鼻咽癌患者外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞與EBV-DNA水平的相關(guān)性研究

劉家豪，黃偉義，蔡永林，湯敏中，董良哲

（廣西壯族自治區(qū)梧州市紅十字會(huì)醫(yī)院，廣西 梧州 543002）

0 引言

鼻咽癌是臨床常見惡性腫瘤疾病，患者癥狀有鼻塞、涕中帶血、頭痛等[1]，腫瘤會(huì)對(duì)患者的視覺、聽覺神經(jīng)造成影響，并損害腦神經(jīng)的健康，還易發(fā)生轉(zhuǎn)移，導(dǎo)致患者死亡[2]。鼻咽癌患者治療期間，受到病痛、化療毒副反應(yīng)等的影響，非常容易出現(xiàn)焦慮抑郁的情況。加強(qiáng)鼻咽癌患者的病情診斷和癥狀分析非常重要，除了常規(guī)的影像學(xué)檢測方法，還可以通過血清檢測來對(duì)患者病情加以了解，研究發(fā)現(xiàn)，檢查患者的外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞、EBV-DNA水平等可以及時(shí)觀察到患者體內(nèi)有無腫瘤細(xì)胞和EB病毒，一般來說，EBV-DNA熒光定量檢測（EBV-DNA）檢驗(yàn)值＜400是正常的，如果高則說明病毒復(fù)制[3]。EBV-DNA高可能與鼻咽癌有關(guān)，對(duì)于鼻咽癌的判斷具有重要意義。本次研究中，抽取100例鼻咽癌患者作為觀察對(duì)象，檢測分析患者的外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞和EBV-DNA水平，探究鼻咽癌患者外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞與EBV-DNA水平的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料。本研究中，將廣西壯族自治區(qū)梧州市紅十字會(huì)醫(yī)院在2019年4月至2020年4月收治的100例鼻咽癌患者作為觀察對(duì)象。基礎(chǔ)資料：選取的患者中男52例，女48例，年齡41.50～68.50歲，平均（55.00±33.23）歲。本研究納入標(biāo)準(zhǔn)：①確診為鼻咽癌的患者；②患者神志清晰并且自主簽署知情同意書；③患者在實(shí)驗(yàn)期間配合相關(guān)數(shù)據(jù)調(diào)查統(tǒng)計(jì)；④患者無其他嚴(yán)重病癥或?qū)?shí)驗(yàn)指標(biāo)產(chǎn)生影響的疾病。排除以下患者：①有智力障礙、身體較差無法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察的患者；②未簽署知情同意書的患者；③中途停止接受觀察的患者。

1.2 方法。利用CTCBIOPSY?檢測系統(tǒng)，采用ISET技術(shù)過濾分離受檢者外周血，將分離后的濾膜采用瑞氏吉姆薩染色進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)學(xué)判定及采集圖像；再利用CD45免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)進(jìn)行排除法檢測，并進(jìn)一步通過原位雜交技術(shù)檢測EBERs進(jìn)行驗(yàn)證，確定受檢外周血中鼻咽癌CTCs及其數(shù)量，同時(shí)檢測EBV-NDA。統(tǒng)計(jì)對(duì)比兩組觀察對(duì)象的外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞和EBV-DNA等的陽性率、臨床病理參數(shù)特征等。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。產(chǎn)生的各項(xiàng)數(shù)據(jù)運(yùn)用SPSS 19.0版本軟件實(shí)現(xiàn)統(tǒng)計(jì)分析工作，運(yùn)用t檢驗(yàn)驗(yàn)證二元比較正態(tài)分布資料，應(yīng)用方差分析功能驗(yàn)證多項(xiàng)比較正態(tài)分布資料，如果SPSS 19.0給出P＜0.05的結(jié)果，表明各項(xiàng)數(shù)據(jù)比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 鼻咽癌患者基礎(chǔ)資料分析。根據(jù)對(duì)鼻咽癌患者的資料分析得知，不同性別、年齡段患者的外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞陽性率，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），患者病理分期中T1和N1最為常見，詳見表1。

表1 鼻咽癌患者基礎(chǔ)資料分析

2.2 患者的EBV-DNA水平等檢測分析。本組患者中外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞和CTCs、EBV-DNA水平、臨床病理參數(shù)特征等，與常規(guī)正常值進(jìn)行比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），詳見表2。

表2 兩組觀察對(duì)象的EBV-DNA水平等比較（±s）

表2 兩組觀察對(duì)象的EBV-DNA水平等比較（±s）

組別 EBV-DNA VCA-IgA CTCs鼻咽癌患者 7.4±0.5 525.3±10.6 28.5±2.3健康正常值 2.1±0.3 311.5±10.3 17.8±1.6 t 6.3856 105.2385 12.4850 P＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.3 外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞水平與患者生存率分析。研究發(fā)現(xiàn)，EBV-DNA＜500，CTCs=0，一年生存率是86.0%，500＜EBV-DNA＜10000，生存率為76.7%，EBVDNA＞10000，生存率為60.0%，患者的EBV-DNA，CTCs水平越高，生存率越低，詳見表3。

表3 外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞水平與患者生存率分析

3 討論

我國是鼻咽癌的高發(fā)地區(qū)，此病還存在有一定的遺傳現(xiàn)象，鼻咽癌主要是受到病毒（EB病毒）、環(huán)境（亞硝胺、性激素失調(diào)）等的影響[4]，最終在鼻咽部位形成腫瘤。鼻咽癌的危害非常大，許多患者需要接受手術(shù)、化療等治療，身體往往需要承受較大痛苦，許多患者在治療期間表現(xiàn)出情緒低落，治療依從性不高。我國的鼻咽癌患者存在一定的區(qū)域聚集性，在兩廣、湖南、福建等地的發(fā)生率非常高[5]。通常情況下，80%左右的鼻咽癌患者，可以經(jīng)過針對(duì)性治療控制病情，延長患者的壽命。在對(duì)患者的病情進(jìn)行監(jiān)測的過程中，可以結(jié)合觀察臨床病理參數(shù)來分析患者病情，比如外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞、EBV-DNA水平等[6]。外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞會(huì)以不同的形態(tài)存在于人體的外周血中，可以表現(xiàn)為單個(gè)游離狀態(tài)，也可以聚集成團(tuán)。外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞可以在人體隨著血液進(jìn)入到淋巴系統(tǒng)，導(dǎo)致患者出現(xiàn)腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的情況[7]。而EBV-DNA水平則是針對(duì)鼻咽癌患者的一種非常有效的檢測方法，主要是檢測EB病毒的DNA情況，如果檢測檢查結(jié)果是陽性，說明體內(nèi)有eb病毒的感染，需要應(yīng)用抗病毒的藥物進(jìn)行治療的，EBV-DNA在醫(yī)學(xué)上是非洲淋巴細(xì)胞瘤病毒.EBV-DNA水平超過500份/mm時(shí)，預(yù)后明顯最差[8-9]。本次研究中，抽取100例鼻咽癌患者者作為觀察對(duì)象，檢測患者的外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞和EBV-DNA水平，對(duì)比探究鼻咽癌患者外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞與EBV-DNA水平的相關(guān)性。根據(jù)檢測結(jié)果分析，鼻咽癌患者中外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞和EBVDNA等的陽性率、臨床病理參數(shù)特征等，與普通健康者進(jìn)行比較，具有顯著差異（P＜0.05）。通過評(píng)估鼻咽癌患者治療前的外周血中的循環(huán)腫瘤細(xì)胞數(shù)量及EBVDNA水平，有望為精準(zhǔn)識(shí)別復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移高危患者提高參考指標(biāo)，從而有利于早期進(jìn)行個(gè)體化治療，從而降低患者復(fù)發(fā)率和轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)移率，改善其預(yù)后。

綜上所述，鼻咽癌患的外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞與EBVDNA水平具有一定特征性，主要與T、M、N分期等有關(guān)，與性別、年齡、病理類型等的關(guān)系不大，可以作為臨床評(píng)判鼻咽癌的重要標(biāo)準(zhǔn)。