環(huán)湖地區(qū)牦牛與藏細(xì)羊O型口蹄疫免疫抗體血清學(xué)調(diào)查

馬艷萍，拉 華，闞 威

(青海省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，青海 西寧 810001)

0 引言

青海省幅員遼闊，自然生態(tài)環(huán)境復(fù)雜多樣，是全國(guó)畜禽遺傳資源大省之一，有地方品種16個(gè)。在現(xiàn)有的地方品種中，藏羊、牦牛是全省家畜的主體，數(shù)量多、分布廣，是農(nóng)牧民生產(chǎn)生活中必不可少的重要物質(zhì)保障，尤其環(huán)湖地區(qū)的羊年出欄量位居全省前列。因此對(duì)藏系綿羊進(jìn)行疫病的血清學(xué)調(diào)查十分必要。

口蹄疫(foot and mouth disease，F(xiàn)MD)是一種熱性、急性且高度接觸傳染性疾病[1]，這種傳染病是由口蹄疫病毒(Foot and mouth disease virus，F(xiàn)MDV)引起的，主要侵染的對(duì)象為偶蹄類動(dòng)物。高度的親和性、高水平的特異性抗體是自然感染動(dòng)物或者免疫動(dòng)物產(chǎn)生抗病毒的有效免疫應(yīng)答關(guān)鍵特征指標(biāo)[2]?？谔阋咴谌蚍秶即嬖?，同時(shí)其范圍及感染數(shù)量呈現(xiàn)出增長(zhǎng)的趨勢(shì)，對(duì)畜牧業(yè)的穩(wěn)健發(fā)展帶來(lái)了嚴(yán)重威脅。因此，本文對(duì)環(huán)湖地區(qū)的口蹄疫免疫抗體進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè)，旨在為該地區(qū)牦牛及綿羊的口蹄疫疫苗免疫情況提供數(shù)據(jù)參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 樣品采集

采用一次性真空采血器從動(dòng)物的頸靜脈抽取血樣，樣本采集后以傾斜的角度放置，自然凝固后放置到4℃冰箱中，待5 h后再放入到37℃溫箱，2 h后提取血清，最后保存到-20℃冰箱中。

1.1.2 主要試劑

采購(gòu)的試劑是由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所制口蹄疫O型液相阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒。

1.1.3 主要儀器

本實(shí)驗(yàn)主要用到的儀器包括恒溫培養(yǎng)箱、MultiskanMK3光吸收酶標(biāo)儀等。

1.2 試驗(yàn)方法

依照口蹄疫O型液相阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)開(kāi)展實(shí)驗(yàn)，運(yùn)用MultiskanMK3光吸收酶標(biāo)儀450 nm波長(zhǎng)測(cè)定樣本的吸光值，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行詳細(xì)記錄。實(shí)驗(yàn)結(jié)果的質(zhì)量控制：病毒的陽(yáng)性對(duì)照血清抗體效價(jià)范圍在1:(1024±1)，對(duì)照組的OD值范圍在1.5±0.5，陰性對(duì)照血清的抗體效價(jià)不超過(guò)1：8，表明實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠。結(jié)果判定：抗體效價(jià)達(dá)到1：128及以上，判定為口蹄疫O型抗體陽(yáng)性；抗體效價(jià)小于1：64，判定為口蹄疫O型抗體陰性，當(dāng)其結(jié)果在1:64～1:128范圍內(nèi)，則判定為疑似。

2 試驗(yàn)結(jié)果

對(duì)環(huán)湖地區(qū)2017-2019年春秋防牛、羊免疫血清樣品各660份進(jìn)行口蹄疫O型抗體檢測(cè)，結(jié)果如表1所示。

表1 免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

2017-2019年環(huán)湖地區(qū)羊O型口蹄疫免疫抗體總體合格率都在70%以上，羊O型口蹄疫免疫抗體普遍高于牦牛的口蹄疫抗體合格率。2017年羊O型口蹄疫抗體陽(yáng)性率均在85%以上，牛陽(yáng)性率在75%以上，且有2個(gè)縣陽(yáng)性率達(dá)到100%，其中興?？h牛、羊陽(yáng)性率均達(dá)到100%；2018年有3個(gè)縣羊陽(yáng)性率達(dá)到100%，2個(gè)縣牛陽(yáng)性率為100%，但貴南、興海、天峻3個(gè)縣羊O型口蹄疫免疫抗體陽(yáng)性率低至2.5%，興?？h牛陽(yáng)性率為35%；2019年環(huán)湖地區(qū)牛、羊免疫抗體均達(dá)到75%以上，且有5個(gè)縣羊陽(yáng)性率達(dá)到100%，如圖1所示。

圖1 環(huán)湖地區(qū)各縣牛、羊O型口蹄疫免疫陽(yáng)性率分布圖

3 討論

從檢測(cè)結(jié)果可以看出，部分縣免疫合格率低至20%以下，具體原因分析是由于散養(yǎng)戶較分散，不易統(tǒng)一管理，只有每年的春秋兩季集中免疫，相對(duì)于種畜場(chǎng)和商品代養(yǎng)殖場(chǎng)，免疫合格率較低，畜群受口蹄疫病毒感染的風(fēng)險(xiǎn)較高。部分高發(fā)口蹄疫的區(qū)域，都是采取疫苗免疫接種的方式來(lái)防止豬牛羊等動(dòng)物感染這種疾病。盡管環(huán)湖地區(qū)都給易感動(dòng)物進(jìn)行疫苗接種，可是各個(gè)區(qū)域采取同樣的預(yù)防措施及免疫疫苗的情況下，免疫抗體的陽(yáng)性率依然較低，其主要原因包括專業(yè)設(shè)施落后、防疫工作人員的經(jīng)驗(yàn)不足等。為動(dòng)物進(jìn)行免疫注射時(shí)，出現(xiàn)漏診、飛針等問(wèn)題，或注射完成期不足、采集血清時(shí)間過(guò)早等問(wèn)題都會(huì)導(dǎo)致抗體效價(jià)數(shù)值達(dá)不到要求?；诖?，應(yīng)該進(jìn)一步加強(qiáng)專業(yè)技術(shù)的培訓(xùn)力度，提高防疫員的專業(yè)技能，建立完善的獎(jiǎng)勵(lì)機(jī)制，以提高防疫員的工作積極性。另外，要求散養(yǎng)戶切實(shí)落實(shí)春秋兩季的免疫工作，確保免疫質(zhì)量，避免出現(xiàn)免疫漏洞。