自體富血小板血漿治療膝關(guān)節(jié)炎的初步結(jié)果

宿顯良，婁秋華，秦方園，栗 冰，張艾紅，李曉國(guó)*

（1.河南省職工醫(yī)院，河南鄭州 450001；2.河南省人民醫(yī)院組織工程室，河南鄭州 450001）

膝骨關(guān)節(jié)炎是一種退行性疾病，具有軟骨下骨生長(zhǎng)、軟骨脫落、滑膜無菌性炎癥等病理特征，破壞關(guān)節(jié)，最終導(dǎo)致膝關(guān)節(jié)功能障礙［1～2］。65歲以上人群發(fā)病率高達(dá)30%～50%，若得不到及時(shí)治療則會(huì)引起關(guān)節(jié)畸形。目前通常對(duì)癥治療，但因軟骨再生能力弱，治療效果一般，較多患者仍需手術(shù)治療［3］。近年來，細(xì)胞治療在骨關(guān)節(jié)炎等多種疾病的治療中顯示出良好的應(yīng)用前景［4］。富血小板血漿（platelet-rich plasm,PRP）是自體全血經(jīng)離心形成的血小板濃縮物,可抑制破骨細(xì)胞，促進(jìn)軟骨細(xì)胞的生成，加之關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射可直接作用于病變部位，能夠更好的發(fā)揮作用［5～6］。因此，本研究通過觀察PRP治療膝關(guān)節(jié)炎的臨床療效，以探尋其在治療膝關(guān)節(jié)炎中的價(jià)值。

1 臨床資料

1.1 一般資料

選擇2018年12月—2020年1月在本院接受治療的60例膝關(guān)節(jié)炎患者，采用抽簽法分為2組。PRP組30例，男18例，女12例，年齡49～72歲，平均（56.85±3.45） 歲，病程 5～32個(gè)月，平均（22.31±3.25）個(gè)月，左側(cè)16例，右側(cè)14例。透明質(zhì)酸（hyaluronic acid,HA）組30例，男16例，女14例，年齡50～73歲，平均（56.91±3.38）歲，病程6～33個(gè)月，平均（22.18±3.26）個(gè)月，左側(cè)17例，右側(cè)13例。兩組基線資料的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有患者均知情同意。

1.2 治療方法

PRP組：抽取45ml外周血，使用5ml枸櫞酸鈉抗凝，無菌實(shí)驗(yàn)室中使用二次離心法分離制備PRP，設(shè)備為湘儀TDZ5-WS。制成PRP后抽取0.5 ml送血常規(guī)檢查，所制備的PRP中血小板含量為富集前的4～8倍。在彩超引導(dǎo)下行膝關(guān)節(jié)注射，2.5 ml自體PRP分別在第0、1、2周關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射。

HA組：注射成品藥物，2.5 ml HA（華熙生物科技股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20143093），分別在第0、1、2、3、4周關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)

采用疼痛視覺模擬評(píng)分（visual analogue scale,VAS）和美國(guó)西部Ontario及McMaster大學(xué)骨關(guān)節(jié)炎指數(shù)評(píng)分（Western Ontario and McMaster Universities OsteoarthritisIndex,WOMAC）評(píng)價(jià)臨床效果。療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)，顯效：疼痛評(píng)分降低70%以上；有效：疼痛評(píng)分降低30%～70%；無效：臨床癥狀無明顯改善甚至加重。

采集關(guān)節(jié)液0.5 ml與0.9%氯化鈉溶液0.5 ml混合后置于無菌離心管中放入-80℃的冷凍箱內(nèi)存儲(chǔ)以備檢測(cè)。標(biāo)本采集完成后解凍，采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定前列腺素E2（PGE2）、P物質(zhì)（SP）、5-羥色胺（5-HT）、腫瘤壞死因子（TNF-α）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）水平。行MRI檢查。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料用以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較使用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以率表示，行x2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 臨床結(jié)果

兩組VAS和WOMAC評(píng)分結(jié)果見表1。與治療前相比，治療后3個(gè)月，PRP組的VAS和WOMAC評(píng)分均顯著下降（P＜0.05）；HA組上述2個(gè)評(píng)分雖有下降，但兩時(shí)間點(diǎn)間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。治療前兩組間VAS和WOMAC評(píng)分的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），治療后3個(gè)月，PRP組的VAS和WOMAC評(píng)分均顯著低于HA組（P＜0.05）。治療后3個(gè)月，總有效率PRP組為93.33%（28/30），HA組為70.00%（21/30），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）。

表1 兩組患者臨床結(jié)果（分，±s）與比較

表1 兩組患者臨床結(jié)果（分，±s）與比較

images/BZ_71_205_2071_694_2137.pngVAS評(píng)分images/BZ_71_694_2071_1032_2137.pngimages/BZ_71_1032_2071_1429_2137.pngimages/BZ_71_1429_2071_1929_2137.pngimages/BZ_71_205_2204_694_2270.pngimages/BZ_71_694_2204_1032_2270.pngimages/BZ_71_1032_2204_1429_2270.pngimages/BZ_71_1429_2204_1929_2270.png治療前5.35±1.315.39±1.29 P值0.906images/BZ_71_1929_2204_2272_2270.pngimages/BZ_71_205_2336_2272_2403.pngP值治療后3個(gè)月＜0.001images/BZ_71_205_2469_1929_2535.png＜0.001 24.25±8.31 0.124 34.62±12.47images/BZ_71_1929_2469_2272_2535.png

2.2 輔助檢查

兩組患者關(guān)節(jié)液檢測(cè)結(jié)果見表2。與治療前相比，治療后 3個(gè)月，兩組 PGE2、SP及 5-HT、TNF-α和IL-1β均顯著下降（P＜0.05）。治療前兩組間關(guān)節(jié)液PGE2、SP及5-HT、TNF-α和IL-1β水平的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；治療3個(gè)月后，PRP組關(guān)節(jié)液PGE2、SP及5-HT、TNF-α和IL-1β水平均顯著低于HA組（P＜0.05）。

表2 兩組患者治療前后實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果（±s，μg/L）與比較

表2 兩組患者治療前后實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果（±s，μg/L）與比較

images/BZ_72_207_382_642_448.pngPGE2（μg/L）images/BZ_72_207_515_642_581.pngimages/BZ_72_642_515_1033_581.pngimages/BZ_72_1033_515_1447_581.pngimages/BZ_72_1447_515_1926_581.png治療前351.67±8.56349.85±8.420.409images/BZ_72_642_382_2274_448.pngimages/BZ_72_1926_515_2274_581.pngimages/BZ_72_207_648_2274_714.png＜0.001images/BZ_72_207_780_2274_847.pngimages/BZ_72_207_913_642_979.png5-HT（μg/L）images/BZ_72_642_913_2274_979.pngimages/BZ_72_1447_1046_1926_1112.png0.453images/BZ_72_207_1046_1447_1112.pngimages/BZ_72_1926_1046_2274_1112.png0.007images/BZ_72_1447_1179_1926_1245.pngimages/BZ_72_207_1179_1033_1245.pngimages/BZ_72_1926_1179_2274_1245.pngimages/BZ_72_642_1311_1033_1378.pngimages/BZ_72_1033_1179_1447_1245.pngIL-1β（ng/L）images/BZ_72_207_1311_642_1378.pngP值治療后治療前P值治療后治療前P值＜0.001＜0.001images/BZ_72_1033_1311_1447_1378.png＜0.001 187.56±7.25 904.58±10.45＜0.001 10.34±2.46 95.41±3.62images/BZ_72_1447_1311_1926_1378.png＜0.001 210.47±5.74 902.57±10.15＜0.001 11.89±1.79 95.37±3.58images/BZ_72_1926_1311_2274_1378.png0.966

MRI檢查顯示PRP組治療后骨髓水腫明顯減輕，見圖1。

圖1 患者，男，72歲，左膝關(guān)節(jié)疼痛3年余，診斷左膝骨性關(guān)節(jié)炎，行PRP治療 1a:治療前MRI示股骨髁間水腫 1b:治療前MRI示股骨外側(cè)髁關(guān)節(jié)面下骨髓水腫 1c:治療16個(gè)月后MRI示股骨髁間水腫減輕 1d:治療16個(gè)月后MRI示股骨外側(cè)髁關(guān)節(jié)面下骨髓水腫明顯減輕

3 討 論

膝關(guān)節(jié)炎的發(fā)生一般由膝關(guān)節(jié)退行性病變、外傷、過度勞累等因素引起，據(jù)流行病學(xué)調(diào)查顯示，我國(guó)膝關(guān)節(jié)炎的發(fā)病率為9.56%，且其發(fā)生率呈現(xiàn)隨年齡的增高而增多的趨勢(shì)［8］。疼痛是膝關(guān)節(jié)炎的主要癥狀，早期多為間隙性疼痛，晚期可發(fā)展為持續(xù)性疼痛［9～10］。

膝關(guān)節(jié)炎口服藥物只能是暫時(shí)性的緩解癥狀，局限性多，遠(yuǎn)期效果欠佳，且易反復(fù)發(fā)作［11］。近年來學(xué)者已開始關(guān)注膝關(guān)節(jié)炎的替代方案，希望通過非侵入性手術(shù)來治療該病。PRP是細(xì)胞治療領(lǐng)域中人類細(xì)胞增殖過程中胎牛血清的替代物，能誘導(dǎo)出更多的內(nèi)源性生長(zhǎng)因子的表達(dá)，凝聚后可形成纖維蛋白網(wǎng)絡(luò)支架，促進(jìn)骨組織再生［12～13］。本研究結(jié)果顯示，使用自體PRP治療的患者總有效率為93.33%，明顯高于使用玻璃酸鈉的患者，分析其原因可能是因?yàn)樽泽wPRP是從自體血中提取而來的，血小板濃度可增加到9.3倍，且含有1 500種蛋白質(zhì)，被激活后可釋放生長(zhǎng)因子，有利于清除壞死組織，并參與關(guān)節(jié)軟骨修復(fù)。

有研究顯示，TNF-α、IL-1β是參與軟骨退變引起膝關(guān)節(jié)炎癥狀的重要細(xì)胞因子，TNF-α能通過激活多形核細(xì)胞，促進(jìn)滑膜細(xì)胞分泌PGE2，增加血管通透性，促進(jìn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，從而加重炎性水腫［14］。本研究結(jié)果顯示，治療后患者血清PGE2、SP、5-HT、TNF-α及IL-1β水平均顯著降低，且PRP低于SH。結(jié)果提示，自體PRP可通過調(diào)節(jié)膝關(guān)節(jié)炎患者的炎癥因子水平，緩解疼痛介質(zhì)的水平。陳群群等［15］研究顯示，自體PRP可通過改變軟骨細(xì)胞退變過程中的炎性細(xì)胞因子，促進(jìn)軟骨再生，抑制炎癥反應(yīng)。分析其原因可能是因?yàn)樽泽wPRP中含有大量血小板衍生生長(zhǎng)因子，能促進(jìn)軟骨基質(zhì)的合成，刺激軟骨細(xì)胞增殖，并有一定的抑制局部炎癥反應(yīng)的作用，而自體富含血小板的炎癥血漿調(diào)節(jié)因子能抑制白三烯介導(dǎo)的軟骨基質(zhì)降解，以及炎性細(xì)胞因子的表達(dá)，促進(jìn)干細(xì)胞增殖、蛋白多糖和膠原分泌，從而減輕疼痛。

綜上所述，在膝關(guān)節(jié)炎患者中應(yīng)用自體PRP效果顯著，可有效改善患者疼痛情況。