• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    獼猴桃中關(guān)鍵香氣組分分析

    2021-08-31 02:34:36田洪磊
    食品科學(xué) 2021年16期
    關(guān)鍵詞:關(guān)鍵

    趙 玉,詹 萍,王 鵬,田洪磊

    (陜西師范大學(xué)食品工程與營(yíng)養(yǎng)科學(xué)學(xué)院,陜西 西安 710119)

    獼猴桃(Actinidia),又名“奇異果”,原產(chǎn)于中國(guó),目前主產(chǎn)地為東亞和新西蘭。因風(fēng)味獨(dú)特,種類眾多,營(yíng)養(yǎng)豐富深受大眾喜愛[1-2]。

    香氣是獼猴桃品質(zhì)評(píng)價(jià)的重要指標(biāo)。迄今為止,獼猴桃中已鑒定出多種揮發(fā)性成分,主要包括酯類、醛類和醇類[2]。早在1982年,Shiota通過同時(shí)蒸餾萃取分離出獼猴桃中的揮發(fā)性成分[3];之后,研究焦點(diǎn)為貯存條件、成熟度以及加工方式對(duì)獼猴桃揮發(fā)性成分的影響。如Huan Chen等[4]采用靜態(tài)頂空固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜(headspace solid phase microextraction-gas chromatography-mass spectrometry,HS-SPME-GC-MS)聯(lián)用法分析不同濃度甲基環(huán)丙烯對(duì)其品質(zhì)及揮發(fā)性成分的影響;Garcia等[5]分析了不同成熟度與鍵合態(tài)香氣成分之間的關(guān)系;Chen Yajing等[6]發(fā)現(xiàn)獼猴桃汁在500 MPa、15 min條件下,可以減少重要成分己醛和反式-2-己烯醛的揮發(fā)。Cozzolino等[7]采用頂空固相微萃取并結(jié)合氣相色譜-四極桿質(zhì)譜聯(lián)用法分析了6 種獼猴桃中揮發(fā)性成分差異,并指出戊基呋喃是區(qū)分綠心和黃心獼猴桃的關(guān)鍵組分。眾多揮發(fā)性成分中,只有少數(shù)物質(zhì)對(duì)香氣輪廓的呈現(xiàn)起決定性作用,這些物質(zhì)稱為關(guān)鍵香氣化合物[8]。目前,多種水果中的關(guān)鍵香氣化合物已被確定,如桃、楊梅和菠蘿蜜[9-11]。然而,獼猴桃香氣研究?jī)H局限在揮發(fā)性成分分析,對(duì)關(guān)鍵香氣物質(zhì)鑒定鮮有報(bào)道,因此,本研究將在揮發(fā)性成分提取的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步鑒定獼猴桃中的關(guān)鍵香氣組分。

    構(gòu)建合適的研究方法可提高研究結(jié)果的準(zhǔn)確性。目前,氣相色譜-嗅聞(gas chromatography-olfactometry,GC-O)法常用于關(guān)鍵組分的鑒定,利用人靈敏的嗅覺,從復(fù)雜混合物中快速有效篩選出貢獻(xiàn)較大的目標(biāo)香氣化合物[12]。GC-O分析方法一般包括頻率檢測(cè)法、香氣稀釋法和直接強(qiáng)度法。與其他2 種方法相比,頻率檢測(cè)法因操作簡(jiǎn)單、重復(fù)性高和節(jié)省時(shí)間等優(yōu)點(diǎn)廣泛用于分析[13]。此外,一些感官組學(xué)研究也用于香氣分析如香氣活性值(odor activity value,OAV)和香氣重組[14]。其中,OAV可用于評(píng)價(jià)單一組分對(duì)整體香氣的貢獻(xiàn),一般OAV越大,其貢獻(xiàn)率越大[15];香氣重組常用來進(jìn)一步驗(yàn)證關(guān)鍵香氣物質(zhì)確定的準(zhǔn)確性[16]。多種分析方法組合可成功鑒定出食品中的關(guān)鍵香氣成分,如荔枝、柑橘和菊花精油[17-19]。因此,本研究將采用HS-SPME法提取分離4 種獼猴桃中的揮發(fā)性成分;采用GC-O并結(jié)合OAV鑒定關(guān)鍵香氣物質(zhì);最后通過香氣重組進(jìn)一步驗(yàn)證這些物質(zhì)確定的準(zhǔn)確性。研究將為獼猴桃香氣評(píng)價(jià)以及獼猴桃汁的加工提供一定的理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    本實(shí)驗(yàn)所用獼猴桃品種分別為美味獼猴桃(Actinidia deliciosa)翠香(CX)、徐香(XX)和秦美(QM)以及中華獼猴桃(A. chinensis)華優(yōu)(HY)。當(dāng)商業(yè)采摘期時(shí)(可溶性固形物為7~8 °Brix),于陜西周至相同種植園采摘,采摘結(jié)束后即刻運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室,用于后續(xù)分析。選取無任何物理損傷且大小均一的整果于室溫下放置至理想可食階段即可溶性固形物分別達(dá)到CX 15~18 °Brix、XX 15~17 °Brix、QM 14~16 °Brix以及HY 13~15 °Brix。然后,將獼猴桃整果清洗并去皮,在低速條件下榨汁,得到獼猴桃果泥,用于后續(xù)分析。

    正構(gòu)烷烴(C7~C40)、1,2-二氯苯、丁酸甲酯、丁酸乙酯、丁酸丁酯、己酸甲酯、己酸乙酯、苯甲酸甲酯、苯甲酸乙酯、己醛、3-己烯醛、反式-2-己烯醛、辛醛、反式-2-癸烯醛、癸醛、反式-2-壬烯醛、反式-2-己烯-1-醇、己醇、3-己烯-1-醇、1-辛烯-3-醇、4-萜烯醇、檸檬烯、二甲基硫化物和1-戊烯-3-酮標(biāo)準(zhǔn)品 Sigma-Aldrich上海有限公司;氯化鈉(分析純) 上海試四赫維化工有限公司。

    1.2 儀器與設(shè)備

    PL202-L電子天平 梅特勒-托利多上海有限公司;JYZ-V5榨汁機(jī) 濟(jì)南九陽公司;RF15 extech手持折光儀 上海默威生物科技有限公司;手動(dòng)SPME進(jìn)樣器、50/30 μm DVB/CAR/PDMS固相微萃取頭、7890B-5977B氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀 美國(guó)Supelco公司;DB-WAX毛細(xì)管柱(30 m×0.25 mm,0.25 μm) 美國(guó)Agilent公司;9100嗅聞儀 瑞士Brechbuhler公司。

    1.3 方法

    1.3.1 HS-SPME提取

    8 g獼猴桃果泥置于20 mL頂空瓶中,同時(shí)加入1.6 g氯化鈉和1 μL溶于甲醇的內(nèi)標(biāo)物1,2-二氯苯(1.306 μg/μL),立即用聚四氟乙烯/硅橡膠隔墊密封。隨后,將頂空瓶置于磁力攪拌器中,于40 ℃平衡20 min,緊接著用50/30 μm DVB/CAR/PDMS萃取頭吸附萃取30 min。萃取結(jié)束后,立即于GC進(jìn)樣口進(jìn)行熱解吸(250 ℃,5 min)。

    1.3.2 GC-MS分析

    GC條件:DB-WAX色譜柱(30 m×0.25 mm,0.25 μm);整個(gè)過程采用無分流模式,載氣為氦氣(純度>99.999%),流速1.5 mL/min。升溫程序:起始溫度40 ℃,保持5 min,以5 ℃/min升至120 ℃,保持10 min,再以相同的速率升至220 ℃并保持5 min。

    MS條件:電子電離源;質(zhì)量掃描范圍m/z30~450;電子能量70 eV;離子源溫度230 ℃。

    定性方式:將化合物的質(zhì)譜與標(biāo)準(zhǔn)譜庫NIST14比對(duì);C7~C40正構(gòu)烷烴以樣品相同升溫程序分析,根據(jù)正構(gòu)烷烴結(jié)果計(jì)算化合物的Kováts保留指數(shù)(Kováts index,KI),且與文獻(xiàn)值進(jìn)行比較;KI按式(1)計(jì)算;在相同GC-MS程序下,與標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間進(jìn)行比對(duì)。

    式中:tx為物質(zhì)x的保留時(shí)間/min;tn和t(n+1)分別為n個(gè)烷烴碳原子和(n+1)個(gè)烷烴碳原子的保留時(shí)間/min。

    1.3.3 GC-O分析

    GC設(shè)備上連有9100嗅聞儀,GC-MS條件同1.3.2節(jié)。GC流出物以1∶1比例分別進(jìn)入質(zhì)譜和嗅聞口。嗅聞傳輸線為失活且無涂層的熔融二氧化硅毛細(xì)管。為防止因長(zhǎng)時(shí)間嗅聞造成鼻孔干燥,以40 mL/min速率在嗅聞口通入濕

    空氣。

    頻率檢測(cè)法用于GC-O分析,選取8 位有感官評(píng)價(jià)經(jīng)驗(yàn)的專業(yè)人員組成評(píng)價(jià)小組,包括4 男4 女,平均年齡在25 歲。為了提高評(píng)價(jià)人員對(duì)獼猴桃氣味的敏感性,采用相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)評(píng)價(jià)人員進(jìn)行培訓(xùn)。評(píng)價(jià)過程中,要求評(píng)價(jià)人員快速準(zhǔn)確地記錄氣味特征及流出物的開始和結(jié)束時(shí)間。最終,以每種物質(zhì)被嗅聞到的總次數(shù)作為檢測(cè)頻率(detection frequency,DF),DF不小于4的物質(zhì)(即8 人中有4 人以上感知到氣味信息)視為重要的香氣化合物。

    1.3.4 定量分析

    參照文獻(xiàn)[17]的方法,采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行定量。選取1,2-二氯苯為內(nèi)標(biāo)物,用甲醇稀釋1 000 倍,4 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。將GC-O中DF不小于4的香氣物質(zhì)進(jìn)行準(zhǔn)確定量。采用甲醇作為溶劑,將目標(biāo)化合物與內(nèi)標(biāo)物的濃度比配制5 個(gè)不同梯度,按照1.3.1節(jié)和1.3.2節(jié)方法進(jìn)行分析。以目標(biāo)化合物與內(nèi)標(biāo)物的濃度比為橫坐標(biāo),以目標(biāo)化合物與內(nèi)標(biāo)物的峰面積比為縱坐標(biāo),建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算香氣物質(zhì)的含量。

    1.3.5 OAV計(jì)算

    查閱化合物在水中的閾值,在定量的基礎(chǔ)上按式(2)計(jì)算每種物質(zhì)的OAV:

    式中:Cx為物質(zhì)x的含量/(μg/kg);OTx為物質(zhì)x在水中的閾值/(μg/kg)。

    1.3.6 感官評(píng)價(jià)

    參考文獻(xiàn)[20-21]對(duì)重組模型與獼猴桃樣本進(jìn)行感官分析。首先,組織評(píng)價(jià)人員討論獼猴桃香氣屬性;然后,將獼猴桃樣品以及GC-O分析中具有典型香氣特征的標(biāo)準(zhǔn)品隨機(jī)編號(hào)呈現(xiàn)給評(píng)價(jià)人員,經(jīng)過反復(fù)討論篩選直到所有成員對(duì)獼猴桃香氣屬性選擇無異議為止;最后,結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)及評(píng)價(jià)人員討論結(jié)果,最終確定出獼猴桃的5 個(gè)代表性香氣屬性:果香味、青草味、香甜味、黃瓜味以及刺激性氣味。這些屬性的參照物具體分別為果香味(1.4 μL/L己酸乙酯)、青草味(40 μL/L 3-己烯醇)、刺激性氣味(大蒜)、香甜味(蜂蜜)以及黃瓜味(黃瓜)。待感官評(píng)價(jià)詞確定,采用9 分制法進(jìn)行評(píng)價(jià),即0為無此種香氣,9為此種香氣最強(qiáng)。每個(gè)實(shí)驗(yàn)重復(fù)3 次,取平均值作為最終的感官得分。

    1.3.7 香氣重組

    參考文獻(xiàn)[17],以超純水為基質(zhì),用檸檬酸和蔗糖將基質(zhì)調(diào)節(jié)成與4 種獼猴桃具有相同可溶性固形物和pH值的溶液作為模擬體系。然后,將OAV不小于1的香氣物質(zhì)根據(jù)定量結(jié)果加入到各自的模擬體系中。最后,樣品隨機(jī)編碼,進(jìn)行感官評(píng)定,評(píng)定方法參照1.3.6節(jié)。

    1.4 數(shù)據(jù)處理

    采用SPSS 23.0軟件分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),采用Origin 2018軟件繪制雷達(dá)圖。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 4 種獼猴桃的HS-SPME-GC-MS及GC-O分析

    4 種獼猴桃之間揮發(fā)性成分種類及含量差異較大,共分離鑒定出56 種揮發(fā)性成分,包括19 種酯、16 種醛、13 種醇和8 種其他類。其中,評(píng)價(jià)人員通過嗅聞共感知到23 種物質(zhì),4 個(gè)樣本CX、XX、QM和HY分別感知到20、17、18 種和16 種香氣化合物,采用標(biāo)準(zhǔn)譜庫NIST14、KI及標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)它們進(jìn)行定性。

    酯類對(duì)獼猴桃香氣輪廓的形成具有重要作用。從表1可以看出,此類物質(zhì)主要呈現(xiàn)濃郁的果香和甜香;此外,苯甲酸甲酯和苯甲酸乙酯還具有花香氣息。DF值通??梢苑从澄镔|(zhì)在樣品中的香氣強(qiáng)度[13]。丁酸乙酯在4 個(gè)樣本中皆呈現(xiàn)強(qiáng)烈的果香味(DF=8),相關(guān)研究表明該物質(zhì)是獼猴桃中的重要香氣成分[7,22-23],與本研究結(jié)果一致,推測(cè)此物質(zhì)對(duì)獼猴桃香氣輪廓的形成起重要作用。同樣,己酸乙酯在所有樣本中皆被檢出,但CX與QM中具有相同的DF值,在HY中DF值最高(DF=8)。丁酸丁酯呈現(xiàn)較高的DF值(DF=6),但它只存在于HY中。苯甲酸乙酯以相同的DF值(DF=4)同時(shí)存在于CX和QM中。綜上分析,不同品種獼猴桃中重要酯類香氣組分的種類及香氣強(qiáng)度具有差異性;由于酯類是果香味以及甜香的重要貢獻(xiàn)者,因此推測(cè)它們之間的差異性是造成不同品種獼猴桃果香味以及甜香不同的重要原因。

    醛類是獼猴桃中的一類關(guān)鍵香氣物質(zhì),根據(jù)其香氣特征,大致可以分為3 類:青草及綠草味、橘子清香類以及黃瓜香和果香。其中,具有青草及綠草香氣特征的物質(zhì)包括己醛、3-己烯醛、反式-2-己烯醛和反式-2-壬醛。除反式-2-壬醛,這些物質(zhì)皆為C6不飽和醛,根據(jù)文獻(xiàn)[24],它們主要是亞油酸和亞麻酸通過脂肪氧合酶途徑生成的。也有研究報(bào)道C6醛是獼猴桃中關(guān)鍵風(fēng)味物質(zhì),具有明顯的青草氣息[2]。特別指出的是,這些C6不飽和醛在4 個(gè)樣本中都有檢出且呈現(xiàn)強(qiáng)烈的青草味,尤其是反式-2-己烯醛在4 個(gè)樣本中皆具有最高的DF值(DF=8)。此外,呈現(xiàn)橘子清香的物質(zhì)包括辛醛和反式-2-癸醛,它們只存在于CX和QM樣本中,且反式-2-癸醛的DF值比較低。順,反-2,6-壬二烯醛呈現(xiàn)典型的黃瓜味,此物質(zhì)已在多種水果中被檢出如柿子、西瓜汁和甜瓜[13,25-26],它存在于所有樣本中,可能也是構(gòu)成獼猴桃香氣的重要物質(zhì)基礎(chǔ)。癸醛是唯一呈現(xiàn)果香的醛類,存在于所有樣本中。

    5 種醇類通過嗅聞被感知到,分別為反式-2-己烯醇、己醇和3-己烯醇(青草味)、1-辛烯-3-醇(蘑菇味)、4-萜品醇(綠草味,脂味)。其中,己醇在所有樣品中都表現(xiàn)出強(qiáng)烈的青草特征,DF值均為8。具有典型蘑菇氣味的1-辛烯-3-醇常在水果中被檢出如桑葚和西瓜[27-28],它在CX和HY中具有較強(qiáng)的氣味信息。除了酯類、醛類及醇類,有些烯烴類、酮類以及硫化物也對(duì)獼猴桃風(fēng)味的形成起重要作用。檸檬烯具有檸檬香氣;二甲基硫醚是唯一一種硫化物,具有刺激性氣味,只在XX中檢出;與二甲基硫醚相似,1-戊烯-3-酮也呈現(xiàn)刺激性氣味,是所有樣品中一種重要的香氣化合物。

    綜上所述,多種具有不同香氣特征的化合物單體組合形成獼猴桃特定香氣,這些物質(zhì)的存在使獼猴桃風(fēng)味更加濃郁。為了確定各個(gè)物質(zhì)對(duì)獼猴桃香氣的貢獻(xiàn)程度,本研究將結(jié)合OAV分析進(jìn)一步篩選獼猴桃關(guān)鍵香氣物質(zhì)。

    表14 種獼猴桃中GC-O鑒定的香氣活性成分(DF≥4)Table 1 Aroma-active compounds (DF ≥ 4) identified in four varieties

    2.2 重要香氣物質(zhì)的OAV分析

    在精確定量的基礎(chǔ)上(表2),進(jìn)行OAV分析,OAV可用于評(píng)價(jià)香氣化合物對(duì)整體風(fēng)味的貢獻(xiàn)。一般,OAV越大對(duì)樣品貢獻(xiàn)越大;當(dāng)OAV≥1時(shí),該物質(zhì)可視為關(guān)鍵香氣化合物[29]。如表3所示,CX、XX、QM和HY分別有16、15、14 種和13種OAV不小于1的物質(zhì)。其中,丁酸乙酯在4 種獼猴桃中OAV均最大,分別為737.07、90.54、786.56和581.58,表明此物質(zhì)對(duì)獼猴桃香氣的貢獻(xiàn)最大,是一種重要的特征風(fēng)味物質(zhì)。CX中,苯甲酸乙酯、3-己烯醇和4-萜品醇的閾值分別為60、70 μg/kg和340 μg/kg[27,34,37],它們因其高閾值致使OAV不大于1。雖然順,反-2,6-壬二烯醛的含量極少(0.72 μg/kg),但由于極低的香氣閾值(0.02 μg/kg),因此它也是CX中的關(guān)鍵香氣化合物,對(duì)香氣輪廓的形成起重要作用。與之類似的還有3-己烯醛、辛醛、癸醛以及反式-2-壬醛均具有低閾值,OAV較高,因此,這些物質(zhì)也被認(rèn)為是CX中的關(guān)鍵香氣物質(zhì)。XX中,丁酸乙酯OAV最大,其次丁酸甲酯(48.90),己醇(9.93)和順,反-2,6-壬二烯醛(26.50)的OAV相對(duì)較大,對(duì)XX風(fēng)味輪廓形成同樣起重要作用。Bartley等[30]報(bào)道一些含硫成分如二甲基硫醚和三硫化物也是獼猴桃中的重要成分。然而,本研究?jī)H發(fā)現(xiàn)一種含硫物即二甲基硫醚且將它確定為XX中的關(guān)鍵香氣化合物(OAV>1),這可能是由不同品種及不同產(chǎn)地引起的。QM中,丁酸甲酯(50.49)、順,反-2,6-壬二烯醛(74.50)和3-己烯醛(34.64)的OAV較大,是QM香氣輪廓的重要組成部分。HY中,丁酸乙酯、己醇以及順,反-2,6-壬二烯醛的OAV較大;己酸甲酯、反式-2-己烯醇以及3-己烯醇的OAV小于1,因此推測(cè)這些物質(zhì)對(duì)HY風(fēng)味輪廓的形成影響較小。綜上分析,不同香氣物質(zhì)對(duì)獼猴桃香氣的貢獻(xiàn)程度不同。此外,不同品種獼猴桃關(guān)鍵香氣物質(zhì)具有一定的相似性和差異性,因此造成不同品種獼猴桃風(fēng)味的普遍性及各自的獨(dú)特性。

    表2 4 種獼猴桃中重要香氣成分定量標(biāo)準(zhǔn)曲線及含量Table 2 Quantitative standard curves and mean contents of aroma compounds in four varieties

    表3 不同獼猴桃香氣成分OAVTable 3 OAV values of aroma compounds in different kiwifruit varieties

    2.3 香氣重組分析

    香氣重組是進(jìn)一步驗(yàn)證關(guān)鍵香氣物質(zhì)鑒定準(zhǔn)確性的重要方法[31]。將各樣本中OAV不小于1的物質(zhì)根據(jù)實(shí)測(cè)濃度添加到模擬體系中,形成重組模型。以實(shí)際獼猴桃樣本作為對(duì)照,選取獼猴桃代表性的香氣屬性(果香、青草味、甜香、黃瓜味以及刺激性氣味)作為評(píng)價(jià)指標(biāo),對(duì)重組模型進(jìn)行打分,結(jié)果如圖1所示。4 種獼猴桃均有強(qiáng)烈的果香和青草香,因此,這2 種香氣可看作是它們的主導(dǎo)香氣。總體上看,重組模型中這2 種屬性的香氣強(qiáng)度均稍弱于實(shí)際樣本,而黃瓜味和刺激性氣味則呈現(xiàn)不同的趨勢(shì)。圖1可以直觀顯示出模擬效果,重組模型與原樣本的香氣輪廓均具有一定的相似性,表明重組模型成功表現(xiàn)出各獼猴桃樣本中的香氣,說明成功鑒定出各樣本中的關(guān)鍵香氣物質(zhì),本實(shí)驗(yàn)?zāi)軌驈膹?fù)雜的揮發(fā)性成分中快速鎖定研究目標(biāo),為獼猴桃香氣品控提供理論依據(jù)。

    圖1 4 個(gè)樣本與重組模型香氣輪廓對(duì)比Fig. 1 Aroma profiles of four samples and reconstitution model

    3 結(jié) 論

    本研究采用GC-O頻率檢測(cè)法和OAV分析并結(jié)合香氣重組,對(duì)不同品種獼猴桃的關(guān)鍵香氣成分進(jìn)行分析。CX、XX、QM和HY通過GC-O各鑒定出20、17、18 種和16 種目標(biāo)香氣化合物。其中,丁酸乙酯在4 種獼猴桃中均呈現(xiàn)強(qiáng)烈的果香味。此外,C6不飽和醛和醇呈現(xiàn)典型的青草味。CX、XX、QM和HY中OAV大于1的特征香氣成分各有16、15、14 種和13 種,共有關(guān)鍵組分為丁酸乙酯、己酸乙酯、C6不飽和醛、癸醛、反式-2-壬醛、順,反-2,6-壬二烯醛、己醇、1-辛烯-3-醇和1-戊烯-3-酮。除上述物質(zhì)外,丁酸甲酯、己酸甲酯、苯甲酸甲酯、辛醛、反式-2-己烯醇也是CX中的關(guān)鍵香氣物質(zhì);丁酸甲酯、3-己烯醇、檸檬烯和二甲基硫醚也為XX中的關(guān)鍵香氣物質(zhì);同樣,丁酸甲酯、己酸甲酯和辛醛確定為QM中的關(guān)鍵香氣物質(zhì);丁酸丁酯和檸檬烯為HY中的關(guān)鍵香氣物質(zhì)。本研究成功確定出4 種獼猴桃中的關(guān)鍵香氣成分,可為獼猴桃品質(zhì)調(diào)控提供參考。

    猜你喜歡
    關(guān)鍵
    高考考好是關(guān)鍵
    “退不退群”不是問題,“怎么用好”才是關(guān)鍵
    甘肅教育(2020年21期)2020-11-24 18:14:30
    買酸奶,這幾個(gè)關(guān)鍵不能不知道
    2020年關(guān)鍵流行色組——自然暢游
    流行色(2020年9期)2020-07-16 08:08:32
    走好關(guān)鍵“五步” 加強(qiáng)自身建設(shè)
    2019年如何靠小龍蝦發(fā)家致富,關(guān)鍵看這幾點(diǎn)
    獲勝關(guān)鍵
    NBA特刊(2014年7期)2014-04-29 00:44:03
    蔣百里:“關(guān)鍵是中國(guó)人自己要努力”
    生意無大小,關(guān)鍵是怎么做?
    內(nèi)燃機(jī)的關(guān)鍵零部件
    欧美zozozo另类| 亚洲人成网站高清观看| 国产毛片a区久久久久| 人妻夜夜爽99麻豆av| 婷婷六月久久综合丁香| 啪啪无遮挡十八禁网站| 如何舔出高潮| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 一进一出抽搐gif免费好疼| 欧美午夜高清在线| 在线观看午夜福利视频| 中文字幕免费在线视频6| 午夜久久久久精精品| 精品乱码久久久久久99久播| 俄罗斯特黄特色一大片| 欧美丝袜亚洲另类 | 欧美乱色亚洲激情| 亚洲国产精品sss在线观看| 90打野战视频偷拍视频| 亚洲成人久久爱视频| 久久久精品大字幕| 在线天堂最新版资源| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 伊人久久精品亚洲午夜| 亚洲欧美日韩高清专用| 美女 人体艺术 gogo| 亚洲天堂国产精品一区在线| 亚洲无线观看免费| 悠悠久久av| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | av福利片在线观看| av中文乱码字幕在线| 久久久成人免费电影| 亚洲av电影在线进入| 男人和女人高潮做爰伦理| 一级黄片播放器| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 亚洲欧美日韩东京热| 国产爱豆传媒在线观看| 午夜福利在线在线| 12—13女人毛片做爰片一| 成年女人看的毛片在线观看| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 欧美一区二区精品小视频在线| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 久久中文看片网| 国产一区二区在线观看日韩| 99久久精品热视频| 国产精品一及| 精品午夜福利在线看| 五月玫瑰六月丁香| 久久久久久大精品| 国产精品女同一区二区软件 | 亚洲av第一区精品v没综合| 欧美成人性av电影在线观看| 男女视频在线观看网站免费| 美女cb高潮喷水在线观看| 色视频www国产| 精品国内亚洲2022精品成人| 男人舔奶头视频| 免费高清视频大片| 一个人观看的视频www高清免费观看| 特大巨黑吊av在线直播| 国产精品1区2区在线观看.| av欧美777| 男女视频在线观看网站免费| 国产高清三级在线| 久久久久久九九精品二区国产| 床上黄色一级片| 亚洲人成电影免费在线| 欧美潮喷喷水| 欧美又色又爽又黄视频| 国产伦人伦偷精品视频| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 一个人看的www免费观看视频| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 国产精品永久免费网站| 国产精品一区二区性色av| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 女人被狂操c到高潮| 听说在线观看完整版免费高清| 一夜夜www| 最近在线观看免费完整版| xxxwww97欧美| av女优亚洲男人天堂| 精品欧美国产一区二区三| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 亚洲欧美激情综合另类| aaaaa片日本免费| 高清毛片免费观看视频网站| 亚洲最大成人手机在线| 精品一区二区三区视频在线| 色哟哟·www| 国产一区二区亚洲精品在线观看| av天堂中文字幕网| 亚洲av.av天堂| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 午夜久久久久精精品| 精品国产亚洲在线| 嫩草影院精品99| 美女高潮的动态| 国内精品一区二区在线观看| 黄片小视频在线播放| 国产亚洲精品久久久com| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 成人av一区二区三区在线看| 俄罗斯特黄特色一大片| 久久精品国产亚洲av天美| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 亚州av有码| 麻豆国产av国片精品| 可以在线观看毛片的网站| 欧美+亚洲+日韩+国产| 中文字幕熟女人妻在线| 内地一区二区视频在线| 小说图片视频综合网站| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 色视频www国产| 又黄又爽又免费观看的视频| 日韩欧美三级三区| 少妇人妻精品综合一区二区 | 精品久久久久久,| 制服丝袜大香蕉在线| 亚洲男人的天堂狠狠| 日本成人三级电影网站| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 国产人妻一区二区三区在| 中文字幕av在线有码专区| 最好的美女福利视频网| 97热精品久久久久久| 亚洲在线观看片| 嫩草影视91久久| 免费看美女性在线毛片视频| 又爽又黄a免费视频| 日本黄大片高清| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 美女高潮的动态| 网址你懂的国产日韩在线| 亚洲av.av天堂| 国产真实乱freesex| 亚洲午夜理论影院| 国产高清激情床上av| 一本久久中文字幕| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 精品久久久久久,| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 高潮久久久久久久久久久不卡| 久久欧美精品欧美久久欧美| 欧美zozozo另类| 国产大屁股一区二区在线视频| 麻豆久久精品国产亚洲av| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 色av中文字幕| 欧美日韩黄片免| 综合色av麻豆| 别揉我奶头 嗯啊视频| 色哟哟哟哟哟哟| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 此物有八面人人有两片| 亚洲成人中文字幕在线播放| 国产成人影院久久av| 窝窝影院91人妻| 精品久久久久久,| 亚洲精品久久国产高清桃花| 亚洲中文日韩欧美视频| 草草在线视频免费看| 精品一区二区三区视频在线| 99久久九九国产精品国产免费| 久久久久久久久久黄片| 色视频www国产| 久久国产精品影院| 欧美性感艳星| 国产高清三级在线| 精品人妻视频免费看| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 脱女人内裤的视频| 欧美bdsm另类| 青草久久国产| 天天一区二区日本电影三级| 亚洲内射少妇av| 国产精品伦人一区二区| 欧美日韩黄片免| 偷拍熟女少妇极品色| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 高清日韩中文字幕在线| 美女高潮的动态| 欧美区成人在线视频| 欧美性猛交黑人性爽| 内地一区二区视频在线| 久久欧美精品欧美久久欧美| 禁无遮挡网站| 99国产精品一区二区三区| 美女黄网站色视频| 国产精品伦人一区二区| 欧美乱色亚洲激情| 国产三级在线视频| 中文字幕av成人在线电影| 日韩免费av在线播放| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 久99久视频精品免费| 丁香六月欧美| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 国产精品女同一区二区软件 | 最近在线观看免费完整版| 高潮久久久久久久久久久不卡| 国产午夜福利久久久久久| 深夜精品福利| 俺也久久电影网| 国产日本99.免费观看| 真实男女啪啪啪动态图| 一区二区三区高清视频在线| 国产精品久久久久久精品电影| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 久久久久久久亚洲中文字幕 | 无人区码免费观看不卡| 亚洲中文日韩欧美视频| 亚洲成人精品中文字幕电影| 两个人视频免费观看高清| 亚洲av不卡在线观看| 久久久久久久久中文| 神马国产精品三级电影在线观看| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 如何舔出高潮| 国产精品乱码一区二三区的特点| 夜夜夜夜夜久久久久| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 一级黄色大片毛片| 99久久精品热视频| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 天堂av国产一区二区熟女人妻| 国产一区二区三区视频了| 国产精品av视频在线免费观看| 乱人视频在线观看| 国产麻豆成人av免费视频| 99精品在免费线老司机午夜| 全区人妻精品视频| 国内揄拍国产精品人妻在线| 国产精品久久视频播放| 日韩欧美国产在线观看| eeuss影院久久| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 激情在线观看视频在线高清| 欧美性猛交黑人性爽| 中文在线观看免费www的网站| 日本与韩国留学比较| 精品欧美国产一区二区三| 99久久九九国产精品国产免费| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 最近最新中文字幕大全电影3| 美女大奶头视频| av女优亚洲男人天堂| 亚洲av二区三区四区| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 91麻豆av在线| 999久久久精品免费观看国产| 观看美女的网站| 啦啦啦观看免费观看视频高清| av欧美777| 国产视频内射| 嫩草影视91久久| 久久性视频一级片| 精品不卡国产一区二区三区| 欧美在线一区亚洲| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 丰满乱子伦码专区| 亚洲三级黄色毛片| 亚洲,欧美精品.| 色综合欧美亚洲国产小说| 日本免费一区二区三区高清不卡| 欧美乱妇无乱码| 婷婷精品国产亚洲av| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 看片在线看免费视频| 亚洲综合色惰| 亚洲国产精品久久男人天堂| 少妇丰满av| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 动漫黄色视频在线观看| 午夜免费激情av| 黄色一级大片看看| 观看美女的网站| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 亚洲第一电影网av| av国产免费在线观看| 成人av在线播放网站| 日本成人三级电影网站| 精品久久久久久久末码| 欧美不卡视频在线免费观看| 观看美女的网站| av专区在线播放| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 熟女人妻精品中文字幕| 国产精品一区二区性色av| 国产精品久久视频播放| 网址你懂的国产日韩在线| 国产黄色小视频在线观看| 赤兔流量卡办理| 十八禁网站免费在线| 日本在线视频免费播放| 精品国产三级普通话版| 欧美极品一区二区三区四区| 精品久久久久久,| 少妇人妻精品综合一区二区 | 免费人成视频x8x8入口观看| 国产探花在线观看一区二区| 久久欧美精品欧美久久欧美| 久久久久久久精品吃奶| 国产成人a区在线观看| 国产男靠女视频免费网站| 午夜精品久久久久久毛片777| 日韩中文字幕欧美一区二区| a在线观看视频网站| 国产毛片a区久久久久| 90打野战视频偷拍视频| 午夜日韩欧美国产| 久久久久久久午夜电影| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 亚洲无线在线观看| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 波多野结衣高清作品| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 精品久久久久久久久亚洲 | 国产精品人妻久久久久久| 亚洲av成人av| 怎么达到女性高潮| 婷婷亚洲欧美| a级毛片免费高清观看在线播放| 亚洲三级黄色毛片| 床上黄色一级片| 欧美+日韩+精品| 国产精品爽爽va在线观看网站| 日日夜夜操网爽| 免费电影在线观看免费观看| 老女人水多毛片| 99久久精品热视频| 午夜久久久久精精品| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 亚洲自拍偷在线| 欧美色欧美亚洲另类二区| 国产三级中文精品| 亚洲欧美激情综合另类| 国产野战对白在线观看| 女人被狂操c到高潮| 午夜影院日韩av| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 欧美一区二区亚洲| 99国产精品一区二区三区| 深爱激情五月婷婷| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 亚洲成av人片在线播放无| 变态另类丝袜制服| 国产精品野战在线观看| 国产精品爽爽va在线观看网站| 国产在线男女| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 在线观看舔阴道视频| 舔av片在线| 黄色视频,在线免费观看| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 天堂动漫精品| 成熟少妇高潮喷水视频| 久久久久久九九精品二区国产| 久久欧美精品欧美久久欧美| av国产免费在线观看| 久久6这里有精品| 久久人妻av系列| 亚洲自拍偷在线| 一区二区三区免费毛片| 成人精品一区二区免费| 美女大奶头视频| 俺也久久电影网| 真人做人爱边吃奶动态| 村上凉子中文字幕在线| 精品免费久久久久久久清纯| 色尼玛亚洲综合影院| 亚洲七黄色美女视频| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 国产高清视频在线播放一区| 黄色视频,在线免费观看| 国产在视频线在精品| 此物有八面人人有两片| 一边摸一边抽搐一进一小说| 国产精品电影一区二区三区| 人人妻人人澡欧美一区二区| 在线观看午夜福利视频| 亚洲国产精品合色在线| 亚洲性夜色夜夜综合| 99精品在免费线老司机午夜| 色综合亚洲欧美另类图片| 精品久久久久久久久久久久久| 亚洲综合色惰| 脱女人内裤的视频| 久久久精品欧美日韩精品| 91狼人影院| 一个人免费在线观看电影| 国产探花极品一区二区| 色播亚洲综合网| 国产黄片美女视频| 国产亚洲精品久久久com| 我的老师免费观看完整版| 99精品久久久久人妻精品| 亚洲 国产 在线| 老司机午夜十八禁免费视频| 精品人妻视频免费看| 色av中文字幕| 黄片小视频在线播放| 免费观看精品视频网站| 听说在线观看完整版免费高清| 欧美激情国产日韩精品一区| 欧美在线一区亚洲| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 可以在线观看的亚洲视频| 97碰自拍视频| 国产精品久久久久久久久免 | 日韩av在线大香蕉| 一级黄色大片毛片| 精品一区二区三区视频在线| av在线观看视频网站免费| 免费看日本二区| 在线观看一区二区三区| 午夜久久久久精精品| 亚洲av成人av| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片 | 特大巨黑吊av在线直播| 久久精品国产清高在天天线| 国产色婷婷99| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 757午夜福利合集在线观看| 欧美黑人巨大hd| 亚洲电影在线观看av| 久9热在线精品视频| 91字幕亚洲| 夜夜夜夜夜久久久久| 国产一区二区在线观看日韩| 久久国产精品人妻蜜桃| 久久精品综合一区二区三区| 天天一区二区日本电影三级| 99riav亚洲国产免费| 成人av一区二区三区在线看| 亚洲一区高清亚洲精品| 久久99热这里只有精品18| 亚洲在线观看片| 九九热线精品视视频播放| 国产午夜精品论理片| 亚洲国产精品成人综合色| 欧美bdsm另类| aaaaa片日本免费| 午夜福利18| 精品午夜福利视频在线观看一区| 一进一出好大好爽视频| a级一级毛片免费在线观看| 我要搜黄色片| 在线a可以看的网站| 亚洲av免费高清在线观看| 久久欧美精品欧美久久欧美| 亚洲男人的天堂狠狠| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 亚洲成av人片在线播放无| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 亚洲最大成人手机在线| 亚洲真实伦在线观看| 99热这里只有精品一区| АⅤ资源中文在线天堂| 亚洲,欧美,日韩| 嫩草影院入口| 国产高清视频在线播放一区| 久久草成人影院| 国产欧美日韩一区二区三| 成人欧美大片| 精品久久国产蜜桃| 久久久久久久久中文| or卡值多少钱| 国产精品99久久久久久久久| 亚洲精品久久国产高清桃花| 久久久久久九九精品二区国产| 首页视频小说图片口味搜索| 我的女老师完整版在线观看| 中文字幕av在线有码专区| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 熟女电影av网| 在线看三级毛片| 婷婷六月久久综合丁香| 一a级毛片在线观看| 精品一区二区三区av网在线观看| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 国产乱人伦免费视频| 久9热在线精品视频| 精品久久久久久,| 日韩欧美国产在线观看| 亚洲av电影在线进入| 国产乱人伦免费视频| av女优亚洲男人天堂| 91av网一区二区| 久久国产精品人妻蜜桃| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 午夜激情欧美在线| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 麻豆成人午夜福利视频| 美女免费视频网站| 国产精品一区二区免费欧美| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 日韩av在线大香蕉| 一进一出抽搐gif免费好疼| 精品午夜福利视频在线观看一区| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 免费看光身美女| 免费观看的影片在线观看| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| av黄色大香蕉| 听说在线观看完整版免费高清| 一级黄色大片毛片| x7x7x7水蜜桃| 日韩欧美一区二区三区在线观看| av专区在线播放| 久久6这里有精品| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 欧美xxxx性猛交bbbb| 国产三级中文精品| 首页视频小说图片口味搜索| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 色5月婷婷丁香| 俄罗斯特黄特色一大片| 国产精品乱码一区二三区的特点| 桃红色精品国产亚洲av| 亚洲成人精品中文字幕电影| 国产精品永久免费网站| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 又黄又爽又免费观看的视频| 日韩有码中文字幕| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 成年免费大片在线观看| 在线免费观看的www视频| netflix在线观看网站| 欧美成人一区二区免费高清观看| 婷婷精品国产亚洲av在线| 国产精品永久免费网站| 听说在线观看完整版免费高清| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 国产亚洲欧美98| 亚洲av美国av| 特级一级黄色大片| 午夜精品在线福利| 丁香欧美五月| 啦啦啦韩国在线观看视频| 91久久精品国产一区二区成人| 久久热精品热| 99久久成人亚洲精品观看| 午夜福利免费观看在线| 一级黄色大片毛片| 欧美丝袜亚洲另类 | 俺也久久电影网| 国产三级在线视频| 国产精品一区二区免费欧美| 性色av乱码一区二区三区2| 日本黄大片高清| 久久99热6这里只有精品| 亚洲激情在线av| 国产熟女xx| 午夜福利视频1000在线观看| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 国产色婷婷99| 男女视频在线观看网站免费| 人妻夜夜爽99麻豆av| 国产单亲对白刺激| 精品久久久久久久久av| 国产黄片美女视频| 99热这里只有是精品在线观看 | 天堂av国产一区二区熟女人妻| 精品久久久久久久末码| 国产三级在线视频| 亚洲三级黄色毛片| 色播亚洲综合网| 婷婷精品国产亚洲av在线| 老女人水多毛片| а√天堂www在线а√下载| 悠悠久久av| 校园春色视频在线观看| 国产精品爽爽va在线观看网站| 全区人妻精品视频| 极品教师在线视频| 丰满乱子伦码专区| 成人特级黄色片久久久久久久| 国产69精品久久久久777片| 长腿黑丝高跟| 欧美最新免费一区二区三区 | 国产精品一区二区性色av| 99热这里只有精品一区| or卡值多少钱| 亚洲一区二区三区色噜噜| 欧美极品一区二区三区四区| 综合色av麻豆| 成年女人看的毛片在线观看| 校园春色视频在线观看| 国产精品爽爽va在线观看网站| 精品国产亚洲在线| 精品久久久久久成人av| 黄色视频,在线免费观看| 亚洲一区二区三区色噜噜| 久久伊人香网站| 制服丝袜大香蕉在线| 一区二区三区高清视频在线| 精品久久久久久久久久久久久| 性色av乱码一区二区三区2| 久久热精品热| 九色国产91popny在线| 欧美激情在线99| 最好的美女福利视频网|