不同孕期血清LAP分析及參考區(qū)間的建立

周慧聰，朱艷婷，王子銘，黃 梅，嚴孝嶺，虞 偉

(南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬泰康仙林鼓樓醫(yī)院檢驗科，南京 210046)

隨著生育政策的開放，每年約有1 600萬名育齡婦女進入妊娠狀態(tài)[1]，尋找與妊娠有關(guān)的檢測指標顯得十分重要。目前，抽血監(jiān)測妊娠的檢測項目有孕酮及人絨毛膜促性腺激素(β-HCG)[2]。血清亮氨酸氨基肽酶(LAP)用于生化檢測的常規(guī)項目，常常作為評價肝功能。LAP是一種蛋白水解酶[3]，在肝臟、腎臟、胰腺及子宮肌層表達水平較多[4]。孕婦體內(nèi)含有兩種LAP，一種由普通組織細胞產(chǎn)生，另一種由胎盤滋養(yǎng)層細胞產(chǎn)生[5-6]。因此，研究孕婦體內(nèi)LAP與孕酮、β-HCG同樣重要。本研究通過受試者工作特征(ROC)曲線[7]確定LAP判斷妊娠的靈敏度和特異度，并將不同孕期婦女進行分組，研究中孕期和晚孕期LAP增長速度，運用多元logistics回歸[8]進行分析，并用Hoffmann法建立不同孕期LAP參考區(qū)間，提高LAP檢測對妊娠婦女的臨床指導(dǎo)作用，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年1月至2019年12月本院產(chǎn)檢正常的2 377例孕婦為研究對象，按照孕期分為早孕組(637例)、中孕組(894例)和晚孕組(846例)，年齡24～36歲。納入同期本院86例流產(chǎn)孕婦作為流產(chǎn)組，納入標準：(1)妊娠婦女；(2)出現(xiàn)腹痛、出血、宮口擴張入院，診斷為流產(chǎn)。另選取同期本院體檢的200例健康婦女作為對照組，年齡24～36歲。

1.2 方法

通過醫(yī)院LIS系統(tǒng)收集數(shù)據(jù)，包括性別、年齡、診斷、LAP、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)結(jié)果，選取ALT、AST結(jié)果正常的孕婦進行LAP檢測，并進行數(shù)據(jù)分析。LAP測定采用L-亮氨酸-p-硝?；桨坊|(zhì)法，檢測儀器為LABOSPECT008全自動生化分析儀，檢測試劑為LABOSPECT試劑，所用定標液為配套定標液，檢測期間室內(nèi)質(zhì)控均在控。統(tǒng)計中孕組和晚孕組做過2次LAP檢測的孕婦(50例、261例)，計算兩次檢測間隔時間，并分析兩組LAP增長速度。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS23.0軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料以M(P25，P75)表示，比較采用非參數(shù)檢驗中克魯斯卡爾-沃利斯檢驗、曼-惠特尼檢驗，應(yīng)用ROC曲線計算靈敏度和特異度，相關(guān)性采用logistic回歸分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 LAP判斷妊娠的ROC曲線

繪制ROC曲線，結(jié)果顯示曲線下面積(AUC)為0.989，靈敏度為96.6%，特異度為99.9%，Cut-Off值為67.5 U/L，見圖1。

圖1 LAP判斷妊娠的ROC曲線

2.2 不同孕期間LAP水平比較

早孕組、中孕組、晚孕組較對照組和流產(chǎn)組LAP水平升高，晚孕組、中孕組LAP水平較早孕組高(P<0.05)，見表1。晚孕期LAP增長速度比中孕期快，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表1 不同孕期LAP水平比較[M(P25,P75)，U/L]

表2 中孕期與晚孕期LAP增長速度比較[M(P25,P75)，U·L-1·d-1]

2.3 多元logistics回歸

以流產(chǎn)、中孕、晚孕為因變量，LAP為協(xié)變量進行多元logistics回歸，以流產(chǎn)為參考類別，LAP每提升1個單位水平，孕婦處于中孕期的可能提升1.158倍[OR=1.158(95%CI：1.121～1.195，P<0.05)]，處于晚孕期的可能性提升1.197倍[OR=1.197(95%CI：1.159～1.236，P<0.05)]。

2.4 Hoffmann法建立不同(早、中、晚)孕期LAP參考區(qū)間

早孕組回歸方程為Y=1.537X+44.300,R2=0.906 8,參考區(qū)間為48.14～194.16 U/L；中孕組回歸方程為Y=3.140X+86.830,R2=0.945 6,參考區(qū)間為94.68～392.98 U/L；晚孕組回歸方程為Y=1.857X+103.800,R2=0.936 2,參考區(qū)間為108.44～284.86 U/L，且與原參考區(qū)間0～70 U/L比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

3 討 論

近年來，隨著婚育年齡越來越高，懷孕后胎兒發(fā)育不良、停止發(fā)育及自然流產(chǎn)患者屢見不鮮[9-10]，其中原因不明的反復(fù)自然流產(chǎn)率為1%～5%[11]。目前通過血液監(jiān)測孕婦妊娠穩(wěn)定性的指標有孕酮、β-HCG、雌二醇(E2)、糖類抗原-125(CA125)[12],其中妊娠早期孕酮、血清β-HCG、E2水平檢測對胚胎停育的預(yù)測具有較高的臨床預(yù)測價值[13]，但妊娠10周左右β-HCG會達到峰值，中、晚期會生理性下降，尋找一種妊娠中晚期的特異性標志物監(jiān)測妊娠狀態(tài)顯得尤為重要。還有研究表明，胎盤中的P-LAP對維持正常妊娠具有重要作用，P-LAP也被稱為催產(chǎn)素酶，在妊娠第37周可以達到高峰，分娩結(jié)束后可以達到正常值[14]。還有研究表明，隨著孕期的增加，若LAP沒有達到高峰，有可能是胎盤組織功能發(fā)生異常，LAP或許會隨之下降[15-16]?？梢奓AP在中晚期妊娠中也有著重要作用。

本研究通過繪制ROC曲線，發(fā)現(xiàn)LAP對判斷妊娠的靈敏度及特異度都很高，進一步證實LAP可以作為孕期監(jiān)測孕婦妊娠情況的指標。通過分組進行非參數(shù)檢驗，證實妊娠組與對照組、妊娠組與流產(chǎn)組LAP水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，以流產(chǎn)組為參考類別，將中孕組與晚孕組對流產(chǎn)組進行多元logistic回歸， LAP每提升1個單位，孕婦處于中孕期的可能提升1.158倍,處于晚孕期的可能性提升1.197倍。本研究還計算中孕組與晚孕組LAP的增長速度，發(fā)現(xiàn)晚孕組LAP增長速度較快。未來檢驗科可以通過優(yōu)化LIS系統(tǒng)，計算孕婦每次產(chǎn)檢LAP值，用2次LAP差值除以2次產(chǎn)檢相隔天數(shù)，計算2次產(chǎn)檢間LAP增長速度，從而作為監(jiān)測妊娠的一個指標，這樣可以提高LAP監(jiān)測的作用，對產(chǎn)檢結(jié)果有指導(dǎo)作用。LAP作為肝功能檢測的指標已運用于臨床中，少有文獻報道LAP用于孕檢項目，介于LAP在妊娠的靈敏度及特異度很高，將LAP加入孕檢項目，可以作為孕期檢測妊娠的指標。

本研究還用Hoffmann法[17-21]建立不同孕期LAP的參考區(qū)間。試劑說明書給出的參考區(qū)間的研究對象是健康成年人，沒有單獨建立孕婦的參考區(qū)間，也未見關(guān)于孕婦LAP參考區(qū)間的報道。運用健康人群的參考區(qū)間，孕婦化驗單上LAP項目均顯示增高，孕婦看到化驗單有“異常增高值”難免會引起情緒上的緊張，但其屬于“正常值”。本研究運用不同孕期正常孕婦的LAP檢測結(jié)果建立參考區(qū)間，可以運用于臨床，既可以指導(dǎo)醫(yī)生判斷不同妊娠婦女的妊娠狀況，也可以指導(dǎo)產(chǎn)檢孕婦正確了解自身身體情況。

綜上所述，本文研究了LAP判斷妊娠的靈敏度及特異度，并探究LAP在中、晚孕期的增長速度，通過logistic回歸確立OR值，并建立LAP在不同孕期的參考區(qū)間，較之前關(guān)于孕期LAP的研究進行了更深的探討，也給臨床提供了有實用價值的建議。