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    慢性乙型肝炎患者外周血NK細(xì)胞水平與肝纖維化的相關(guān)性

    2021-09-10 09:12:00李蘭亞伍廣屠濤張麗
    肝臟 2021年8期
    關(guān)鍵詞:基線外周血纖維化

    李蘭亞 伍廣 屠濤 張麗

    研究表明,慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者病情惡化與免疫功能損害有一定聯(lián)系,對患者預(yù)后情況也有影響[1]。有研究發(fā)現(xiàn),非特異性免疫對抑制CHB病情的發(fā)展也有重要作用[2]。而自然殺傷細(xì)胞(natural killer cell,NK)屬于非特異性免疫的一部分,可能也參與或推動了CHB肝纖維化的發(fā)生[3-4]。本研究通過分析外周血NK細(xì)胞表達水平對CHB患者肝纖維化的影響及預(yù)測價值,以指導(dǎo)未來CHB患者肝纖維化的風(fēng)險評估與干預(yù)。

    資料與方法

    一、一般資料

    選取2017年3月至2020年2月收治的83例CHB患者作為研究對象。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核通過,患者與家屬均知情且自愿簽署同意書。研究對象中,男性46例,女性37例;年齡22~56歲,平均年齡(40.59±7.50)歲;體質(zhì)指數(shù)18.12~24.75 kg/m2,平均體質(zhì)指數(shù)(21.57±1.89)kg/m2;病程1~15年,平均病程(5.98±3.82)年。

    納入標(biāo)準(zhǔn):①符合《CHB防治指南(2015年版)》[5]中CHB診斷標(biāo)準(zhǔn);②經(jīng)病理學(xué)、實驗室檢查等確診為CHB;③腎、肺等重要臟器檢查正常;④無血液系統(tǒng)疾病或凝血功能障礙。排除標(biāo)準(zhǔn):①合并甲、丙等其他肝炎病毒感染;②合并自身免疫性肝病或者酒精性肝??;③合并惡性腫瘤;④既往半年曾使用腎上腺皮質(zhì)激素、抗病毒藥物等。

    三、研究方法

    (一)基線資料收集方法 比較基線資料,包括性別(男/女)、年齡、體質(zhì)指數(shù)[體質(zhì)指數(shù)=體質(zhì)量(kg)÷身高(m)的平方]、病程、家族史、吸煙史(根據(jù)世界衛(wèi)生組織定義,吸煙者為一生中連續(xù)或累積吸煙6個月或以上者)、飲酒史(世界衛(wèi)生組織定義10~30 g/d為適量飲酒)等。

    (二)血清學(xué)相關(guān)指標(biāo)檢測方法 入院時,采集1 mL外周靜脈血,EDTA-K2抗凝,100 μL EDTA-K2抗凝血加入20 μL的CD16+56+PE并混勻,15~20 min的室溫避光孵育,上機溶血,使用流式細(xì)胞儀(安捷倫公司,NOVOCYTE D2040R型)測定CD16+56+水平陽性細(xì)胞占比,以代表NK細(xì)胞的含量。

    (三)肝纖維化評估方法及分組 根據(jù)Scheuer評分系統(tǒng)[6]評估,進行S(纖維化分期,分0~4期)分級,S0表示無肝纖維化,S1~S2表示輕度肝纖維化,S3表示中度肝纖維化,S4表示重度肝纖維化。將S0級無肝纖維化的患者納入對照組,其他納入肝纖維化組。

    四、統(tǒng)計學(xué)分析

    結(jié) 果

    一、肝纖維化結(jié)果及基線資料比較

    本研究納入的83例CHB患者中,57例患者發(fā)生肝纖維化,肝纖維化發(fā)生率為68.67%(57/83)。對比肝纖維化組與對照組基線資料發(fā)現(xiàn),兩組性別、年齡、體質(zhì)指數(shù)、病程、家族史、吸煙史、飲酒史比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);肝纖維化組外周血NK細(xì)胞水平低于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

    二、外周血NK細(xì)胞水平影響CHB患者肝纖維化的Logistic回歸分析結(jié)果

    (一)二元Logistic回歸分析 將外周血NK細(xì)胞表達水平作為協(xié)變量,將CHB患者肝纖維化作為因變量(1=發(fā)生肝纖維化,0=無肝纖維化),經(jīng)二元Logistic回歸分析結(jié)果顯示,外周血NK細(xì)胞低表達可能是CHB患者肝纖維化的影響因素(OR>1,P<0.05)。見表2。

    (二)多元回歸分析 將外周血NK細(xì)胞表達水平作為協(xié)變量,將CHB患者肝纖維化作為因變量(1=發(fā)生肝纖維化,0=無肝纖維化),同時將其他基線資料(性別、年齡等)納入,校正其他基線資料帶來的影響并構(gòu)建多元回歸模型行多因素分析發(fā)現(xiàn),外周血NK細(xì)胞低表達是CHB患者肝纖維化的獨立危險因素(OR>1,P<0.05)。見表3。

    表1 兩組基線資料比較

    表2 外周血NK細(xì)胞水平影響CHB患者肝纖維化二元Logistic回歸分析結(jié)果

    表3 外周血NK細(xì)胞水平影響CHB患者肝纖維化二元Logistic回歸分析結(jié)果

    三、外周血NK細(xì)胞水平預(yù)測CHB患者肝纖維化風(fēng)險價值

    繪制ROC曲線(圖1)發(fā)現(xiàn),外周血NK細(xì)胞預(yù)測CHB患者肝纖維化風(fēng)險的AUC為0.842(95%CI:0.759~0.924,P<0.001),有一定預(yù)測價值,最佳閾值9.12%、特異度0.731、靈敏度0.985、約登指數(shù)0.716。

    圖1 外周血NK細(xì)胞水平預(yù)測CHB患者肝纖維化風(fēng)險的ROC曲線圖

    討 論

    研究表明,CHB患者發(fā)生肝纖維化風(fēng)險高[7]。本研究結(jié)果顯示,83例CHB患者中57例患者發(fā)生肝纖維化,肝纖維化發(fā)生率為68.67%(57/83),與上述研究結(jié)論一致。NK細(xì)胞是人體免疫系統(tǒng)中的效應(yīng)細(xì)胞,在抗感染免疫方面具有重要作用。以往通常認(rèn)為,細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞反應(yīng)是導(dǎo)致CHB患者肝損傷和肝纖維化進展的重要因素,但近年來研究表明,NK細(xì)胞對肝臟疾病的發(fā)展具有推進作用,與CHB關(guān)系緊密[8]。由此推測,NK細(xì)胞表達水平的高低可能也會對CHB患者肝纖維化造成影響。本研究初步對比肝纖維化組與對照組基線資料發(fā)現(xiàn),肝纖維化組外周血NK細(xì)胞表達水平低于對照組。分析原因可能為:NK細(xì)胞水平的波動可能受乙肝病毒所影響,引起NK細(xì)胞再分布,表現(xiàn)為NK細(xì)胞選擇性集中于肝臟內(nèi),減少了外周血中的NK細(xì)胞含量[9-10]。CHB伴隨炎癥反應(yīng),隨著炎癥反應(yīng)的發(fā)生發(fā)展,部分炎性因子遷移至肝臟,肝臟受到侵犯后大量募集NK細(xì)胞,造成外周血NK細(xì)胞水平降低[11-12]。而發(fā)生肝纖維化的CHB患者相對炎癥反應(yīng)更為嚴(yán)重,因此肝纖維化組患者外周血NK細(xì)胞水平低于無肝纖維化的患者[13]。

    本研究初步對比了肝纖維化患者與無肝纖維化患者基線資料及外周血NK細(xì)胞水平,并做二元Logistic回歸分析后建立多元回歸模型行多因素分析,結(jié)果顯示,外周血NK細(xì)胞低表達可影響CHB患者肝纖維化,且經(jīng)ROC檢驗證實,外周血NK細(xì)胞含量用于預(yù)測CHB患者肝纖維化的發(fā)生風(fēng)險均有理想價值。分析原因可能為:NK細(xì)胞對肝炎具有抗病毒感染的功能,通過合成細(xì)胞毒物質(zhì),如顆粒酶,參與溶解和破壞靶細(xì)胞并達到殺傷作用[14]。NK細(xì)胞是淋巴細(xì)胞浸潤的一種特異性細(xì)胞,在外周血中表達水平降低是由于其集中于肝臟中,引起NK細(xì)胞在肝臟浸潤中過度應(yīng)答反應(yīng),造成肝細(xì)胞破壞和肝臟損傷,導(dǎo)致肝細(xì)胞的壞死,從而引起肝纖維化[15-16]。同時,NK細(xì)胞在肝臟內(nèi)聚集后,NK細(xì)胞表達活性的增加會造成腫瘤壞死因子-α、γ干擾素的釋放,進一步加重炎性反應(yīng),誘導(dǎo)肝纖維化的發(fā)生發(fā)展[18]。因此,外周血NK細(xì)胞表達對CHB患者的肝纖維化發(fā)生有一定影響。

    綜上所述,外周血NK細(xì)胞低表達可能與CHB進程相關(guān),影響肝纖維化發(fā)生,早期檢測外周血NK細(xì)胞水平可預(yù)測CHB患者與肝纖維化風(fēng)險并指導(dǎo)早期干預(yù),可能對改善患者預(yù)后有積極意義。

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