TB-DNA、IgG、IgM 及血沉檢測(cè)在菌陰肺結(jié)核診斷中的應(yīng)用價(jià)值探討

蘇俊梅 謝榮章 歐雅文

肺結(jié)核是一種慢性傳染病,是由肺部感染結(jié)核桿菌所致,會(huì)累及許多器官,重要傳染源為排菌者,主要經(jīng)呼吸道傳播。近幾年,中國肺結(jié)核發(fā)病率開始逐年上升,其中痰菌陰性患者人數(shù)占60%～70%［1］?，F(xiàn)階段,細(xì)菌學(xué)檢查仍為診斷結(jié)核病的金標(biāo)準(zhǔn),傳統(tǒng)的抗酸染色涂片敏感性為19.5%～35%［2］,而普通培養(yǎng)分枝桿菌出報(bào)告的時(shí)間在6～8 周,且要求較高的培養(yǎng)條件,較低的陽性率,很多醫(yī)院在開展這一方法時(shí)條件不夠。因此,需深入探究有效的診斷形式,提升診斷效率。本文圍繞菌陰肺結(jié)核診斷中TB-DNA、IgG、IgM 及血沉檢測(cè)的應(yīng)用價(jià)值展開研究,具體內(nèi)容報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2019 年7 月～2020 年9 月收治的146 例肺部疾病患者,所有患者資料完整,經(jīng)過相關(guān)及腫瘤標(biāo)志物檢查排除腫瘤,根據(jù)痰涂片、常規(guī)檢查及臨床診斷將患者分為菌陽肺結(jié)核組(50 例)、菌陰肺結(jié)核組(46 例)及肺部其他疾病組(50 例)。菌陽肺結(jié)核組男26 例、女24 例；年齡21～72 歲,平均年齡(46.28±9.10)歲；納入標(biāo)準(zhǔn)：患者均有典型臨床表現(xiàn),并符合國際傳染性肺結(jié)核診斷標(biāo)準(zhǔn)。菌陰肺結(jié)核組男26 例、女20 例；年齡22～73 歲,平均年齡(47.18±9.06)歲；納入標(biāo)準(zhǔn)：其他非結(jié)核性肺部疾病及其他部位肺結(jié)核除外,胸部CT 顯示存在活動(dòng)性肺結(jié)核表現(xiàn),支氣管或肺部組織病理證實(shí)結(jié)核病變,同時(shí)符合《肺結(jié)核診斷與治療指南》中有關(guān)活動(dòng)性不排菌肺結(jié)核診斷標(biāo)準(zhǔn)。肺部其他疾病組男28 例、女22 例；年齡23～71 歲,平均年齡(47.59±8.36)歲；納入標(biāo)準(zhǔn)：肺膿腫、慢性阻塞性肺疾病、大葉性肺炎患者等,所有患者均經(jīng)過確診并排除存在合并肺結(jié)核患者。三組患者一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),具有可比性。見表1。本文研究通過倫理審核批準(zhǔn)。

表1 三組患者一般資料比較(n,±s)

表1 三組患者一般資料比較(n,±s)

注：三組比較,P＞0.05

1.2 方法 三組患者均進(jìn)行TB-DNA、IgG、IgM 及血沉檢測(cè)。患者入院后均采取晨痰標(biāo)本,采用抗酸染色鏡檢痰涂片,痰涂片陽性：每100 個(gè)視野抗酸桿菌＞3 個(gè)；以TB-DNA 法測(cè)定同份晨痰,患者同時(shí)行IgG、IgM 及血沉檢測(cè)。菌陰判定標(biāo)準(zhǔn)［3］:支氣管或肺部組織病理證實(shí)結(jié)核病變、痰或支氣管肺泡灌洗液中未檢出抗酸分枝桿菌均可判斷確診。

1.2.1 TB-DNA 檢測(cè) 患者采取合格晨痰標(biāo)本,用4%氫氧化鈉溶液稀釋液化痰液,混勻,靜置30 min～1 h,使其充分液化,待無明顯固狀物且吸出時(shí)無拖絲現(xiàn)象,取液化后痰標(biāo)本離心處理,用于基因擴(kuò)增。應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)檢測(cè)標(biāo)本中TB-DNA。實(shí)驗(yàn)步驟及結(jié)果判讀嚴(yán)格按照試劑盒上的說明書實(shí)施操作,同時(shí)做好室內(nèi)質(zhì)量控制。

1.2.2 IgG、IgM 檢測(cè) 實(shí)行結(jié)核抗體膠體金IgG、IgM 檢測(cè),按常規(guī)法采集、分離、貯存靜脈血清標(biāo)本,按照各試劑盒說明書要求實(shí)施試驗(yàn)步驟,嚴(yán)格按產(chǎn)品操作說明書開展試驗(yàn)過程和判斷相關(guān)結(jié)果。

1.2.3 血沉檢測(cè) 采用魏氏(Westergren)法進(jìn)行血沉檢測(cè),男性正常值0～10 mm/h,女性正常值0～15 mm/h,大于正常值為陽性,小于正常值為陰性［4］。

1.3 觀察指標(biāo) 比較三組TB-DNA、IgG、IgM、血沉的陽性檢出率,TB-DNA、IgG、IgM、血沉單項(xiàng)檢測(cè)及聯(lián)合檢測(cè)菌陰肺結(jié)核的敏感度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差 (±s)表示,采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組陽性檢出率比較 菌陰肺結(jié)核組血沉、TB-DNA、IgG、IgM 陽性檢出率均明顯高于菌陽肺結(jié)核組和肺部其他疾病組,菌陽肺結(jié)核組血沉、TB-DNA、IgG、IgM 陽性檢出率高于肺部其他疾病組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表2。

表2 三組陽性檢出率比較［n(%)］

2.2 血沉、TB-DNA、IgG、IgM 單項(xiàng)檢測(cè)與聯(lián)合檢測(cè)菌陰肺結(jié)核的敏感度比較 聯(lián)合檢測(cè)菌陰肺結(jié)核的敏感度顯著高于血沉、TB-DNA、IgG、IgM 單項(xiàng)檢測(cè),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表3。

表3 血沉、TB-DNA、IgG、IgM 單項(xiàng)檢測(cè)與聯(lián)合檢測(cè)菌陰肺結(jié)核的敏感度比較(%)

3 討論

結(jié)核病是一種慢性感染性疾病,是由機(jī)體接觸感染結(jié)核分枝桿菌后引發(fā),常見于青年群體,潛伏期為4～8 周,入侵肺部的結(jié)核菌感染超過80%被稱為肺結(jié)核［5］。結(jié)核病中常見肺結(jié)核,引發(fā)肺結(jié)核的病原體為結(jié)核分枝桿菌,現(xiàn)階段診斷結(jié)核分枝桿菌的主要手段包括免疫學(xué)診斷、分子生物學(xué)診斷、影像學(xué)診斷、細(xì)菌學(xué)診斷［6］。細(xì)菌學(xué)檢查為檢測(cè)傳染源的主要手段,與此同時(shí),也是確診肺結(jié)核和制定化療方案的主要依據(jù)［7］。但由于肺結(jié)核患者痰液呈間歇排菌或處于不合格的痰標(biāo)本質(zhì)量,會(huì)導(dǎo)致痰涂片或分枝桿菌呈陰性培養(yǎng)結(jié)果,以至于部分肺結(jié)核患者無法證實(shí)病理學(xué)［8］。診斷菌陰肺結(jié)核除依據(jù)胸部影像學(xué)檢查和臨床表現(xiàn)外,實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)指標(biāo)對(duì)診斷可發(fā)揮良好作用。對(duì)菌陰肺結(jié)核采取多種方法聯(lián)合檢測(cè)可提升陽性檢出率［9］。

隨著分子生物技術(shù)不斷發(fā)展,且敏感度、特異度也較高,其快速進(jìn)入結(jié)核病診斷領(lǐng)域。以往血沉在診斷結(jié)核病中可作為一種非特異性參考指標(biāo),在檢查過程中簡單易行,目前已經(jīng)普遍應(yīng)用于國內(nèi),但影響因素較多,從而引發(fā)假陽性或假陰性的幾率很高［10］。TB-DNA 具有較高的檢測(cè)敏感度,速度快,但僅能判斷是否有結(jié)核桿菌,無法對(duì)潛伏性感染、死菌及活動(dòng)性感染行良好鑒別。現(xiàn)階段結(jié)核抗體IgG 主要選擇使用純化的結(jié)核菌細(xì)胞壁多糖,結(jié)核菌脂阿拉伯甘露糖(LAM)是最常用的［11］?；颊咴诮Y(jié)核分枝桿菌感染早期以IgM 型結(jié)核抗體為體內(nèi)主要的免疫球蛋白,中晚期主要為IgG 型。TB-DNA、IgG、IgM 及血沉聯(lián)合檢測(cè)可有效彌補(bǔ)單項(xiàng)檢測(cè)的不足,提升檢出率,發(fā)揮良好的檢測(cè)效果［12］。本次研究結(jié)果顯示,菌陰肺結(jié)核組血沉、TB-DNA、IgG、IgM 陽性檢出率均明顯高于菌陽肺結(jié)核組和肺部其他疾病組,菌陽肺結(jié)核組血沉、TB-DNA、IgG、IgM 陽性檢出率高于肺部其他疾病組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。聯(lián)合檢測(cè)菌陰肺結(jié)核的敏感度顯著高于血沉、TB-DNA、IgG、IgM 單項(xiàng)檢測(cè),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

綜上所述,在菌陰肺結(jié)核診斷中應(yīng)用TB-DNA、IgG、IgM 及血沉聯(lián)合檢測(cè),有利于提升診斷率,增強(qiáng)特異性,為早期診斷菌陰肺結(jié)核提供有力依據(jù)。