術(shù)前血清TIMP-1、TIMP-2水平與肝切除術(shù)后肝功能延遲恢復的相關(guān)性研究*

陸 路，黎東明，吳曉勇，王學國，王太成，趙紅巖，李 鵬

海南醫(yī)學院第二附屬醫(yī)院肝膽胰腺外科，海南?？?570100

肝癌患者多合并慢性疾病，特別是肝切除術(shù)后患者易發(fā)生肝功能延遲恢復，增加圍術(shù)期病死率及術(shù)后復發(fā)風險，不利于預后[1-2]?；|(zhì)金屬蛋白酶-1組織抑制因子(TIMP-1)、基質(zhì)金屬蛋白酶-2組織抑制因子(TIMP-2)已被證實可影響細胞外基質(zhì)降解，使細胞外基質(zhì)在組織內(nèi)過度沉積[3-4]。而細胞外基質(zhì)的過度沉積是肝纖維化發(fā)生、發(fā)展的主要因素之一[5]。本研究主要觀察肝癌患者術(shù)前血清TIMP-1、TIMP-2水平與肝切除術(shù)后肝功能延遲恢復的關(guān)系，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年1月至2019年12月在本院接受肝切除術(shù)治療的61例肝癌患者，全部患者及家屬對此次研究知情，并簽署同意書。(1)納入標準：①組織病理檢查結(jié)果確診為原發(fā)性肝癌；②意識清醒，可以很好地配合研究的展開；③預計生存時間>3個月。(2)排除標準：①合并心、腎衰竭；②合并其他惡性腫瘤；③合并嚴重傳染性疾病或感染性疾??；④合并免疫系統(tǒng)疾病。61例肝癌患者中男32例，女29例；年齡55～64歲，平均(59.32±2.03)歲；腫瘤最大徑2.1～7.2 cm，平均(5.38±0.42)cm。本研究經(jīng)本院倫理委員會批準實施。

1.2方法

1.2.1手術(shù)方法 全部患者均接受肝切除術(shù)治療：全身麻醉后選擇合適切口，根據(jù)病變部位、腫瘤大小，充分游離肝周圍的韌帶，鈍性切開肝實質(zhì)，縫合肝斷面后放置引流，縫合傷口。

1.2.2肝功能延遲恢復評估及分組方法 參照文獻[6]，將術(shù)后第1～5天內(nèi)出現(xiàn)凝血酶原時間>20 s或血清膽紅素>50 μmol/L的患者納入延遲恢復組，其余患者納入正?；謴徒M。收集兩組患者的一般資料。

1.2.3術(shù)前實驗室指標檢測 (1)γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶、堿性磷酸酶、乳酸脫氫酶、α-L-巖藻糖苷酶、甲胎蛋白：分別于兩組患者接受肝切除術(shù)當天早晨抽取空腹狀態(tài)下5 mL外周肘靜脈血，經(jīng)全自動生化儀(武漢盛世達醫(yī)療設備有限公司，BS-450型)檢測；(2)中性粒細胞絕對值(NE)、淋巴細胞絕對值(LY)：分別于兩組患者接受肝切除術(shù)當天早晨抽取空腹狀態(tài)下4 mL外周肘靜脈血，經(jīng)全自動血細胞分析儀(南京貝登醫(yī)療股份有限公司，BC-5000型)檢測；(3)TIMP-1、TIMP-2：分別于兩組患者接受肝切除術(shù)當天早晨抽取空腹狀態(tài)下5 mL外周肘靜脈血，經(jīng)智能型高效離心機[貝克曼庫爾特商貿(mào)(中國)有限公司，Avanti JXN-30/26型]，以3 000 r/min的速度離心5 min后取血清，經(jīng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測，試劑盒由合肥萊爾生物科技有限公司提供。

2 結(jié) 果

2.1肝功能延遲恢復發(fā)生情況 全部61例肝癌患者行肝切除術(shù)后，肝功能延遲恢復的患者有7例，延遲恢復率為11.48%(7/61)。

2.2延遲恢復組與正?；謴徒M一般資料、實驗室指標水平比較 延遲恢復組術(shù)前NE及血清TIMP-1、TIMP-2水平高于正常恢復組，LY低于正常恢復組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。兩組一般資料及其他實驗室指標水平比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 一般資料、實驗室指標在兩組間比較

2.3肝癌患者術(shù)前血清TIMP-1水平與TIMP-2的相關(guān)性分析 雙變量Pearson相關(guān)分析結(jié)果顯示，肝癌患者術(shù)前血清TIMP-1水平與TIMP-2水平呈正相關(guān)(r=0.308，P=0.016)。見圖1。

圖1 肝癌患者術(shù)前血清TIMP-1水平與TIMP-2水平相關(guān)性的散點圖

2.4影響肝癌患者肝切除術(shù)后肝功能延遲恢復的二元Logistic回歸分析結(jié)果 將肝癌患者術(shù)前NE、LY及血清TIMP-1、TIMP-2水平分別作為自變量，術(shù)后肝功能恢復情況作為因變量(1=延遲恢復，0=正?；謴?進行分析，結(jié)果提示術(shù)前NE、LY及血清TIMP-1、TIMP-2水平是肝癌患者肝切除術(shù)后肝功能延遲恢復的影響因素(P<0.05)。見表2。

表2 影響肝癌患者肝切除術(shù)后肝功能延遲恢復的二元Logistic回歸分析結(jié)果

2.5血清TIMP-1、TIMP-2檢測預測肝癌患者肝切除術(shù)后肝功能延遲恢復的效能 ROC曲線(圖2)分析結(jié)果顯示，術(shù)前血清TIMP-1、TIMP-2水平單獨及聯(lián)合檢測預測肝癌患者肝切除術(shù)后肝功能延遲恢復的AUC均>0.80，預測價值較理想，且以聯(lián)合預測效果最佳。各指標對應的最佳閾值、特異度、靈敏度及約登指數(shù)見表3。

圖2 血清TIMP-1、TIMP-2水平單獨或聯(lián)合檢測預測肝癌患者肝切除術(shù)后肝功能延遲恢復的ROC曲線

表3 血清TIMP-1、TIMP-2水平單獨或聯(lián)合檢測預測肝癌患者肝切除術(shù)后肝功能延遲恢復的效能分析

3 討 論

研究指出，80%～90%肝癌患者合并不同程度的肝硬化，肝硬化可降低患者肝組織的再生能力，進而增加肝切除術(shù)后肝功能延遲恢復的風險[7]。還有研究指出，肝切除術(shù)后肝功能延遲恢復的患者具有較高的腫瘤復發(fā)風險，且術(shù)后生存時間顯著縮短，增加術(shù)后病死風險，不利于預后[8-9]。為提高患者生存率，臨床應早期評估肝癌患者肝切除術(shù)后肝功能延遲恢復的風險，并給出針對性的建議，指導治療方案的擬定。

張軍等[10]研究指出，肝癌患者肝切除術(shù)后肝功能延遲恢復發(fā)生率為10%～13%，嚴重影響患者預后。本研究納入61例肝癌患者，經(jīng)肝切除術(shù)后發(fā)生肝功能延遲恢復的患者有7例，發(fā)生率為11.48%，與上述研究結(jié)果相近。這表明肝癌患者經(jīng)肝切除術(shù)后存在肝功能延遲恢復的風險，故分析肝癌患者肝切除術(shù)后肝功能延遲恢復的影響因素及可能的風險預測因子，對改善預后意義重大。肝癌的發(fā)生、發(fā)展與全身或局部炎性反應密切相關(guān)，炎性反應的發(fā)生可使大量新血管生成，損壞脫氧核糖核酸(DNA)，進而促進肝臟癌變程度進一步發(fā)展[11]。NE、LY是常見炎性反應標志物，二者對肝癌肝切除術(shù)后肝功能恢復的影響也被本研究證實，簡單分析原因：中性粒細胞可引發(fā)炎性反應及疼痛，影響肝組織的凝血功能[12]。淋巴細胞作為體積最小的白細胞，是發(fā)揮免疫應答功能的重要細胞，可主導淋巴系統(tǒng)內(nèi)的大部分免疫功能，通過影響免疫功能，繼而影響肝功能的恢復[13]。但需注意的是，NE、LY具有不穩(wěn)定性，進而影響研究的可靠性及準確性，故單獨使用二者來評估術(shù)后肝功能延遲恢復的發(fā)生風險局限性大。

有研究指出，細胞外基質(zhì)的合成及降解與肝功能密切相關(guān)，而在細胞外基質(zhì)降解過程中起關(guān)鍵作用的是基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)[14]。作為鋅離子依賴酶，MMPs能夠明顯降低膠原的穩(wěn)定性，進而為其他蛋白酶的降解創(chuàng)造條件[15]。TIMP-1、TIMP-2已被諸多研究證實是一組能夠明顯降低MMPs活性的多肽，不僅能夠與MMPs非共價結(jié)合，降低MMPs活性，還可結(jié)合酶原，不利于MMPs活化以及細胞外基質(zhì)降解，繼而影響肝功能[16-17]。本研究對比延遲恢復組與正?；謴徒M患者的血清TIMP-1、TIMP-2水平并進行Logistic回歸分析，結(jié)果顯示，術(shù)前血清TIMP-1、TIMP-2水平是肝癌患者肝切除術(shù)后發(fā)生肝功能延遲恢復的影響因素，初步提示術(shù)前血清TIMP-1、TIMP-2水平與肝癌患者肝切除術(shù)后肝功能延遲恢復有關(guān)。究其原因：正常情況下，基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子(TIMPs)與MMPs共同維護機體穩(wěn)態(tài)[18]。當體內(nèi)細胞外基質(zhì)大量生成時，MMPs可通過降解細胞外基質(zhì)，避免肝組織內(nèi)細胞外基質(zhì)過度沉積，降低肝纖維化的發(fā)生風險，繼而促進肝功能的恢復[19]。但當體內(nèi)血清TIMP-1、TIMP-2過表達時，可顯著降低MMPs活性，進而影響細胞外基質(zhì)的降解過程，加重器官、組織的受損程度，繼而不利于器官功能的恢復[20]。此外，有報道顯示，TIMP-1、TIMP-2還可促進成纖維細胞、內(nèi)皮細胞等多種細胞增殖，進而為心肌纖維化的發(fā)生、發(fā)展創(chuàng)造有利條件，不利于預后[21]。

為了進一步明確術(shù)前血清TIMP-1、TIMP-2水平與肝癌患者肝切除術(shù)后肝功能延遲恢復的關(guān)系，本研究繪制ROC曲線發(fā)現(xiàn)，術(shù)前血清TIMP-1、TIMP-2單獨及聯(lián)合檢測預測肝癌患者肝切除術(shù)后肝功能延遲恢復的AUC均>0.80，預測價值較理想，且以聯(lián)合預測效果最佳。上述結(jié)果均證實，術(shù)前血清TIMP-1、TIMP-2水平與肝癌患者肝切除術(shù)后肝功能延遲恢復有關(guān)，可作為肝功能延遲恢復風險的預測指標。此外，本研究還對這兩個血清指標的水平進行變量間的相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，肝癌患者術(shù)前血清TIMP-1水平與TIMP-2呈正相關(guān)，提示肝癌患者術(shù)前血清TIMP-1與TIMP-2可相互影響、相互作用，共同參與了肝癌患者肝切除術(shù)后肝功能的延遲恢復，但具體機制尚未明確，且相關(guān)研究較少，仍需要在未來進一步開展大樣本、長時間的研究加以驗證分析。

綜上所述，肝癌患者肝切除術(shù)后仍有肝功能延遲恢復的風險，可能與患者肝切除術(shù)前血清TIMP-1、TIMP-2水平異常有關(guān)，臨床可考慮通過術(shù)前檢測患者血清TIMP-1、TIMP-2水平來預測患者術(shù)后肝功能延遲恢復的發(fā)生風險，以指導早期干預，改善患者預后。