3種交叉配血方法在輸血檢驗中的應(yīng)用評價

吳文雁

（福建省人民醫(yī)院，福建 福州 350004）

輸血是現(xiàn)代醫(yī)療的一種重要方法，它能夠輔助治療疾病，并且在關(guān)鍵的時候能夠拯救患者生命。同時輸血又是一把雙刃劍，它在帶來諸多益處的同時也可能帶來風(fēng)險，如它有可能傳播病毒，引起傳染病以及免疫性疾病。在血液輸入患者體內(nèi)之前，必須經(jīng)過嚴(yán)格的交叉配血試驗，確保受血者與供血者之間血液相合，最大程度地保障用血安全，否則在輸血的過程中極有可能出現(xiàn)不良反應(yīng)，加重患者的負(fù)擔(dān)，嚴(yán)重時可能對患者的生命安全造成威脅。輸血前必須經(jīng)過嚴(yán)格的交叉配血檢測，否則在輸血的過程中極有可能出現(xiàn)不良反應(yīng)，加重患者的負(fù)擔(dān)。交叉配血的方法有多種，包括凝聚胺法、微柱凝膠法、鹽水法、木瓜酶法及抗人球蛋白法等。鹽水法是傳統(tǒng)的交叉配血方法，它能夠準(zhǔn)確檢測出IgM類不規(guī)則抗體，卻難以檢測出IgG類不規(guī)則抗體，安全性較低[1]。隨著臨床輸血技術(shù)的進(jìn)步，更多方法被用于臨床，凝聚胺法和微柱凝膠法都受到了青睞。本文將對凝聚胺法、微柱凝膠法和鹽水法交叉配血的靈敏度、準(zhǔn)確度和穩(wěn)定性進(jìn)行分析，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年11月至2020年7月在我院輸血的165例患者作為主要研究對象，男79例，女86例；年齡16～93歲，平均年齡為（55.35±10.55）歲；包括40例血液病科患者、32例肛腸科患者、25例婦產(chǎn)科患者、21例骨科患者、18例普外科患者、13例脾胃病科患者、10例腎病科患者以及6例心血管科患者。

1.2 儀器與試劑 珠海貝索生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的凝聚胺介質(zhì)試劑及BASO2005-1型號的血型離心機(jī)；伯樂生命醫(yī)學(xué)產(chǎn)品（上海）有限公司生產(chǎn)的低離子抗人球蛋白卡、ID-Centrifuge型號的卡片離心機(jī)及ID-Incubator 37 S I型號的保溫箱；金壇醫(yī)療生產(chǎn)XK-10型號的數(shù)顯三用恒溫水箱。

1.3 方法

1.3.1 凝聚胺法 抽取患者靜脈血3 mL于EDTA-K2管中，以3 000 r/min的速度離心3 min。取試管二支，標(biāo)明主次側(cè)，主側(cè)管加患者血漿100 μL及供血者3%～5%紅細(xì)胞懸液50 μL。次側(cè)管加獻(xiàn)血者血漿100 μL及患者3%～5%紅細(xì)胞懸液50 μL。主次側(cè)管各加低離子溶液0.65 mL，混合均勻后，再各加凝聚胺溶液2滴，混合均勻。用離心機(jī)3 400 r/min離心10 s，棄去上清液，管底留約0.1 mL液體。輕輕搖動試管，觀察紅細(xì)胞有無凝集，如無凝集，則必須重做。最后加入懸浮液2滴，輕搖試管并觀察結(jié)果。如60 s內(nèi)凝集散開，代表是由凝聚胺引起的特異性聚集，配血結(jié)果相合；如凝集不散開，則為紅細(xì)胞抗原抗體結(jié)合的特異性反應(yīng)，配血結(jié)果不相合。為避免漏檢微小凝集，所有結(jié)果均倒在玻片上用顯微鏡觀察。

1.3.2 微柱凝膠法 抽取患者靜脈血3 mL于EDTA-K2管中，以3 000 r/min的速度離心3 min?？ㄆ献⒚髦鞔蝹?cè)，主側(cè)加受血者血漿50 μL及獻(xiàn)血者1%的紅細(xì)胞懸液50 μL，次側(cè)加獻(xiàn)血者血漿50 μL及受血者1%紅細(xì)胞懸液50 μL。37 ℃孵育15 min，隨后在專用離心機(jī)上離心10 min后觀察結(jié)果。若微柱中的紅細(xì)胞與血漿發(fā)生了特異性抗原抗體反應(yīng)，則紅細(xì)胞產(chǎn)生凝集，離心后凝集的紅細(xì)胞將不能夠通過凝膠下沉到底部，表明配血結(jié)果不相合；反之，若離心后微柱中的紅細(xì)胞下沉到了凝膠底部，則說明未發(fā)生抗原抗體反應(yīng)，交叉配血結(jié)果相合。

1.3.3 鹽水法 抽取患者靜脈血3 mL于EDTA-K2管中，以3 000 r/min的速度離心3 min，取兩根試管標(biāo)明主次側(cè)，主側(cè)加患者血漿100 μL及供血者3%～5%紅細(xì)胞懸液50 μL。次側(cè)加獻(xiàn)血者血漿100 μL及患者3%～5%紅細(xì)胞懸液50 μL。以1 000 r/min的速度離心1 min，離心后觀察試管中的上清液體，看是否存在溶血的情況，隨后傾斜試管輕彈試管底部，確認(rèn)管底反應(yīng)物是否存在凝集的狀況。未出現(xiàn)溶血或凝集的狀況，表明配血結(jié)果相合。若出現(xiàn)溶血或凝集的狀況，則表明配血結(jié)果不相合。

1.4 觀察指標(biāo) 分別對3種檢測方法的靈敏度、準(zhǔn)確度和穩(wěn)定性進(jìn)行比較。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計學(xué)軟件對此次研究數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，使用χ2檢驗計數(shù)資料（%），若檢驗結(jié)果為P＜0.05，則差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

低離子凝聚胺法及微柱凝膠法的靈敏度、準(zhǔn)確度和穩(wěn)定性均高于鹽水法，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 3種交叉配血試驗的靈敏度、準(zhǔn)確度、穩(wěn)定性結(jié)果比較[n（%）]

3 討論

合理用血能夠幫助各種疾病導(dǎo)致重度貧血的患者改善自身病情，提高生存質(zhì)量。但輸血也有風(fēng)險，機(jī)體的免疫系統(tǒng)可能對抗原細(xì)胞造成一定的損傷，造成溶血等輸血不良反應(yīng)，嚴(yán)重者可危及生命[2]。醫(yī)院輸血科作為把控臨床用血質(zhì)量的重要部門，必須十分嚴(yán)格地執(zhí)行輸血前相容性檢測，交叉配血作為關(guān)鍵步驟有著十分重要的作用。交叉配血的方法多樣，了解常用方法的特點(diǎn)，根據(jù)臨床需要選擇合適的配血方法十分重要。鹽水法操作簡單，對設(shè)備的要求低，成本低廉，但該方法對IgG抗體的檢測能力不佳，靈敏度欠佳，容易導(dǎo)致患者出現(xiàn)輸血不良反應(yīng)，威脅患者健康[3]。隨著輸血技術(shù)的發(fā)展以及臨床對輸血安全意識的提高，凝聚胺法與微柱凝膠法應(yīng)用越來越廣泛，相比于鹽水法，它們更能夠保障輸血檢驗的可靠性[4]。凝聚胺法的原理為：凝聚胺是一種高價離子季胺鹽多聚物，經(jīng)溶解后可出現(xiàn)大量的正電荷，能夠有效中和紅細(xì)胞表面的唾液酸所帶有的負(fù)電荷，形成非特異性凝集，在低離子的作用下，紅細(xì)胞Zeta電位降低，有利于增加抗原抗體間的引力，促進(jìn)特異性凝集。凝聚胺法能夠提高IgG抗體的檢出率，其檢測準(zhǔn)確性較高，且該方法還能在檢測后快速得出結(jié)果，非常適合運(yùn)用在急診搶救用血中[5-6]。但凝聚胺法由手工操作，需要嚴(yán)格按比例加樣，其結(jié)果容易受到人為操作因素的影響，還容易受到溫度、藥物、抗凝劑等影響，漏檢一些抗體效價低的不完全抗體。而鹽水法雖然漏檢率高，但在檢測ABO弱抗原抗體反應(yīng)能力方面靈敏度相對高，同時它還能夠發(fā)現(xiàn)凝聚胺法的假陰性[7]，所以鹽水法在某些情況下有其應(yīng)用價值，在適當(dāng)情況下，聯(lián)合運(yùn)用鹽水法進(jìn)行交配配血，能夠提升用血安全性。微柱凝膠法在檢測過程中不易受到人為因素的干擾，其結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)化要求更符合。微柱凝膠在微柱中進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)，每個微柱內(nèi)都有預(yù)先裝入的抗人球蛋白和凝膠，凝膠的實(shí)質(zhì)是無數(shù)個微玻璃珠，玻璃珠的間隙被設(shè)定為只允許單個紅細(xì)胞通過，若微柱內(nèi)發(fā)生抗原抗體反應(yīng)導(dǎo)致紅細(xì)胞凝集，離心后凝集的紅細(xì)胞將不能通過凝膠沉到微柱底部。相比于凝聚胺法，用微柱凝膠法做交叉配血不僅有更高的靈敏度，而且輸血后發(fā)生溶血或者非溶血性的不良反應(yīng)較少[8]，在時間充裕的情況下，選用微柱凝膠法做交叉配血可以更大程度地保障用血安全。但微柱凝膠法也有缺點(diǎn)，血液中纖維蛋白的析出對它影響較大，紅細(xì)胞濃度過高、血液抗凝或離心不充分、細(xì)胞受到污染或凝塊等都容易造成假陽性[9]。同時，微柱凝膠法在檢測致敏紅細(xì)胞與Ig-抗-AB的過程中檢出能力不足[10-11]。

本文研究結(jié)果顯示，凝聚胺法與微柱凝膠法的靈敏度、準(zhǔn)確度和穩(wěn)定性均明顯高于鹽水法，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）?？傮w而言，3種交配配血方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，在選用其中一種方法進(jìn)行交叉配血時，要充分了解該方法的適宜性和不足之處，根據(jù)臨床實(shí)際情況靈活選用合適的方法，可以提高交叉配血效率并保證臨床用血安全。必要的時候，同時進(jìn)行鹽水法、凝聚胺法及微柱凝膠法可以最大程度地檢出抗原抗體反應(yīng)，保障臨床輸血的安全性。