葛根藥材和藥渣硒含量對(duì)比檢測(cè)分析

＊徐春柳 林軍

（浙江尖峰藥業(yè)有限公司 浙江 321000）

愈風(fēng)寧心滴丸為我公司產(chǎn)品，具有解痙止痛，增強(qiáng)腦及冠脈血流量的作用。用于高血壓頭暈，頭痛，頸項(xiàng)疼痛，冠心病心絞痛，神經(jīng)性頭痛等癥。愈風(fēng)寧心滴丸是由單味中藥葛根提取制備而成，所用葛根為野葛。在生產(chǎn)實(shí)踐中我們發(fā)現(xiàn)，葛根素含量高的野葛產(chǎn)地不少在富硒帶，同時(shí)葛根是豆科植物，而豆科植物富集硒的能力在植物中排在第二位，因此推測(cè)野葛中有較高含量的硒。硒是人體健康和動(dòng)物體內(nèi)必需的14種微量元素之一，被稱為生命的保護(hù)劑，體內(nèi)缺硒會(huì)引起多種疾病如肝壞死、心肌變性、胰臟萎縮纖維化、肌肉營(yíng)養(yǎng)不良、克山病、大骨節(jié)、白內(nèi)障等疾病。硒有保護(hù)心肌健康的作用，可防止心腦血管冠心病、動(dòng)脈硬化等疾病，可以抗氧化、防衰老，增強(qiáng)人體免疫力等作用。明確其硒含量，對(duì)葛根及其藥渣的富硒食品開發(fā)有重要意義，為此我們?nèi)×松a(chǎn)用的野葛及經(jīng)提取后的藥渣各三批，用電感耦合等離子體發(fā)射光譜法（ICP-OES法）進(jìn)行了硒含量檢測(cè)分析。

1.試劑及儀器

超純水（自制），硝酸（色譜級(jí)，永華化學(xué)科技有限公司），雙氧水（分析級(jí)，無錫市展望化工試劑有限公司），硒單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院），ICPOES（Inductively Coupled Plasma Optical Emission Spectrometer，電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀）（型號(hào)5100，安捷倫科技有限公司），微波消解儀（MDS-15，上海新儀微波化學(xué)科技有限公司），加熱板（ECH-Ⅱ，上海新儀微波化學(xué)科技有限公司），電子天平（BSA224S，賽多利斯公司），葛根藥材（安康康元醫(yī)藥科技有限公司）及對(duì)應(yīng)藥渣各三批，藥渣三批編號(hào)為1#、2#、3#，藥材三批編號(hào)為4#、5#、6#。

2.實(shí)驗(yàn)過程

(1)溶液配制

①供試品溶液、回收率溶液、陰性對(duì)照溶液：

將樣品磨碎，取14個(gè)聚四氟乙烯消解罐，分別編號(hào)1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12，13，14，往1至13號(hào)罐內(nèi)依次加入1# 2.0113g、2.0277g，2# 2.0206g、2.0170g，3# 2.0202g、2.0078g，4# 2.0519g、2.0012g、2.0456g，5# 1.9877g、2.0336g，6# 1.9966g、2.0096g，9號(hào)罐加入硒單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液0.250ml，14號(hào)罐不加樣品，往14個(gè)消解罐內(nèi)加入20ml硝酸，混勻，加熱至120℃，往消解罐內(nèi)加入2ml H2O2，加熱30min后升溫至150℃，往所有消解罐內(nèi)加入1ml H2O2，加熱至罐內(nèi)液體剩余5ml左右，冷卻。加入5ml硝酸、1ml H2O2，攪勻，蓋上內(nèi)蓋，旋緊外套，置微波消解儀中消解（消解程序見表1）。消解完全后，冷卻。

表1 微波消解程序

②0.5%硝酸溶液：精密量取7ml硝酸，加超純水1400ml,混勻。

③用0.5%硝酸溶液分別將2.1.1中消解液洗入50ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，取上清液。9號(hào)罐作為回收率溶液，14號(hào)罐作為陰性對(duì)照溶液，其余罐所得溶液作為供試品溶液。

④線性溶液：分別精密量取硒單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（100μg/ml）0.00ml，0.40ml，0.80ml，1.20ml，1.60ml，2.00ml置100ml量瓶中，用0.5%硝酸溶液稀釋至刻度，搖勻。

(2)儀器工作參數(shù)

讀取時(shí)間（s）：5霧化氣流量（L/min）：0.7。

RF功率（kW）：1.2等離子體氣流量（L/min）：12。

穩(wěn)定時(shí)間（s）：15輔助氣流量（L/min）：1。

觀察方式：軸向氧氣百分比：0。

重復(fù)次數(shù)：3泵速（rpm）：12樣品抽吸時(shí)間（s）：15。

(3)分析條件

檢測(cè)波長(zhǎng)：通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定203.985nm。

(4)測(cè)定

蠕動(dòng)泵進(jìn)樣，分別測(cè)定線性溶液、陰性對(duì)照溶液、供試品溶液、回收率溶液的硒的強(qiáng)度，按照《中國(guó)藥典》2015版四部通則0411標(biāo)準(zhǔn)曲線法測(cè)量與計(jì)算。

(5)計(jì)算公式

(6)結(jié)果

表2 系統(tǒng)適用性結(jié)果

表3 線性結(jié)果

圖1 線性結(jié)果

表4 回收率結(jié)果

表5 樣品檢測(cè)結(jié)果

結(jié)論：電感耦合等離子體發(fā)射光譜法（ICP-OES法）可以用于葛根藥材和藥渣中硒含量的測(cè)定。試驗(yàn)證實(shí)了葛根及其藥渣中富硒，可作富硒食品或食品添加劑。

3.討論

（1）硒的含量與野葛的產(chǎn)地、生長(zhǎng)年限有關(guān)，我們生產(chǎn)所用的野葛中硒的含量在多少范圍內(nèi)，還需不斷的數(shù)據(jù)積累。從檢測(cè)分析結(jié)果看，野葛及提取后的藥渣屬于富硒植物，葛根中的硒為有機(jī)硒，優(yōu)于無機(jī)硒。從開發(fā)硒食品（葛根是藥食同源產(chǎn)品）或食品添加劑來說，有一定的價(jià)值。

（2）野葛經(jīng)乙醇-水提取后，從結(jié)果看，硒含量減少不多，推測(cè)野葛中的有機(jī)硒在乙醇-水溶液中溶解度小。開發(fā)葛根硒食品，從經(jīng)濟(jì)效益角度看，使用葛根渣效果更好，野葛藥渣開發(fā)出來的膳食補(bǔ)充劑能做到價(jià)廉物美。

（3）我國(guó)大部分地區(qū)是貧硒，20世紀(jì)90年代初進(jìn)行的總膳食結(jié)構(gòu)調(diào)查結(jié)果顯示，中國(guó)居民日常飲食中硒攝入量平均值為43.3μg/天，低于中國(guó)營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)推薦的硒適宜攝入量下限50μg/天。如以每天每人需另外補(bǔ)有機(jī)硒10μg計(jì)，以葛根或渣制成的富硒食品或食品添加劑，按這次檢測(cè)結(jié)果計(jì)算，需每天服用15-50g左右，人體可以接受。

（4）硒檢測(cè)方法有原子分光光譜法，色譜法，紫外可見吸收光譜法，熒光光度法等，為了準(zhǔn)確、快速檢測(cè)出硒的含量，我們直接使用了最先進(jìn)的ICP-OES法，從結(jié)果看，靈敏度、線性關(guān)系良好。鑒于企業(yè)中常有的分析儀器為HPLC、GC、UV，從中選用一種建立常規(guī)檢測(cè)葛根中硒含量方法也很有意義。

（5）土壤中硒含量與葛根中葛根素含量的高低是否存正比關(guān)系還需大量的檢測(cè)分析。

（6）葛根中的硒為有機(jī)硒，推測(cè)與葛根多糖結(jié)合在一起的比較多，而葛根多糖本身具有多種生物活性，主要有抗氧化，調(diào)節(jié)免疫，降血糖降血脂，解酒、保肝和抑菌、抗腫瘤作用等。富硒葛根多糖的生物活性又是很值得研究的課題。由于目前葛根多糖只是一類成分，不是單一的化合物，如何分離純化得到單一的化合物，進(jìn)行分析、對(duì)比研究也是不小的課題。