中藥逍遙丸治療小鼠糖皮質(zhì)激素抑郁模型的療效研究

鞠博名 王澤鑫 鮑琦文 陳東卓 徐銘鴻 竇薇

摘要：目的：探究臨床常見用藥中藥逍遙丸對昆明小鼠糖皮質(zhì)激素抑郁模型療效。方法：雌性昆明小鼠共60只，每組15只，共四組分別為：正常、對照、中藥、西藥組，除正常組外其余各組灌胃氫化可的松，每日一次，一次0.1ml，正常組同上式灌胃0.1ml生理鹽水，連續(xù)21天后，中藥與西藥分別采用逍遙丸與氟西汀進行治療，制特定劑量混懸液分別灌胃，每日一次，一次0.1ml，正常與對照組同上式灌胃0.1ml生理鹽水，持續(xù)14d，末次給藥后對小鼠進行行為學試驗。結果：行為學試驗中，中藥與西藥組分別與對照組比較有差異（P<0.01），分別與正常組比較有差異（P<0.05）中藥組與西藥組對比小部分數(shù)據(jù)有差異（P<0.5）。結論：逍遙丸治療糖皮質(zhì)激素抑郁模型具有很好的效果且中劑量療效就已與氟西汀相當。

關鍵詞：小鼠;抑郁/藥物作用;行為學試驗;糖皮質(zhì)激素;逍遙丸;中藥;氟西汀;

抑郁癥是一種常見、嚴重和致殘性的精神障礙，有高發(fā)病、高復發(fā)、高自殺、高自殘以及低診斷的特點，且其發(fā)病不限于年齡，種族等因素[1][2]，雖然西藥抗抑郁與發(fā)展前景較好，但西藥抗抑郁效果有限，毒副作用大，易產(chǎn)生耐藥性等，因此還面臨著許多問題，而中藥療效較好且副作用小，價格低廉，不易產(chǎn)生耐藥性與不良反應[3]。

1.1材料

選用昆明雌性小鼠為實驗研究動物對象，開始時小鼠重18～21g，由齊齊哈爾醫(yī)學院動物實驗中心提供。

1.2實驗使用藥物

逍遙丸 ：河南省濟源市濟世藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號 ：1901092，氫化可的松：國藥集團容生制藥有限公司生產(chǎn)，氟西?。海≒atheon France（法國）生產(chǎn)商生產(chǎn)，禮來蘇州制藥有限公司，編號：8802A）。

1.3實驗方法

1.3.1小鼠抑郁模型建立

用糖皮質(zhì)激素——氫化可的松灌胃方式造模。

1.3.2小鼠的分組及治療

分為正常，對照，中藥和西藥共四組，每組15只，適應性喂養(yǎng)3d后，除正常組外，余組建立抑郁模型，三模型組每只每日0.1ml氫化可的松，正常組每只每日0.1ml生理鹽水，持續(xù)21d，后中藥組給予逍遙丸灌胃，將100丸逍遙丸溶于125ml蒸餾水中制成混懸液，劑量為0.3g/ml（每8丸相當于飲片3g，200，100，50丸逍遙丸分別溶于125ml蒸餾水分別制成劑量為高劑量0.6g/ml，中劑量0.3g/ml，低劑量0.15g/ml，本實驗采用中劑量0.3g/ml），每只灌胃0.1ml，西藥組給予氟西汀灌胃，每只灌胃0.1ml（10mg/kg），正常與對照組每組每只灌胃0.1ml生理鹽水，治療14d，末次給藥后進行小鼠行為學實驗。

二.評價指標與方法

2.1強迫游泳試驗

有機玻璃自制長寬高為30cm×30cm×20cm的鼠游泳盒，水深10cm，水溫保持在21℃～23℃，強迫每只鼠游泳6min后觀察記錄鼠接下來4min內(nèi)累計不動時間。

2.2懸尾試驗

將鼠尾部（距尾尖約1.5cm）用醫(yī)用膠布固定在水平木板上，鼠頭部距離實驗臺約10cm，鼠保持倒懸狀態(tài)2min后，連續(xù)觀察4min內(nèi)實驗鼠倒懸活動狀態(tài)，記錄鼠身體下垂、完全不動總時間。

2.3曠場試驗

自制長寬高分別為50cm×50cm×40cm的曠場箱，箱內(nèi)部涂成黑色，箱底正方形均分為25小格，沿箱壁的16方格記為外周格，中心9小格為中央格。鼠初始被放在中央格內(nèi)隨機位，記錄實驗5min內(nèi)鼠對各區(qū)域的探索表現(xiàn)。

2.4高架十字迷宮試驗

試驗與分析方法同韋史利，趙學軍的研究[4]，將每只鼠隨機放置于高架十字平臺位置后，拉遮光簾形成暗環(huán)境通過攝像機及軟件記錄鼠在5min內(nèi)的各種活動。

3.數(shù)據(jù)分析

spss22.0軟件分析，P分析計量資料采用平均值±標準差表示，采用單因素方差分析比較組間差異，兩兩比較時，采用LSD校正組間差異，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

三.結果

以下結果敘述中，N為正常組，A為中藥逍遙丸組，B為西藥氟西汀組，C為對照組

3.1強迫游泳試驗

游泳不動時間A，C和N有差異， B與C有差異。

3.2懸尾試驗

懸尾不動時間A，B，C和N有差異，A，B與C有差異。B的懸尾不動時間顯著高于A。

3.3曠場試驗

5min內(nèi)總格數(shù)A，C和N有差異，A和B與C之間有差異。5min內(nèi)九宮格靜止數(shù)，A，B以及和N有差異，A，B與C有差異。5min內(nèi)總靜止時間數(shù)，A，C和N有差異，A，B與C有差異。B的5min內(nèi)九宮格靜止數(shù)，顯著高于A。

3.4高架十字迷宮試驗

（OE+CE），OE/ （OE+CE）和OT/ （OT+CT）均具有差異，兩兩比較發(fā)現(xiàn)，高架總次數(shù)A，B和N均與C有差異，次數(shù)百分比B和N均與C有差異，A和B與N之間有差異。時間百分比B和N均與C有差異，且A和B與N之間有差異。

四.分析

逍遙丸可追溯于宋代，首見于《太平惠民合劑局方》中逍遙散后制為丸劑，由君藥柴胡，臣藥當歸、白芍，佐藥白術、茯苓、甘草、薄荷，君臣佐使配伍嚴謹性效及佳，具有疏肝解郁，養(yǎng)血健脾之功效，其治療范圍大，在臨床各個科室內(nèi)應用廣泛，療效好，安全且穩(wěn)定，近幾年發(fā)現(xiàn)其對產(chǎn)后抑郁癥，老年期抑郁癥也具有療效[5]，且顏巧觀[6]和張華東，蘇慧[7]及孫淑榮[8]等人臨床研究顯示中藥逍遙丸聯(lián)合西藥使用進行部分抑郁癥治療比單一使用西藥治療效果更好，具有重要臨床意義。

但抑郁癥發(fā)病機制，病理病因尚不明確?，F(xiàn)在機制機理多為單胺假說，谷氨酸假說，應激假說，去甲腎上腺素、5-羥色胺、多巴胺與其各自受體學說，乙酰膽堿能學說，HPA亢進、HPT功能減退學說，神經(jīng)元與神經(jīng)膠質(zhì)細胞自身變化等。[9][10]

蔡辰與陶河清[11]淺析后指出抑郁癥發(fā)病機制與5-HT含量下降，糖皮質(zhì)激素含量上升，谷氨酸含量上升以及海馬神經(jīng)元突觸可塑性降低有關，大多實驗研究都集中在了HPA軸病理性亢進從而引起了糖皮質(zhì)激素含量升高，吳斌[12]更是從中醫(yī)方面表示HPA與“腎”有極大聯(lián)系，由于糖皮質(zhì)激素破壞了人體腎之陰陽平衡導致了腎陽虛，且現(xiàn)在也有部分研究者如李雷[13]通過激素加減進行治療，何貴平，包祖曉等人[14]指出糖皮質(zhì)激素是一種全新制造抑郁動物模型方法，模型動物會表現(xiàn)出一系列有關的“耗竭”現(xiàn)象，而這種現(xiàn)象又與腎陽虛臨床表現(xiàn)極其相似，所以由于這種HPA軸紊亂導致腎陽虛可能也是導致患者抑郁的病因。

通過觀察試驗結果，行為學試驗中，中藥和西藥組分別與對照（P<0.01）和正常組（P<0.05）相比較均具有統(tǒng)計學意義，表示中藥和西藥均能夠治療糖皮質(zhì)激素抑郁模型小鼠，而中藥組與西藥組相比較僅有兩小點具有統(tǒng)計學意義（P<0.05），大體可以認為中劑量逍遙丸療效已與氟西汀的療效相當，若采用高劑量療效可能會持平甚至超越。

因此逍遙丸可能是通過改善體內(nèi)5-HT、DA、NE等含量、并改善體內(nèi)HPA軸、HPT軸從而改善抑郁癥狀從而達成治療效果。

綜上所述，我們發(fā)現(xiàn)逍遙丸對于糖皮質(zhì)激素抑郁模型小鼠具有很好的療效，但具體對糖皮質(zhì)激素抑郁模型小鼠干預治療機理尚不明確，可為今后動物抑郁模型以及逍遙丸治療抑郁癥提供思路與靶點。

參考文獻：

[1]瞿偉，谷珊珊.抑郁癥治療研究新進展[J].第三軍醫(yī)大學學報，2014，36（11）：1113-1117.

[2]勞詠鋒，康隨芳，姜彥彪，潘銘昊，胡榕，范艷琴，楊艷芬.20年國內(nèi)抑郁癥機制研究領域的現(xiàn)狀及熱點分析[J].中國校醫(yī)，2020，34（08）：570-572.

[3]王旭東，喬明琦，張樟進，陳剛，陳家旭，圖婭.中醫(yī)藥治療抑郁癥的研究進展[J].南京中醫(yī)藥大學學報，2016，32（01）：93-96.

[4]韋史利，趙學軍.逍遙丸對高架十字迷宮小鼠行為影響的實驗研究[J].遼寧中醫(yī)藥大學學報，2010，12（06）：265-266.

[5]管慶霞，楊志平，趙夢瑤，夏昭睿，張雪，楊芳芳，周小影，陳忠新.逍遙丸藥理研究進展[J/OL].中國實驗方劑學雜志：1-9[2021-03-10].https：//kns-cnki-net.webvpn.qmu.edu.cn/kcms/detail/11.3495.R.20210201.1808.008.html.

[6]顏巧觀.氫溴酸西酞普蘭與逍遙丸聯(lián)合治療抑郁癥的效果及護理干預分析[J].中國醫(yī)藥指南，2017，15（10）：244-245.

[7]張華東，蘇慧.帕羅西汀加逍遙丸治療抑郁癥的臨床對照研究[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結合雜志，2009，18（33）：4060-4061+4063.

[8]孫淑榮，劉泳麗，陳志芬，李劉貞，錢海凌，雷龍鳴.中西醫(yī)結合治療46例老年抑郁癥門診病人的臨床觀察[J/OL].遼寧中醫(yī)藥大學學報：1-7[2021-03-10].https：//kns-cnki-net.webvpn.qmu.edu.cn/kcms/detail/21.1543.R.20210120.1516.002.html.

[9]劉佳莉，苑玉和，陳乃宏.抑郁癥的治療研究進展[J].中國藥理學通報，2011，27（09）：1193-1196

[10]王睿，黃樹明.抑郁癥發(fā)病機制研究進展[J].醫(yī)學研究生學報，2014，27（12）：1332-1336.

[11]蔡辰，陶河清.淺析抑郁癥發(fā)病機制[J].世界最新醫(yī)學信息文摘，2018，18（76）：68+71.

[12]吳斌.糖皮質(zhì)激素副作用的中醫(yī)藥研究進展[J].時珍國醫(yī)國藥，2010，21（03）：719-721.

[13]李雷.腎病綜合征激素副作用的中醫(yī)辨治[J].河南中醫(yī)，2005（10）：36-37.

[14]何貴平，包祖曉，張麗，陳寶君.基于動物模型探討抑郁癥與中醫(yī)陽虛證的關系[J].中華中醫(yī)藥學刊，2012，30（09）：2052-2053.

本文通訊作者 竇薇 齊齊哈爾醫(yī)學院臨床病理診斷中心

大學生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓練計劃項目編號：201911230030