老年反流性食管炎患者血清c-myb表達(dá)及流行病學(xué)情況

王勝 蔣明 王敏

(1海南西部中心醫(yī)院普外科，海南 儋州 571700；2海南醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院普外科)

胃食道反流是人體的正常生理過(guò)程，大多數(shù)發(fā)生在食道遠(yuǎn)端且通常無(wú)癥狀，當(dāng)反流物病理性流入食道后則會(huì)導(dǎo)致食道黏膜發(fā)炎、糜爛和潰瘍，誘發(fā)反流性食管炎(RE)，對(duì)患者的日常生活產(chǎn)生嚴(yán)重影響并增加患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)〔1〕。據(jù)統(tǒng)計(jì)，在亞洲國(guó)家RE的患病率在5%左右〔2〕，我國(guó)在1999年對(duì)30～40周歲RE患者癥狀的發(fā)生率進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)，但未對(duì)老年群體進(jìn)行統(tǒng)計(jì)〔3〕。研究顯示，隨著年齡的增長(zhǎng)，RE的發(fā)病率逐漸增加〔4〕。原癌基因c-myb是一種核內(nèi)癌基因，常分布于人體消化道上皮細(xì)胞中〔5〕，參與結(jié)直腸癌、胃癌、食道癌和肝癌細(xì)胞的增殖與分化〔6〕。報(bào)道顯示，c-myb在上消化道相關(guān)疾病中異常表達(dá)〔7〕，但c-myb在RE中的表達(dá)情況鮮有報(bào)道。本研究通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-qPCR)檢測(cè)了RE患者和健康志愿者食道黏膜中c-myb mRNA的表達(dá)，并分析其水平在診斷RE中的參考價(jià)值。

1 材料與方法

1.1一般資料 隨機(jī)抽取2017年12月至2019年12月在海南西部中心醫(yī)院就診的150例老年RE患者和在體檢中心進(jìn)行體檢的志愿者1 450例。納入研究的RE患者均符合下述條件：①有反酸、胃灼熱等典型癥狀；②經(jīng)電子胃鏡檢查排除消化性潰瘍和腫瘤等器質(zhì)性疾??；③無(wú)胃部及十二指腸炎癥；④無(wú)腹部手術(shù)史；⑤無(wú)肝膽疾病或嚴(yán)重的全身性疾??；⑥無(wú)結(jié)締組織病和糖尿病病史。RE患者中男78例，女73例，平均年齡(69.4±6.7)歲。1 450例志愿者中包括十二指腸潰瘍546例、胃潰瘍193例、萎縮性胃炎372例及糜爛性胃炎273例，其中男797例，女653例，平均年齡(70.1±6.5)歲。共發(fā)放1 600份調(diào)查問(wèn)卷，其中RE患者150份，健康志愿者1 450份。RE組最終收回110份，志愿者(非RE)組最終收回1 432份(89.50%)。參與本研究的RE患者及志愿者均簽署知情同意書，本研究獲得醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)后進(jìn)行。

1.2方法 采用問(wèn)卷調(diào)查的方式對(duì)參與研究的老年人進(jìn)行調(diào)查，內(nèi)容包括：年齡、身高、體重、文化程度、居住地、RE常見癥狀發(fā)生情況(健康志愿者不需要填寫)和日常生活習(xí)慣。

胃鏡下取110例RE患者和546例十二指腸潰瘍患者胃竇處1塊胃黏膜組織，妥善保存后用于后續(xù)檢查。采用幽門螺旋桿菌款速分析化學(xué)法尿素酶診斷試劑盒(100人份/盒，山東博邁達(dá)生物科技有限公司)進(jìn)行Hp檢測(cè)。193例胃潰瘍、372例萎縮性胃炎和273例糜爛性胃炎患者另取胃黏膜組織采用甲苯胺藍(lán)染色法檢測(cè)Hp。

胃鏡下取RE患者、十二指腸潰瘍患者、胃潰瘍患者、萎縮性胃炎患者和糜爛性胃炎患者食道下部黏膜組織，并妥善保存。采用RT-qPCR，以β-actin對(duì)上述患者食道黏膜組織中的c-myb mRAN水平進(jìn)行檢測(cè)。c-myb上游引物序列為：5′-GGCATAACCACTTGAATCCAGAACG-3′，下游引物序列為：5′-CAGTTCGTCCAGGCAGTAGC-3′。內(nèi)參基因β-actin上游引物序列為：5′-ATCGTGCGTGACATTAAGGAGAAG-3′，下游引物序列為：5′-AATGGGGAGAAATTCGGCTGT-3′。使用2-ΔΔCt計(jì)算c-myb mRNA的相對(duì)表達(dá)水平。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)、t檢驗(yàn)。OR<1.1表示該因素為無(wú)關(guān)因素，1.1≤OR≤1.5表示該因素為輕微影響因素，1.6≤OR≤2.0表示該因素為中度危險(xiǎn)因素，OR>2.0表示該因素為高度危險(xiǎn)因素。

2 結(jié) 果

2.1兩組年齡、文化程度及居住地分布情況 兩組年齡和居住地差異顯著(P<0.01)。見表1。

表1 兩組年齡、文化程度及居住地分布情況〔n(%)〕

2.2患者常見癥狀發(fā)生情況 RE組中最常見的癥狀為反酸，其次為反胃和胃灼熱，有少部分患者出現(xiàn)胸骨后疼痛和下咽困難的癥狀。另外，大部分患者發(fā)生上述癥狀的頻率較低，每日發(fā)生1次及以上者僅占少數(shù)。見表2。

表2 RE患者常見癥狀發(fā)生情況〔n(%),n=110〕

2.3患者Hp檢出率 RE患者Hp陽(yáng)性檢出率〔25.45%(28/110)〕明顯低于十二指腸潰瘍〔66.85%(365/546)〕、胃潰瘍〔55.96%(108/193)〕、萎縮性胃炎〔41.94%(156/372)〕和糜爛性胃炎患者〔91.79%(196/273),χ2=65.319、26.354、9.720、63.347，P=0.000、0.000、0.002、0.000〕。

2.4調(diào)查人群反流性食管炎危險(xiǎn)因素分析 肥胖、經(jīng)常大量吸煙、經(jīng)常大量飲酒和經(jīng)常過(guò)飽飲食是導(dǎo)致患RE的高危因素(P<0.05)；經(jīng)常喝咖啡和經(jīng)常吃甜食是導(dǎo)致患RE的中危因素(P<0.05)；經(jīng)常喝濃茶、經(jīng)常吃辛辣食物和經(jīng)常吃油膩食物對(duì)RE的發(fā)生無(wú)明顯影響(P>0.05)，見表3。

表3 兩組反流性食管炎危險(xiǎn)因素分析〔n(%)〕

2.5患者血清c-myb水平及參考價(jià)值 RT-qPCR檢測(cè)結(jié)果顯示，c-myb mRNA水平在RE患者食道組織樣品中的表達(dá)水平明顯升高(1.00±0.14，1.36±0.27；t=22.849，P<0.05)。ROC分析結(jié)果顯示，食管組織樣本中c-myb mRNA的水平在診斷RE時(shí)具有較高的靈敏度和特異性，有作為診斷RE特異性生物標(biāo)志物的潛在價(jià)值(AUC=0.955，95%CI：0.091～1.000，P=0.000)，見圖1。

圖1 RE組血清c-myb水平的診斷價(jià)值ROC分析曲線

3 討 論

RE是胃內(nèi)容物反流入食管引發(fā)的食管黏膜慢性炎癥。據(jù)統(tǒng)計(jì)，RE的發(fā)病年齡主要集中在老群體中〔8〕，可見對(duì)于RE患者的防治重點(diǎn)人群應(yīng)為老年。我國(guó)早在1999年就對(duì)30～40周歲的人群進(jìn)行了RE流行病學(xué)調(diào)查，但缺少老年群體的數(shù)據(jù)〔3〕。

本研究發(fā)現(xiàn)，在年齡大于60周歲的老年群體中，66～75周歲是RE的高發(fā)年齡段。另外，年齡和居住地對(duì)RE的發(fā)生率有極大的影響，究其原因可能是由于隨著年齡的增長(zhǎng)，人體功能退化導(dǎo)致的胃腸道功能失衡而引起的；同時(shí)，因居住地的不同導(dǎo)致不同老年人的生活習(xí)慣和飲食習(xí)慣等的差異致胃腸道及十二指腸功能失常導(dǎo)致胃排空能力受阻使胃反流物增加。RE的臨床表現(xiàn)以胃灼熱、反酸、范圍等癥狀為主，也是患者就診的主要原因〔9〕。由于不同患者的主觀感受和耐受性不同，因此并非所有RE患者表現(xiàn)出上述癥狀。本研究結(jié)果顯示，胃灼熱、反酸和反胃是RE患者的主要癥狀，胸骨后疼痛和下咽困難的發(fā)生率較低。由于不同研究方法和采用的標(biāo)準(zhǔn)不一致，因此很難對(duì)RE主要癥狀的發(fā)生率進(jìn)行比較。但與其他研究結(jié)果一致的是，在老年群體中RE主要癥狀的發(fā)生相當(dāng)普遍〔8〕。Hp是與消化道疾病發(fā)病有關(guān)的致病菌種，是目前發(fā)現(xiàn)的唯一可以在人胃中生存的微生物〔10〕，與慢性胃炎、消化系統(tǒng)潰瘍和黏膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤的發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)聯(lián)〔11〕。研究顯示，Hp感染通常不會(huì)引起人體的胃食管反流病，本研究結(jié)果提示RE患者中Hp的感染率較低，其主要原因可能是Hp感染降低了以胃部炎癥為主的患者胃反流的能力〔12〕。

目前研究認(rèn)為RE與Barrett食管和食管腺癌的發(fā)生發(fā)展是一個(gè)多步驟、多階段的多因素事件，由RE引起的食道鱗狀上皮損傷發(fā)展至Barrett食管最終發(fā)展為食管腺癌〔13〕。相關(guān)報(bào)道顯示，RE患者Barrett食管的發(fā)生率為10%左右〔14〕，而Barrett食管患者的食管腺癌患病率是一般人群的數(shù)十倍〔15〕。同時(shí)，也有研究證實(shí)RE還可能引起部分患者上呼吸道、肺部和口咽部疾病〔16〕。因此，對(duì)RE危險(xiǎn)因素的研究和新型生物標(biāo)志物的探尋在該病的防治中至關(guān)重要。本研究結(jié)果顯示，肥胖、經(jīng)常大量吸煙、經(jīng)常大量飲酒和經(jīng)常過(guò)飽飲食是導(dǎo)致RE發(fā)生的高危因素，而經(jīng)常喝咖啡和經(jīng)常吃甜食是導(dǎo)致RE發(fā)生的中度危險(xiǎn)因素。近年來(lái)研究證實(shí)，原癌基因c-myb具有轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子的作用，參與了多種腫瘤的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程。任春蓉等〔13〕的研究顯示，c-myb的表達(dá)水平與食管腺癌的病理分級(jí)具有較高的相關(guān)性，是BE發(fā)展為食管腺癌的早期事件之一。鑒于此研究，推測(cè)c-myb有作為診斷RE發(fā)生生物標(biāo)志物的潛力。本研究結(jié)果提示c-myb可作為RE診斷的新型生物標(biāo)志物。

總之，在RE的防治工作中應(yīng)加強(qiáng)66周歲以上及農(nóng)村地區(qū)老年人群體的篩查力度，同時(shí)應(yīng)對(duì)高危因素暴露人群展開教育工作。另外，在臨床上檢測(cè)食道黏膜組織中c-myb mRNA水平有助于RE的早發(fā)現(xiàn)早治療。