酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測艾滋病病毒抗體的失控原因分析

禹 洋

（遼寧省沈陽市和平區(qū)衛(wèi)生健康服務與行政執(zhí)法中心，遼寧 沈陽 110000）

艾滋病是臨床上的一種傳染性較強的免疫缺陷性病癥，這種病癥會通過母嬰傳播、血液傳播、性途徑接觸傳播等方式導致人體感染艾滋病病毒[1]。最近這幾年我國艾滋病的發(fā)生率在逐年的提高，也使得艾滋病成為對人類生命健康產(chǎn)生威脅的一個重大病癥，及時的選擇安全有效的方法進行臨床篩查對控制艾滋病的蔓延具有重要的價值[2]。酶聯(lián)免疫吸附試驗主要是一種固相免疫檢驗方法，在臨床應用的過程中操作簡單快捷，而且具有較強的特異性和靈敏性，能夠多次重復操作，也是對患者確認是否感染艾滋病的一個有效途徑。臨床實踐研究認為[3]，在進行操作的過程中會因為技術(shù)因素、外界環(huán)境因素、標本因素等多方的影響，導致存在一定程度的假陽性和假陰性結(jié)果，所以會產(chǎn)生艾滋病病毒檢驗抗體失控。本文主要基于此進行調(diào)查，同時將主要研究情況報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本文調(diào)查時間選擇2018年5月至2019年10月，選擇的調(diào)查對象為在此期間來我中心進行艾滋病病毒抗體篩查的34例疑似艾滋病患者，所有患者當中存在男性11例，女性23例，患者年齡最大為48歲，年齡最小為26歲，平均年齡為（35.15±5.46）歲。所有調(diào)查對象簽署知情同意書，臨床資料經(jīng)倫理委員會批準和認可。

1.2 樣本的采集和處理 對所有調(diào)查對象均抽取清晨的新鮮空腹靜脈血，在采集血液的過程中要保證無菌操作的原則，并且避免劇烈的震蕩試管而導致的不良狀況出現(xiàn)。當標本采集成功以后需要在常溫的環(huán)境之下放置1～2 h，在血液凝固之后進行3000轉(zhuǎn)每分鐘的離心處理，處理時間大約為15 min。對所有采集的標本需要貼上標簽，標注患者的相關(guān)信息等，并且盡快的對患者的標本進行檢驗。如果在5 d內(nèi)進行檢驗，那么需要將標本保存在2～8 ℃的環(huán)境當中，如果一周以后才進行檢驗，則需要將標本保存在零下20 ℃的環(huán)境當中[4]。

1.3 關(guān)于標本試劑的選擇 標本試劑主要應用珠海麗珠試劑股份有限公司的相關(guān)產(chǎn)品，確保所選擇的試劑經(jīng)過國家食品藥品監(jiān)督管理局的認可，并且經(jīng)過注冊，試劑質(zhì)量檢驗合格，并控制在有效期當中，檢驗的過程中嚴格的根據(jù)試劑盒的說明書進行操作。本文應用的全自動酶標儀來自北京普朗公司，型號為DM9602，洗板機同樣來自于北京普朗，型號為9620。

1.4 陽性結(jié)果判定標準 通過應用450 nm波長對各個孔值進行測定，并且對樣本的吸光度進行確定，以樣本吸光度/陽性判斷值不足1表示為陰性，反之則為陽性[5]。

1.5 統(tǒng)計學方法 本研究所產(chǎn)生的數(shù)據(jù)采用SPSS25.0進行統(tǒng)計分析與處理，且本文所有數(shù)據(jù)均符合正態(tài)分布，計數(shù)資料通過組間行χ2檢驗后用[n（%）]表示，P＜0.05表示差異有顯著性。

2 結(jié)果

蛋白印記試驗檢驗33例被確診為艾滋病患者，占97.06%；對所有患者應用酶聯(lián)免疫吸附試驗進行艾滋病病毒抗體檢測，診斷為艾滋病患者30例，診斷的符合率為90.91%，敏感度為96.67%，特異度為75.00%，準確度為94.12%；對所有調(diào)查對象進行追溯分析，在誤診的3例患者當中，存在標本污染、溶血標本、血液標本處理不當各1例，標本處理不當?shù)闹饕驗闈舛容^高的非特異性免疫球蛋白影響而出現(xiàn)假陽性，還有1例患者標本當中含有補體險些導致漏診出現(xiàn)，但經(jīng)過仔細分析對比避免了相關(guān)狀況的發(fā)生，也提示臨床應對此狀況予以重視。見表1。

表1 酶聯(lián)免疫吸附試驗與蛋白印記試驗結(jié)果比較

3 討 論

酶聯(lián)免疫吸附檢驗方法檢驗艾滋病病毒抗體失控的原因主要包括標本、檢驗試劑和操作人員技術(shù)等各個因素。針對于此，臨床需要采取有效的措施避免相關(guān)風險產(chǎn)生的影響[6]。

在標本采集時要嚴格的根據(jù)無菌操作的原則進行落實，采集以后避免存在過度的震蕩，標本采集以后要放置在常溫環(huán)境之下1～2 h，在血塊收縮或血液凝固以后進行離心處理。盡量對標本進行立即檢測，如果不能立即檢測，5 d之內(nèi)檢測的標本要放置在2～8 ℃的環(huán)境當中，而1周以后檢測的標本需要放置在零下20 ℃的環(huán)境中[7]。在標本中還要加入抗凝物質(zhì)，盡量不應用酶抑制劑，這樣能夠防止對酶聯(lián)免疫吸附試劑當中酶的活性產(chǎn)生影響[8]。

艾滋病抗體檢驗的所有試劑盒都應該確保經(jīng)過國家的注冊和認證批準，而且保證檢驗合格沒有過期的情況。在設(shè)計和選擇的時候要嚴格的根據(jù)檢驗報告對監(jiān)制評估數(shù)據(jù)進行選擇，應用靈敏度特異性較高的試劑盒[9]。還要對相關(guān)的檢驗做好預處理，每次應用試劑盒以前需要在室溫環(huán)境之下放置30 min以上，并且確保試劑的溫度和室溫相類似，以避免對抗體結(jié)合和反應速度產(chǎn)生影響，而導致檢驗結(jié)果出現(xiàn)偏差。同時也要注意避免應用不同廠家和不同批號的試劑[10]。

綜上所述，臨床對艾滋病病毒抗體通過酶聯(lián)吸附試驗進行檢驗能夠具有較高的診斷效率，而導致檢驗失控的原因來自于多個方面，綜合做好各個方面的質(zhì)控工作，能有效確保酶聯(lián)免疫吸附試驗對艾滋病診斷的效率提高。