氣相色譜-質(zhì)譜法測定茶葉中6種農(nóng)藥殘留

劉偉悅，劉夢瑤

北京張一元金橋茶葉有限公司（北京 101102）

茶葉源于中國，最早被作為祭品使用。春秋后期，茶葉被人們作為菜食，在西漢中后期發(fā)展為藥用以及宮廷高級(jí)飲料，西晉以后成為普及民間的普通飲料。茶葉中含有兒茶素、茶多酚、氨基酸、礦物質(zhì)等成分，有安神明目、解毒消暑、消食醒酒、增強(qiáng)免疫力等功效，被譽(yù)為“世界三大飲料之一”。

為提高茶葉產(chǎn)量，農(nóng)藥在茶葉病蟲防治中得到了廣泛使用，由此帶來的農(nóng)藥殘留可能危害消費(fèi)者健康。隨著生活水平日益提高，人們對(duì)茶葉的質(zhì)量和安全性有了更高要求[1]。陳紅平等[2]研究發(fā)現(xiàn)，農(nóng)藥在茶湯中的浸出率取決于農(nóng)藥的理化性質(zhì)（內(nèi)因）和沖泡方法（外因）。一般認(rèn)為農(nóng)藥殘留的種類和含量在國家標(biāo)準(zhǔn)允許范圍內(nèi)，不會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生明顯的健康危害或潛在的危害，這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)是通過嚴(yán)格的安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估后確定的，同時(shí)也會(huì)根據(jù)相關(guān)情況的發(fā)展變化不斷修訂標(biāo)準(zhǔn)，最新版國家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)GB 2763—2019《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》[3]中涉及茶葉中農(nóng)藥最大殘留限量達(dá)到65種。國內(nèi)外農(nóng)藥殘留的檢測方法主要有氣相色譜法、液相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜法、氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法等[4-7]。其中，液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法利用被測樣品離子質(zhì)荷比，定性定量更加準(zhǔn)確，檢測靈敏度更高，對(duì)于茶葉類復(fù)雜基質(zhì)中農(nóng)藥殘留檢測有其獨(dú)特的技術(shù)優(yōu)勢。

試驗(yàn)建立適用于檢測茶葉中農(nóng)藥殘留的氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法，該方法簡單快速、分離度好、重現(xiàn)性好、精密度高，可滿足同時(shí)檢測茶葉中西瑪津[8-11]、莠去津、氟蟲脲、百菌清[12-16]、毒死蜱和喹硫磷6種農(nóng)藥殘留的要求。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

丙酮中西瑪津、莠去津、氟蟲脲、毒死蜱、喹硫磷，正己烷中百菌清溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品（質(zhì)量濃度均為100 μg/mL），內(nèi)標(biāo)正己烷中環(huán)氧七氯（質(zhì)量濃度為100 μg/mL）（農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測所）；乙腈，甲苯、正己烷（均為色譜純，賽默飛世爾科技（中國）有限公司）；無水硫酸鈉（分析純，北京化工廠，經(jīng)550 ℃灼燒4 h，儲(chǔ)存于干燥器中，冷卻后備用）；Cleanert TPT固相萃取柱（Agela公司）；0.22 μm尼龍微孔過濾膜（津騰公司）。

1.2 儀器與設(shè)備

7890B-5975C氣相色譜-質(zhì)譜儀（美國安捷倫公司）；CM-12水浴氮吹儀（北京成萌偉業(yè)科技有限公司）；RE-2000B旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠）；QL-901渦旋混合器（海門市其林貝爾儀器制造有限公司）；HP-5MS色譜柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；SE202F電子分析天平（奧豪斯）；TDL-40B臺(tái)式低速離心機(jī)（飛鴿牌）；HY-5A型回旋式振蕩器（江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司）。

1.3 方法

1.3.1 待測液制備[17]

稱取5 g（精確至0.01 g）粉碎均勻的試樣，用體積20.0 mL的乙腈振蕩提取1 h，在4000 r/min下離心5 min。分取4 mL上清液，過Cleanert TPT固相萃取柱（萃取柱中加入約2 cm高無水硫酸鈉，用10 mL乙腈-甲苯（3+1）洗脫液預(yù)洗，棄去流出液）凈化，用20 mL乙腈+甲苯（3+1）洗脫，收集的洗脫液水浴40 ℃旋蒸至近干，用正己烷定容1 mL，加40 μL環(huán)氧七氯（35 μg/mL）內(nèi)標(biāo)，過0.22 μm微孔過濾膜，混勻，用于氣相色譜-質(zhì)譜測定，以基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液工作曲線定量。

1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的配制：用移液槍取農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液，加入10.0 mL容量瓶中，用正己烷稀釋并定容。各農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液的取用體積見表1。

表1 混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液質(zhì)量濃度

基質(zhì)空白溶液的制備：同待測液的制備方法，用未檢出待測農(nóng)藥的普洱生茶樣品制作基質(zhì)空白溶液，洗脫液旋蒸至近干。用正己烷標(biāo)液定容，過0.22 μm濾膜，所得溶液為基質(zhì)空白溶液。

基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：將1 mL混合標(biāo)準(zhǔn)溶液氮吹至近干，用基質(zhì)空白定容至1 mL。配制6點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)曲線，分別移取20，40，60，80，100和200 μL上述混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，用基質(zhì)空白溶液定容至1 mL，加40 μL環(huán)氧七氯（35 μg/mL）內(nèi)標(biāo)，混勻，待上機(jī)。基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線質(zhì)量濃度見表2。

表2 基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線質(zhì)量濃度 單位：μg/L

1.3.3 氣相色譜-質(zhì)譜條件

氣相色譜進(jìn)樣口溫度260 ℃；柱溫40 ℃保持1 min，30 ℃/min升溫至250 ℃，保持1 min；3 ℃/min升溫至280 ℃，保持2 min；30 ℃/min升溫至310 ℃，保持3 min；壓力為9.1 Psi，載氣采用高純氦氣He（≥9.999%），HP-5色譜柱，柱流速為1.2 mL/min，不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量1 μL。

質(zhì)譜采用EI離子源，電離能量70 eV；離子源溫度230 ℃；四極桿溫度150 ℃；傳輸線溫度280 ℃；溶劑延遲時(shí)間6.5 min。采用選擇離子掃（SIM）方式定性定量?；衔镉⑽拿Q、保留時(shí)間及質(zhì)譜參數(shù)見表3。

表3 保留時(shí)間和質(zhì)譜特征離子

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性范圍

氣質(zhì)聯(lián)用儀經(jīng)調(diào)諧通過后，即可進(jìn)樣分析。以所測化合物與環(huán)氧七氯響應(yīng)值比為縱坐標(biāo)，濃度比為橫坐標(biāo)，以3倍信噪比（S/N）計(jì)算方法檢出限，以10倍信噪比（S/N）計(jì)算方法定量限[18-21]，茶葉中6種農(nóng)藥線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限和限值見表4。

表4 茶葉中6種農(nóng)藥線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限和限值

2.2 加標(biāo)回收和精密度

選擇普洱生茶空白樣品進(jìn)行加標(biāo)處理，處理方法同待測液的制備方法，按照所建立的方法處理、測定，每個(gè)加標(biāo)量重復(fù)6次，驗(yàn)證試驗(yàn)方法的精密度?？瞻讟悠分?種農(nóng)藥加標(biāo)回收結(jié)果見表5。從表5可以看出，6種農(nóng)藥的加標(biāo)回收率在75.4%～114.6%，表明方法準(zhǔn)確度高；精密度在0.3%～7.8%，表明方法重現(xiàn)性好。

表5 農(nóng)藥加標(biāo)回收率及精密度

2.3 3種茶葉樣品加標(biāo)回收率分析

對(duì)綠茶、紅茶、茉莉花茶3種茶葉進(jìn)行6種農(nóng)殘加標(biāo)試驗(yàn)，制備均勻樣品，采用試驗(yàn)方法提取、凈化、上機(jī)測試，添加水平及回收率見表6。從表6可以看出，3種茶葉中6種農(nóng)藥的回收率在70.5%～108.0%，表明方法可用于茶葉中6種農(nóng)藥殘留的同時(shí)檢測。

表6 3種茶葉加標(biāo)回收

2.4 樣品測定

隨機(jī)抽取綠茶、紅茶、黑茶、烏龍茶、茉莉花茶5種茶樣共187批次，采用建立的檢測方法對(duì)該批樣品進(jìn)行檢測。結(jié)果表明，西瑪津、莠去津、百菌清、氟蟲脲、喹硫磷均未檢出，而毒死蜱的檢出率較高。共有152批次樣品中檢出毒死蜱，各種茶類抽檢批次，檢出毒死蜱批次和毒死蜱最高檢出含量見表7。由表7可知，烏龍茶和茉莉花茶毒死蜱檢出率最高，但含量均低于GB 2763—2019《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》規(guī)定的茶葉農(nóng)藥殘留限值。

表7 茶葉樣品中毒死蜱檢出情況

3 結(jié)論

建立氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法，可同時(shí)測定茶葉中西瑪津、莠去津、氟蟲脲、百菌清、毒死蜱、喹硫磷的殘留量，且方法線性相關(guān)性好、準(zhǔn)確度高、精密度好。試驗(yàn)結(jié)果一方面可為茶葉產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)的完善提供數(shù)據(jù)，另一方面可為監(jiān)管部門對(duì)茶葉產(chǎn)品的風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測提供方法參考。