃奶的免费视频| 在现免费观看毛片| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 国产黄色小视频在线观看| 欧美一级a爱片免费观看看| 3wmmmm亚洲av在线观看| 一级av片app| 男女边摸边吃奶| 午夜福利视频1000在线观看| 最近中文字幕2019免费版| 嫩草影院新地址| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 亚洲自偷自拍三级| 国产大屁股一区二区在线视频| 亚洲成人中文字幕在线播放| 免费黄色在线免费观看| 国产高潮美女av| av国产久精品久网站免费入址| 亚洲在久久综合| av一本久久久久| 一级爰片在线观看| 美女国产视频在线观看| 亚洲精品一区蜜桃| 亚洲av成人精品一二三区| 国产乱来视频区| 国产高潮美女av| 18禁在线播放成人免费| 亚洲精品一区蜜桃| 亚洲怡红院男人天堂| 99热6这里只有精品| 身体一侧抽搐| 国产精品嫩草影院av在线观看| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 亚洲精品,欧美精品| 成人av在线播放网站| 一个人看视频在线观看www免费| 国产不卡一卡二| a级毛色黄片| 久久热精品热| 亚洲成人久久爱视频| 国产一级毛片七仙女欲春2| 天天躁日日操中文字幕| 黄色一级大片看看| 一区二区三区四区激情视频| 亚洲在久久综合| 激情 狠狠 欧美| 午夜免费观看性视频| 美女黄网站色视频| av在线老鸭窝| 最近最新中文字幕免费大全7| 亚洲av不卡在线观看| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 在线免费十八禁| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 久久久久久久亚洲中文字幕| 97超视频在线观看视频| 天堂影院成人在线观看| 我的女老师完整版在线观看| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 国产不卡一卡二| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 国产精品一区www在线观看| 全区人妻精品视频| 免费观看的影片在线观看| 日韩国内少妇激情av| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 国国产精品蜜臀av免费| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 精品久久国产蜜桃| 国产单亲对白刺激| 亚洲精品日韩av片在线观看| 极品教师在线视频| 3wmmmm亚洲av在线观看| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 久久国产乱子免费精品| 亚洲av不卡在线观看| 国产 一区精品| 国产精品一二三区在线看| 日韩精品青青久久久久久| 99久久精品国产国产毛片| 九九在线视频观看精品| 亚洲va在线va天堂va国产| 在线a可以看的网站| 69av精品久久久久久| 久久精品国产亚洲av涩爱| 嫩草影院精品99| 人人妻人人看人人澡| 夫妻午夜视频| 午夜免费观看性视频| 高清av免费在线| 夜夜爽夜夜爽视频| 午夜激情久久久久久久| 午夜免费观看性视频| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 免费少妇av软件| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 91午夜精品亚洲一区二区三区| 国产人妻一区二区三区在| av在线蜜桃| 亚洲av免费高清在线观看| 九九在线视频观看精品| 毛片女人毛片| 精品一区二区三区人妻视频| 久久久久精品性色| ponron亚洲| 男人爽女人下面视频在线观看| 日本黄大片高清| 五月天丁香电影| av在线蜜桃| 国产片特级美女逼逼视频| 两个人的视频大全免费| 国产美女午夜福利| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 国产精品国产三级国产专区5o| 国产极品天堂在线| 嘟嘟电影网在线观看| 哪个播放器可以免费观看大片| 成人二区视频| 哪个播放器可以免费观看大片| 麻豆成人午夜福利视频| 中文资源天堂在线| 在线免费观看的www视频| 国产精品熟女久久久久浪| 少妇的逼水好多| 色综合亚洲欧美另类图片| 韩国av在线不卡| 成人亚洲欧美一区二区av| 精品一区在线观看国产| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 亚洲av国产av综合av卡| 久久午夜福利片| 人妻一区二区av| av一本久久久久| 黄色欧美视频在线观看| 久久久久精品久久久久真实原创| 亚洲欧美一区二区三区国产| 老司机影院毛片| 偷拍熟女少妇极品色| 青春草视频在线免费观看| 又大又黄又爽视频免费| 日韩一区二区三区影片| 三级国产精品欧美在线观看| 日韩av在线大香蕉| 亚洲精品一二三| 一级毛片电影观看| 内射极品少妇av片p| av在线播放精品| 99久久九九国产精品国产免费| 毛片一级片免费看久久久久| 亚洲电影在线观看av| 亚洲精品日本国产第一区| ponron亚洲| 一级黄片播放器| 亚洲自拍偷在线| 晚上一个人看的免费电影| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 国产色爽女视频免费观看| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 久久久精品免费免费高清| 乱人视频在线观看| 99久久九九国产精品国产免费| 国产精品久久视频播放| 日本黄大片高清| 国产麻豆成人av免费视频| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 一级av片app| 婷婷六月久久综合丁香| 黄色欧美视频在线观看| 舔av片在线| 免费看光身美女| 美女内射精品一级片tv| 精品一区二区三区人妻视频| a级毛色黄片| 3wmmmm亚洲av在线观看| 最近最新中文字幕大全电影3| 精品午夜福利在线看| 日韩一区二区视频免费看| 国产精品精品国产色婷婷| 欧美激情久久久久久爽电影| 在线观看免费高清a一片| 高清午夜精品一区二区三区| 国产美女午夜福利| 亚洲成人中文字幕在线播放| 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | 丝瓜视频免费看黄片| 亚洲av免费在线观看| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 日本免费a在线| 国产一区二区三区综合在线观看 | 一夜夜www| 成人亚洲精品一区在线观看 | 精品久久久久久久久av| 伦精品一区二区三区| 男女视频在线观看网站免费| 成年女人看的毛片在线观看| 韩国av在线不卡| 少妇被粗大猛烈的视频| 丝袜喷水一区| 亚洲精品国产成人久久av| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 极品少妇高潮喷水抽搐| 国产一区二区在线观看日韩| 亚洲一区高清亚洲精品| 亚洲精品视频女| 久99久视频精品免费| 边亲边吃奶的免费视频| 在现免费观看毛片| 欧美三级亚洲精品| 六月丁香七月| 成人亚洲精品一区在线观看 | 亚洲av日韩在线播放| 久久精品久久精品一区二区三区| 中文字幕久久专区| 寂寞人妻少妇视频99o| 在线观看免费高清a一片| 国产精品一区二区在线观看99 | 亚洲久久久久久中文字幕| eeuss影院久久| 最近2019中文字幕mv第一页| 纵有疾风起免费观看全集完整版 | 欧美潮喷喷水| 99热网站在线观看| 舔av片在线| 国产成人a区在线观看| 最近最新中文字幕免费大全7| 99久久人妻综合| 国产 一区精品| 国产一级毛片在线| 91aial.com中文字幕在线观看| 乱系列少妇在线播放| 国产午夜福利久久久久久| 一本久久精品| 高清午夜精品一区二区三区| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 精品国产露脸久久av麻豆 | 亚洲在线观看片| 亚洲国产欧美人成| 国产伦理片在线播放av一区| 视频中文字幕在线观看| 亚洲,欧美,日韩| 国产综合精华液| 精品少妇黑人巨大在线播放| 欧美一区二区亚洲| 人人妻人人看人人澡| 夫妻午夜视频| 波多野结衣巨乳人妻| 听说在线观看完整版免费高清| 尾随美女入室| 午夜福利网站1000一区二区三区| 欧美性感艳星| a级一级毛片免费在线观看| 五月玫瑰六月丁香| av在线老鸭窝| 国产精品av视频在线免费观看| 午夜老司机福利剧场| 日本黄色片子视频| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 午夜爱爱视频在线播放| 男女啪啪激烈高潮av片| 中文乱码字字幕精品一区二区三区 | 国产精品不卡视频一区二区| 激情 狠狠 欧美| 中文字幕av在线有码专区| 男女边吃奶边做爰视频| 日韩视频在线欧美| 一边亲一边摸免费视频| 国产伦精品一区二区三区四那| 精品久久国产蜜桃| 久久久欧美国产精品| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 亚洲久久久久久中文字幕| 黄色一级大片看看| 久久精品久久精品一区二区三区| 免费大片黄手机在线观看| or卡值多少钱| 亚洲欧美成人精品一区二区| 欧美另类一区| 伦精品一区二区三区| 亚洲精品影视一区二区三区av| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 久久久久久久大尺度免费视频| 寂寞人妻少妇视频99o| 毛片女人毛片| 国产老妇女一区| 午夜精品一区二区三区免费看| 日本wwww免费看| 色尼玛亚洲综合影院| 丰满人妻一区二区三区视频av| 夜夜爽夜夜爽视频| 色综合站精品国产| 国产午夜精品论理片| 免费观看性生交大片5| 国产精品.久久久| 精品久久久精品久久久| 三级国产精品欧美在线观看| 亚洲人与动物交配视频| 欧美日韩在线观看h| 九九爱精品视频在线观看| 我的女老师完整版在线观看| 精品一区二区三卡| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 欧美人与善性xxx| 六月丁香七月| 国产一级毛片七仙女欲春2| 久久精品夜色国产| 亚洲欧美精品专区久久| 国产91av在线免费观看| 一级毛片 在线播放| 成年女人在线观看亚洲视频 | 精品久久久久久久久av| h日本视频在线播放| 国产精品国产三级国产专区5o| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 欧美精品国产亚洲| 成年版毛片免费区| 久久久久性生活片| 精品午夜福利在线看| 伦理电影大哥的女人| 久久精品国产亚洲网站| 五月玫瑰六月丁香| 国产黄片美女视频| 国产69精品久久久久777片| 国产av不卡久久| 看十八女毛片水多多多| 国产视频内射| 欧美精品国产亚洲| 国产精品一区二区在线观看99 | 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 国产大屁股一区二区在线视频| 久久99热这里只频精品6学生| 寂寞人妻少妇视频99o| 亚洲久久久久久中文字幕| 乱人视频在线观看| 两个人的视频大全免费| 亚洲国产精品国产精品| 日本av手机在线免费观看| 久久久亚洲精品成人影院| 久久久a久久爽久久v久久| 久久6这里有精品| 亚洲真实伦在线观看| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 亚洲精品日韩av片在线观看| 欧美变态另类bdsm刘玥| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| av国产免费在线观看| 18+在线观看网站| 在线 av 中文字幕| 久久久久久久久大av|