Hippo-YAP/TAZ通路在腫瘤免疫調(diào)節(jié)中的作用研究進(jìn)展

韓明媛 王振波

[摘要] Hippo-YAP/TAZ 通路在調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、存活和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等生物學(xué)功能方面發(fā)揮著重要作用。近年來(lái)，該通路在腫瘤免疫調(diào)節(jié)中的作用被廣泛研究，其不僅可以調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境中的免疫細(xì)胞，還能在 mRNA 和蛋白水平上調(diào)控程序性死亡配體-1（PD-L1）的轉(zhuǎn)錄和翻譯過(guò)程，進(jìn)而影響程序性死亡受體-1（PD -1）/PD-L1免疫檢查點(diǎn)抑制劑的療效。此外，該通路還是腫瘤細(xì)胞耐藥與免疫逃逸之間聯(lián)系的橋梁。因此，全面了解 Hippo-YAP/TAZ 通路在免疫調(diào)節(jié)中的作用機(jī)制，可為臨床抗腫瘤治療尋求新的靶點(diǎn)，使更多患者在免疫治療中獲益。

[關(guān)鍵詞] Hippo-YAP/TAZ 通路;腫瘤免疫調(diào)節(jié); PD-1/PD-L1;免疫逃逸;作用機(jī)制

[中圖分類(lèi)號(hào)] R730.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? [文章編號(hào)]2095-0616（2021）22-0049-04

Advances in the study of the role of Hippo-YAP/TAZ pathway in tumor immunity regulation

HAN? Mingyuan?? WANG? Zhenbo

Department of Oncology， Affiliated Hospital of Binzhou Medical University， Shandong， Binzhou 256600， China? [Abstract] Hippo-YAP/TAZ pathway plays an important role in regulating biological functions such as cell proliferation， survival and signal transduction. In recent years， the role of this pathway in tumor immunity regulation has been extensively studied. A variety of studies showed that it not only regulates immune cells in the tumor microenvironment， but also regulates the transcription and translation processes of programmed death-ligand 1（PD-L1） at the messenger ribonucleic acid （mRNA） and protein levels， which further affects the efficacy of programmed cell death-1（PD-1）/PD-L1 immune checkpoint inhibitors. In addition， this pathway bridges the link between drug resistance and immune escape in tumor cells. Therefore， a comprehensive understanding of the mechanism of Hippo-YAP/TAZ pathway in immunity regulation can lead to new targets for antitumor therapy in clinic and enable more patients to benefit from immunotherapy.

[Key words] Hippo-YAP/TAZ pathway; Tumor immunity regulation; Programmed cell death-1/programmed death- ligand 1; Immune escape; Mechanism

近年來(lái)，腫瘤免疫檢查點(diǎn)抑制劑（immune checkpoint? inhibitors，ICIs）成為臨床關(guān)注的熱點(diǎn)，其中，程序性死亡受體-1（programmed death protein 1，PD-1）/程序性死亡配體-1（programmed death ligand 1， PD-L1）抑制劑在臨床治療中應(yīng)用較為廣泛。免疫治療的目的是啟動(dòng)免疫的自我循環(huán)過(guò)程，即癌癥-免疫周期[1]，該循環(huán)中的任何一個(gè)環(huán)節(jié)都會(huì)影響免疫治療的效果，接受免疫治療的患者必須具有一定程度的免疫功能;同時(shí)，ICIs 的應(yīng)用會(huì)導(dǎo)致某些免疫相關(guān)不良事件的發(fā)生[2]。因此，免疫耐藥以及尋求更多、更精確的生物標(biāo)志物成為臨床治療中亟待解決的問(wèn)題[3]。

Hippo-YAP/TAZ 通路是一個(gè)高度保守的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路， Yes 相關(guān)蛋白（yes-associated protein， YAP）是該通路的轉(zhuǎn)錄共激活因子，在正常機(jī)體內(nèi)， YAP 以磷酸化的形式參與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)節(jié)。當(dāng) Hippo 通路發(fā)生異?；?YAP 過(guò)表達(dá)時(shí)會(huì)破壞細(xì)胞的增殖-凋亡平衡，從而促進(jìn)腫瘤的發(fā)生[4]。研究發(fā)現(xiàn)，該通路在免疫調(diào)節(jié)過(guò)程中發(fā)揮著重要作用[5]。因此，本文就 Hippo-YAP/TAZ 通路在腫瘤免疫調(diào)節(jié)中的作用做一綜述。

1哺乳動(dòng)物中的Hippo-YAP/TAZ通路

在哺乳動(dòng)物中，經(jīng)典的 Hippo 通路主要是由 MST1/2、SAV1、LATS1/2及 MOB1組成的一條激酶鏈，如圖1所示，這一系列的激酶級(jí)聯(lián)反應(yīng)最終會(huì)抑制 YAP 和轉(zhuǎn)錄共激活因子 PDZ 結(jié)合基序（transcriptional co-activator with PDZ-binding motif，TAZ）的活性。當(dāng) Hippo 通路被激活時(shí)首先會(huì)活化 MST1/2激酶，該激酶與支架蛋白 SAV1形成蛋白復(fù)合物，激活 LATS1/2激酶，使其與 MOB1蛋白結(jié)合，導(dǎo)致 YAP/TAZ 磷酸化后失活。失活的 YAP/TAZ 與14-3-3結(jié)合域結(jié)合后滯留在細(xì)胞質(zhì)中，進(jìn)一步磷酸化及泛素化，并通過(guò)蛋白酶體途徑被降解，從而抑制下游基因的表達(dá)，減少細(xì)胞的過(guò)度增殖。反之，當(dāng)核心激酶鏈中的某個(gè)激酶處于失活狀態(tài)時(shí)，Hippo 通路發(fā)生異常，去磷酸化的 YAP/TAZ 則會(huì)進(jìn)入細(xì)胞核，由于它們?nèi)狈?DNA 結(jié)合位點(diǎn)，需要與 TEA 結(jié)構(gòu)域家族（TEA domain family members， TEADs）結(jié)合，形成 YAP/TAZ- TEADs 復(fù)合物，進(jìn)而促進(jìn)相關(guān)靶基因的轉(zhuǎn)錄與表達(dá)，誘導(dǎo)細(xì)胞增殖、遷移[6-7]。

2 Hippo-YAP/TAZ通路在腫瘤免疫調(diào)節(jié)中的作用

2.1 Hippo通路參與調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境中的多種免疫細(xì)胞

腫瘤細(xì)胞逃避免疫監(jiān)視的機(jī)制包括抑制抗原的產(chǎn)生或呈遞、促進(jìn)免疫抑制性細(xì)胞的激活和再招募等。腫瘤微環(huán)境（tumor micro-environment， TME）中含有多種細(xì)胞類(lèi)型，它們分泌的各種因子會(huì)促進(jìn)慢性炎癥的發(fā)生，抑制免疫應(yīng)答，大大降低腫瘤細(xì)胞被免疫細(xì)胞監(jiān)測(cè)和清除的可能性[8]。因此，TME 的改變以及免疫細(xì)胞的調(diào)節(jié)在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中有著重要作用。有文獻(xiàn)指出，Hippo 通路可調(diào)節(jié) TME 中的腫瘤相關(guān)免疫細(xì)胞，包括骨髓源性抑制細(xì)胞（myeloid -derived suppressor cells，MDSCs）、腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞和調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞等[9]。

MDSCs 是一種未成熟的髓系細(xì)胞群，無(wú)法分化為具有正常功能的巨噬細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞或中性粒細(xì)胞，其促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移的途徑大致分為4個(gè)方面：①抑制抗腫瘤反應(yīng)，降低免疫細(xì)胞對(duì)腫瘤的殺傷作用;②重塑 TME;③建立轉(zhuǎn)移前生態(tài)位;④與腫瘤細(xì)胞相互作用并促進(jìn)上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化。有研究表明，在 Hippo 通路中，胞核內(nèi)的 YAP-TEAD 復(fù)合體能夠驅(qū)動(dòng)腫瘤細(xì)胞分泌趨化因子 CXCL5，這種趨化因子會(huì)吸引表達(dá) CXCR2的 MDSCs 向 TME 募集，從而抑制抗腫瘤免疫反應(yīng)。因此，藥物性阻斷 CXCL5-CXCR2信號(hào)或抑制 MDSCs 能夠增強(qiáng)抗腫瘤反應(yīng)[10]。

在腫瘤發(fā)生早期，腫瘤啟動(dòng)細(xì)胞（tumor-initiating cells，TICs）呈現(xiàn)單個(gè)存在的狀態(tài)。Guo 等[11]在肝癌的研究中表明， TICs 中 C-C Motif 趨化因子配體2（C-C Motif chemokine ligand 2，CCL2）與集落刺激因子1（colony stimulating factor， CSF1）是 YAP- TEAD 的靶基因，激活 YAP 可以誘導(dǎo) CCL2和 CSF1的表達(dá)，從而促進(jìn) TICs 相關(guān)巨噬細(xì)胞募集，使腫瘤細(xì)胞得以生存。

YAP 還是 T 細(xì)胞免疫應(yīng)答反應(yīng)的負(fù)性調(diào)節(jié)因子。特異性 YAP 缺乏的 T 細(xì)胞中，參與 T 細(xì)胞活化、遷移的基因表達(dá)水平顯著升高，且在相應(yīng)的小鼠移植瘤模型中， CD4、CD8陽(yáng)性的 T 細(xì)胞浸潤(rùn)增加，小鼠移植瘤生長(zhǎng)緩慢。而 Hippo 通路中的核心激酶 MST1/2，已被證明是 T 細(xì)胞發(fā)育、分化和凋亡的重要調(diào)節(jié)因子，該基因敲除時(shí)會(huì)導(dǎo)致 T 細(xì)胞凋亡增加[12-13]。

值得注意的是，在該通路對(duì)天然免疫調(diào)節(jié)作用的研究中，核心激酶 LATS1/2缺失或 YAP/TAZ 過(guò)表達(dá)的腫瘤細(xì)胞會(huì)分泌大量富含核酸的細(xì)胞外囊泡，通過(guò) TLRs-Myd88/TRIF 信號(hào)增強(qiáng)抗腫瘤免疫反應(yīng)，抑制腫瘤生長(zhǎng)[14]。以上研究均表明，靶向 YAP 聯(lián)合免疫治療可能為腫瘤患者提供新的治療策略。

2.2 Hippo通路在mRNA和蛋白水平調(diào)控PD-L1的表達(dá)

PD-1屬于 CD28家族，是表達(dá)于 T 細(xì)胞表面的一種免疫檢查點(diǎn)受體。PD-L1是 PD-1的配體之一，在各實(shí)體瘤中高度表達(dá)。當(dāng) PD-1與 PD-L1結(jié)合時(shí)會(huì)抑制 CD8+T 細(xì)胞的效應(yīng)功能，并促進(jìn) T 細(xì)胞凋亡，從而幫助腫瘤細(xì)胞逃避宿主免疫。目前，針對(duì) PD-1/PD-L1的 ICIs 已被廣泛研究，并成功地用于治療包括非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer， NSCLC）在內(nèi)的各種實(shí)體腫瘤和血液惡性腫瘤[15]。

癌細(xì)胞表面 PD-L1的異常表達(dá)是腫瘤逃避免疫反應(yīng)的重要機(jī)制，并且 PD-L1的表達(dá)水平可以作為 ICIs 是否有效的預(yù)測(cè)生物標(biāo)志物。但 ICIs 作為一種單一療法，只能啟動(dòng)患者體內(nèi)固有的免疫應(yīng)答反應(yīng)，如果與其他靶向治療聯(lián)合應(yīng)用，可能會(huì)獲得更大的療效[16]。Miao 等[17]發(fā)現(xiàn)， YAP 與 PD-L1共同表達(dá)于 NSCLC 中，且 YAP 通過(guò)與 PD-L1下游的增強(qiáng)子結(jié)合調(diào)控其表達(dá)，用小干擾 RNA 和化合物維泊芬抑制 YAP 表達(dá)后， PD-L1的蛋白和 mRNA 表達(dá)水平降低。同樣，在黑色素瘤的樣本中，組成型活性 YAP 也會(huì)影響 PD-L1的表達(dá)水平，敲除 YAP 可以觀察到 PD-L1的表達(dá)明顯下降。

TAZ 作為 YAP 的類(lèi)似物，同樣也引起了眾多研究者的關(guān)注。TAZ 和 PD-L1共同表達(dá)于乳腺癌、肺腺癌等多種癌癥類(lèi)型中[18]，過(guò)表達(dá)的 TAZ 通過(guò)轉(zhuǎn)錄因子 TEAD 家族與 PD-L1的啟動(dòng)子結(jié)合，從而上調(diào) PD-L1的 mRNA 表達(dá)水平，抑制效應(yīng) T 細(xì)胞的功能。因此，深入了解 Hippo 通路與 PD-1/PD-L1的相互作用機(jī)制十分必要。

2.3 Hippo通路導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞耐藥的機(jī)制

有文獻(xiàn)指出，抑制 YAP/TAZ 能夠增加化療藥物的細(xì)胞毒性，還能提高腫瘤細(xì)胞對(duì)表皮生長(zhǎng)因子受體（epidermal growth factor receptor， EGFR）、 BRAF、MEK 等靶向抑制劑的敏感性[19]。EGFR 是一種跨膜酪氨酸激酶受體，通過(guò)參與一系列的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，調(diào)控細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖等。對(duì)于存在 EGFR 激酶結(jié)構(gòu)域突變的 NSCLC 來(lái)說(shuō)， EGFR-酪氨酸激酶抑制劑（EGFR-tyrosine kinase inhibitors， EGFR-TKIs）是一種可供選擇的靶向治療方法，而部分患者在接受 EGFR-TKIs 治療后會(huì)產(chǎn)生耐藥性[20]。臨床試驗(yàn)指出，與厄洛替尼或吉非替尼（EGFR-TKIs）單藥治療相比，聯(lián)合抗 PD-1/PD-L1抑制劑的治療并沒(méi)有提高客觀反應(yīng)率，因此，兩藥聯(lián)合治療晚期 EGFR 突變型 NSCLC 的療效尚不清楚[21]。EGFR-TKIs 耐藥細(xì)胞中 YAP 和 PD-L1的表達(dá)水平明顯升高，敲除 YAP 會(huì)顯著降低 PD-L1的表達(dá)，而同時(shí)敲除 YAP、抑制 PD-L1比單藥治療更能有效地減少腫瘤細(xì)胞的增殖[22-23]。有研究發(fā)現(xiàn)，YAP 的激活增強(qiáng)了 NSCLC 中腫瘤細(xì)胞對(duì)吉非替尼的抗藥性，使用 YAP 抑制劑維泊芬聯(lián)合吉非替尼治療更有效的抑制了腫瘤的侵襲[24]。Yi 等[25]研究了用 EGFR-TKIs 治療 NSCLC 時(shí) TME 的動(dòng)態(tài)變化。 MDSCs 在這個(gè)過(guò)程中持續(xù)升高，且血清中的炎癥因子 IL-10和 CCL-2也同樣升高，在一定程度上解釋了 PD-1/PD-L1抑制劑在 EGFR-TKIs 耐藥的 NSCLC 中療效不好的原因。同樣，黑色素瘤患者在接受 BRAF 抑制劑治療出現(xiàn)進(jìn)展后，其腫瘤細(xì)胞內(nèi)表現(xiàn)出了 YAP 的過(guò)度激活以及 T 細(xì)胞衰竭標(biāo)志物的增加，如 PD-L1，而 YAP 及 TAZ 的敲除抑制了 PD-L1的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)。這些研究均提示， Hippo 通路通過(guò)上調(diào) PD-L1的表達(dá)來(lái)抑制 T 細(xì)胞功能，進(jìn)而導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞耐藥。

3總結(jié)與展望

綜上所述，復(fù)雜的微環(huán)境與不同腫瘤組織之間的差異性使得 Hippo 通路在免疫調(diào)節(jié)過(guò)程中具有多重性作用。目前研究模型多采用黑色素瘤、卵巢癌及 NSCLC 等，對(duì)于該通路在其他常見(jiàn)實(shí)體瘤中的免疫調(diào)節(jié)作用以及藥物聯(lián)合應(yīng)用的療效問(wèn)題仍然值得深入探討。全面了解 Hippo-YAP/TAZ 通路的作用機(jī)制，開(kāi)發(fā)以 YAP 為靶點(diǎn)的抗腫瘤藥物，在臨床免疫治療中具有重要指導(dǎo)意義和實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。

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（收稿日期：2021-05-12）