水果中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留回收率與基質(zhì)效應(yīng)的研究

吳夢(mèng)霞

摘 要：為深入探究水果基質(zhì)對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測(cè)的影響，本文采用氣相色譜法測(cè)定8種有機(jī)磷農(nóng)藥在4種水果中的基質(zhì)效應(yīng)和回收率。結(jié)果表明：水胺硫磷﹑甲胺磷﹑樂(lè)果﹑甲基對(duì)硫磷﹑敵敵畏﹑毒死蜱﹑對(duì)硫磷﹑殺螟硫磷8種農(nóng)藥在香瓜﹑蘋(píng)果﹑香蕉﹑西瓜4種水果中基質(zhì)效應(yīng)多表現(xiàn)為增強(qiáng)。敵敵畏回收率較低，尤其在西瓜和香蕉中表現(xiàn)明顯。

關(guān)鍵詞：氣相色譜法;有機(jī)磷農(nóng)藥;回收率;基質(zhì)效應(yīng)

1? 前言

在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，有機(jī)磷農(nóng)藥廣泛使用，常用于防治農(nóng)作物病﹑蟲(chóng)﹑草害，但同時(shí)也導(dǎo)致農(nóng)產(chǎn)品中發(fā)生不同程度的農(nóng)藥殘留，其不容易降解，造成環(huán)境污染，并通過(guò)食物鏈對(duì)動(dòng)物和人體產(chǎn)生危害。目前對(duì)農(nóng)產(chǎn)品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法有很多，現(xiàn)如今農(nóng)業(yè)部水果中農(nóng)藥殘留風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)執(zhí)行農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T761-2008[2-3]。在此農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中，采用氣相色譜法對(duì)蔬菜﹑水果﹑食用菌類(lèi)有機(jī)磷農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測(cè)，所得峰面積與試驗(yàn)基質(zhì)的特性有很大的相關(guān)性，試驗(yàn)基質(zhì)對(duì)整個(gè)分析過(guò)程有顯著的干擾，對(duì)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性產(chǎn)生影響，這些影響和干擾被稱(chēng)為基質(zhì)效應(yīng)，基質(zhì)效應(yīng)分為增強(qiáng)效應(yīng)和抑制效應(yīng)[4]。農(nóng)藥殘留基質(zhì)效應(yīng)因氣相色譜儀進(jìn)樣器﹑襯管以及樣品的不同導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室之間的研究結(jié)果差異較大，所以每種農(nóng)藥的基質(zhì)效應(yīng)并不是固定的，在評(píng)價(jià)基質(zhì)效應(yīng)時(shí)，變換實(shí)驗(yàn)條件或?qū)嶒?yàn)對(duì)象后，其會(huì)發(fā)生相應(yīng)變化，因具體情況具體分析，不能一概而論[1]。檢測(cè)蔬菜或水果中農(nóng)藥殘留時(shí)，回收率常作為指標(biāo)來(lái)檢驗(yàn)檢測(cè)方法的準(zhǔn)確性和可行性，在實(shí)際檢測(cè)中，常常因?yàn)榛|(zhì)效應(yīng)的影響，回收率超過(guò)正常范圍，給檢測(cè)過(guò)程帶來(lái)了很多麻煩。本文旨在探究四種水果基質(zhì)對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥基質(zhì)效應(yīng)的影響，討論在以后檢測(cè)過(guò)程中如何消除其影響。

2? 研究方法和材料

2.1? 設(shè)備和試劑

2.1.1? 儀器設(shè)備

安捷倫7890A氣相色譜儀（FPD火焰光度檢測(cè)器）;EG35B數(shù)控?cái)?shù)顯電熱板;Easy-30超純水機(jī);MTN-5800A氮吹濃縮裝置;Vac Elut 20 SPE固相萃取裝置;IKA-T25高速勻漿機(jī);PL602-L電子天平;GZX-9070 MBE電熱鼓風(fēng)干燥箱;樣品粉碎機(jī)。

2.1.2? 試劑

有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品：水胺硫磷﹑殺螟硫磷﹑敵敵畏﹑甲胺磷﹑甲基對(duì)硫磷﹑對(duì)硫磷﹑毒死蜱﹑樂(lè)果;濃度：1000μg/ml;廠家：農(nóng)業(yè)部環(huán)境質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心。

乙腈（色譜純）﹑丙酮（色譜純）;氯化鈉（分析純）。

2.2? 實(shí)驗(yàn)方法

2.2.1? 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置

試劑標(biāo)準(zhǔn)溶液：將8種有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)原液用丙酮分別10倍梯度稀釋為10ug/ml的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，4℃保存。吸取一定量的已配置好并保存于冰箱中的8種有機(jī)磷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，配置成濃度為0.2ugml的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。

基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液：以香瓜﹑蘋(píng)果﹑香蕉﹑西瓜空白樣品基質(zhì)溶液代替丙酮將8種有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)參照上述步驟配置成濃度為0.2μg/ml的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。

2.2.2? 色譜條件（表1）

2.2.3? 樣品前處理

（1）試驗(yàn)制備

取香瓜﹑蘋(píng)果﹑香蕉﹑西瓜，分別將其切碎，放入樣品粉碎機(jī)中粉碎制成樣品，放入樣品盒中，于-20℃條件下保存?zhèn)溆谩?/p>

（2）提取

分別稱(chēng)取25.0g試樣做空白、空白加標(biāo)（3個(gè)平行樣品測(cè)定回收率，添加水平均為0.1mg/ml），放入250ml燒杯中，吸取50.0ml乙腈溶液加到試樣中，空白加標(biāo)樣品還需加入配好的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液，使用高速勻漿機(jī)勻漿2min，濾紙過(guò)濾，下方用裝有5g～7g氯化鈉的100ml具塞量筒收集濾液40ml～50ml，然后蓋緊量筒塞子，劇烈震蕩1min，靜置30min，使有機(jī)相（乙腈相）和水相分層。

（3）凈化

從具塞量筒中吸取有機(jī)相（乙腈相）10ml，放入100ml燒杯中，而后放于提前預(yù)熱至80℃的電熱板上加熱，蒸發(fā)近干，加入2.0ml丙酮，轉(zhuǎn)移至試管中，再用約3ml丙酮，分3次，每次1ml，沖洗燒杯并轉(zhuǎn)移至試管中，最后定容至5.0ml，混勻，若溶液渾濁，用0.2μm濾頭過(guò)濾，而后移入樣品瓶中，等待上機(jī)測(cè)定。

3? 結(jié)果與分析

3.1? 有機(jī)磷農(nóng)藥色譜圖

在上述色譜條件下，將已經(jīng)配置好的0.2μg/ml的混標(biāo)上機(jī)測(cè)定，8種有機(jī)磷農(nóng)藥的保留時(shí)間見(jiàn)圖1，8種農(nóng)藥由于出峰時(shí)間的不同分離效果明顯。

3.2? 四種水果的回收率與基質(zhì)效應(yīng)

基質(zhì)效應(yīng)（%）=純?nèi)軇┲修r(nóng)藥的響應(yīng)值/樣品基質(zhì)中農(nóng)藥的響應(yīng)值×100。從表1中可以看出：8種有機(jī)磷農(nóng)藥回收率普遍在80～110%之間，證明本文所用檢測(cè)方法有效可行，其中敵敵畏回收率較低。從基質(zhì)效應(yīng)來(lái)看，以香瓜為基質(zhì)，除敵敵畏基質(zhì)效應(yīng)不明顯外，其他7種有機(jī)磷農(nóng)藥均表現(xiàn)為基質(zhì)增強(qiáng);以蘋(píng)果和西瓜作為基質(zhì)，8種有機(jī)磷農(nóng)藥基質(zhì)效應(yīng)均表現(xiàn)為增強(qiáng);以香蕉為基質(zhì)，除甲基對(duì)硫磷和殺螟硫磷基質(zhì)效應(yīng)不明顯外，其他6種農(nóng)藥均表現(xiàn)為基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)（表2）。

4? 討論

目前大多數(shù)的研究都集中于以蔬菜作為基質(zhì)，對(duì)多種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留基質(zhì)效應(yīng)的研究[5-7]，對(duì)水果以及食用菌類(lèi)，尤其是食用菌類(lèi)基質(zhì)效應(yīng)研究較少。而在用農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)方法NY/T761-2008對(duì)水果中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留研究時(shí)，常因水果品種的不同，即試驗(yàn)基質(zhì)的不同，產(chǎn)生不同程度的基質(zhì)效應(yīng)，對(duì)檢測(cè)過(guò)程起到干擾作用，進(jìn)而影響檢測(cè)結(jié)果[8]。本文采用氣相色譜法﹑火焰光度檢測(cè)器測(cè)定8種有機(jī)磷農(nóng)藥在4種水果中的基質(zhì)效應(yīng)和回收率，結(jié)果顯示甲胺磷﹑樂(lè)果﹑水胺硫磷﹑甲基對(duì)硫磷﹑敵敵畏﹑毒死蜱﹑對(duì)硫磷﹑殺螟硫磷8種農(nóng)藥在香蕉﹑蘋(píng)果﹑西瓜﹑香瓜4種水果中基質(zhì)效應(yīng)大多表現(xiàn)為增強(qiáng)，這與羅貴文2017年[9]﹑孫丹2014年[10]的研究結(jié)果是一致的，即在研究水果中有機(jī)磷農(nóng)藥的基質(zhì)效應(yīng)時(shí)，多種農(nóng)藥都表現(xiàn)出不同程度的基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)。因此，在日常實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，應(yīng)考慮基質(zhì)配標(biāo)，而不是直接用丙酮溶液配標(biāo)，排除基質(zhì)效應(yīng)后再計(jì)算農(nóng)藥殘留回收率，可以有效避免出現(xiàn)回收率超出好幾倍的現(xiàn)象，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。此外，本文在農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)方法上做了改進(jìn)，原方法凈化這一步驟位于水浴鍋上，通入空氣或氮?dú)饬魇箻悠氛舭l(fā)近干，而本次研究則使用溫度相同的電熱板代替水浴鍋，結(jié)果表明除敵敵畏回收率較低外，其余7種有機(jī)磷農(nóng)藥的回收率均在80%～110%之間，說(shuō)明所用檢測(cè)方法有效可行，敵敵畏本身不穩(wěn)定，易揮發(fā)，所以回收率普遍偏低，其在堿性基質(zhì)中易水解，在西瓜和香蕉中表現(xiàn)尤為明顯，回收率表現(xiàn)更低，這與楊燕燕2014年[1]的研究結(jié)果是一致的。

參考文獻(xiàn)

[1] 楊燕燕，張曉峰，劉靖，等.氣相色譜儀測(cè)定蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的回收率和基質(zhì)效應(yīng)[J].山西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2014，34（4）：328-329.

[2] 何浩.氣相色譜法快速測(cè)定食品中多種有機(jī)氯﹑擬除蟲(chóng)菊酯﹑有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào)，2016，7（3）：1063-1064.

[3] 羅劍鳴.氣相色譜法測(cè)定蔬菜中多種農(nóng)藥殘留量[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，41（21）：8891-8892.

[4] 平新亮，林媚，王燕斌，等.添加13種有機(jī)磷農(nóng)藥在4種果蔬中的回收率和基質(zhì)效應(yīng)[J].江西植保，2009，9（32）：3.

[5] 倪佳.氣相色譜法測(cè)定農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的基質(zhì)效應(yīng)研究[J].科學(xué)技術(shù)創(chuàng)新，2019（36）：142-143.

[6] 王小喬，楊志敏，俞賓年，等.基質(zhì)效應(yīng)對(duì)蔬菜中18種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測(cè)的影響[J].現(xiàn)代食品，2019（14）：138-141.

[7] 劉欣紅，王艷輝，吳迪，等.蔬菜中13種有機(jī)磷農(nóng)藥基質(zhì)效應(yīng)研究[J].農(nóng)藥科學(xué)與管理，2019（7）：28-35.

[8] 韓宇.氣相色譜法測(cè)定蔬菜中有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥的基質(zhì)效應(yīng)分析[J].上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)（農(nóng)業(yè)科學(xué)版），2018，5：86-90.

[9] 羅貴文，牙家璇，郭儒敏，等.基質(zhì)效應(yīng)對(duì)水果中16種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測(cè)的影響[J].農(nóng)業(yè)科技通訊，2017（12）：188-192.

[10] 孫丹，張世瑞.水果基質(zhì)中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留基質(zhì)效應(yīng)比較[J].農(nóng)業(yè)災(zāi)害研究，2014（11）：23-26.