1019 例育齡婦女地中海貧血基因檢測和血液學結(jié)果分析

譚滿勝，陳紅玲

（1.廣東處茂名市婦幼保健院 遺傳優(yōu)生優(yōu)育科，廣東 茂名 525000；2.廣東省茂名市人民醫(yī)院 檢驗科，廣東 茂名 525000）

0 引言

貧血是臨床上一種常見的血液系統(tǒng)疾病，指血紅細胞容量降低且低于標準水平[1]。導致貧血的原因較多，包括原發(fā)性因素與繼發(fā)性因素。疾病類型分布中，常將貧血分為缺鐵性貧血和地中海貧血兩種，其中地中海貧血主要因珠蛋白基因缺失或突變、珠蛋白鏈合成異常導致血紅蛋白成分改變所致[2-3]。地中海貧血臨床上尚無根治措施，重癥患者只能實行去鐵劑治療或定期輸血，所以對患者的血液進行篩查和基因檢測是防治地中海貧血的主要手段，這樣可以減少和避免地中海貧血患兒的出生數(shù)量，對于預(yù)防重型地中海貧血新生兒出生和提高人口質(zhì)量有重要意義[4]。地中海貧血因地域和人群的不同而有明顯的差異，茂名地區(qū)處于地貧高發(fā)區(qū)，本研究通過分析廣東處茂名市婦幼保健院1019例育齡婦女的地中海貧血基因和血液學檢測結(jié)果，從而了解該地區(qū)育齡人群的地中海貧血基因型構(gòu)成、分布和各類型地貧的血液學特點，為地貧的防控提供基礎(chǔ)。報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料。選取2020年1月至2021年7月在廣東處茂名市婦幼保健院就診的育齡婦女1019例作為研究對象，年齡18～40歲，平均（28.54±3.16）歲。所有受檢者均告知檢測內(nèi)容并簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 血常規(guī)檢測：晨起空腹采集靜脈血約2 mL于專用抗凝管中，應(yīng)用日本希森美康XN-20全自動模塊式血液體液分析儀及其配套試劑進行檢測。觀察指標包括平均紅細胞體積（MCV）、平均紅細胞血紅蛋白量（MCH），結(jié)果參考值為MCV：82～100 fl；MCH：27.5～34.8 Pg。

1.2.2 血紅蛋白電泳檢測：采集靜脈血約3 mL于專用抗凝管中，應(yīng)用法國Sebia公司的Sebia CaPilarys全自動毛細血管電泳儀及其配套試劑進行檢測分析。觀察血紅蛋白A2（HbA2）的變化，結(jié)果參考值為HbA2：2.5%～3.2%。

1.2.3 地貧基因檢測：采集靜脈血約3 mL于專用抗凝管中，使用廈門致善Lab-Aid820提取DNA、美國伯樂公司BIO-RAD T100 PCR儀擴增DNA、亞能生物技術(shù)（深圳）有限公司YN-H48全自動核酸分子雜交儀進行擴增產(chǎn)物的雜交，最后人工判讀結(jié)果。地貧基因檢測試劑購自亞能生物技術(shù)(深圳)有限公司。實驗操作按試劑說明書進行，每個樣本均同時檢測3種缺失型α-地中海貧血基因突變（--SEA、-α3.7、-α4.2）、3種非缺失型α-地中海貧血基因突變（αCSα、αQSα、αWSα）和17種β-地中海貧血基因突變（41-42M、654M、－28M、71-72M、17M、βEM、IVS-I-1M、IVS-1-5M、27/28M、43M、－29M、－30M、31M、－32M、14-15M、IntM和CAPM）。

1.3 統(tǒng)計學分析。應(yīng)用Excel處理所有數(shù)據(jù)，采用SPSS 22.0軟件包進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計，計量資料以（）表示，行t檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義，計數(shù)資料以%表示。

2 結(jié)果

2.1 地貧基因檢測結(jié)果。1019例育齡婦女共檢出地貧基因459例（占比45.04%），包括α地貧324例（占比31.80%），β地貧110例（占比10.79%），α復(fù)合β地貧25例（占比2.45%）；基因檢測結(jié)果正常560例（占比54.96%）。結(jié)果統(tǒng)計見表1。324例α地貧包括靜止型α地貧135例（占比41.67%），以-α3.7/αα和-α4.2/αα為主要類型；輕型α地貧179例（占比55.25%），以-SEA/αα為主要類型；中間型α地貧（HbH?。?0例（占比3.09%）。110例β地貧中以βCD41-42/βN和βIVS-II-654/βN為主要類型，分別占比41.82%和23.64%。α復(fù)合β地貧各基因型分布較均勻?；蝾愋头植家姳?。

表1 1019例育齡婦女地貧基因檢測結(jié)果統(tǒng)計（n，%）

表2 459例地貧基因類型分布

2.2 血液學檢測結(jié)果?；蚪Y(jié)果正常組與各類型地貧的MCV、MCH、HbA2結(jié)果見表3?；蚪Y(jié)果正常組與各類型地貧的血液學參數(shù)比較均具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

表3 不同類型地中海貧血與正常組血液學參數(shù)分析（）

表3 不同類型地中海貧血與正常組血液學參數(shù)分析（）

3 討論

地中海貧血為單基因遺傳病，具有明顯的遺傳特異性，重度患者可導致妊娠晚期胎停、新生兒窒息等不良妊娠結(jié)局，會對母嬰健康造成嚴重影響，甚至會危及生命安全，應(yīng)及早診治[5]。我國是出生缺陷高發(fā)國家之一，每年出生缺陷的新生兒約占全世界的20%。在我國，長江以南大部分省區(qū)，尤其是廣西、廣東和海南是地中海貧血的主要流行區(qū)域[6]。預(yù)防地中海貧血、減少出生缺陷是這些地區(qū)提高人口質(zhì)量所要面臨的重要問題。重型地貧目前雖尚無有效的治療方法，但可以通過地貧篩查、地貧基因檢測和產(chǎn)前診斷等技術(shù)手段避免重癥地貧患兒的出生[7]。因此，對育齡婦女進行地中海貧血篩查和基因檢測對于降低重型地貧患兒的出生，提高人口素質(zhì)具有重要的意義[8]。

血常規(guī)檢測聯(lián)合血紅蛋白電泳分析是目前所采用的地貧普遍篩查方法[9]。地中海貧血屬于小細胞低色素貧血，臨床上主要通過外周血血常規(guī)檢測MCV、MCH等指標進行分類；地中海貧血另一個特點是HbA2含量的變化，臨床上主要通過血紅蛋白電泳定量分析。本研究顯示各類型地貧的MCV、MCH、HbA2血液學參數(shù)與基因結(jié)果正常組比較差異均有統(tǒng)計學意義，與國內(nèi)報道一致[10]。因此，臨床上可通過血常規(guī)指標陽性初步篩查出地中海貧血基因攜帶者，根據(jù)紅細胞指標和HbA2水平可提示進一步進行α或β地中海貧血的基因檢測確診。需要注意的是，由于靜止型α地中海貧血一般沒有血液學表型的變化，通過血常規(guī)和血紅蛋白電泳不能發(fā)現(xiàn)陽性的攜帶者，容易造成漏檢，可以直接采用地貧基因檢測等分子診斷技術(shù)進行診斷。

地中海貧血的最終確診以基因檢測結(jié)果為金標準[11]。本研究顯示，1019例育齡婦女共檢出地貧基因459例，檢出率為45.04%。有報道指出，廣東省總?cè)巳旱刎毣驍y帶率為11.07%，廣州市花都區(qū)育齡人群基因攜帶率為15.09%[12],?？诘貐^(qū)育齡人群基因攜帶率為41.57%[13]。這表明茂名地區(qū)育齡婦女的地貧基因攜帶率還是比較高的，需要加強防控工作。另外，本研究顯示，459例陽性包括α地貧324例（占比31.80%），β地貧110例（占比10.79%）；324例α地貧中靜止型α地貧占比41.67%，以-α3.7/αα和-α4.2/αα為主要類型，輕型α地貧占比55.25%，以--SEA/αα為主要類型；β地貧以βCD41-42/βN和βIVS-II-654/βN為主要類型，分別占比41.82%和23.64%。研究提示本地區(qū)育齡婦女α地貧以--SEA/αα為主要構(gòu)成比，β地貧以βCD41-42/βN和βIVS-II-654/βN為主要構(gòu)成比，與本地區(qū)人群的地貧基因型特點相符[14]。

綜上所述，育齡婦女的地中海貧血基因攜帶率較高，基因類型多樣，各類型地貧的血液學指標與正常人比較差異具有統(tǒng)計學意義。針對本地區(qū)育齡婦女地貧基因攜帶率高和基因型特點，通過血液學篩查和基因檢測發(fā)現(xiàn)致病攜帶者后，應(yīng)積極動員其婚育對象進一步做檢測，找出地中海貧血發(fā)生高風險家庭，作為產(chǎn)前針對重點服務(wù)對象，是我們婦幼保健機構(gòu)和產(chǎn)前診斷機構(gòu)開展地貧防控的重要任務(wù)，也是減少重型地貧患兒出生、減少出生缺陷的有效措施。