特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品中氯的國標檢測方法適用性

吳 昊，張 斌，劉曉光，郭美娟，張?zhí)m天，張 巖

（河北省食品檢驗研究院，河北省食品安全重點實驗室，河北 石家莊 050200）

特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品指針對患有特殊紊亂、疾病或醫(yī)療狀況等特殊醫(yī)學狀況嬰兒的營養(yǎng)需求設(shè)計制成的粉狀或液態(tài)配方食品。在醫(yī)生或臨床營養(yǎng)師的指導下，單獨食用或與其他食物配合食用時，其能量和營養(yǎng)成分能夠滿足0～6 月齡特殊醫(yī)學狀況嬰兒的生長發(fā)育需求[1-2]。氯是人體必需元素，血液中的氯等電解質(zhì)離子比例失調(diào)時，輕者使人疲乏無力、厭食嗜睡、消化不良，重者導致嘔吐、抽搐、昏迷不醒、心律失常等癥狀[3]。特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品中的氯主要來自加工過程中加入的食鹽[4]。GB 25596—2010《食品安全國家標準 特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品通則》規(guī)定，特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品中氯的含量范圍為12～38 mg/100 kJ。

GB 25596—2010指定特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品中氯的檢測方法為GB 5413.24—2010《食品安全國家標準 嬰幼兒食品和乳品中氯的測定》。目前，GB 5413.24—2010已被廢止，現(xiàn)行國標為GB 5009.44—2016《食品安全國家標準 食品中氯化物的測定》[5]。GB 5009.44—2016規(guī)定了食品中氯化物的3 種檢測方法，分別為電位滴定法、佛爾哈德法（間接沉淀滴定法）、銀量法（摩爾法或直接滴定法）。目前嬰幼兒配方乳粉中氯采用GB 5009.44—2016第三法，即銀量法（摩爾法或直接滴定法）進行檢測，而對于種類繁多、基質(zhì)不同的特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品，該方法的適用性仍需進一步驗證。

作為乳蛋白過敏嬰幼兒的唯一食物來源，特殊醫(yī)學用途嬰幼兒蛋白質(zhì)水解配方和氨基酸配方產(chǎn)品的質(zhì)量控制尤為重要[6-9]。本研究共有7 家實驗室參與，依據(jù)GB 5009.44—2016對3 類不同配方特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品、共8 種產(chǎn)品中的氯進行測定，研究特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品中氯國標檢測方法的適用性，期望能夠為建立特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品中氯的檢測方法提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

目前因無法得到特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品的參考樣品，代以市售嬰兒配方乳粉作為參考樣品，參考值由具有ISO 17043資質(zhì)的實驗室基于AOAC 986.26的內(nèi)部檢測方法，依據(jù)能力驗證統(tǒng)計方法計算得出。

本研究選用市售不同品牌、不同配方的特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品為樣品，具體為4 種乳蛋白部分水解配方產(chǎn)品、2 種乳蛋白深度水解配方產(chǎn)品及2 種氨基酸配方產(chǎn)品。樣品信息詳見表1。

表1 特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品樣品信息Table 1 Information about samples tested in this study

本研究中各實驗室所用儀器、試劑及標準溶液配制均參照GB 5009.44—2016要求進行。

1.2 儀器與設(shè)備

855型全自動電位滴定儀 瑞士萬通有限公司。

1.3 方法

樣品前處理及氯的檢測分析采用GB 5009.44—2016第三法銀量法（摩爾法或直接滴定法）和GB 5009.44—2016第一法電位滴定法。

1.4 數(shù)據(jù)處理

使用Microsoft Office Excel 2007軟件和SPSS軟件進行數(shù)據(jù)處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 嬰兒配方乳粉參考樣品中氯含量測定結(jié)果

本研究參加比對的7 家實驗室使用GB 5009.44—2016第三法對參考樣品中的氯進行檢測。由表2可知，參考值為423 mg/100 g，各實驗室檢測值為412～490 mg/100 g，相對標準偏差為6.17%。直接滴定法的終點是靠肉眼進行判斷，而且在滴定管的估讀上可能存在誤差，從而導致結(jié)果出現(xiàn)差異[10]。

表2 嬰兒配方乳粉參考樣品中氯含量測定結(jié)果（GB 5009.44 —2016第三法）Table 2 Results of silver nitrate titration for chlorine in infant formula reference samples

2.2 特殊醫(yī)學用途嬰兒配方乳粉中氯含量測定結(jié)果

由表3可知，各樣品檢測結(jié)果的相對標準偏差為12.7%～32.9%。蛋白質(zhì)水解配方和氨基酸配方樣品中含有氨基酸，酸性較強，在此條件下，會轉(zhuǎn)化為從而指示終點的Ag2CrO4沉淀出現(xiàn)延遲。此外，樣品中的氨基酸還有可能會與銀離子發(fā)生反應(yīng)，形成有色（如紅棕色）物質(zhì)，影響終點判定，最終導致檢測結(jié)果偏高[11-13]。而GB 5009.44—2016第三法是在堿性環(huán)境（pH 6.5～10.5）中用硝酸銀進行滴定，通過目測顏色變化來判定終點，因此采用GB 5009.44—2016第三法檢測蛋白質(zhì)水解配方和氨基酸配方樣品中氯時，樣品基質(zhì)影響終點判斷，導致檢測結(jié)果差異性較大。

表3 特殊醫(yī)學用途嬰兒配方乳粉中氯含量測定結(jié)果（GB 5009.44—2016第三法）Table 3 Results of silver nitrate titration for chlorine content in infant formula for special medical purposes

2.3 各實驗室測定結(jié)果的ZB值

ZB值即實驗室間Z比分數(shù)（Z值），用來衡量實驗室間測試結(jié)果的系統(tǒng)誤差[14]。Z值用來衡量某一測試結(jié)果在一組數(shù)據(jù)中相對于中位值的偏離程度，Z絕對值越小，表明該結(jié)果的偏離程度越低。Z值的計算公式為：Z=（測試結(jié)果－中位值）/測試結(jié)果的標準四分位數(shù)間距。依據(jù)CNAS-GL02《能力驗證結(jié)果的統(tǒng)計處理和能力評價指南》中對Z比分數(shù)評價準則的規(guī)定，|Z|≤2為滿意結(jié)果，2＜|Z|＜3為可疑或有問題結(jié)果，|Z|≥3為不滿意結(jié)果。

由表4可知，實驗室4氨基酸配方樣品D、乳蛋白部分水解配方樣品E，實驗室7乳蛋白部分水解配方樣品B、F和氨基酸配方樣品H 5 個樣品檢測結(jié)果的|ZB|大于2，其余51 個檢測結(jié)果的|ZB|≤2，說明檢測結(jié)果精密度符合實驗要求。

表4 各實驗室測定結(jié)果的ZB值Table 4 ZB values obtained in seven laboratories

2.4 回收率測定結(jié)果

為了進一步驗證GB 5009.44—2016第三法的方法適用性，選擇乳蛋白深度水解配方樣品C、氨基酸配方樣品D、乳蛋白部分水解配方樣品E進行加標回收實驗，考察方法的準確性。GB/T 27404—2008《實驗室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測》規(guī)定，含量大于100 mg/kg的被測組分，其加標回收率應(yīng)為95%～105%。

由表5可知：對于乳蛋白深度水解配方樣品C，實驗室2的加標回收率為108%，略高于105%，實驗室4的加標回收率高達125%；對于氨基酸配方樣品D，實驗室1的加標回收率為106%，略高于105%；對于乳蛋白部分水解配方樣品E，實驗室1、2的加標回收率為108%，略高于105%，其他實驗室加標回收率檢測結(jié)果均符合GB/T 27404—2008要求。

表5 各實驗室加標回收率測定結(jié)果Table 5 Spiked recoveries of silver nitrate titration obtained in different laboratories

2.5 方法間比對

GB 5009.44—2016第一法（電位滴定法）是在酸性（硝酸）環(huán)境中用硝酸銀進行滴定，銀離子和氯離子生成白色沉淀，經(jīng)硝酸酸化后，硝酸銀可排除多種雜質(zhì)離子的干擾，從而能夠準確測定溶液中的含氯離子。田洪蕓等[9]報道，電位滴定法測定結(jié)果準確度好、精密度高，能避免基質(zhì)干擾，因此，采用電位滴定法來進一步驗證國標方法的適用性。采用電位滴定法重新檢測8 種特殊醫(yī)學用途嬰兒配方乳粉樣品中的氯，并進行加標回收實驗。

由表6可知，GB 5009.44—2016第一法檢測結(jié)果低于GB 5009.44—2016第三法，乳蛋白深度水解配方樣品C、氨基酸配方樣品D的加標回收率均符合GB/T 27404—2008要求，但乳蛋白部分水解配方樣品E的加標回收率偏低，僅75.6%，不符合GB/T 27404—2008要求。

表6 特殊醫(yī)學用途嬰兒配方乳粉中氯含量測定結(jié)果（GB 5009.44 —2016第三法和第一法）Table 6 Results of silver nitrate titration and potentiometric titration for chlorine contents in real samples of infant formula for special medical purposes

3 結(jié) 論

采用GB 5009.44—2016第三法銀量法（摩爾法或直接滴定法）檢測特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品中乳蛋白部分水解配方、乳蛋白深度水解配方、氨基酸配方樣品中氯含量，得到的樣品加標回收率分別為95%～108%、98%～125%、100%～106%，相對標準偏差為12.7%～32.9%。采用GB 5009.44—2016第一法電位滴定法得到的檢測結(jié)果低于第三法檢測結(jié)果，電位滴定法檢測乳蛋白部分水解配方樣品的回收率較低，后期需進一步對該方法進行驗證。