手足口病合并肺炎支原體感染患兒實驗室指標(biāo)檢測的臨床意義

胡妞

手足口?。╤and-foot-and-mouth disease，HFMD）是由腸道病毒[以柯薩奇病毒A16（coxsachie virus 16，CA16）型和腸道病毒71（enterovirus 71，EV71）型為主]感染引起的急性傳染病，好發(fā)于5歲以下兒童，其中3歲以下的嬰幼兒的發(fā)病率最高，呈急性起病，是兒科常見病[1-2]?？共《局委熓桥R床上治療HFMD的一種常用方法，然后HFMD并非僅由腸道病毒感染引起，還可能合并其他病原微生物，其中以合并肺炎支原體（mycoplasma pneumoniae，MP）感染最為常見[3]。在HFMD患兒的臨床治療中，若患兒合并MP感染而臨床上僅給予單純抗病毒治療，則很難獲得理想的臨床效果。因此，早期明確是否合并其他病原微生物感染對HFMD患兒的臨床治療至關(guān)重要。本課題組經(jīng)文獻(xiàn)檢索分析發(fā)現(xiàn)，目前關(guān)于HFMD患兒合并MP感染的相關(guān)研究較罕見[4-5]。本文通過分析EV71和CA16陽性表達(dá)率、血壓、心率、空腹血糖（fasting blood-glucose，F(xiàn)BG）、白細(xì)胞（white blood cell，WBC）計數(shù)及心肌酶譜等實驗室指標(biāo)檢測對HFMD合并MP感染患兒診療的臨床意義，以期為臨床提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018年12月-2019年11月本院診治的HFMD合并MP感染的患兒158例為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合文獻(xiàn)[6]診斷標(biāo)準(zhǔn)；（2）血清中特異性抗體MP-IgM定性檢測呈陽性；（3）年齡5個月～7歲，一般資料完整；（4）患兒父母或主要監(jiān)護(hù)人配合檢測所需標(biāo)本采集。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并先天性心臟病、肝疾病、腎疾病、肺疾病及腦??；（2）本研究中觀察項目未全部完成；（3）存在標(biāo)本采集時間不當(dāng)可能影響檢測結(jié)果。根據(jù)患兒病情嚴(yán)重程度分組，并發(fā)腦炎、腦膜炎、腦脊髓炎、肺水腫、循環(huán)衰竭等其中之一或多種為重癥組（65例），其余為輕癥組（93例）。重癥組男37例，女28例；年齡6個月～7歲，平均（4.13±1.23）歲；病程1～5 d，平均（3.35±1.18）d。輕癥組男53例，女40例；年齡5個月～7歲，平均（4.06±1.35）歲；病程1～6 d，平均（3.18±1.05）d。兩組性別、年齡、病程等一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），有可比性。本研究獲得醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 EV71及CA16檢測 采用熒光定量RT-PCR法檢測EV71和CA16。均于患者入院時取咽拭子和皰疹液保存于-20 ℃待測；儀器使用瑞士羅氏LC-480實時熒光PCR儀器，試劑盒采用通用型EV71、CA16核酸檢測試劑盒，根據(jù)試劑盒說明方法進(jìn)行質(zhì)控品和標(biāo)本的核糖核酸（ribonucleic acid，RNA）提取，RNA提取后通常直接檢測，若延時檢測則保存于-70 ℃待測；將已提取RNA分別加入EV71、CA16的檢測試劑的反應(yīng)液中，然后將反應(yīng)管放入PCR儀中；RT-PCR反應(yīng)條件設(shè)置：40 ℃ 25 min，1個循環(huán)；94 ℃3 min，1個循環(huán)；93 ℃ 15 s→55 ℃ 45 s，40個循環(huán)。結(jié)果判斷：反應(yīng)結(jié)束后根據(jù)RT-PCR擴(kuò)增圖像分析調(diào)節(jié)Baseline的Start值、End值和Threshold值，通過儀器系統(tǒng)分析得出結(jié)果，在陽性和陰性質(zhì)控品同時滿足質(zhì)量控制的條件下，受檢樣品呈典型S型擴(kuò)增曲線且CT值≤35.1時判斷EV71陽性、CT值≤34.8時判斷CA16陽性[7]。

1.2.2 常規(guī)實驗室指標(biāo)檢測 患兒確診后常規(guī)監(jiān)測血壓（包括收縮壓和舒張壓）、心率（連續(xù)監(jiān)測1 d，每2 h記錄一次，取平均值）；FBG：清晨空腹采集患兒無名指血2 ml，采用葡萄糖氧化酶法檢測，日立7180全自動生化分析儀進(jìn)行分析；WBC計數(shù)：采用顯微鏡計數(shù)法檢測，具體操作步驟概述為：采用稀乙酸將血液稀釋并破壞紅細(xì)胞，混勻后取0.3 ml的白細(xì)胞稀釋液于試管中，然后用微量吸管吸取20 μl末梢血，擦去微量管外余血厚插入稀釋液底部，輕輕將血放出并吸取上清液洗滌微量吸管2～3次，混勻后取混勻的細(xì)胞懸浮液1滴，充入計數(shù)池與蓋片縫隙中，靜置2 min使WBC下沉，然后在低倍鏡下觀察并計數(shù)，然后計算每升血液中白細(xì)胞總數(shù)。

1.2.3 心肌酶譜檢測 患兒于就診當(dāng)日或次日清晨空腹抽取靜脈血3 ml，常規(guī)分離血清后留取血清保存于-20 ℃冰箱，采用日立7180全自動生化分析儀檢測血清心肌酶譜水平，心肌酶譜類測定系列試劑盒由上海易博生物技術(shù)有限公司提供，操作嚴(yán)格按照試劑盒說明及提供的資料進(jìn)行；心肌酶譜構(gòu)成包括：門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（aspartate transaminase，AST）、肌酸激酶同工酶（creatine kinase isoenzyme，CKMB）、肌酸激酶（creatine kinase，CK）、乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，LDH）、 乳 酸 脫 氫 酶 同 工 酶 1（lactate dehydrogenase 1，LDH-1）。

1.3 觀察指標(biāo)

采用單盲法（觀察者不知道對象所屬組別）觀察記錄各檢測指標(biāo)，EV71陽性率、CA16陽性率、心率、舒張壓、收縮壓、FBG、WBC計數(shù)、AST、CK、CK-MB、LDH、LDH-1重癥組與輕癥組進(jìn)行比較。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

本研究數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行分析和處理，計量資料以（±s）表示，采用t檢驗，計數(shù)資料以率（%）表示，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組EV71及CA16陽性率比較

重癥組EV71陽性率高于輕癥組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）；兩組CA16陽性率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表 1。

表1 兩組EV71及CA16陽性率比較 例（%）

2.2 兩組常規(guī)實驗室指標(biāo)比較

重癥組舒張壓、收縮壓、心率、WBC計數(shù)、FBG等水平均高于輕癥組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），見表2。

表2 兩組常規(guī)實驗室指標(biāo)比較 （±s）

表2 兩組常規(guī)實驗室指標(biāo)比較 （±s）

組別 收縮壓（mm Hg） 舒張壓（mm Hg） 心率（次/min） WBC計數(shù)（×109/L） FBG（mmol/L）重癥組（n=65） 94.75±6.23 65.18±7.43 145.39±11.28 13.73±4.16 7.23±1.85輕癥組（n=93） 86.25±5.74 56.64±5.16 120.17±10.63 10.09±2.54 4.74±1.06 t值 4.528 4.962 5.139 3.716 5.314 P值 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000

2.3 兩組心肌酶譜水平比較

重癥組心肌酶指標(biāo)（AST、CK、CK-MB、LDH及LDH-1）水平高于輕癥組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表3。

表3 兩組心肌酶譜水平比較 [U/L，（±s）]

表3 兩組心肌酶譜水平比較 [U/L，（±s）]

組別 AST CK CK-MB LDH LDH-1重癥組（n=65） 56.73±7.68 151.94±16.81 64.34±11.17 503.56±112.78 106.72±43.87輕癥組（n=93） 46.17±6.49 125.76±23.47 49.65±7.38 437.89±92.74 89.76±33.75 t值 3.175 3.205 2.674 4.471 3.865 P值 0.000 0.000 0.006 0.000 0.000

3 討論

HFMD是由腸道病毒（enterovirus，EV）引起的一種常見的全球性傳染病，近年來我國HFMD發(fā)病率呈逐步增長的趨勢，該病好發(fā)于5歲以下嬰幼兒，以3歲以下兒童發(fā)病率最高。據(jù)相關(guān)調(diào)查顯示：僅2014年7月我國HFMD病例已超過30萬，死亡73例，發(fā)病占丙類傳染病的70%左右，死亡病例占丙類傳染病的90%左右[8-9]?？梢奌FMD是一種嚴(yán)重影響兒童健康并威脅其生命安全的疾病，應(yīng)引起高度重視。EV71及CA16感染是引起HFMD最主要的兩種病毒，且由這兩種類型病毒引起的HFMD對機(jī)體的損傷更大、并發(fā)癥更多?？偨Y(jié)多年的臨床經(jīng)驗并結(jié)合文獻(xiàn)[10]發(fā)現(xiàn)，多數(shù)HFMD患兒在EV感染的同時，還合并其他病原微生物感染，以合并MP感染最為常見。對于HFMD合并MP感染的患兒，如果臨床上僅針對EV感染進(jìn)行治療，不僅影響臨床療效，還可能造成嚴(yán)重不良后果?；诖耍疚奶接慔FMD合并MP感染的患兒實驗室檢測指標(biāo)對該病診療的臨床意義，旨在為提高該病的臨床治療水平提供參考經(jīng)驗。

本研究顯示，重癥組與輕癥組CA16陽性率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），提示CA16檢測對HFMD合并MP感染患兒病情評估不具有明顯的參考價值。重癥組EV71陽性率高于輕癥組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），這提示：EV71陽性率與HFMD合并MP感染患兒病情又密切的關(guān)系，早期檢測EV71對評估病情嚴(yán)重程度有一定的指導(dǎo)意義，可將EV71作為臨床治療方法制定的參考指標(biāo)。有文獻(xiàn)[11]報道亦顯示：重癥HFMD患兒EV71陽性率明顯高于輕癥者，本研究與其基本一致。

血壓、心率、WBC及血糖水平檢測是實驗室檢測的常規(guī)指標(biāo)，血壓、心率及血糖監(jiān)測可有效評估患者的身體基本狀況。而WBC被稱為人體與疾病斗爭的衛(wèi)士，當(dāng)機(jī)體遭受病菌侵入時，WBC能穿過毛細(xì)血管壁集中到病菌入侵部位，一旦機(jī)體內(nèi)WBC數(shù)偏高，說明很可能是身體有了炎癥。本研究顯示：重癥組血壓、心率、WBC計數(shù)、FBG等水平均高于輕癥組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），這說明，較輕癥患兒而言，病情較重的HFMD合并MP感染患兒，其血壓、心率、WBC及FBG水平均有一定程度升高，早期血壓、心率、WBC及血糖水平檢測可作為HFMD合并MP感染患兒早期病情評估的參考指標(biāo)，可為臨床治療提供豐富的信息。有文獻(xiàn)[12]報道顯示：重癥HFMD合并MP感染患兒WBC血壓、心率、WBC及血糖水平明顯高于輕癥患兒，本研究與其具有一致性。

心肌酶譜主要由AST、CK-MB、CK、LDH及LDH-1構(gòu)成，其活性與心臟損傷有密切的關(guān)系，通過檢測心肌酶譜法發(fā)現(xiàn)機(jī)體的心肌損傷情況。CK-MB被認(rèn)為是心肌特異性同工酶，主要存在于心肌細(xì)胞，正常血液中含量極少，但心肌損傷后CK-MB釋放進(jìn)入血液引起血液中CK-MB水平升高（CK-MB的生物半衰期較短，水平下降較快，需掌握好監(jiān)測時機(jī)）；AST、LDH、CK存在于機(jī)體多種組織細(xì)胞，較其他心肌酶指標(biāo)而言其特異性偏低，但其半衰期較長。本研究顯示：重癥組AST、CK-MB、CK、LDH及LDH-1水平均高于輕癥組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。這提示：重癥HFMD合并MP感染患兒心肌損傷情況重于輕癥患兒，通過檢測AST、CK-MB、CK、LDH及LDH-1水平可有效評估HFMD合并MP感染患兒心肌損傷程度，為臨床治療提供依據(jù)。文獻(xiàn)[13]的報告顯示重癥HFMD合并MP感染患兒與輕癥患兒心肌酶譜水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），與本研究不一致，其原因可能是因為患兒病情嚴(yán)重程度差異造成的，心肌酶譜水平與HFMD患兒病情嚴(yán)重程度有關(guān)。

本研究結(jié)果提示：HFMD合并MP感染患兒實驗室檢測指標(biāo)對病情判斷具有重要意義，然而卻未對各檢測指標(biāo)對判斷病情嚴(yán)重程度的臨界值進(jìn)行深入探討，還有待于進(jìn)一步開展專題研究。另外，HFMD合并MP感染患兒，隨著其病情的加重，血壓、心率、WBC、血糖水平及心肌酶譜活性增加，但其機(jī)制尚待更多的體外試驗進(jìn)行證實。

綜上所述，血壓、心率、WBC、血糖及心肌酶譜等實驗室檢測指標(biāo)對HFMD合并MP感染患兒病情評估具有重要價值，可為該病的臨床治療提供依據(jù)。