駝乳脂對CIA模型大鼠血清炎癥因子及關(guān)節(jié)滑膜中炎癥基因表達的影響

伊 麗，李 磊，王 昆，佟臻昊，何 靜，斯仁達來

（1 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學乳品生物技術(shù)與工程教育部重點實驗室 呼和浩特 010018 2 內(nèi)蒙古駱駝研究院 內(nèi)蒙古阿拉善盟 737300）

類風濕關(guān)節(jié)炎（Rheumatoid arthritis，RA）是一種以損害關(guān)節(jié)滑膜、軟骨和骨骼為特征的慢性炎癥性疾病[1-2]。RA 主要發(fā)病部位為手、腕、足等小關(guān)節(jié)。該病易反復發(fā)作，常為雙手、雙腿同時發(fā)病，呈對稱性分布?；疾≡缙谟嘘P(guān)節(jié)紅腫熱痛和功能障礙表現(xiàn)，到晚期時，關(guān)節(jié)可出現(xiàn)不同程度的僵硬畸形，并伴有骨損傷和骨骼肌萎縮，極易致殘。RA影響到全世界1%的人口，其發(fā)病率和死亡率也一直較高。迄今為止，類風濕性關(guān)節(jié)炎尚無特效療法[3]，治療主要以鎮(zhèn)痛、消炎，防止或減緩關(guān)節(jié)變形及損傷，增加關(guān)節(jié)活動度為主。臨床上治療的藥物主要有非甾體類抗炎藥、糖皮質(zhì)激素、改善病情的抗風濕藥等。雖然能夠緩解疾病進程，但是也存在著嚴重的不良反應(yīng)、毒副作用、耐藥性以及高額的藥物治療成本等缺點，結(jié)果都難以令人滿意[4-5]。鑒于西藥的缺陷，趙靜[6]利用弗氏佐劑與膠原蛋白混合液構(gòu)建類風濕關(guān)節(jié)炎模型，發(fā)現(xiàn)青藤堿可以有效緩解類風濕關(guān)節(jié)炎的作用。甘可[7]研究發(fā)現(xiàn)雷公藤可以顯著抑制膠原誘導關(guān)節(jié)炎小鼠關(guān)節(jié)炎癥，還能抑制破骨細胞分化激活。林兵[8]通過動物體內(nèi)藥效學實驗證實了豆豉姜提取物的抗類風濕關(guān)節(jié)炎作用。古麗巴哈爾·卡吾力等[9]、Li 等[10]和Lu 等[11]研究發(fā)現(xiàn)食用含有ω-3 的不飽和脂肪酸可以預防類風濕性關(guān)節(jié)炎及骨質(zhì)疏松癥等。

早在20世紀60年代，部分東南亞地區(qū)就有利用駝乳脂涂抹傷口的先例[12]?！侗静菥V目》上記載，駝脂具有主治頑痹風騷、惡瘡毒腫、肌肉僵硬等癥狀，有潤燥、祛風、活血、消腫等功效[13]。Arab等[14]研究發(fā)現(xiàn)將駝乳灌胃可有效緩解大鼠類風濕關(guān)節(jié)炎。目前，Ⅱ型膠原誘導型關(guān)節(jié)炎（Collageninduced arthritis，CIA）模型是最為常用的RA 模型，該模型具有與人類RA 相似的免疫學與病理學特征，且模型穩(wěn)定，是篩選治療RA 藥物的理想模型[15-18]，本試驗采用Wistar 大鼠建造CIA 模型，通過為期30 d 的駝乳脂涂抹干預，觀察大鼠的臨床表現(xiàn)、血清中的炎性因子、滑膜組織病理學切片和基因的相對表達量，探討駝乳脂對類風濕性關(guān)節(jié)炎大鼠的影響，為研究類風濕性關(guān)節(jié)炎提供一定的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動物、材料與試劑

4～6 周雌性Wistar 大鼠32 只，體質(zhì)量（150±20）g，清潔級，由北京維通利華實驗動物中心提供。

弗氏完全佐劑、Ⅱ型膠原蛋白，美國Sigma 公司；扶他林，北京諾華制藥有限公司；定量酶聯(lián)檢測試劑盒，上海酶聯(lián)生物科技有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

SIGMA 3-18K 高速臺式冷凍型離心機、BSA223S-CW 電子精密天平，德國Sartorius 公司；SQ2125 石蠟切片機，Leica 公司；實時熒光定量PCR 儀，ABI 公司；全自動核酸提取儀，Taco 公司。

1.3 方法

1.3.1 駝乳脂的制備 從阿拉善右旗采集自然放牧3～6 歲成年雙峰駝乳樣，采集后迅速用冰袋冷凍保存，試驗前緩慢解凍，至于離心機中5 000 r/min 離心30 min 上層即為乳脂。

1.3.2 CIA 大鼠模型的制備 將大鼠隨機分為4組：正常組、模型組、扶他林組、駝乳脂組，每組8只。先用0.1 mol/L 醋酸充分溶解的牛Ⅱ膠原蛋白配制成質(zhì)量濃度為2 mg/mL 的溶液于4 ℃冰箱保存，與弗氏完全佐劑等體積混合充分乳化。除正常組外，分別于大鼠左后足皮下注射0.1 mL 致炎，14 d 后改為尾巴根部同等劑量注射再次免疫。

二次免疫7 d 后，扶他林組涂抹扶他林，駝乳脂組涂抹駝乳脂，每組每天涂抹3 次，連續(xù)30 d。

1.3.3 CIA 大鼠外形評價 建模后，觀察大鼠的情緒、活動量、采食量、體質(zhì)量以及足爪腫脹度的變化。

1.3.4 大鼠關(guān)節(jié)炎指數(shù)評價 關(guān)節(jié)炎指數(shù)是判斷大鼠患病的重要的外觀檢驗指標，主觀的對關(guān)節(jié)炎病情的嚴重程度進行定量評價，對病情的變化有著參考價值。

從建模開始每隔7 d 判定一次，采用大鼠類風濕關(guān)節(jié)炎評分標準，對大鼠兩只后足進行評分，并求出每只大鼠后足關(guān)節(jié)炎評分的平均值，再根據(jù)每只大鼠關(guān)節(jié)炎評分算出每組大鼠關(guān)節(jié)炎評分平均值并記錄。大鼠類風濕關(guān)節(jié)炎評分標準如下：0 分，后足沒有關(guān)節(jié)炎表現(xiàn)；1 分，1～2 個關(guān)節(jié)發(fā)紅，軟組織發(fā)生腫脹；2 分，3～4 個關(guān)節(jié)發(fā)紅，軟組織發(fā)生腫脹；3 分，后足5 個或更多關(guān)節(jié)發(fā)紅，軟組織發(fā)生腫脹；4 分，后足嚴重關(guān)節(jié)炎。每只大鼠兩肢評分相加總分為關(guān)節(jié)炎指數(shù)，最高8 分[19]。

1.3.5 大鼠體質(zhì)量指標 體質(zhì)量變化是動物對不利條件產(chǎn)生的首個機體適應(yīng)性變化，可以直觀地反映機體的健康狀態(tài)，是動物病理實驗普通考察的指標之一，每隔4 d 對大鼠體質(zhì)量進行測定。

1.3.6 大鼠左后足爪腫脹度 建模開始后每隔4 d 利用電子游標卡尺測定大鼠左后足厚度。

1.3.7 大鼠關(guān)節(jié)影像學觀察 處死前，乙醚麻醉大鼠，對大鼠足趾及膝關(guān)節(jié)進行X 光拍攝。

1.3.8 大鼠肝、脾、腎臟器指數(shù) 試驗結(jié)束后，心臟采血處死大鼠，常規(guī)無菌操作，采取大鼠肝、脾、腎臟，稱重并記錄數(shù)據(jù)。

1.3.9 滑膜組織病理學檢查 心臟釆血處死大鼠，取大鼠滑膜組織，利用4%多聚甲醛固定，10%EDTA 脫鈣，常規(guī)脫水，石蠟包埋，切片。

1.3.10 血清中細胞因子含量的測定 心臟釆血，收集血液靜止后離心機離心，-20 ℃低溫保存，按照試劑盒的操作說明書進行白介素-10 （IL-10）、白介素-1β（IL-1β）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）檢測。

1.3.11 滑膜組織中相關(guān)炎癥因子mRNA 表達的檢測 打開關(guān)節(jié)腔后，完整的剝離大鼠滑膜組織，于-80 ℃冰箱保存待測。提取滑膜組織的RNA，并逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，根據(jù)各組的平均CT 值，計算出每個基因的相對表達量[20]。

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS 20.0 對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析；并利用GraphPad 進行了圖片繪制和相關(guān)性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 CIA 大鼠外形的變化

二次免疫后，大鼠出現(xiàn)明顯的關(guān)節(jié)炎特征，精神狀態(tài)不佳，飲食量下降，體質(zhì)量明顯下降，情緒易怒，活動能力有所下降，足爪紅腫疼痛不能著地，尾巴有潰爛現(xiàn)象。扶他林組和駝乳脂組大鼠上述現(xiàn)象都有所減緩，大鼠后足爪腫脹程度有一定緩解和消失。其中，扶他林組大鼠效果明顯；駝乳脂組大鼠原發(fā)性腫脹并沒有消失，但繼發(fā)性的紅腫得到了抑制，活動量、飲食量都有所增加，精神狀態(tài)良好；從外觀來看，與空白組大鼠相比，駝乳脂有很好的效果。

2.2 駝乳脂對大鼠關(guān)節(jié)炎指數(shù)的影響

試驗觀察了大鼠從建模開始到涂抹處理結(jié)束過程中駝乳脂對CIA 大鼠關(guān)節(jié)炎指數(shù)的影響。由圖1可知，除空白組外，二次免疫前（第14 天）各組關(guān)節(jié)炎指數(shù)以一定速率迅速升高。開始涂抹時，模型組關(guān)節(jié)炎指數(shù)還有增長的趨勢，大約35 d后，由于大鼠自身的抵抗能力，關(guān)節(jié)炎指數(shù)開始下降，但最終關(guān)節(jié)炎指數(shù)（7.80±0.45）顯著高于扶他林組和駝乳脂組關(guān)節(jié)炎指數(shù)（P＜0.05）；扶他林（3.60±0.55）對類風濕性關(guān)節(jié)炎的緩解效果大于駝乳脂（4.80±0.45）。

圖1 駝乳脂對大鼠關(guān)節(jié)評分的影響Fig.1 Effect of camel milk fat on rat joint score

2.3 駝乳脂對大鼠體質(zhì)量的影響

從建模前到涂抹處理完成，對整個過程大鼠體質(zhì)量的變化進行了測試。結(jié)果顯示，空白組大鼠體質(zhì)量隨著周齡的增加以一定的速率增加；第0天，由于大鼠周齡比較小，代謝比較旺盛，各組大鼠體質(zhì)量迅速增加，第14 天為二次免疫時間，模型組、扶他林組和駝乳脂組大鼠體質(zhì)量開始下降且有顯著性差異（P＜0.05）。第21 天開始，由于模型組大鼠自身也有抵抗力，所以模型組大鼠體質(zhì)量也有增長的趨勢，然而扶他林組和駝乳脂組大鼠體質(zhì)量增長值顯著大于模型組大鼠體質(zhì)量（P＜0.05），伴隨著大鼠精神狀態(tài)改善，食欲增加等現(xiàn)象。

表1 駝乳脂對大鼠體質(zhì)量的影響（±s，n=8）Table 1 Effect of camel milk fat on rat body weight （±s，n=8）

表1 駝乳脂對大鼠體質(zhì)量的影響（±s，n=8）Table 1 Effect of camel milk fat on rat body weight （±s，n=8）

注：*.與空白組相比差異顯著（P＜0.05），#.與模型組相比差異顯著（P＜0.05）。

時間/d 空白組/g 模型組/g 扶他林組/g 駝乳脂組/g 0 150.37±8.91 155.70±15.05 153.14±13.94 149.01±19.53 4 232.35±11.90# 216.13±17.01* 236.59±22.71*# 232.57±13.54*#8 238.53±4.39# 226.67±19.52* 241.10±20.38*# 238.35±11.33*#12 248.34±7.67# 254.26±12.73* 253.28±17.22*# 260.41±16.08*#16 253.97±7.76# 207.95±21.53* 222.45±16.82*# 219.68±14.62*#20 257.77±8.39# 204.47±23.12* 218.18±13.92*# 214.94±13.12*#24 265.86±7.62# 209.34±19.14* 231.36±22.56*# 223.44±19.69*#28 269.35±11.90# 216.13±17.01* 236.59±22.71*# 232.57±13.54*#32 273.53±4.39# 226.67±19.52* 241.10±20.38*# 238.35±11.33*#36 274.09±6.67# 232.18±20.73* 242.06±20.86*# 244.82±12.71*#40 279.77±6.30#7.72#236.97±20.17* 245.15±21.04*# 247.54±11.81*#44 283.15±242.68±16.46* 248.88±18.44*# 253.48±14.85*#48 285.45±6.49# 250.30±11.57* 251.22±18.22*# 257.97±15.71*#51 288.34±7.67# 254.26±12.73* 253.28±17.22*# 260.41±16.08*#

2.4 駝乳脂對大鼠原發(fā)性腫脹度的影響

對大鼠足趾注射牛Ⅱ蛋白乳濁液引起的直接性腫脹，稱為原發(fā)性足腫脹。本試驗所指的原發(fā)性腫脹為大鼠左后足腫脹度，可以直接表示關(guān)節(jié)炎的病情嚴重程度。結(jié)果顯示，空白組腫脹度一直保持在3 mm 左右。建模后，各組大鼠左后足爪腫脹度迅速增長，第20 天左右，關(guān)節(jié)炎腫脹達到高峰，從涂抹處理開始，腫脹度逐漸減緩。由于模型組大鼠自身也有抵抗能力，大約從第24 天足爪腫脹度也有一個下降的趨勢，但腫脹度顯著高于扶他林組和駝乳脂組（P＜0.05）。表2可直觀的看到扶他林組和駝乳脂組對CIA 關(guān)節(jié)炎大鼠足爪原發(fā)性腫脹有一定的抑制作用；但從第28 天開始，扶他林組大鼠足爪腫脹度顯著低于駝乳脂組腫脹度（P＜0.05）；這說明扶他林對CIA 關(guān)節(jié)炎大鼠足爪原發(fā)性腫脹的抑制作用高于駝乳脂。

表2 駝乳脂對大鼠原發(fā)性腫脹度的影響（±s，n=8）Table 2 Effect of camel milk fat on primary swelling degree in rats（±s，n=8）

表2 駝乳脂對大鼠原發(fā)性腫脹度的影響（±s，n=8）Table 2 Effect of camel milk fat on primary swelling degree in rats（±s，n=8）

注：*.與空白組相比差異顯著（P＜0.05），#.與模型組相比差異顯著（P＜0.05）。

?時間/d 空白組/mm 模型組/mm 扶他林組/mm 駝乳脂組/mm 0 2.974±0.082 2.874±0.040 2.844±0.044 2.910±0.057*4 2.984±0.082# 3.176±0.040* 3.158±0.040* 3.224±0.051*8 2.988±0.076# 3.494±0.035* 3.488±0.040* 3.534±0.051*12 3.036±0.070# 3.722±0.042* 3.726±0.042* 3.766±0.063*16 3.004±0.062# 4.106±0.038* 4.090±0.038*# 3.874±0.063*#20 3.002±0.055# 4.312±0.035* 4.132±0.028# 3.998±0.056#24 3.000±0.061# 4.372±0.041* 4.008±0.033*# 3.932±0.054*#28 2.988±0.055# 4.300±0.035* 3.862±0.030* 3.874±0.060*#32 2.978±0.044# 4.244±0.035* 3.714±0.029*# 3.804±0.063*#36 3.000±0.046# 4.176±0.036* 3.596±0.036*# 3.726±0.067*#40 3.018±0.046# 4.104±0.035* 3.462±0.030*# 3.638±0.070*#44 3.022±0.036# 4.024±0.043* 3.364±0.019*# 3.570±0.070*#48 3.016±0.034# 3.906±0.036* 3.310±0.019*# 3.526±0.070*#51 2.996±0.031# 3.734±0.035* 3.244±0.019*# 3.484±0.065*#

2.5 駝乳脂對大鼠關(guān)節(jié)的影響

X 射線影像可觀察到周圍軟組織的變化，例如腫脹、增厚、關(guān)節(jié)間隙增大、骨侵蝕、骨變形等情況。由圖2和3 可知，空白組大鼠足爪骨骼輪廓清晰，關(guān)節(jié)間隙較小，膝關(guān)節(jié)骨密度堅實，滑膜組織沒有增厚現(xiàn)象；模型組大鼠足爪骨骼輪廓嚴重模糊，關(guān)節(jié)間隙被炎性細胞填充，膝關(guān)節(jié)骨侵蝕現(xiàn)象嚴重，滑膜組織嚴重增厚。扶他林組大鼠足爪輪廓明顯緩解，骨骼較清晰，膝關(guān)節(jié)骨侵蝕現(xiàn)象消失，軟組織明顯變?。获勅橹M足爪關(guān)節(jié)腫大現(xiàn)象明顯減輕，足趾間隙明顯緩解，膝關(guān)節(jié)軟組織也有很大的改善。

圖2 大鼠足爪光學檢測Fig.2 Optical detection of rat paws

圖3 大鼠膝關(guān)節(jié)光學檢測Fig.3 Rat knee joint optical detection

2.6 駝乳脂對大鼠臟器指數(shù)的影響

實驗動物的內(nèi)臟器官質(zhì)量和臟器系數(shù)是其主要的生物學特性之一，實驗動物臟器的質(zhì)量及其系數(shù)能反映動物所處的生長發(fā)育階段和生理狀況[21]。由圖4可知，模型組各臟器指數(shù)顯著高于其它組（P＜0.05）。經(jīng)過涂抹處理后，扶他林組和駝乳脂組各臟器指數(shù)低于模型組，且扶他林組臟器指數(shù)更接近空白組。

圖4 駝乳脂對大鼠免疫器官指數(shù)的影響Fig.4 Effect of camel milk fat on immune organ index in rats

2.7 駝乳脂對大鼠化膜組織病理學變化的影響

HE 染色結(jié)果顯示，正常組大鼠關(guān)節(jié)面光滑無破壞，滑膜組織結(jié)構(gòu)完成，細胞排列整齊，未見炎性細胞浸潤及血管增生，未見異常（圖5a）；模型組大鼠滑膜組織表現(xiàn)出許多與RA 相似的典型病理特征，如：細胞增生，纖維組織增生，炎癥細胞浸潤等（圖5b）；扶他林和駝乳脂可以不同程度地緩解CIA 大鼠的這些變化（圖5c 和圖5d）；其中駝乳脂對CIA 大鼠滑膜組織有著較好的效果。

圖5 大鼠滑膜組織切片（200×）Fig.5 Rat synovial tissue section （200×）

2.8 駝乳脂對大鼠血清中炎癥因子水平的影響

與空白組比較，模型組大鼠血清中抗炎因子IL-10 的含量顯著降低（P＜0.05），炎癥因子IL-1β 和IL-6 的含量顯著升高（P＜0.05）。經(jīng)30 d 涂抹處理后，與模型組比較，扶他林和駝乳脂組均能顯著提高抗炎因子IL-10 的含量（P＜0.05），降低炎癥因子IL-1β 和IL-6 的含量（P＜0.05）（圖6）。模型組大鼠血清中的TNF-α 含量較空白組高，但各組之間無顯著差異，無統(tǒng)計學意義。

圖6 大鼠血清中炎性因子的含量Fig.6 Content of inflammatory factors in rat serum

2.9 駝乳脂對大鼠滑膜組織中炎癥因子水平的影響

由圖7可知，各組間IL-1β 基因表達量都有顯著性差異，模型組的相對表達量顯著高于其它組（P＜0.05）；模型組大鼠滑膜組織中TNF-α 基因的相對表達量稍高，但各組間并沒有統(tǒng)計學意義，導致這一結(jié)果的原因可能是建模并沒有影響這一基因的變化。模型組大鼠滑膜組織中IκB、IKK 和RIP1 基因的表達量均高于其它組，其中扶他林組的表達量要顯著低于駝乳脂組（P＜0.05），說明扶他林的作用效果高于駝乳脂。

圖7 大鼠滑膜組織中基因表達Fig.7 Gene expression in rat synovial tissue

3 討論

RA 是一種表現(xiàn)為慢性、侵蝕性關(guān)節(jié)炎為主要特點的自身免疫性疾病，若不及時的干預治療可引起關(guān)節(jié)畸形或強直，進而可引起機體關(guān)節(jié)功能喪失導致殘疾[22-23]。近些年來，RA 的發(fā)病率逐年上升，且其存在治療后反復發(fā)作、致殘率高等特點[23-25]。RA 的主要治療手段包括糖皮質(zhì)激素，生物療法和抗風濕藥物（DMARDs）[26]。然而，長期服用這些藥物會產(chǎn)生不良作用且治療成本過高，因此急需研究副作用少的RA 治療劑。

大量研究表明，促炎因子TNF-α，IL-1β 和IL-6 在RA 發(fā)展過程中起關(guān)鍵作用[27-30]。IL-1β 是最強的骨吸收劑，能夠調(diào)節(jié)免疫細胞，還可以使滑膜細胞合成和釋放前列腺素E2（PGE2），造成關(guān)節(jié)損傷[30-31]。TNF-α 主要由纖維滑膜細胞和單核巨噬細胞產(chǎn)生，可以促進滑膜細胞中PGE2 的釋放，抑制骨保護素（OPG）的表達，導致滑膜增生和骨代謝異常[32]。IL-6 是一種多效促炎細胞因子，通過誘導新血管生成，炎性細胞浸潤和滑膜增生來促進滑膜炎[33]。IL-1β 和TNF-α 能夠誘導IL-6 的合成，促進IL-6 的分泌，提高滑膜細胞和成骨細胞中NF-κB 活化因子配體的釋放，從而促進破骨細胞生成因子的表達[34]。IL-10 可作為抗炎信號，減弱激活的巨噬細胞和嗜中性粒細胞釋放促炎細胞因子，但有研究發(fā)現(xiàn)，RA 患者體內(nèi)IL-10 水平較低[35]。因此，抑制這些促炎因子的產(chǎn)生可以有效的控制炎癥反應(yīng)，緩解關(guān)節(jié)癥狀。

本研究選用CIA 模型，探究了駝乳脂對類風濕關(guān)節(jié)炎的保護作用。結(jié)果顯示，經(jīng)駝乳脂涂抹處理30 d 后，RA 大鼠采食量、足腫脹度、關(guān)節(jié)炎指數(shù)、體質(zhì)量和關(guān)節(jié)骨表面均有明顯的改善，該結(jié)果與郭強[36]和朱玉芳等[37]的研究結(jié)果一致。通過測定RA 大鼠血清中炎癥因子發(fā)現(xiàn)，駝乳脂涂抹可以有效的提高抗炎因子IL-10 的含量，顯著降低IL-6、IL-1β 的含量（P＜0.05），該結(jié)果與朱陽春[38]的研究結(jié)果一致。駝乳中脂肪酸的組成隨其來源而變化，例如我國雙峰駝乳中飽和脂肪酸的含量為54.14%[39]，沙特單峰駝乳中飽和脂肪酸的含量為65%[40]。眾所周知，飲食中的飽和脂質(zhì)會增強促炎性細胞因子的表達[41]。在駝乳飽和脂肪酸中棕櫚酸含量最高，且棕櫚酸已被確定為促炎性物質(zhì)[42]。研究表明，駝乳對健康的有益之處歸因于其油酸、共軛亞油酸、ω-3 脂肪酸，短鏈和中鏈脂肪酸以及其它生物活性化合物[43]。駝乳中短鏈脂肪酸的含量比牛、羊、綿羊和水牛少6～8 倍[44]。鑒于此，駝乳脂緩解炎癥反應(yīng)可能是飽和和不飽和脂肪酸的協(xié)同作用所致，該推測與Al-Nasseri 等[45]的研究結(jié)果一致。

RA 的發(fā)病機理中涉及NF-κB 通路的激活，該通路在RA 的炎癥、痛覺過敏和組織損傷中起著重要作用[46]。在正常情況下，NF-κB 與IκB 形成復合物，以無活性的形式存在于細胞漿中。當受刺激后，IKK 激酶被激活，使IκB 發(fā)生磷酸化，隨后被泛素化酶識別，導致IκB 被蛋白酶體降解，釋放與IκB 結(jié)合的NF-κB 轉(zhuǎn)錄因子，使其移位到細胞核以調(diào)控下游炎癥因子的轉(zhuǎn)錄與表達，誘發(fā)和加重炎癥反應(yīng)[47-49]。Arab 等[14]的研究發(fā)現(xiàn)，使用駝乳灌胃能夠顯著降低佐劑誘導關(guān)節(jié)炎大鼠軟組織中的TNF-α，環(huán)氧合酶-2（COX-2），一氧化氮合酶（iNOS）及上游效應(yīng)物NF-κB 的表達，并增強抗炎因子IL-10 的表達。Al-Nasseri 等[45]的研究表明，駝乳脂能夠下調(diào)NF-κB 和核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體3（NLRP3）等關(guān)鍵炎癥因子的表達，增強IL-10，白介素-1 受體拮抗劑（IL-1Ra）和TET甲基胞嘧啶雙加氧酶2（TET-2）等抗炎因子的表達以緩解糖化血清白蛋白（gBSA）誘導的巨噬細胞炎癥。本研究發(fā)現(xiàn)，駝乳脂可顯著降低RA 大鼠滑膜組織中炎癥因子IL-1β、IκB、IKK 和RIP1 mRNA 的表達（P＜0.05）。由此推測駝乳脂對滑膜組織的保護作用是通過抑制NF-κB 通路降低炎癥因子表達而實現(xiàn)的。

4 結(jié)論

綜上所述，駝乳脂可有效改善大鼠的活動量、采食量、腫脹程度，增加體質(zhì)量等；也可降低外周血清IL-1β、IL-6 的含量，促進IL-10 含量上升，降低NF-κB 通路的表達來減輕炎癥反應(yīng)。盡管這些脂質(zhì)介導其活性的確切機制尚待證實，但本研究提供的數(shù)據(jù)闡明了駝乳脂對關(guān)節(jié)炎和其它炎癥性疾病有益的潛在機制。今后，需要進一步證實駝乳脂對NF-κB 信號通路及其相關(guān)基因功能的直接作用。