60%環(huán)嗪酮·敵草隆可濕性粉劑的高效液相色譜分析

孫新(江蘇藍(lán)豐生物化工股份有限公司，江蘇 新沂 221400)

0 引言

60%環(huán)嗪酮?敵草隆可濕性粉劑是江蘇藍(lán)豐生物化工股份有限公司(以下稱“我公司”)最近幾年新開發(fā)的一種新型田間除草劑。該產(chǎn)品由環(huán)嗪酮(Hexazinone)敵草隆(Diuron)兩種除草劑混配而成，具有高效、廣譜、低殘留的特點(diǎn)。經(jīng)查閱相關(guān)資料，環(huán)嗪酮、敵草隆兩種成分分別用氣相色譜法和液相色譜方法分析，操作復(fù)雜，分析時間長，目前尚沒有統(tǒng)一的兩種組分同時測定的方法[1-2]。為了方便快捷的同時測出兩種成分，經(jīng)過多次反復(fù)的實(shí)驗、驗證對比，最后確定用反相高效液相色譜法（RP-HPLC）可以同時測定該產(chǎn)品中兩種組分的含量。該方法操作簡單、易于掌握，而且分析時間短，分析成本低。

1 實(shí)驗部分

1.1 儀器與試劑

高效液相色譜儀(安捷倫-1260，帶DAD二極管陣列檢測器)，超聲波振蕩器；甲醇(HPLC級)，水(新蒸二次蒸餾水)；環(huán)嗪酮標(biāo)準(zhǔn)品 含量≥98.0%，敵草隆標(biāo)準(zhǔn)品 含量≥98.0%。

1.2 實(shí)驗方法

1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)品溶液、樣品溶液的制備

準(zhǔn)確稱取環(huán)嗪酮0.013 0 g(精確至0.2 mg)左右的標(biāo)準(zhǔn)品和敵草隆0.047 0 g(精確至0.2 mg)左右的標(biāo)準(zhǔn)品，于一個50 mL容量瓶中，加入20 mL左右的甲醇，放入超聲波振蕩器中超聲振蕩5 min，取出冷卻至室溫，再甲醇定容至刻度，然后用5.00 mL的移液管移取5 mL該溶液于一個50 mL容量瓶中，用流動相稀釋定容至刻度，搖勻備用[3]。

準(zhǔn)確稱取0.1 g左右(精確至0.2 mg)待測樣品于一個50 mL容量瓶中，加入20 mL左右的甲醇，放入超聲波振蕩器中超聲振蕩5 mL，取出冷卻至室溫，再甲醇定容至刻度，然后用5.00 mL的移液管移取5 mL該溶液于一個50 mL容量瓶中，用流動相稀釋定容至刻度，搖勻備用[4]。

1.2.2 色譜分析操作條件

色譜柱：Agilent SB-C18 150×4.60 mm 5 μm；柱溫：35 ℃，檢測波長：254 nm；流動相：甲醇+水＝60+40(V/V)，流速：1.0 mL/min。

1.2.3 測定

按上述色譜分析操作條件，待儀器穩(wěn)定后，連續(xù)進(jìn)幾針標(biāo)準(zhǔn)品溶液，待相鄰兩針溶液中環(huán)嗪酮、敵草隆的峰面積響應(yīng)值變化分別＜1.0%時，按標(biāo)準(zhǔn)溶液、樣品溶液、樣品溶液、標(biāo)準(zhǔn)溶液的順序分別進(jìn)樣，分別記錄相應(yīng)的色譜圖，并計算各個溶液中環(huán)嗪酮、敵草隆的峰面積，色譜圖詳如圖1和圖2所示。

圖1 樣品譜圖峰1[前]為環(huán)嗪酮標(biāo)準(zhǔn)品譜圖，峰2[后]為敵草隆標(biāo)準(zhǔn)品譜圖

圖2 標(biāo)準(zhǔn)品譜圖

1.3 數(shù)據(jù)處理

出峰后分別用面積歸一法計算各標(biāo)準(zhǔn)樣品、待測樣品中環(huán)嗪酮、敵草隆的峰面積，按下式計算60%環(huán)嗪酮·敵草隆可濕性粉劑中環(huán)嗪酮、敵草隆的質(zhì)量百分含量：

式中：A2為待測樣品溶液中環(huán)嗪酮或敵草隆的峰面積；A1為標(biāo)準(zhǔn)品溶液中環(huán)嗪酮或敵草隆的峰面積；M1為標(biāo)準(zhǔn)溶液中環(huán)嗪酮或敵草隆的質(zhì)量(g)；M為樣品的質(zhì)量(g)；P為環(huán)嗪酮或敵草隆標(biāo)準(zhǔn)品的質(zhì)量百分含量(%)。

2 結(jié)果與討論

2.1 流動相及檢測波長的選擇

在分析過程中為了保證樣品中環(huán)嗪酮、敵草隆及雜質(zhì)能夠完全分離，采用不同比例的甲醇+水，分別進(jìn)行試驗，最后確定以甲醇+水=60+40(v/v)作為流動相，流速1 mL /min，作為最佳分析的流動相比例及流速，既能保證定量分析要求的分離度，又能做到分析樣品時快速的目的[5-6]。在波長選擇時，分別對環(huán)嗪酮和敵草隆進(jìn)行波長掃描，環(huán)嗪酮在258 nm處吸光度最大，敵草隆在245 nm處吸光度最大，綜合考慮兩個組分的吸光度，選擇254 nm作為測定波長，在此波長下環(huán)嗪酮和敵草隆都有比較大的吸收，可以滿足定量分析的要求[7]。

2.2 線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)的確定

分別準(zhǔn)確稱取敵草隆0.047 0 g、環(huán)嗪酮0.013 0 g于一個50 mL容量瓶中，加入20 mL 左右的甲醇溶解，放超聲波中超聲振蕩5 min，取出冷卻至室溫，再用甲醇定容至刻度，然后用5 mL的移液管，分別移取該溶液5.00 mL 分別于10 mL、20 mL、50 mL、100 mL、500 mL容量瓶中，用流動相定容至刻度，環(huán)嗪酮和敵草隆的濃度范圍分別為0.5～0.01 g/L和0.13～0.002 6 g/L[8]，在上述色譜條件下分別進(jìn)樣，測量其峰面積，實(shí)驗數(shù)據(jù)如表1所示。以峰面積為縱坐標(biāo)，以進(jìn)樣質(zhì)量為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，如圖3和圖4所示。

表1 線性相關(guān)性測定數(shù)據(jù)

圖3 環(huán)嗪酮標(biāo)準(zhǔn)曲線

根據(jù)實(shí)驗數(shù)據(jù)及圖3、圖4確定方法的線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)分別為：環(huán)嗪酮線性回歸方程：Y=2.01×106X-13 822；相關(guān)系數(shù)：0.999 9；敵草隆線性回歸方程：Y=2.08×106X+154 881；相關(guān)系數(shù)：0.999 5。

圖4 敵草隆標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.3 方法的準(zhǔn)確度與精密度

稱取5個60%環(huán)嗪酮·敵草隆可濕性粉劑樣品，按分析方法測得敵草隆平均含量為47.0%，計算出方法的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.052，變異系數(shù)為0.11%；測得環(huán)嗪酮平均含量為13.2%，計算出方法的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.07，變異系數(shù)為0.53%。

在已知含量的樣品中分別加入不同質(zhì)量的環(huán)嗪酮和敵草隆配成5個已知樣，在相同色譜條件下進(jìn)行測定并計算方法的回收率；環(huán)嗪酮和敵草隆的平均回收率分別為98.9%和99.6%，實(shí)驗數(shù)據(jù)如表2所示。

表2 回收率實(shí)驗數(shù)據(jù)

3 結(jié)語

從上述實(shí)驗數(shù)據(jù)可以得出：該高效液相色譜法可以適用于60%環(huán)嗪酮·敵草隆可濕性粉劑樣品的分析，分析結(jié)果準(zhǔn)確，可信度高，線性好，分析時間短，宜用于該兩項產(chǎn)品的質(zhì)量控制。