旋轉(zhuǎn)恒溫箱在快速細(xì)菌培養(yǎng)及鑒定中的應(yīng)用

石冬月 撫順市望花區(qū)疾病預(yù)防控制中心 （遼寧 撫順 113001）

內(nèi)容提要：目的：分析旋轉(zhuǎn)恒溫箱在快速細(xì)菌培養(yǎng)及鑒定中的應(yīng)用價(jià)值。方法：選取2019年3月～2020年6月的100份待測(cè)模擬樣本，分別使用快速法的普通恒溫培養(yǎng)箱和旋轉(zhuǎn)恒溫箱進(jìn)行培養(yǎng)，比較普通恒溫培養(yǎng)箱和旋轉(zhuǎn)恒溫箱陽(yáng)性顯示時(shí)間以及結(jié)果判讀時(shí)間。結(jié)果：旋轉(zhuǎn)恒溫箱陽(yáng)性顯示所需時(shí)間明顯少于普通恒溫培養(yǎng)箱（P<0.05）；旋轉(zhuǎn)恒溫箱各物質(zhì)結(jié)果判斷所用時(shí)間均明顯少于普通恒溫培養(yǎng)箱（P<0.05）。結(jié)論：旋轉(zhuǎn)恒溫箱在細(xì)菌培養(yǎng)和鑒定中的效率明顯高于普通恒溫培養(yǎng)箱，有助于縮短培養(yǎng)時(shí)間和結(jié)果判斷時(shí)間，提高檢測(cè)效率。

細(xì)菌培養(yǎng)是指利用人工方法讓細(xì)菌快速生長(zhǎng)繁殖的方法。細(xì)菌在自然界中有著廣泛的分布。隨著現(xiàn)代檢驗(yàn)技術(shù)的不斷發(fā)展，對(duì)細(xì)菌培養(yǎng)的速度和質(zhì)量要求越來(lái)越高。但是傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)方法的耗時(shí)長(zhǎng)，至少需要18～38h才能夠獲得陽(yáng)性結(jié)果，這使得細(xì)菌判定結(jié)果也需要花費(fèi)不少的時(shí)間才能夠得出確切的結(jié)論[1]。旋轉(zhuǎn)恒溫箱是一種新型培養(yǎng)箱，能夠有效縮短細(xì)菌培養(yǎng)與鑒定的耗時(shí)，從而提高檢驗(yàn)工作的效率，且旋轉(zhuǎn)恒溫箱與進(jìn)口儀器相比，成本更低，具有經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的優(yōu)勢(shì)，能夠在基層醫(yī)院、縣區(qū)疾控中心推廣使用。文章主要針對(duì)旋轉(zhuǎn)恒溫箱的應(yīng)用效果展開分析，報(bào)道如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取選取2019年3月～2020年6月的100份待測(cè)模擬樣本，均為已知菌株和標(biāo)準(zhǔn)菌株，由臨床檢驗(yàn)中心微生物室提供。

1.2 方法

分別使用快速法的普通恒溫培養(yǎng)箱和旋轉(zhuǎn)恒溫箱進(jìn)行培養(yǎng)，比較普通恒溫培養(yǎng)箱和旋轉(zhuǎn)恒溫箱陽(yáng)性顯示所需時(shí)間差異以及結(jié)果判讀所需時(shí)間差異。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，組間差異采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料差異采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 普通恒溫培養(yǎng)箱和旋轉(zhuǎn)恒溫箱陽(yáng)性顯示所需時(shí)間差異

旋轉(zhuǎn)恒溫箱陽(yáng)性顯示所需時(shí)間明顯少于普通恒溫培養(yǎng)箱（P<0.05），見表1。

表1.普通恒溫培養(yǎng)箱和旋轉(zhuǎn)恒溫箱陽(yáng)性顯示所需時(shí)間差異

2.2 普通恒溫培養(yǎng)箱和旋轉(zhuǎn)恒溫箱結(jié)果判讀所需時(shí)間差異

旋轉(zhuǎn)恒溫箱各物質(zhì)結(jié)果判斷所用時(shí)間均明顯少于普通恒溫培養(yǎng)箱（P<0.05），見表2。

表2.普通恒溫培養(yǎng)箱和旋轉(zhuǎn)恒溫箱結(jié)果判讀所需時(shí)間差異 (h)

3.討論

隨著感染性疾病在臨床發(fā)生率的不斷升高，加上食品衛(wèi)生事件屢屢發(fā)生，使得盡快鑒定致病菌來(lái)指導(dǎo)臨床治療和用藥成為臨床和公共衛(wèi)生的當(dāng)務(wù)之急。細(xì)菌培養(yǎng)是指通過(guò)人為干預(yù)的方式讓提取樣本中的細(xì)菌繁殖速度增加，從而用于鑒定和應(yīng)用，是一個(gè)較為復(fù)雜的技術(shù)。臨床主要是根據(jù)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)鑒定細(xì)菌來(lái)確定抗菌治療方案。感染性疾病發(fā)生后會(huì)引起炎癥反應(yīng)和器官功能障礙，因此在治療感染性疾病時(shí)需要明確病原體，才能夠采取針對(duì)性的治療方案。普通的血常規(guī)雖然能夠發(fā)現(xiàn)人體炎癥反應(yīng)的發(fā)生，但是無(wú)法確定患者的病原菌，也無(wú)法選擇敏感藥物。因此仍需要通過(guò)細(xì)菌培養(yǎng)來(lái)指導(dǎo)臨床用藥，同時(shí)能夠評(píng)估患者的預(yù)后情況。細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果是抗菌藥物治療方案制定的重要基礎(chǔ)，能夠準(zhǔn)確鑒別病原菌。培養(yǎng)時(shí)需要根據(jù)細(xì)菌種類選擇相應(yīng)的培養(yǎng)方法、培養(yǎng)基以及培養(yǎng)條件[2]。通常先將樣本接種在培養(yǎng)基上進(jìn)行分離培養(yǎng)，之后對(duì)培養(yǎng)的菌落形態(tài)、生化以及血清學(xué)反應(yīng)進(jìn)行進(jìn)一步的鑒定。目前常用的培養(yǎng)基有肉湯、蛋白胨、氯化鈉、葡萄糖以及血液等。需氧菌通常都是在有氧環(huán)境中培養(yǎng)，而厭氧菌則是在無(wú)氧環(huán)境中培養(yǎng)，雖然大部分細(xì)菌的培養(yǎng)時(shí)間為16～38h，但也有特殊細(xì)菌需要培養(yǎng)數(shù)周至數(shù)月左右，例如結(jié)核菌就需要培養(yǎng)1個(gè)月的時(shí)間[3]。傳統(tǒng)微生物檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)，導(dǎo)致在等待檢測(cè)結(jié)果的時(shí)間內(nèi)只能憑經(jīng)驗(yàn)用藥，很容易造成耐藥事件的發(fā)生，不但影響了臨床治療效果，同時(shí)導(dǎo)致醫(yī)藥資源的浪費(fèi)[4]。因此需要縮短細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)間，從而為后續(xù)的藥敏試驗(yàn)以及治療方案調(diào)整爭(zhēng)取更多的時(shí)間。目前一些醫(yī)院和省級(jí)疾控中心引入了高智能化的全自動(dòng)生化分析儀以及藥敏分析系統(tǒng)，以加速微生物測(cè)量效率，但是由于進(jìn)口設(shè)備昂貴，測(cè)量成本高，增加了患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。而基層醫(yī)院和縣區(qū)疾控中心也無(wú)法承擔(dān)這些儀器費(fèi)用[5]。而本次研究發(fā)現(xiàn)旋轉(zhuǎn)恒溫箱的應(yīng)用能夠有效縮短細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)間，從而指導(dǎo)臨床用藥，最大程度提高臨床治療效果，從而采取有效的治療方案，同時(shí)可以根據(jù)血清培養(yǎng)結(jié)果來(lái)判斷治療的有效性，若轉(zhuǎn)為陰性則代表治療有效，若仍為陽(yáng)性則可能出現(xiàn)耐藥的情況，需要進(jìn)一步選擇其他藥物或采取聯(lián)合治療方案，提高治療效果，確保臨床用藥的科學(xué)性。

傳統(tǒng)恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)細(xì)菌所需時(shí)間大約為16～38h，而旋轉(zhuǎn)恒溫箱不但具有經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的優(yōu)勢(shì)，且細(xì)菌培養(yǎng)速度快，能夠獲得與進(jìn)口檢測(cè)儀器基本相同的結(jié)果，但成本大幅下降，可以在基層醫(yī)院和縣區(qū)疾控中心推廣使用[6]。旋轉(zhuǎn)恒溫箱主要是通過(guò)不斷旋轉(zhuǎn)載物網(wǎng)，讓培養(yǎng)液保持流動(dòng)狀態(tài)，從而持續(xù)提供細(xì)菌生長(zhǎng)所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣，同時(shí)能夠不斷沖刷細(xì)菌繁殖代謝產(chǎn)物；而流動(dòng)樹脂能夠?qū)⒂卸疚镔|(zhì)與殘余物質(zhì)吸附掉，讓細(xì)菌處于適宜環(huán)境內(nèi)，加速細(xì)菌生長(zhǎng)。因此旋轉(zhuǎn)恒溫箱在細(xì)菌培養(yǎng)的花費(fèi)時(shí)間明顯短于普通恒溫培養(yǎng)箱。本次研究中旋轉(zhuǎn)恒溫箱陽(yáng)性顯示所需時(shí)間明顯低于普通恒溫培養(yǎng)箱（P<0.05），這說(shuō)明了旋轉(zhuǎn)恒溫箱能夠有效縮短細(xì)菌培養(yǎng)所需時(shí)間，提高了細(xì)菌檢測(cè)和鑒定的效率。

旋轉(zhuǎn)恒溫箱在細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中由于還原反應(yīng)會(huì)使得培養(yǎng)基的顏色產(chǎn)生變化，顏色會(huì)從原來(lái)的粉紅色變成鮮艷的紫紅色，從而反映了細(xì)菌生長(zhǎng)速度，也更容易判斷。傳統(tǒng)的恒溫培養(yǎng)箱是靜止培養(yǎng)，無(wú)法快速補(bǔ)充細(xì)菌所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，而細(xì)菌的代謝產(chǎn)物也無(wú)法有效清除，因此培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)，同時(shí)其主要是通過(guò)肉眼觀察培養(yǎng)基渾濁度變化來(lái)判斷菌落生長(zhǎng)，會(huì)受到檢驗(yàn)人員主觀意識(shí)的影響。七葉苷、尿素酶、靛基質(zhì)是細(xì)菌鑒定中的常見生化實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步分類，從而更好地為細(xì)菌鑒定提供思考方向，避免細(xì)菌鑒定的盲目性。高濃度培養(yǎng)液能夠提供生長(zhǎng)因子，因此能夠加速細(xì)菌繁殖速度，旋轉(zhuǎn)恒溫箱能夠通過(guò)旋轉(zhuǎn)讓細(xì)菌與培養(yǎng)液更充分的結(jié)合，在不同濃度中表現(xiàn)出的準(zhǔn)確度也明顯高于普通恒溫培養(yǎng)基。本次研究中旋轉(zhuǎn)恒溫箱各物質(zhì)結(jié)果判斷所用時(shí)間均明顯短于普通恒溫培養(yǎng)箱（P<0.05），這說(shuō)明旋轉(zhuǎn)恒溫箱能夠快速獲取鑒定結(jié)果，且不需要特殊的設(shè)備與昂貴的試劑，更加符合臨床醫(yī)學(xué)和公共衛(wèi)生的需求。

綜上所述，旋轉(zhuǎn)恒溫箱在細(xì)菌培養(yǎng)和鑒定中的效率明顯高于普通恒溫培養(yǎng)箱，有助于縮短培養(yǎng)時(shí)間和結(jié)果判斷時(shí)間，提高檢測(cè)效率。