水產(chǎn)品中六溴聯(lián)苯測(cè)定方法的建立及應(yīng)用分析

張龍飛，于慧娟，田良良，方長玲，黃冬梅，喬藝飄，史永富,

（1.上海海洋大學(xué)食品學(xué)院，上海 201306；2.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部水產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心（上海），上海 200090）

六溴聯(lián)苯（hexabromobiphenyls，HexaBBs）具有良好的阻燃性質(zhì)，被廣泛用于電子電器、印刷、建筑等領(lǐng)域[1-2]。環(huán)境中的HexaBBs具有親脂性、持久殘留性以及遠(yuǎn)距離傳遞等性質(zhì)[3-8]，被國際癌癥組織機(jī)構(gòu)列為可能會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生致癌、致畸、致突變毒性的2A類有害物質(zhì)[9]；我國于2014年，在《關(guān)于持久性有機(jī)污染物的斯德哥爾摩公約修正案》中增加HexaBBs等9 種受控的持久性有機(jī)污染物[10]。毒理學(xué)研究表明，HexaBBs的半數(shù)致死量為5.00 g/kg，可能在多溴聯(lián)苯中占有主導(dǎo)地位[11]，長期暴露于HexaBBs環(huán)境中，能引起生物體器官（如肝、腎、甲狀腺）功能異常[12-13]。

目前國內(nèi)對(duì)HexaBBs的研究主要集中在浙江、長江三角洲等地的區(qū)域性研究上，主要包括電子垃圾、土壤、水鳥等環(huán)境和生物樣品[3,14]，多表現(xiàn)為以多溴聯(lián)苯醚為主要研究對(duì)象，且僅涉及個(gè)別HexaBBs單體[2,15-16]，鮮有對(duì)HexaBBs在水產(chǎn)品領(lǐng)域中的研究報(bào)道[17-18]；而國外的淡水魚[19-21]、海洋生物[1]、甚至在海洋環(huán)境介質(zhì)中均有檢出HexaBBs[22]。國內(nèi)關(guān)于HexaBBs在水生環(huán)境中蓄積特征的研究相對(duì)缺乏，且HexaBBs在水產(chǎn)品中的蓄積分布特征以及代謝轉(zhuǎn)化規(guī)律等方面的研究處于空白階段；目前國內(nèi)尚未頒布關(guān)于測(cè)定環(huán)境和生物基質(zhì)中HexaBBs的標(biāo)準(zhǔn)方法。因此，開發(fā)水產(chǎn)品中HexaBBs的分析方法，監(jiān)測(cè)水產(chǎn)品中HexaBBs的殘留水平，對(duì)水產(chǎn)品質(zhì)量安全以及通過飲食攝入HexaBBs所造成的風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行評(píng)估并最終保護(hù)公眾健康至關(guān)重要。

HexaBBs和多溴聯(lián)苯的測(cè)定分析，常采用氣相色譜和氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[1,23-24]，而環(huán)境和生物基質(zhì)的復(fù)雜性是影響準(zhǔn)確定量痕量多溴聯(lián)苯的主要因素[25]；且對(duì)于大多生物樣品常采用索氏提取[26]、微波輔助萃取[25]、加速溶劑萃取并結(jié)合凝膠滲透色譜技術(shù)進(jìn)行提取和凈化[27-28]，無法同時(shí)實(shí)現(xiàn)高選擇性、高回收率、快速簡單的目的[29]。本實(shí)驗(yàn)對(duì)水產(chǎn)品中HexaBBs提取、凈化等樣品前處理?xiàng)l件以及HexaBBs氣相色譜行為進(jìn)行研究，擬建立水產(chǎn)品中HexaBBs的定性定量方法，并對(duì)不同營養(yǎng)級(jí)水產(chǎn)品中HexaBBs的殘留水平和蓄積特征進(jìn)行分析，以期為水產(chǎn)品樣品中HexaBBs的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)制定、監(jiān)測(cè)其在水產(chǎn)品中的殘留水平以及評(píng)估HexaBBs在水產(chǎn)品質(zhì)量安全領(lǐng)域中所造成的風(fēng)險(xiǎn)提供技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

PBB153（2,2’,4,4’,5,5’-六溴聯(lián)苯）、PBB155（2,2’,4,4’,6,6’-六溴聯(lián)苯）、PBB156（2,3,3’,4,4’,5-六溴聯(lián)苯）、PBB159（2,3,3’,4,5,5’-六溴聯(lián)苯）（以上標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量濃度均為35 μg/mL，體積均為1 mL）美國Accustandard公司；PBB154（2,2’,4,4’,5,6’-六溴聯(lián)苯）（質(zhì)量濃度為50 μg/mL，體積為1.2 mL） 美國Wellington公司；正己烷（色譜純） 美國Supelco公司；乙酸乙酯（色譜純） 美國Tedia公司；硅膠柱（500 mg/6 mL） 美國Agela Technologies公司。其他試劑為國產(chǎn)分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

6890氣相色譜儀（配Ni 63電子捕獲檢測(cè)器） 美國Agilent公司；XYC-BDM-24全自動(dòng)氮空吹掃濃縮儀上海析友儀器有限公司；DOP-B高通量組織研磨儀 上海萬柏生物科技公司；高速冷凍離心機(jī) 日本Hitach公司；B5510E-MT超聲波清洗機(jī) 美國必能信公司；JA12002天平 上海精天電子儀器有限公司；數(shù)顯型旋渦混合器 美國Tallboys公司；Milli-Q超純水系統(tǒng)（Q-Gard1預(yù)純化柱） 美國Millipore公司；LG100B理化干燥箱 上海實(shí)驗(yàn)儀器總廠。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：將35 μg/mL的PBB153、PBB155、PBB156、PBB159標(biāo)準(zhǔn)品和50 μg/mL的PBB154標(biāo)準(zhǔn)品用正己烷分別配制成3.50 μg/mL和6.00 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)中間液，密封，4 ℃保存。

混合標(biāo)準(zhǔn)工作液的配制：將5 種HexaBBs的標(biāo)準(zhǔn)中間液用正己烷分別配制成0.20、0.50、1.00、2.00、5.00、10.00 ng/mL的6 種HexaBBs的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液，密封，4 ℃保存。

1.3.2 樣品的制備

水產(chǎn)品樣品的預(yù)處理參考GB/T 30891—2014《水產(chǎn)品抽樣規(guī)范》附錄B：養(yǎng)殖及捕撈水產(chǎn)品的試樣制備[30]。

鯽魚、大黃魚清洗后去頭、骨、內(nèi)臟，取肌肉、皮等可食部分絞碎混合均勻后備用；小龍蝦清洗后去蝦頭、蝦皮、腸腺，得到整條蝦肉絞碎混合均勻后備用；中華絨螯蟹清洗后取可食部分，絞碎混合均勻后備用；貝類清洗后開殼剝離，收集全部的軟組織和體液勻漿備用。

1.3.3 樣品前處理

稱?。?.00±0.05）g樣品于50 mL圓底塑料離心管中，加入10.0 mL乙酸乙酯，擰緊離心管蓋后于高通組織研磨儀中研磨（60 Hz、30 s），使樣品分散均勻后，超聲提取10 min；于4 ℃、10 000 r/min離心10 min，將有機(jī)相轉(zhuǎn)移至雞心瓶中，離心管的殘?jiān)貜?fù)提取1 次，合并有機(jī)相；將提取液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，用6.0 mL正己烷分3 次洗滌雞心瓶，洗滌液轉(zhuǎn)入50 mL圓底塑料離心管中。向離心管中加入3.0 mL濃硫酸，1 500 r/min旋渦混勻8 min；于4 ℃、10 000 r/min離心10 min；移取正己烷層至10.0 mL具塞玻璃離心管；硅膠柱（500 mg/6 mL）用10.0 mL正己烷活化平衡，將正己烷層轉(zhuǎn)移至活化硅膠柱上，并同時(shí)接收流出液，另取2.0 mL正己烷洗滌具塞玻璃離心管，一并上柱，最后進(jìn)行氮吹至干，用1.0 mL正己烷復(fù)溶，待上機(jī)分析。

1.3.4 氣相色譜條件

6890氣相色譜儀配Ni 63電子捕獲檢測(cè)器，色譜柱為DB-17MS毛細(xì)管柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；進(jìn)樣口溫度：280 ℃；進(jìn)樣體積：1 μL；進(jìn)樣方式：不分流；載氣流速：1.2 mL/min；檢測(cè)器溫度：300 ℃；升溫程序：150 ℃保持1 min，以10 ℃/min升至310 ℃，保持8 min，共運(yùn)行25 min。

1.4 數(shù)據(jù)處理

在配置有7683自動(dòng)進(jìn)樣器的6890氣相色譜儀進(jìn)行HexaBBs的分析；并使用Agilent ChemStation B.04.02.[96]軟件程序通過外標(biāo)法對(duì)水產(chǎn)品中HexaBBs進(jìn)行定量，采用Microsoft Excel?軟件進(jìn)行圖譜和表格的繪制。

2 結(jié)果與分析

2.1 色譜柱的優(yōu)化

PBBs和多溴聯(lián)苯醚極性較弱，常采用HP和DB系列的毛細(xì)管柱進(jìn)行色譜分離[15,23,31]。本研究對(duì)比HP-5MS（30 m×0.25 mm，0.25 μm）和DB-17MS（30 m×0.25 mm，0.25 μm）色譜柱的分離效果。使用HP-5MS色譜柱進(jìn)行分離時(shí)，PBB155、PBB154、PBB153、PBB156、PBB159五種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)均出現(xiàn)不同程度的拖尾現(xiàn)象，對(duì)稱性較差，且PBB156和PBB159的響應(yīng)值較低（圖1A），影響后期樣品痕量分析的精確度。而采用DB-17MS的色譜柱，5 種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)都能夠達(dá)到良好的基線分離，且峰形尖銳對(duì)稱（圖1B）；因此，選用DB-17MS（30 m×0.25 mm，0.25 μm）色譜柱能滿足5 種HexaBBs的分析要求。

圖1 10 ng/mL水平下5 種HexaBBs混合標(biāo)準(zhǔn)工作液在2 種色譜柱上的色譜圖Fig.1 Chromatograms of mixed solution of five HexaBB standards at 10 ng/mL on two different columns

2.2 提取試劑的選擇

HexaBBs是結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、極性較弱、脂溶性較強(qiáng)的化合物，可采用多種有機(jī)溶劑對(duì)其進(jìn)行提取。魚類中脂肪含量較高[32]，本研究以鯽魚作為代表性樣品，對(duì)比正己烷、乙酸乙酯、正己烷-乙酸乙酯（1∶1，V/V）、丙酮試劑在鯽魚樣品中加標(biāo)量5.0 μg/kg的提取效果，結(jié)果見圖2。正己烷與丙酮的提取效果較低；且丙酮因其極性相對(duì)較大，能將水產(chǎn)品樣品中的水等強(qiáng)極性雜質(zhì)提取出來，引入雜質(zhì)較多，會(huì)影響后期固相萃取小柱的凈化效果和定量的準(zhǔn)確性。乙酸乙酯和正己烷-乙酸乙酯（1∶1，V/V）對(duì)5 種HexaBBs的提取效果較好，且乙酸乙酯作為提取試劑，5 種HexaBBs回收率均在83.90%～100.78%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（relative standard deviation，RSD）為1.43%～3.43%，因此從整體和提取試劑的復(fù)雜性上分析，本研究采用乙酸乙酯作為HexaBBs的提取試劑。

圖2 4 種提取試劑對(duì)5 種HexaBBs的提取效果比較Fig.2 Comparison of extraction efficiencies of four solvents for extraction of five HexaBBs

2.3 乙酸乙酯體積的確定

為研究不同體積乙酸乙酯的提取效果，對(duì)水產(chǎn)品鯽魚進(jìn)行加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)，加標(biāo)量為5.0 μg/kg，在單次提取液乙酸乙酯體積為2.0、3.5、5.0、10.0、15.0、20.0 mL的梯度水平下，對(duì)目標(biāo)物回收率進(jìn)行研究，結(jié)果見圖3。乙酸乙酯體積在2.0～10.0 mL之間，5 種HexaBBs的回收率與其呈正相關(guān)；體積為10.0、15.0、20.0 mL時(shí)并沒有明顯變化，且在20.0 mL時(shí)，各物質(zhì)的回收率略有下降，可能是因?yàn)橐宜嵋阴ンw積增大，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮時(shí)間延長，使得目標(biāo)化合物在旋蒸過程中的損耗增加，造成目標(biāo)物的定量結(jié)果降低。因此，從有機(jī)溶劑的消耗及回收率上分析，在乙酸乙酯體積為10.0 mL時(shí)，各目標(biāo)物的回收率均在87.36%～106.89%之間，RSD為4.88%～6.74%，因此，將HexaBBs的最佳提取體積選定為10.0 mL。

圖3 乙酸乙酯體積對(duì)5 種HexaBBs的提取效果比較Fig.3 Comparison of extraction efficiencies of different volumes of ethyl acetate for extraction of five HexaBBs

2.4 凈化優(yōu)化

2.4.1 濃硫酸凈化

環(huán)境和生物基質(zhì)較為復(fù)雜，雜質(zhì)較多，有效地去除雜質(zhì)是準(zhǔn)確定量痕量多溴聯(lián)苯的關(guān)鍵[25]，水產(chǎn)品中含有較多的脂肪等雜質(zhì)，油脂會(huì)影響色譜柱固定相的表面活性，降低色譜柱的柱效率，影響峰形及定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。HexaBBs穩(wěn)定性好，難以通過自然條件下的物理、化學(xué)或生物方法快速有效降解，濃硫酸并不能將其破壞[1,33]。因此本實(shí)驗(yàn)采用濃硫酸進(jìn)行去脂，在去脂的過程中，振搖要輕緩，以免樣品出現(xiàn)乳化現(xiàn)象，造成后期定量結(jié)果偏低，且濃硫酸應(yīng)少量多次加入，直至上清液澄清。

2.4.2 SPE凈化

參考多溴聯(lián)苯醚在水產(chǎn)品中的凈化方式[34-35]，對(duì)硅膠柱、中性氧化鋁柱、堿性氧化鋁柱、酸性氧化鋁柱、弗羅里硅土柱5 種SPE小柱進(jìn)行篩選，首先采用SPE小柱富集模式，將混合標(biāo)準(zhǔn)溶液上柱后的流出液、洗滌液以及洗脫液分別進(jìn)行上機(jī)檢測(cè)，結(jié)果顯示：在洗滌液和洗脫液中并沒有檢測(cè)到目標(biāo)物；這表明，5 種SPE小柱對(duì)5 種HexaBBs并沒有明顯的吸附作用，而多溴聯(lián)苯醚因含有O元素具有特殊性，比如在采用堿性氧化鋁SPE柱對(duì)含有多溴聯(lián)苯醚的樣品進(jìn)行凈化時(shí)，其主要原因是O元素可以和柱中的填料形成較強(qiáng)的氫鍵作用而被吸附在柱子中[35]。因此本研究以鯽魚為例，加標(biāo)量為5.0 μg/kg，采用SPE小柱的除雜模式，對(duì)比5 種SPE小柱的凈化效果，操作為：樣品液上柱后，并同時(shí)接收流出液，最后采用2.0 mL正己烷洗滌樣品瓶，洗滌液一并上柱，以確保各目標(biāo)物的回收率。

氧化鋁對(duì)目標(biāo)物保留的主要機(jī)制是偶極-偶極作用，可用于去除水產(chǎn)品提取液中極性較強(qiáng)的有機(jī)酸類等極性雜質(zhì)。研究表明（圖4），酸性氧化鋁SPE柱比中性和堿性氧化鋁SPE柱的凈化效果要好，而中性和堿性氧化鋁SPE柱雜質(zhì)較多，背景值較高；這可能是因?yàn)樗嵝匝趸X可以進(jìn)一步去除脂肪等雜質(zhì)，從而達(dá)到更好的凈化效果；但是從圖4可以看出，當(dāng)酸性氧化鋁SPE柱作為凈化柱時(shí)，PBB156的響應(yīng)值較低，且回收率僅有65.82%，并不適合作為5 種HexaBBs的凈化柱。

圖4 鯽魚樣品固相萃取條件優(yōu)化（氧化鋁SPE柱）Fig.4 Optimization of SPE conditions for C.auratus samples(using Alumina SPE cartridge)

弗羅里硅土SPE柱是硅膠鍵合氧化鎂的吸附劑，適合從非極性基質(zhì)中吸附多環(huán)芳烴、多氯聯(lián)苯、脂肪等極性化合物。從圖5可以看出，采用弗羅里硅土SPE柱所產(chǎn)生的基質(zhì)效應(yīng)較大，其中PBB156的回收率為127.88%；凈化效果差，不僅會(huì)影響色譜柱和儀器的壽命，還會(huì)對(duì)后期定量的準(zhǔn)確性產(chǎn)生影響。

圖5 鯽魚樣品固相萃取條件優(yōu)化（弗羅里硅土SPE柱）Fig.5 Optimization of SPE conditions for C.auratus samples(using Florisil SPE cartridge)

硅膠表面具有一定數(shù)量的孤立硅羥基，孤立硅羥基能增加硅膠與極性物質(zhì)之間的氫鍵作用、離子相互作用和偶極-偶極等相互作用，其數(shù)量能夠決定硅膠固相萃取SPE柱的吸附性能[36]。圖6表示采用硅膠SPE柱對(duì)5 種HexaBBs的回收率均在70%～110%之間，RSD為7.35%～9.17%，重復(fù)性好、背景值低、凈化效果最好，因此選用硅膠SPE柱對(duì)其進(jìn)行凈化。

圖6 鯽魚樣品固相萃取條件優(yōu)化（硅膠SPE柱）Fig.6 Optimization of SPE conditions for C.auratus samples(using silica SPE cartridge)

2.5 超聲條件的優(yōu)化

為探究不同超聲時(shí)間的提取效果，對(duì)鯽魚、大黃魚、小龍蝦、中華絨螯蟹、貽貝5 種水產(chǎn)品樣品在加標(biāo)量5.0 μg/kg、單次超聲時(shí)間為5、10、15、20 min的條件下，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在4 個(gè)超聲時(shí)間水平下，其回收率并沒有明顯區(qū)別，考慮到不同水產(chǎn)品基質(zhì)復(fù)雜的原因，選取超聲時(shí)間為10 min。

為探究有無超聲條件對(duì)不同水產(chǎn)品基質(zhì)中HexaBBs的提取效果，對(duì)鯽魚、大黃魚、中華絨螯蟹3 種代表性水產(chǎn)品樣品分別加標(biāo)5.0 μg/kg水平下進(jìn)行有無超聲的對(duì)比實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見圖7。可以看出3 種水產(chǎn)品樣品在超聲條件下的提取效率都高于無超聲條件下的提取效率，但超聲條件對(duì)魚類（鯽魚和大黃魚）HexaBBs提取的影響較為明顯，對(duì)中華絨螯蟹的影響較弱，超聲條件下鯽魚、大黃魚以及中華絨螯蟹的加標(biāo)回收率分別為91.45%～101.20%、92.17%～106.76%以及89.96%～108.92%，RSD分別為0.56%～3.42%、9.55%～13.32%以及5.58%～6.89%。因此，為擴(kuò)大本方法的適用性，確定采用超聲條件提取水產(chǎn)品樣品中的HexaBBs。

圖7 HexaBBs在3 種水產(chǎn)品中有無超聲條件下的回收率Fig.7 Recoveries of HexaBBs in three aquatic products with or without ultrasonic treatment

2.6 線性范圍與檢出限

按照1.3.4節(jié)條件對(duì)5 種HexaBBs的6 個(gè)質(zhì)量濃度混合工作溶液進(jìn)行上機(jī)測(cè)定，以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，在0.20～10.00 ng/mL范圍內(nèi)，5 種HexaBBs的線性良好，線性相關(guān)系數(shù)均大于0.998。以信噪比RSN≥3和回收率在80%～120%范圍內(nèi)確定檢出限為0.50 μg/kg，以信噪比RSN≥10和回收率在80%～120%范圍內(nèi)確定定量限為1.00 μg/kg，各目標(biāo)物的線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限、定量限見表1。

表1 5 種HexaBBs的線性回歸方程、檢出限和定量限Table 1 Linear calibration equations, detection limits and quantitation limits for five HexaBBs

2.7 準(zhǔn)確度和精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

魚、蝦、蟹及貝類樣品的基體不同，在相同的前處理?xiàng)l件下，對(duì)鯽魚、大黃魚、小龍蝦、中華絨螯蟹、貽貝5 類水產(chǎn)品樣品分別添加相對(duì)于樣品中含1.00 μg/kg和5.00 μg/kg的5 種HexaBBs混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。然后按照1.3.3節(jié)后續(xù)步驟平行測(cè)定3 個(gè)樣品，平均加標(biāo)回收率及RSD見表2，鯽魚加標(biāo)1.00 μg/kg和鯽魚空白樣品的5 種HexaBBs色譜出峰結(jié)果見圖8。在1.00、5.00 μg/kg水平下加標(biāo)回收率在77.15%～118.14%之間，RSD在0.56%～13.32%之間。

表2 5 種HexaBBs的平均加標(biāo)回收率和RSD（n =3）Table 2 Average spiked recoveries and RSD for five HexaBBs (n= 3)

圖8 鯽魚樣品中添加1.00 μg/kg（A）和空白樣品（B）的5 種HexaBBs色譜圖Fig.8 Chromatograms of five HexaBBs at spiked level of 1.00 μg/kg in C.auratus (A) and blank sample (B)

2.8 水產(chǎn)品中HexaBBs定量分析

采用本方法對(duì)淡水魚（鯽魚）、海水魚（大黃魚）、蝦（小龍蝦）、蟹（中華絨螯蟹）、貝（貽貝）5 種代表性水產(chǎn)品進(jìn)行測(cè)定。如表3所示，其中鯽魚和中華絨螯蟹水產(chǎn)品中均檢測(cè)到PBB153和PBB155，這可能是因?yàn)轹a魚和中華絨螯蟹都屬于底層水域的雜食性水生生物，有研究表明，底泥的結(jié)構(gòu)和表面特征被視為天然的吸附劑，持久性有機(jī)污染物具有親脂疏水性，底泥是其在水體環(huán)境的首要儲(chǔ)集之地[37-38]，鯽魚和中華絨螯蟹可能會(huì)通過攝食底層生物、碎屑以及直接接觸底泥環(huán)境而增大暴露于HexaBBs的概率。目前大黃魚多以養(yǎng)殖模式進(jìn)行飼養(yǎng)，且在飼養(yǎng)過程中主要攝食加工的冰鮮魚和野生的蝦等甲殼類水生生物[39]，大黃魚可能會(huì)通過攝入被HexaBBs暴露的魚飼料或者通過食物鏈間的傳遞對(duì)HexaBBs產(chǎn)生蓄積效應(yīng)。在小龍蝦和貽貝樣品中并沒有檢出HexaBBs，而中華絨螯蟹中HexaBBs的含量高于魚類（鯽魚和大黃魚），本實(shí)驗(yàn)分析的中華絨螯蟹為性腺發(fā)育成熟的成年蟹，性腺中所含的脂肪含量較高，可能會(huì)蓄積更多的HexaBBs，這也表明在不同營養(yǎng)級(jí)的水產(chǎn)品中可能存在著HexaBBs蓄積差異。在所檢出的中華絨螯蟹、鯽魚和大黃魚水產(chǎn)品中，HexaBBs含量在0.220～0.430 μg/kg范圍內(nèi)，均小于檢出限；雖然多溴聯(lián)苯在全球被較早限用，在魚類、蟹類等水產(chǎn)品中的含量較低，但在相對(duì)高等的水生生物中卻有所不同，De Boer等[22]對(duì)取自荷蘭北部瓦登海的海豹脂肪中測(cè)定出13～61 μg/kg的PBB153，約占總HexaBBs的1/3；Von Der Recke等[1]的研究也表明PBB153在海豚、海豹等生物中的蓄積水平較高，HexaBBs在環(huán)境中具有持久殘留性、親脂性等性質(zhì)，這可能表明HexaBBs能經(jīng)食物鏈的傳遞產(chǎn)生生物放大效應(yīng)，特別是脂肪含量較高的水生生物，仍然存在著蓄積隱患，可能會(huì)降低水產(chǎn)品的食用安全系數(shù)，并增加食物鏈終端人類的暴露風(fēng)險(xiǎn)；馬玉等[17]所報(bào)道的加拿大淡水魚中多溴聯(lián)苯總殘留量處于0.21～2.40 μg/kg水平。通過對(duì)實(shí)際水產(chǎn)品樣品的分析說明在水產(chǎn)品中HexaBBs的痕量殘留可能會(huì)與不同營養(yǎng)級(jí)的水生生物相關(guān)。

表3 水產(chǎn)品中5 種HexaBBs的分析結(jié)果Table 3 Results of analysis of five HexaBBs in aquatic products

本研究雖分析的樣品數(shù)量較少，但包含了魚、蝦、蟹、貝類中的代表性水產(chǎn)品樣品，且在中華絨螯蟹、鯽魚、大黃魚中均檢出HexaBBs，雖然國內(nèi)并沒有頒布關(guān)于水產(chǎn)品中HexaBBs限值相關(guān)的法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)，但近些年國內(nèi)外水產(chǎn)品中多次檢出HexaBBs，應(yīng)當(dāng)引起重視，并開展相關(guān)方面的研究。

3 結(jié) 論

本實(shí)驗(yàn)對(duì)水產(chǎn)品樣品中HexaBBs前處理和色譜行為等條件進(jìn)行研究，建立水產(chǎn)品中HexaBBs的定性定量分析方法，確定以乙酸乙酯為提取試劑、超聲10 min，經(jīng)濃硫酸去脂，硅膠SPE柱凈化；檢出限為0.50 μg/kg，定量限為1.00 μg/kg；并對(duì)淡、海水中5 種代表性水產(chǎn)品進(jìn)行了實(shí)際分析，發(fā)現(xiàn)不同營養(yǎng)級(jí)的水產(chǎn)品中可能存在不同的HexaBBs蓄積特征，對(duì)于脂肪含量高且處于底層水域的雜食性水產(chǎn)品可能會(huì)有HexaBBs易于富集的趨勢(shì)，表明HexaBBs在不同營養(yǎng)級(jí)的水產(chǎn)品中可能存在殘留隱患。HexaBBs在多溴聯(lián)苯中具有較高的毒理效應(yīng)，選取5 種代表性HexaBBs進(jìn)行不同營養(yǎng)級(jí)水產(chǎn)品樣品的研究分析，為多種多溴聯(lián)苯在大批量水生生物樣品的測(cè)定及多溴聯(lián)苯在不同水域、不同營養(yǎng)級(jí)水生生物中的蓄積分布特征研究提供了參考；本研究建立的方法可以為水產(chǎn)品中HexaBBs的殘留水平進(jìn)行測(cè)定、監(jiān)測(cè)以及評(píng)估HexaBBs在水產(chǎn)品質(zhì)量安全領(lǐng)域中所造成的風(fēng)險(xiǎn)提供技術(shù)支持。