大葉鐵線蓮乙醇提取物正丁醇部位的化學(xué)成分研究

張 倩，陸云陽，劉 楊，湯海峰

大葉鐵線蓮乙醇提取物正丁醇部位的化學(xué)成分研究

張 倩，陸云陽，劉 楊，湯海峰*

空軍軍醫(yī)大學(xué) 藥學(xué)系，中藥與天然藥物學(xué)教研室，陜西 西安 710032

研究大葉鐵線蓮全草的化學(xué)成分。利用硅膠、Sephadex LH-20凝膠、ODS反相柱色譜和半制備高效液相色譜等分離方法進行分離純化，結(jié)合核磁共振、質(zhì)譜等波譜學(xué)技術(shù)鑒定其化學(xué)結(jié)構(gòu)。從大葉鐵線蓮全草75%乙醇提取物的正丁醇萃取部位分離鑒定了10個化合物，包括三萜皂苷6個、黃酮苷1個、木栓烷型三萜2個和植物甾醇1個，分別為3,23-二羥基-齊墩果-18-烯-28-酸--α--吡喃鼠李糖基-(1→4)-β--吡喃葡萄糖基-(1→6)-β--吡喃葡萄糖苷（1）、刺楸皂苷B（2）、粗齒鐵線蓮皂苷B（3）、刺五加苷A1（4）、皂苷PJ3（5）、異株五加苷B（6）、金絲桃苷（7）、木栓酮（8）、表木栓醇（9）和β-谷甾醇（10）?；衔?是新化合物，命名為大葉鐵線蓮皂苷D；化合物2～9均為首次從大葉鐵線蓮中分離得到。

大葉鐵線蓮；3,23-二羥基-齊墩果-18-烯-28-酸--α--吡喃鼠李糖基-(1→4)-β--吡喃葡萄糖基-(1→6)-β--吡喃葡萄糖苷；大葉鐵線蓮皂苷D；刺楸皂苷B；粗齒鐵線蓮皂苷B；刺五加苷A1；木栓酮

毛茛科（Ranunculaceae）鐵線蓮屬L.植物在全球分布廣泛，有350多種，其中93種為我國特有，85種為藥用植物[1-2]。該屬植物自古因其利尿通淋、祛風止痛的藥用價值而被廣泛使用，如《證類本草》中記載的川木通和最早收錄在《集驗方》中的威靈仙[3-4]?！吨袊幍洹?020年版也收載了川木通和威靈仙[5]。大葉鐵線蓮DC. 作為鐵線蓮屬藥用植物，主要分布于我國華中和西南地區(qū)，常見于山坡溝谷、林邊及路旁的灌叢中[6]，常以全草或根莖入藥，用于治療風濕關(guān)節(jié)痛風、皮膚炎癥、瘺管等病[7]。國內(nèi)外學(xué)者對大葉鐵線蓮的化學(xué)成分研究較少，活性研究也以粗提物為主[8]?；谡n題組前期對大葉鐵線蓮全草化學(xué)成分的初步探究[9]，為了進一步明確其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，從而為大葉鐵線蓮的開發(fā)與利用提供理論依據(jù)，本實驗繼續(xù)對其75%乙醇水提取物的正丁醇層萃取部位進行化學(xué)成分研究，共分離得到10個化合物，分別鑒定為3,23-二羥基-齊墩果-18-烯-28-酸--α--吡喃鼠李糖基-(1→4)-β--吡喃葡萄糖基-(1→6)-β--吡喃葡萄糖苷[3,23-dihydroxyolean-18-en-28-oic acid--α--rhamnopyransyl-(1→4)-β--glucopyranosyl- (1→6)-β--glucopyranoside，1]、刺楸皂苷B（kalopanax saponin B，2）、粗齒鐵線蓮皂苷B（clemargenoside B，3）、刺五加苷A1（ciwujianoside A1，4）、皂苷PJ3（saponin PJ3，5）、異株五加苷B（sieboldianoside B，6）、金絲桃苷（hyperin，7）、木栓酮（friedelin，8）、表木栓醇（epifriedelinol，9）和β-谷甾醇（βsitosterol，10）?；衔?是新化合物，命名為大葉鐵線蓮皂苷D，化合物2～9均為首次從大葉鐵線蓮中分離鑒定。

1 儀器與材料

電子分析天平（賽多利斯科學(xué)儀器公司）；XT5型顯微熔點測定儀（北京科儀電光儀器廠）；Quatrro 質(zhì)譜儀（Micromass公司）；PL343型旋光儀（Perkin-Elmer公司）；AVANCE 500型超導(dǎo)核磁共振儀、AVANCE 800型超導(dǎo)核磁共振儀（Bruker公司）；戴安P680高效液相色譜儀（戴安公司，P680系列單泵、UV-VS檢測器、CHROMELON工作站）；Agilent GC-6820氣相色譜儀 [Agilent公司，配HP-5彈性石英毛細管柱（30 m×0.32 mm，0.25 μm），氫火焰離子化檢測器]；柱色譜硅膠（100～200、200～300目，青島海洋化工廠）；薄層色譜用硅膠H（青島海洋化工廠）；Rp-18高效薄層預(yù)制硅膠板G（Merck公司）；ODS C18填料（Pharmacia公司）；Sephadex LH-20柱（北京歐亞新技術(shù)公司）；-(三甲基硅基)咪唑（Sigma公司）；對照品-葡萄糖（-Glc）、-核糖（-Rib）、-鼠李糖（-Rha）、-阿拉伯糖（-Ara）和-木糖（-Xyl），Sigma公司；試劑均為分析純；制備液相所用試劑均為色譜純。

藥材于2014年9月采自陜西省寶雞市太白山，經(jīng)陜西中醫(yī)藥大學(xué)王繼濤教授鑒定為大葉鐵線蓮DC. 的全草，標本（20140909）存于空軍軍醫(yī)大學(xué)藥學(xué)系中藥與天然藥物學(xué)教研室。

2 提取與分離

取干燥大葉鐵線蓮全草6 kg，粉碎，用10倍體積的75%乙醇加熱回流提取3次，每次2 h，合并濾液并減壓蒸餾至無醇味，將得到的浸膏加水分散，水溶液用等體積石油醚萃取4次，回收石油醚層，再加入等體積的水飽和正丁醇萃取3次，合并正丁醇層溶液，減壓蒸餾得到浸膏130 g。取100 g浸膏用硅膠拌樣后進行硅膠柱色譜分離，用三氯甲烷-甲醇-水系統(tǒng)（50∶1∶0～65∶35∶10）梯度洗脫，得到12個組分（Fr. A～L）。Fr. A采用Sephadex LH-20柱色譜分離，流動相為三氯甲烷-甲醇（1∶1），得到化合物8（32 mg）、9（70 mg）和10（110 mg）；Fr. F進行Sephadex LH-20柱色譜，三氯甲烷-甲醇（1∶1）洗脫除去雜質(zhì)，再進行半制備高效液相色譜分離，流動相為85%甲醇，得到化合物7（R＝10.3 min，32 mg）；Fr. G進行硅膠柱色譜，用三氯甲烷-甲醇-水系統(tǒng)（10∶1∶0～8∶1∶0.1）梯度洗脫，再結(jié)合Sephadex LH-20柱色譜和半制備高效液相色譜（流動相為65%甲醇）分離，得到化合物5（R＝12.9 min，18 mg）；Fr. J利用Sephadex LH-20柱色譜和ODS反相柱色譜（依次以30%、50%和70%甲醇洗脫）分離，結(jié)合半制備高效液相色譜（流動相為35%甲醇）純化，得到化合物2（R＝18.7 min，3 mg）、3（R＝16.2 min，8 mg）和4（R＝14.5 min，16 mg）；Fr. K通過硅膠柱色譜，以三氯甲烷-甲醇-水系統(tǒng)（8∶2∶0.2～7∶2.5∶0.25）梯度洗脫，再結(jié)合Sephadex LH-20柱色譜和半制備高效液相色譜（流動相為65%甲醇）分離，得到化合物6（R＝20.6 min，34 mg）；Fr. L利用Sephadex LH-20柱色譜、ODS反相柱色譜（依次以30%、50%、70%甲醇溶液洗脫）分離，結(jié)合半制備高效液相色譜（流動相為55%甲醇）純化，得到化合物1（R＝33.3 min，30 mg）。

3 皂苷類化合物酸水解

稱取化合物1～6各1.5 mg分別加入2 mL三氟乙酸（2 mol/L）中，120 ℃加熱2 h，蒸干溶劑，分別向反應(yīng)物中加入二氯甲烷和水進行萃取。蒸干水層，向殘留物中加入1 mL無水吡啶溶液和2 mL-半胱氨酸甲酯鹽酸鹽的無水吡啶溶液（0.1 mol/L），60 ℃加熱2 h，氮氣吹干；加入1 mL吡啶和0.5 mL-(三甲基硅基)咪唑，60 ℃加熱1 h，蒸干溶液，以正己烷和水萃取，有機相層進行GC分析（氣化室250 ℃；柱溫180～250 ℃，5 ℃/min；檢測器280 ℃；進樣量1 μL；載氣為氮氣）[10]。通過比較標準糖衍生物和樣品單糖衍生物的保留時間確定化合物中的單糖的種類。標準糖衍生物的保留時間分別為-Glc為16.78 min、-Ara為9.65 min、-Xyl為13.43 min、-Rha為12.31 min和-Rib為9.16 min。

4 結(jié)構(gòu)鑒定

1H-NMR (500 MHz, pyridine-5) 數(shù)據(jù)（表1）高場區(qū)顯示6個角甲基的信號峰H0.83、0.95、0.99、1.05、1.05和1.17，1個烯氫的寬單峰信號H5.25 (1H, brs, H-19)。在HSQC譜中可依次找到相應(yīng)的6個角甲基碳信號C15.6、17.7、29.5、13.3、16.8和31.0。結(jié)合13C-NMR (125 MHz, pyridine-5) 譜C175.8 (C-28) 和C73.7 (C-3) 信號，提示C-28位形成酯苷鍵，C-3位未形成氧苷鍵。推測化合物1為齊墩果烷型皂苷。在HMBC譜（圖1）中，H2.30 (H-21) 和1.42 (H-16) 信號與C138.2信號存在遠程偶合關(guān)系，而H5.25信號與C41.6 (C-13)、49.1 (C-17)、33.9 (C-21)、32.6 (C-20)、29.5 (C-29) 和31.0 (C-30) 均存在相關(guān)峰，因此可以推測雙鍵位置在C-18(19) 位。結(jié)合1H-1H COSY、HMBC、TOCSY、HSQC、NOESY譜，可歸屬苷元上的所有碳、氫信號（表1）。對照文獻報道[11]的具有C-18(19) 雙鍵的金盞花皂苷A（calendasaponin A），其碳譜數(shù)據(jù)基本一致，進一步驗證了化合物1的苷元結(jié)構(gòu)與該化合物相同，即黃蓮木酸。對化合物1進行酸水解后制備衍生物[12-13]，經(jīng)GC分析，確定化合物1所含糖為-Glc、-Rha，比例為2∶1。1H-NMR譜中發(fā)現(xiàn)3個糖的端基氫信號H6.36 (1H, d,= 8.5 Hz, GlcI-H-1) 5.85 (1H, brs, Rha-H-1), 4.95 (1H, d,= 8.0 Hz, GlcII-H-1)；HSQC譜匹配到相應(yīng)糖基的端基碳信號：C96.2 (GlcI-C-1), 103.1 (Rha-C-1), 105.3 (GlcII-C-1)。由葡萄糖基端基氫偶合常數(shù)= 8.5 Hz可得糖苷鍵的相對構(gòu)型為β；鼠李糖基的端基氫信號為寬單峰，3位和5位碳的化學(xué)位移值分別為：C73.1 (Rha-C-3) 和C70.6 (Rha-C-5)，可判斷出相應(yīng)糖苷鍵為α構(gòu)型[14]。結(jié)合TOCSY譜，可通過1H-1H COSY譜歸屬所有糖基的氫信號，再通過HSQC譜歸屬了所有糖基的碳信號。HMBC譜中，可觀察到GlcI-H-1/C-28, GlcII-H-1/GlcI-C-6以及Rha-H-1/ GlcII-C-4相關(guān)，從而確定了糖基與苷元和各糖基之間的連接位點與順序。這些信息可以通過NOESY譜得到進一步的驗證，見圖1。

表1 化合物1的13C-NMR (125 MHz) 和1H-NMR (500 MHz) 數(shù)據(jù)

圖1 化合物1的結(jié)構(gòu)式及主要HMBC和NOESY相關(guān)

綜上，化合物1結(jié)構(gòu)鑒定為3,23-二羥基-齊墩果-18-烯-28-酸--α--吡喃鼠李糖基-(1→4)-β--吡喃葡萄糖基-(1→6)-β--吡喃葡萄糖苷，經(jīng)SciFinder數(shù)據(jù)庫查詢，確定其為新化合物，命名為大葉鐵線蓮D（clemahergenoside D）。

化合物5：白色無定形粉末，易溶于吡啶和甲醇；Lieberman-Buchard反應(yīng)與Molish反應(yīng)均呈陽性，與10%硫酸顯色劑呈紫紅色；ESI-MS/: 1203 [M－H]?。采用與化合物1相同方法進行酸水解，檢出Glc、Rha和Ara，經(jīng)過GC分析確定它們的比例為2∶2∶1。1H-NMR (800 MHz, pyridine-5): 0.91 (3H, s, H-25), 0.92 (3H, s, H-29), 0.93 (3H, s, H-30), 0.98 (3H, s, H-26), 1.11 (3H, s, H-24), 1.26 (3H, s, H-27), 1.29 (3H, s, H-23), 5.40 (1H, brs, H-12), 5.80 (1H, brs, 3--Ara-H-1), 6.27 (1H, brs, 3--Rha-H-1), 6.18 (1H, d,= 8.0 Hz, 28-- GlcI-H-1), 5.02 (1H, d,=7.4 Hz, 28--GlcII-H-1), 4.80 (1H, d,= 6.0 Hz, 28--Rha-H-1)；13C-NMR (200 MHz, pyridine-5): 38.8 (C-1), 26.5 (C-2), 88.5 (C-3), 39.3 (C-4), 55.6 (C-5), 18.3 (C-6), 33.0 (C-7), 39.8 (C-8), 48.0 (C-9), 36.8 (C-10), 23.6 (C-11), 123.0 (C-12), 144.0 (C-13), 41.9 (C-14), 28.1 (C-15), 23.2 (C-16), 46.8 (C-17), 41.5 (C-18), 46.0 (C-19), 30.5 (C-20), 33.8 (C-21), 32.3 (C-22), 28.0 (C-23), 16.8 (C-24), 15.3 (C-25), 17.3 (C-26), 25.8 (C-27), 176.3 (C-28), 33.0 (C-29), 23.5 (C-30)。由HMBC譜發(fā)現(xiàn)糖鏈連接順序為C-3位Rha(1→2)Ara-和C-28位Rha(1→4)GlcII(1→6)GlcI-, 104.3 (3--Ara-C-1), 75.3 (3--Ara-C-2), 73.9 (3--Ara-C-3), 68.6 (3--Ara-C-4), 64.5 (3--Ara-C-5), 101.3 (3--Rha-C-1), 72.6 (3--Rha-C-2), 72.4 (3--Rha-C-3), 73.8 (3-Rha-C-4), 70.0 (3--Rha-C-5), 18.3 (3--Rha-C-6), 95.8 (28--GlcI-C-1), 73.5 (28--GlcI-C-2), 78.3 (28--GlcI-C-3), 70.7 (28--GlcI-C-4), 78.0 (28--GlcI-C-5), 69.0 (28--GlcI-C-6), 104.7 (28--GlcII-C-1), 75.3 (28--GlcII-C-2), 76.4 (28--GlcII-C-3), 78.0 (28--GlcII-C-4), 76.9 (28--GlcII-C-5), 61.0 (28--GlcII-C-6), 102.6 (28--Rha-C-1), 72.4 (28--Rha-C-2), 72.3 (28--Rha-C-3), 73.8 (28--Rha-C-4), 69.7 (28--Rha-C-5), 18.3 (28--Rha-C-6)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻數(shù)據(jù)基本一致[18]，故鑒定化合物5為皂苷PJ3。

化合物6：白色無定形粉末，易溶于吡啶和甲醇，Lieberman-Buchard反應(yīng)與Molish反應(yīng)均呈陽性，與10%硫酸顯色劑呈紫紅色，ESI-MS/: 1335 [M－H]?。采用與化合物1相同方法進行酸水解，檢出Glc、Rha、Xyl和Ara，經(jīng)過GC分析確定它們的比例為2∶2∶1∶1。1H-NMR (800 MHz, pyridine-5): 0.90 (3H, s, H-25), 0.91 (3H, s, H-29), 0.93 (3H, s, H-30), 0.97 (3H, s, H-26), 1.12 (3H, s, H-24), 1.27 (3H, s, H-27), 1.28 (3H, s, H-23), 5.42 (1H, brs, H-12), 5.87 (1H, brs, 3--Ara-H-1), 6.32 (1H, brs, 3--Rha-H-1), 6.25 (1H, brs, 3--Xyl-H-1), 5.01 (1H, d,= 8.0 Hz, 28--GlcI-H-1), 4.85 (1H, d,= 6.4 Hz, 28--GlcII-H-1), 5.37 (1H, d,= 7.6 Hz, 28--Rha-H-1)；13C-NMR (200 MHz, pyridine-5): 39.2 (C-1), 27.0 (C-2), 89.1 (C-3), 39.9 (C-4), 56.3 (C-5), 18.8 (C-6), 33.4 (C-7), 40.2 (C-8), 48.3 (C-9), 37.3 (C-10), 24.1 (C-11), 123.2 (C-12), 144.4 (C-13), 42.4 (C-14), 28.6 (C-15), 23.6 (C-16), 47.3 (C-17), 41.9 (C-18), 46.5 (C-19), 31.0 (C-20), 34.3 (C-21), 32.8 (C-22), 28.5 (C-23), 17.5 (C-24), 16.0 (C-25), 17.8 (C-26), 26.4 (C-27), 176.9 (C-28), 33.4 (C-29), 24.0 (C-30)。經(jīng)過HMBC譜發(fā)現(xiàn)糖鏈連接順序為：C-3位Xyl(1→3)Rha(1→2)Ara-和C-28 Rha(1→4)GlcII(1→6)GlcI-, 105.6 (3--Ara-C-1), 75.6 (3--Ara-C-2), 75.2 (3--Ara-C-3), 69.8 (3--Ara-C-4), 65.5 (3--Ara-C-5), 101.7 (3--Rha-C-1),72.4 (3--Rha-C-2), 81.5 (3-Rha-C-3), 73.1 (3--Rha-C-4), 70.2 (3--Rha-C-5), 18.8 (3--Rha-C-6), 106.7 (3--Xyl-C-1), 75.3 (3--Xyl-C-2), 78.4 (3--Xyl-C-3), 70.9 (3--Xyl-C-4), 66.1 (3--Xyl-C-5), 95.9 (28--GlcI-C-1), 74.2 (28--GlcI-C-2), 79.0 (28--GlcI-C-3), 71.1 (28--GlcI-C-4), 78.3 (28--GlcI-C-5), 69.4 (28--GlcI-C-6), 105.1 (28--GlcII-C-1), 75.6 (28--GlcII-C-2), 76.8 (28--GlcII-C-3), 78.5 (28--GlcII-C-4), 77.4 (28--GlcII-C-5), 61.5 (28--GlcII-C-6), 103.0 (28--Rha-C-1), 72.9 (28--Rha-C-2), 73.0 (28--Rha-C-3), 74.3 (28--Rha-C-4), 70.6 (28--Rha- C-5), 18.8 (28--Rha-C-6)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻數(shù)據(jù)基本一致[19]，故鑒定化合物6為異株五加苷B。

化合物7：淡黃色晶體（氯仿-甲醇），易溶于二甲基亞砜，mp 225～226 ℃；Molish反應(yīng)呈陽性；ESI-MS/487 [M＋Na]+, 463 [M－H]?，推測分子式為C21H20O12。1H-NMR (500 MHz, DMSO-6): 12.63 (1H, s, 5-OH), 10.88 (1H, s, 7-OH), 9.76 (1H, s, 4′-OH), 9.10 (1H, s, 3′-OH), 7.64 (1H, dd,= 8.2, 1.6 Hz, H-6′), 7.51 (1H, d,= 1.6 Hz, H-2′), 6.80 (1H, d,= 8.3 Hz, H-5′), 6.44 (1H, d,= 2.0 Hz, H-6), 6.24 (1H, d,= 2.0 Hz, H-8), 5.43 (1H, d,= 7.8 Hz, H-1′′), 5.20 (1H, d,= 4.5 Hz, 4′′-OH), 4.88 (1H, d,= 5.5 Hz, 2′′-OH), 4.43 (2H, m, 3′′, 6′′-OH), 3.64 (1H, m, H-6′′b), 3.62 (1H, m, H-6′′a), 3.50 (1H, m, H-5′′), 3.39 (1H, m, H-4′′), 3.37 (1H, m, H-2′′), 3.30 (1H, m, H-3′′)；13C-NMR (125 MHz, DMSO-6): 156.4 (C-2), 133.7 (C-3), 177.9 (C-4), 161.4 (C-5), 98.9 (C-6), 164.2 (C-7), 93.7 (C-8), 156.4 (C-9), 103.9 (C-10), 122.0 (C-1′), 115.2 (C-2′), 144.9 (C-3′), 148.5 (C-4′), 115.9 (C-5′), 120.9 (C-6′), 101.7 (C-1′′), 71.1 (C-2′′), 73.1 (C-3′′) , 67.9 (C-4′′), 75.8 (C-5′′), 60.1 (C-6′′)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻數(shù)據(jù)基本一致[20]，故鑒定化合物7為金絲桃苷。

化合物8：白色針狀結(jié)晶（石油醚-丙酮），易溶于石油醚和氯仿，mp 257～258 ℃；與10%硫酸甲醇顯色劑反應(yīng)呈紫紅色。ESI-MS/449 [M＋Na]+，推測分子式為C30H50O。1H-NMR (500 MHz, CDCl3): 0.70 (3H, s, H-24), 0.83 (3H, s, H-25), 0.84 (3H, d,= 6.2 Hz, H-23), 0.94 (3H, s, H-26), 0.97 (3H, s, H-27), 0.98 (3H, s, H-28)；13C-NMR (125 MHz, CDCl3): 22.2 (C-1), 41.6 (C-2), 213.1 (C-3), 58.1 (C-4), 42.2 (C-5), 41.2 (C-6), 18.3 (C-7), 53.0 (C-8), 37.4 (C-9), 59.4 (C-10), 35.7 (C-11), 30.4 (C-12), 39.6 (C-13), 38.2 (C-14), 32.4 (C-15), 35.9 (C-16), 29.8 (C-17), 42.7 (C-18), 35.2 (C-19), 28.3 (C-20), 32.7 (C-21), 39.3 (C-22), 6.8 (C-23), 14.5 (C-24), 17.8 (C-25), 20.3 (C-26), 18.7 (C-27), 32.0 (C-28), 35.1 (C-29), 31.8 (C-30)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻數(shù)據(jù)基本一致[21]，故鑒定化合物8為木栓酮。

化合物9：白色針狀晶體（甲醇），易溶于三氯甲烷，mp 284～286 ℃；與10%硫酸甲醇顯色劑反應(yīng)呈紫紅色。ESI-MS正離子模式下/451 [M＋Na]+，推測分子式為C30H52O。1H-NMR (500 MHz, CDCl3) 譜可觀察到8個甲基峰1.19 (3H, s, H-28), 1.02 (3H, s, H-27), 1.01 (3H, s, H-26), 0.99 (3H, s, H-29), 0.98 (3H, s, H-30), 0.93 (3H, s, H-23), 0.92 (3H, s, H-25)和0.87 (3H, s, H-24),3.73是C-3位的氫；13C-NMR (125 MHz, CDCl3): 22.2 (C-1), 35.3 (C-2), 72.6 (C-3), 49.3 (C-4), 37.3 (C-5), 41.7 (C-6), 17.6 (C-7), 53.4 (C-8), 37.9 (C-9), 61.0 (C-10), 35.5 (C-11), 30.4 (C-12), 38.3 (C-13), 39.6 (C-14), 32.2 (C-15), 36.0 (C-16), 30.0 (C-17), 42.7 (C-18), 35.2 (C-19), 28.0 (C-20), 32.7 (C-21), 39.3 (C-22), 11.5 (C-23), 16.3 (C-24), 18.0 (C-25), 18.5 (C-26), 20.0 (C-27), 31.9 (C-28), 35.2 (C-29), 32.3 (C-30)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻數(shù)據(jù)基本一致[22]，故鑒定化合物9為表木栓醇。

化合物10：無色針狀結(jié)晶（氯仿），易溶于甲醇；mp 136～139 ℃，Lieberman-Buchard反應(yīng)呈陽性，與10%硫酸顯色劑呈紫紅色反應(yīng)；經(jīng)與對照品β-谷甾醇共薄層，在3種溶劑系統(tǒng)中與對照品Rf值相同，且混合熔點不下降，故鑒定化合物10為β-谷甾醇。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Chemical constituents of-BuOH fraction from ethanolic extract of

ZHANG Qian, LU Yun-yang, LIU Yang, TANG Hai-feng

Department of Chinese Materia Medica and Natural Medicines, Pharmacy School, Air Force Medical University, Xi’an 710032, China

To investigate the chemical constituents from the whole plants of.The-BuOH part of 75% ethanol extraction of the whole plants was isolated by slilica gel, Sephadex LH-20, ODS column chromatographies and semi-preparative HPLC. The structures of compounds were identified by NMR, MS, and other spectroscopic techniques.Ten compounds, including 3,23-dihydroxyolean-18-en-28-oic acid--α--rhamnopyransyl-(1→4)-β-- glucopyranosyl-(1→6)-β--glucopyranoside (1), kalopanax saponin B (2), clemargenoside B (3), ciwujianoside A1(4), saponin PJ3(5), sieboldianoside B (6), hyperin (7), friedelin (8), epifriedelinol (9), and βsitosterol (10) were isolated and identified.Compound 1 is a new compound named clemahergenoside D, and compounds 2—9 are isolated from the whole plants offor the first time.

DC.; 3,23-dihydroxyolean-18-en-28-oic acid--α--rhamnopyranosyl-(1→4)-β--glucopyranosyl-(1→6)-β--glucopyranoside; clemahergenoside D; kalopanax saponin B; clemargenoside B; ciwujianoside A1; friedelin

R284.1

A

0253 - 2670(2021)17 - 5185 - 07

10.7501/j.issn.0253-2670.2021.17.008

2021-07-16

國家自然科學(xué)基金資助項目（81274029）

張 倩（1990—），女，博士，主要從事天然藥化研究。Tel: 17791539129 E-mail: qianqiangoodok@163.com

湯海峰（1971—），男，沈陽藥科大學(xué)1998級博士研究生藥物化學(xué)專業(yè)校友。主任藥師、教授，博士生導(dǎo)師，空軍軍醫(yī)大學(xué)藥物研究所所長、藥學(xué)系中藥與天然藥物學(xué)教研室主任，空軍軍醫(yī)大學(xué)中藥學(xué)一級學(xué)科學(xué)科帶頭人，空軍高層次科技人才；主要從事天然藥化研究和中藥、海洋藥物開發(fā)，曾獲得軍隊和省級科技獎勵6項、社會力量辦獎6項。Tel: (029)84711551 E-mail: tanghaifeng71@163.com

[責任編輯 王文倩]