基于高效液相色譜定量指紋圖譜和液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用定量的酸棗仁提取物質(zhì)量考察

郭秀潔, 李昊虬, 馮昊天, 戚華文, 張 露,徐 偉, 伍言娟, 王超然*, 梁鑫淼

(1. 中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所, 遼寧 大連 116023; 2. 中科院大化所中國醫(yī)藥城生物醫(yī)藥創(chuàng)新研究院, 江蘇 泰州 225300; 3. 內(nèi)蒙古乳業(yè)技術(shù)研究院有限責(zé)任公司, 內(nèi)蒙古 呼和浩特 010110; 4. 內(nèi)蒙古伊利實(shí)業(yè)集團(tuán)股份有限公司, 內(nèi)蒙古 呼和浩特 010110)

酸棗仁為鼠李科植物酸棗ZiziphusjujubaMill. var.spinosa(Bunge) Hu ex H. F. Chou的干燥成熟種子,具有養(yǎng)心補(bǔ)肝,寧心安神等功效[1,2],是我國最著名的安神類中藥材之一,也是衛(wèi)生部頒布的第一批藥食同源中藥材,被廣泛應(yīng)用于“棗仁安神顆?！薄ⅰ鞍贅访吣z囊”和“太太靜心口服液”等中成藥或保健品[3,4]。酸棗仁的主要活性成分為以斯皮諾素為代表的黃酮類和以酸棗仁皂苷A和B為代表的皂苷類等。研究表明,這些活性成分不僅具有鎮(zhèn)靜催眠作用,還具有神經(jīng)元保護(hù)作用,可抗焦慮、抗抑郁、改善記憶和治療老年癡呆等[5-7]。隨著現(xiàn)代社會(huì)工作節(jié)奏的加快,生活壓力的增加,患有睡眠障礙問題的人群越來越多,酸棗仁水提物作為一種有效的助眠原料也正被日益廣泛地應(yīng)用到各類助眠產(chǎn)品的開發(fā)中,獲得了極大的關(guān)注。然而,當(dāng)前市場(chǎng)上酸棗仁提取物缺少統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn),市場(chǎng)產(chǎn)品良莠不齊,存在理?xiàng)椚蕮郊?、輔料稀釋增重或采用醇提等不合規(guī)生產(chǎn)工藝提高成分含量等一系列問題,導(dǎo)致企業(yè)在應(yīng)用酸棗仁提取物開發(fā)功能性食品時(shí),難以評(píng)估供應(yīng)商原料的真假優(yōu)劣,面臨較大的質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)。為此,企業(yè)亟須建立一種準(zhǔn)確、全面的分析方法對(duì)酸棗仁提取物進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)。

2020版《中國藥典》對(duì)酸棗仁藥材分別采用兩個(gè)液相色譜方法對(duì)斯皮諾素和酸棗仁皂苷A進(jìn)行含量測(cè)定,其中酸棗仁皂苷A的含量測(cè)定使用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)檢測(cè)。斯皮諾素在摻假品理?xiàng)椚手泻扛?而酸棗仁皂苷A在理?xiàng)椚手袔缀鯖]有,酸棗仁皂苷B在酸棗仁中的含量也遠(yuǎn)高于理?xiàng)椚?因此兩個(gè)皂苷成分可以作為兩者區(qū)分的特征成分[8,9]。目前,針對(duì)酸棗仁提取物含量測(cè)定的文獻(xiàn)報(bào)道較少,且多針對(duì)醇提物中酸棗仁皂苷A和B的測(cè)定[10],或者是采用樹脂富集后進(jìn)行總皂苷測(cè)定[11]。但由于酸棗仁皂苷本身含量較低(飲片要求含量不低于0.03%),水提過程中皂苷轉(zhuǎn)移率低,且在生產(chǎn)過程中往往添加輔料輔助干燥或進(jìn)行稀釋,針對(duì)藥材或醇提工藝開發(fā)的HPLC-ELSD含量測(cè)定方法靈敏度不足以適用于提取物的檢測(cè)。為此,本文建立了超高效液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜(UPLC-QqQ-MS/MS)法來測(cè)定酸棗仁水提物中皂苷A、B含量,同時(shí)采用定量指紋圖譜的方法,建立了斯皮諾素的含量測(cè)定及其他7種成分的峰面積半定量對(duì)比方法,最終將這10種成分的含量差異統(tǒng)一用雷達(dá)圖形象展示,對(duì)不同廠家的酸棗仁提取物進(jìn)行比較研究,為酸棗仁提取物的內(nèi)控質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建設(shè)和供應(yīng)商篩選提供更多依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器、試劑與材料

Waters Alliance高效液相色譜系統(tǒng),包括2695梯度泵、2998二極管陣列檢測(cè)器、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱恒溫系統(tǒng)和Empower色譜工作站;島津超高效液相色譜(UHPLC)系統(tǒng),配SPD-20A紫外檢測(cè)器,與AB SCIEX X500系列四極桿飛行時(shí)間(QTOF)質(zhì)譜儀聯(lián)用;Waters I-Class Xevo TQ-XS超高效液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜儀;MS204TS電子分析天平(梅特勒-托利多有限公司)。

斯皮諾素對(duì)照品(批號(hào)DST191025-060,規(guī)格20 mg,含量92.7%)、酸棗仁皂苷A對(duì)照品(批號(hào)DST200510-058,規(guī)格20 mg,含量91.7%)和酸棗仁皂苷B對(duì)照品(批號(hào)DST210412-059,規(guī)格20 mg,含量87.2%)購自成都德思特生物技術(shù)有限公司。3批酸棗仁飲片分別購自四川新荷花中藥飲片股份有限公司、北京宏濟(jì)藥業(yè)有限公司和盛實(shí)百草藥業(yè)有限公司,并經(jīng)中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所楊小平高級(jí)工程師鑒定為鼠李科植物酸棗ZiziphusjujubaMill. var.spinosa(Bunge) Hu ex H. F. Chou的干燥成熟種子。

酸棗仁提取物為自制或購自不同廠家,具體信息見表1。乙腈(色譜級(jí))、甲醇(色譜級(jí))均購自Sigma-Aldrich。磷酸(色譜級(jí))、甲酸(色譜級(jí))購自Aladdin。實(shí)驗(yàn)室用水來自美國Milli-Q超純水凈化系統(tǒng)。

表1 酸棗仁提取物樣品信息

1.2 樣品制備

1.2.1酸棗仁水提物

稱取40 g酸棗仁飲片至圓底燒瓶,加水400mL,浸泡30 min,回流提取1 h,濾過,濾液轉(zhuǎn)移至1 000 mL容量瓶中,濾渣加400 mL水二次回流提取1 h,濾過,濾液轉(zhuǎn)移至前述容量瓶中,冷卻至室溫后定容,搖勻,取500 mL酸棗仁水提液,濃縮至100 mL,冷凍干燥,得到自制酸棗仁水提物。

1.2.2定量指紋圖譜供試品溶液

取酸棗仁提取物,精密稱取約1 g置于25 mL容量瓶中,加50%(v/v)甲醇水溶液約15 mL,振蕩,超聲30 min使全部溶解或溶散,冷卻至室溫后用50%(v/v)甲醇水溶液定容,過0.22 μm濾膜,即得。

1.2.3酸棗仁皂苷含量測(cè)定供試品溶液

取酸棗仁提取物,精密稱取約0.1 g置于100 mL容量瓶中,加50%(v/v)乙腈水溶液約50 mL,振蕩,超聲20 min使全部溶解或溶散,冷卻至室溫后用50%(v/v)乙腈水溶液定容,過0.22 μm濾膜,即得。

1.3 對(duì)照品儲(chǔ)備液的制備

取斯皮諾素、酸棗仁皂苷A、酸棗仁皂苷B對(duì)照品各10 mg,分別置于10 mL容量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,分別作為斯皮諾素、酸棗仁皂苷A、酸棗仁皂苷B儲(chǔ)備液。

1.4 分析條件

1.4.1HPLC----用于建立對(duì)照指紋圖譜和特征峰半定量及斯皮諾素含量測(cè)定

Waters Alliance HPLC系統(tǒng),Waters XSelect HSS C18(250 mm×4.6mm, 5 μm)色譜柱,流動(dòng)相乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)洗脫,0～5 min, 10%A～15%A; 5～25 min, 15%A～20%A; 25～35 min, 20%A～30%A; 35～40 min, 30%A～95%A; 40～46 min, 95%A;流速為1.0 mL/min;進(jìn)樣量為10 μL;柱溫為40 ℃;檢測(cè)波長(zhǎng)為337 nm。

1.4.2HPLC-QTOF-MS----用于對(duì)照指紋圖譜中特征峰的鑒定

島津UHPLC系統(tǒng),與AB SCIEX X500系列QTOF質(zhì)譜儀聯(lián)用,LC條件中流動(dòng)相為乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B),其余條件同1.4.1節(jié)。離子源:ESI;負(fù)離子模式;氣簾氣:241 kPa; Gas 1: 379 kPa; Gas 2: 379 kPa;溫度:550 ℃;離子化壓力:-4 500 V,去簇電壓:-80 V;全掃描范圍:m/z50～1 500;裂解電壓:-40 V。CE Spread: 20 V。

1.4.3UPLC-QqQ-MS----用于皂苷A、B的定量測(cè)定

Waters I-Class Xevo TQ-XS UPLC-QqQ-MS儀,Waters ACQUITY UPLC BEH C18(50 mm×2.1 mm, 1.7 μm)色譜柱。流動(dòng)相為乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B);梯度洗脫:0～2 min, 19%A～23%A; 2～4 min, 23%A～95%A; 4～7 min, 95%A; 7～7.1 min, 95%A～19%A; 7.1～10 min, 95%A～19%A,流速為0.3 mL/min,柱溫為30 ℃;進(jìn)樣量為2 μL。離子源:ESI;正離子模式;碰撞氣,氬氣;霧化氣,氮?dú)?加熱氣,氮?dú)?毛細(xì)管電壓3.00 kV;源溫度150 ℃, MRM模式監(jiān)測(cè),皂苷質(zhì)譜參數(shù)見表2。

表2 酸棗仁皂苷A和B的質(zhì)譜參數(shù)

2 結(jié)果與討論

2.1 指紋圖譜的建立

取3批自制酸棗仁水提物,按1.2.2節(jié)的方法制備HPLC指紋圖譜供試品溶液,按1.4.1節(jié)的方法依次進(jìn)樣檢測(cè),將3批自制酸棗仁水提物樣品的色譜圖全部導(dǎo)入《中藥色譜特征圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)軟件》(2012版),以第一批自制酸棗仁水提物(STW2006093)的圖譜為校正參照,使用中位數(shù)進(jìn)行自動(dòng)匹配,加以多點(diǎn)校正,可識(shí)別8個(gè)主要共有色譜峰,得到酸棗仁水提物的對(duì)照譜圖(見圖1)。選擇出峰時(shí)間穩(wěn)定且相對(duì)居中的斯皮諾素峰(3號(hào)峰)作為參比峰。

圖1 酸棗仁水提物HPLC指紋圖譜及其共有模式Fig. 1 HPLC fingerprints and their common pattern of Ziziphi Spinosae Semen water extracts Mobile phase A: acetonitrile; mobile phase B: water containing 0.1% (v/v) phosphoric acid. Column: Waters XSelect HSS C18 (250 mm×4.6 mm, 5 μm). Gradient program: 0-5 min, 10%A-15%A; 5-25 min, 15%A-20%A; 25-35 min, 20%A-30%A; 35-40 min, 30%A-95%A; 40-46min, 95%A. Detection wavelength: 337 nm. Injection volume: 10 μL. Column temperature: 40 ℃. Flow rate: 1.0 mL/min. For peaks, see Table 3.

取批號(hào)為STW2006093的自制酸棗仁水提物,制備供試品溶液,以HPLC-QTOF-MS分析,采集質(zhì)譜數(shù)據(jù),通過比對(duì)精確相對(duì)分子質(zhì)量和特征碎片離子,結(jié)合軟件推斷的分子式及文獻(xiàn)報(bào)道[12,13],鑒定出酸棗仁水提物8個(gè)共有峰的結(jié)構(gòu),結(jié)果見表3。

表3 酸棗仁水提物特征峰的鑒定

取15批不同廠家酸棗仁提取物,采集得到HPLC指紋圖譜(見圖2)并進(jìn)行相似度分析。15批不同廠家的酸棗仁提取物指紋圖譜與共有模式對(duì)照指紋圖譜相似度分別為0.992(A), 0.947(B), 0.960(C), 0.991(D), 0.976(E), 0.966(F), 0.957(G), 0.978(H), 0.935(I), 0.961(J), 0.989(K), 0.104(L), 0.989(M), 0.950(N), 0.980(O)。相似度結(jié)果顯示,除廠家L外,14批不同廠家酸棗仁提取物的相似度均在0.9以上,但從色譜圖上看,這些提取物樣品在成分組成和含量上有著顯著差異。

圖2 15批酸棗仁提取物的HPLC指紋圖譜Fig. 2 HPLC fingerprints of 15 batches of Ziziphi Spinosae Semen extracts Peak identifications: 1. vicenin-2; 2. glucosylvitexin; 3. spinosin; 4. 6″′-feruloylspinosin; 5. 6″-O-(3-Glc-indole-acetyl) spinosin or its isomer; 6. 6″-O-(3-Glc-indole-acetyl) spinosin or its isomer; 7. 6″-O-(3-Glc-indole-acetyl)-6″′-feruloyl spinosin or its isomer; 8. 6″-O-(3-Glc-indole-acetyl)-6″′-feruloyl spinosin or its isomer.

2.2 指紋圖譜方法學(xué)考察[14]

精密度 取批號(hào)為STW2006093的自制酸棗仁水提物,制備供試品溶液,連續(xù)進(jìn)樣6次,8個(gè)特征峰的相對(duì)保留時(shí)間RSD均小于1%,相對(duì)峰面積RSD小于5%,表明儀器精密度良好。

穩(wěn)定性 取批號(hào)為STW2006093的自制酸棗仁水提物,制備供試品溶液,分別于0、6、12、18、24 h注入液相色譜儀,8個(gè)特征峰的相對(duì)保留時(shí)間RSD均小于1%,相對(duì)峰面積RSD小于5%,表明供試品溶液24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

重復(fù)性 取批號(hào)為STW2006093的自制酸棗仁水提物,制備6份供試品溶液,進(jìn)樣測(cè)定,8個(gè)特征峰的相對(duì)保留時(shí)間RSD均小于1%,相對(duì)峰面積RSD小于5%,表明該方法重復(fù)性良好。

2.3 斯皮諾素方法學(xué)考察與含量測(cè)定

檢出限與定量限 精密吸取斯皮諾素儲(chǔ)備液適量,逐級(jí)稀釋后進(jìn)行測(cè)定,以信噪比(S/N)為3～10作為方法的檢出限(LOD),以S/N為10～20作為方法的定量限(LOQ),得出斯皮諾素的檢出限為0.6 mg/L,定量限為1.9 mg/L。

線性關(guān)系 精密吸取斯皮諾素儲(chǔ)備液適量,配制成5個(gè)質(zhì)量濃度系列的對(duì)照品溶液,進(jìn)行測(cè)定,以斯皮諾素質(zhì)量濃度(X)為橫坐標(biāo),峰面積(Y)為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)(r2)和線性范圍,結(jié)果見表4。

表4 斯皮諾素、酸棗仁皂苷A和B的線性關(guān)系和線性范圍

精密度 取斯皮諾素對(duì)照品溶液,連續(xù)進(jìn)樣6次,測(cè)得斯皮諾素峰面積的RSD值為0.38%,表明儀器精密度良好。

穩(wěn)定性 取批號(hào)為STW2006093的自制酸棗仁水提物,按照1.2.2節(jié)下樣品處理方法制備供試液,在制備后的0、6、12、18、24 h分別進(jìn)行HPLC測(cè)定,得到斯皮諾素峰面積的RSD為0.64%,表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

重復(fù)性 取同一自制酸棗仁水提物6份(批號(hào)STW2006093),分別制備供試液,測(cè)定HPLC譜圖,記錄斯皮諾素的峰面積,計(jì)算6份平行樣中斯皮諾素含量RSD為0.45%,表明本方法重復(fù)性較好。

加樣回收率 取自制酸棗仁水提物6份(批號(hào)STW2006093),每份0.5 g,精密稱定,置于25 mL容量瓶中,加入斯皮諾素1 mg,加50%(v/v)甲醇水溶液約15 mL,振蕩,超聲30 min使全部溶解或溶散,冷卻至室溫后用50%(v/v)甲醇水溶液定容,過0.22 μm濾膜后進(jìn)行HPLC測(cè)定,結(jié)果顯示,斯皮諾素的回收率為90.70%, RSD為1.16%。

樣品含量測(cè)定 對(duì)3批自制酸棗仁水提物和來自15個(gè)不同廠家的酸棗仁提取物進(jìn)行分析,測(cè)定斯皮諾素的含量,結(jié)果見表5。結(jié)果顯示,18批樣品中斯皮諾素含量在0～0.62%之間,含量測(cè)定的RSD均小于2%。

表5 酸棗仁提取物中斯皮諾素、酸棗仁皂苷A和B的含量及RSD (n=3)

2.4 酸棗仁皂苷A和B方法學(xué)考察與含量測(cè)定

檢出限和定量限 分別精密吸取酸棗仁皂苷A和B儲(chǔ)備液適量,逐級(jí)稀釋進(jìn)樣測(cè)定,以S/N為3～10作為方法的LOD,以S/N為10～20作為方法的LOQ,得出酸棗仁皂苷A的LOD為0.007 μg/L,LOQ為0.02 μg/L,酸棗仁皂苷B的LOD為0.007 μg/L,LOQ為0.02 μg/L。

線性關(guān)系 精密吸取酸棗仁皂苷A和B儲(chǔ)備液適量,配制成7個(gè)質(zhì)量濃度的系列混合對(duì)照品溶液,進(jìn)樣測(cè)定,以質(zhì)量濃度(X)為橫坐標(biāo),峰面積(Y)為縱坐標(biāo),得線性回歸方程、r2和線性范圍,結(jié)果見表4。

精密度 取酸棗仁皂苷A和B對(duì)照品混合溶液,連續(xù)進(jìn)樣6次測(cè)定,得到酸棗仁皂苷A和B峰面積的RSD分別為0.70%和3.29%,表明儀器精密度良好。

穩(wěn)定性 取自制酸棗仁水提物(批號(hào)STW2006093),制備供試液,在制備后的0、6、12、18、24 h分別進(jìn)行測(cè)定,得到酸棗仁皂苷A和B峰面積的RSD分別為1.23%和1.89%,表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

重復(fù)性 取同一自制酸棗仁水提物6份(批號(hào)STW2006093),制備供試液,進(jìn)樣測(cè)定,記錄酸棗仁皂苷A和B的峰面積,計(jì)算6份平行樣中酸棗仁皂苷A和B含量的RSD分別為2.35%和1.88%,表明本方法重復(fù)性較好。

加樣回收率 取自制酸棗仁水提物6份(批號(hào)STW2006093),每份0.05 g,精密稱定,置于100 mL容量瓶中,加入酸棗仁皂苷A 0.04 mg,酸棗仁皂苷B 0.02 mg,加50%(v/v)乙腈水溶液約50 mL,振蕩,超聲20 min,冷卻至室溫后用50%(v/v)乙腈水溶液定容,過0.22 μm濾膜后進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果顯示,酸棗仁皂苷A和B的回收率分別為94.14%和91.41%, RSD分別為1.27%和2.38%。

樣品含量測(cè)定 通過對(duì)3批自制酸棗仁水提物和15批不同廠家酸棗仁提取物進(jìn)行分析,測(cè)定酸棗仁皂苷A和B的含量,含量測(cè)定結(jié)果見表5。結(jié)果顯示,18批樣品中酸棗仁皂苷A含量在0～0.42%之間,酸棗仁皂苷B含量在0～0.22%之間。

2.5 雷達(dá)圖分析

雷達(dá)圖分析方法是基于一種形似導(dǎo)航雷達(dá)顯示屏上的圖形而構(gòu)建的一種多變量對(duì)比分析技術(shù)。在雷達(dá)圖中,每組評(píng)價(jià)指標(biāo)都有一個(gè)獨(dú)立的單一數(shù)值軸,坐標(biāo)軸呈輻射狀分布在中心點(diǎn)周圍,把同一評(píng)價(jià)對(duì)象的不同指標(biāo)數(shù)據(jù)值在坐標(biāo)軸上的點(diǎn)用折線連接起來所形成的多邊形就是雷達(dá)圖[15-17]。為了更加直觀地反映不同廠家酸棗仁提取物的質(zhì)量差異,本研究采用雷達(dá)圖對(duì)酸棗仁提取物質(zhì)量進(jìn)行對(duì)比評(píng)價(jià)。使用開源軟件plotlyjs網(wǎng)頁繪圖庫(Plotly公司)制作雷達(dá)圖。采用3批自制的酸棗仁水提物平均值作為基準(zhǔn)進(jìn)行參照(雷達(dá)圖中紅框),選擇10個(gè)代表性成分進(jìn)行評(píng)價(jià),其中斯皮諾素、酸棗仁皂苷A和酸棗仁皂苷B采用含量測(cè)定結(jié)果進(jìn)行比例折算,定量指紋圖譜中其他7個(gè)黃酮共有峰采用相對(duì)峰面積進(jìn)行比例折算,10個(gè)成分的含量對(duì)比雷達(dá)圖見圖3。從雷達(dá)圖中可以清晰地看到,市場(chǎng)提取物不僅與實(shí)驗(yàn)室采用合格飲片自制的水提物含量差距較大,不同廠家之間的成分組成和含量差異也非常大,其中廠家B、C、E、F、G、H、I、O的酸棗仁提取物中代表性成分含量較低,約為實(shí)驗(yàn)室正常水提含量的1/10,推測(cè)廠家為降低產(chǎn)品單價(jià),酸棗仁投料較少或使用了大量輔料進(jìn)行稀釋,而廠家L幾乎未檢出任何酸棗仁代表性成分,產(chǎn)品真實(shí)性存在較大問題。廠家D的10個(gè)成分含量都超過自制酸棗仁水提物,結(jié)合總皂苷含量>20%的質(zhì)量標(biāo)識(shí)和較差的水溶性,推測(cè)可能是采用醇提法制備并經(jīng)樹脂純化富集的產(chǎn)品;廠家N的提取物中部分黃酮類成分含量略高于自制酸棗仁水提物,但不含酸棗仁皂苷A,推測(cè)可能提取用原料為酸棗仁的偽品理?xiàng)椚蔥18]。只有廠家A的各成分含量與自制水提物均較為接近,且酸棗仁皂苷A和B都有足夠的含量,提示其使用的原料和工藝都較為合規(guī)。上述結(jié)果表明,由于缺乏統(tǒng)一的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求,各廠家的酸棗仁提取物所用原料和生產(chǎn)工藝可能存在巨大的差異,導(dǎo)致其產(chǎn)品差異性十分巨大,酸棗仁提取物應(yīng)用企業(yè)需要建立嚴(yán)格的內(nèi)控質(zhì)量評(píng)價(jià)體系,對(duì)這些原料進(jìn)行篩選,合理應(yīng)用。

圖3 15批酸棗仁提取物雷達(dá)圖Fig. 3 Radar-gram of 15 batches of Ziziphi Spinosae Semen extracts For peaks, see Table 3.

3 結(jié)論

本文建立了8個(gè)共有黃酮峰為代表的酸棗仁水提物HPLC定量指紋圖譜,并通過液相色譜-四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜聯(lián)用鑒定了共有峰的可能成分。結(jié)合斯皮諾素、酸棗仁皂苷A和B定量結(jié)果,以及定量指紋圖譜中其他7個(gè)共有峰的相對(duì)定量結(jié)果進(jìn)行雷達(dá)圖評(píng)價(jià)。結(jié)果顯示,不同廠家提供的酸棗仁提取物存在非常大的差異,對(duì)比實(shí)驗(yàn)室按照正常水提工藝的樣品,可能存在大量輔料稀釋甚至不含有效成分,以及理?xiàng)椚蕮郊?、醇提富集等情況。本文所建立的HPLC定量指紋圖譜結(jié)合液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用定量分析方法,可全面、系統(tǒng)地應(yīng)用雷達(dá)圖呈現(xiàn)酸棗仁提取物的質(zhì)量差異,為酸棗仁提取物應(yīng)用企業(yè)根據(jù)自身產(chǎn)品分類和市場(chǎng)定位建立合理內(nèi)控質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)并篩選合格供應(yīng)商提供重要參考。