湖北鄂州市春季養(yǎng)禽高致病禽流感免疫效果監(jiān)測(cè)

陸偉偉，呂新慧，熊勇兵，張盼望

(1.鄂州市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，湖北 鄂州 436000；2.鄂州市東溝畜牧獸醫(yī)站)

禽流感是禽流感病毒感染家禽后引起的各種綜合征，分為中、低致病性禽流感和高致病性禽流感。其中高致病性禽流感是由H5和H7亞型毒株所引起的疾病,其發(fā)病率和致死率都很高,對(duì)家禽危害非常嚴(yán)重，是OIE分類中的A類病，我國(guó)也列其為一類傳染病。

為保護(hù)家禽健康生長(zhǎng)，及時(shí)有效的預(yù)防和控制高致病性禽流感的發(fā)生，免疫接種刺激機(jī)體產(chǎn)生高滴度抗體至關(guān)重要。近年來我市一直重視對(duì)H5及H7亞型禽流感的免疫注射和免疫抗體監(jiān)測(cè)工作，為全面了解禽類免疫動(dòng)態(tài)，進(jìn)一步加強(qiáng)養(yǎng)禽業(yè)健康發(fā)展，市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心在2020年5月中旬集中對(duì)轄區(qū)內(nèi)華容區(qū)、梁子湖區(qū)、鄂城區(qū)的21個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)及養(yǎng)殖散戶進(jìn)行隨機(jī)抽樣，開展H5及H7亞型禽流感抗體監(jiān)測(cè)，掌握全市H5及H7亞型禽流感抗體水平，為鄂州市有效防控禽流感提供了科學(xué)依據(jù)。

1 試驗(yàn)材料

1.1 試驗(yàn)地點(diǎn)、方法

本試驗(yàn)于2020年5月25日至27日在鄂州市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，采取血凝抑制試驗(yàn)方法。

1.2 血清樣品

共采集經(jīng)免疫禽類血清729份，其中鄂城區(qū)232份、梁子湖區(qū)357份、華容區(qū) 140份。729份血清樣品中，其中來自規(guī)模場(chǎng)405份、散養(yǎng)戶324份。

1.3 檢測(cè)試劑

禽流感病毒H5亞型血凝抑制試驗(yàn)抗原，哈爾濱國(guó)生生物科技有限公司(生產(chǎn)批號(hào)：20200217)。

禽流感病毒H7亞型血凝抑制試驗(yàn)抗原，哈爾濱國(guó)生生物科技有限公司(生產(chǎn)批號(hào)：20200212)。

1.4 儀器設(shè)備

振蕩器、微量移液器、低溫高速離心機(jī)。

2 試驗(yàn)方法

H5與H7禽流感抗體試驗(yàn)方法相同。

2.1 血凝(HA)試驗(yàn)

①在V型微量反應(yīng)板中，每孔加入25 μLPBS，吸取25uL的抗原于第一孔中，混勻。然后從第一孔依次作倍比稀釋至11孔，棄去剩余25 μL；每孔再加入25 μLPBS，混勻；每孔加入25 μL1%(V/V)雞紅細(xì)胞懸液，震蕩混勻，室溫(20～25℃)靜置20～30 min，在對(duì)照孔的紅細(xì)胞顯著成紐扣狀時(shí)判定結(jié)果。

②結(jié)果判定 將反應(yīng)板傾斜60度，觀察紅細(xì)胞有無(wú)淚珠狀流淌，完全無(wú)無(wú)淚珠狀流淌(100%凝集)的最高稀釋倍數(shù)為血凝效價(jià)。

2.2 血凝抑制(HI)試驗(yàn)

①根據(jù)HA試驗(yàn)測(cè)定的效價(jià)，計(jì)算配置4個(gè)血凝單位(4HAU)抗原。在V型微量反應(yīng)板第1～11孔均加入25 μLPBS，第12孔加入50 μLPBS。吸取25 μL的血清于第一孔中，混勻。然后從第一孔依次作倍比稀釋至10孔，棄去剩余25 μL；第1～11孔均加入25 μL的4HAU抗原在室溫(20～25℃)靜置30 min；每孔加入25 μL1%(V/V)雞紅細(xì)胞懸液，震蕩混勻，室溫(20～25℃)靜置20～30 min，在對(duì)照孔的紅細(xì)胞顯著成紐扣狀時(shí)判定結(jié)果。

②結(jié)果判定 以完全抑制4HAU抗原的最高血清稀釋倍數(shù)判為該血清的HI效價(jià)。HI效價(jià)≥4log2判為陽(yáng)性，HI效價(jià)<4log2判為陰性。

3 結(jié)果

3.1 血凝試驗(yàn)結(jié)果

H7和H9的血凝效價(jià)分別是9和10。

3.2 抗體檢測(cè)結(jié)果

血清檢測(cè)729份，H5、H7亞型禽流感抗體免疫合格率分別達(dá)到96.84%、98.21%。檢測(cè)結(jié)果具體見表1、表2。

表1 鄂州市轄區(qū)H5、H7亞型禽流感抗體免疫檢測(cè)情況

表2 鄂州市養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)H5、H7亞型禽流感抗體免疫檢測(cè)情況

4 討論

4.1 試驗(yàn)結(jié)果

從監(jiān)測(cè)結(jié)果看出，鄂州市2020年春季家禽H5、H7亞型禽流感免疫效果良好。按區(qū)域，從表1可以看出鄂城區(qū)、華容區(qū)、梁子湖區(qū)H5亞型禽流感免疫合格率分別達(dá)到95.36%、96.43%、98.04%，H7亞型禽流感免疫合格率分別達(dá)到97.41% 、96.43% 、99.44%；按養(yǎng)殖類型，從表2可以看出規(guī)模場(chǎng)、養(yǎng)殖場(chǎng)H5亞型禽流感免疫合格率分別達(dá)到95.06%、99.07%，H7亞型禽流感免疫合格率分別達(dá)到97.04%、99.38%。鄂州市H5、H7亞型高致病性禽流感總體的免疫抗體水平合格率分別達(dá)到96.84%、98.21%，均達(dá)到了農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的免疫要求。

4.2 結(jié)果分析

分析我市能夠取得較好免疫效果的幾點(diǎn)原因。一是高致病禽流感被納入重大動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫的病種之一，當(dāng)?shù)卣托竽林鞴懿块T的高度重視。湖北省農(nóng)業(yè)事業(yè)發(fā)展中心基于相關(guān)政策要求和新冠肺炎疫情實(shí)際，明確湖北省今年的動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫疫苗采取規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)“自行采購(gòu)、先打后補(bǔ)”和散養(yǎng)戶“省級(jí)集中采購(gòu)、調(diào)撥分發(fā)”相結(jié)合的方式保障，為養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)提供了堅(jiān)實(shí)的物資及資金保障；二是合理的免疫程序、疫苗合理保存及正確的使用，確保了免疫的成功率；三是重視對(duì)防疫員的培訓(xùn)，提高了動(dòng)物防疫人員的理論水平、操作技能和服務(wù)水平；四是我市持續(xù)加強(qiáng)免疫監(jiān)督力度。在春季家禽集中免疫期間，我市組織監(jiān)督組不定期開展檢查指導(dǎo)，做到“五不漏”，特別是對(duì)規(guī)模場(chǎng)免疫強(qiáng)調(diào)主體責(zé)任、對(duì)散養(yǎng)戶免疫工作不放松，促進(jìn)免疫效率，確保免疫防控取得良好的效果。

4.3 綜合防控

疫苗接種是預(yù)防H5、H7亞型禽流感的主要手段，但疫苗免疫有時(shí)不能使家禽達(dá)到100%保護(hù)。因此除了定期免疫和監(jiān)測(cè)外，還應(yīng)結(jié)合加強(qiáng)飼養(yǎng)管理、加強(qiáng)禽舍消毒等生物安全措施進(jìn)行綜合防控。