李 涵
(濮陽職業(yè)技術(shù)學院,河南濮陽 457000)
近年來,由于世界范圍內(nèi)奶牛的繁殖性能不斷惡化,提高受胎率已成為奶牛生產(chǎn)養(yǎng)殖中面臨的重要問題之一。雖然引起奶牛繁殖性能惡化的因素有很多,但最近的研究集中在提高黃體功能作為解決這一問題的途徑。卵泡生長過程中血漿孕酮水平降低被發(fā)現(xiàn)與胎齡降低有關(guān),同時早期妊娠期胚胎存活率低被證明與血漿孕酮濃度低有關(guān)(Inskeep,2004)。由于產(chǎn)后血漿孕酮水平與受孕率呈正相關(guān),因此,授精前內(nèi)源性孕酮濃度會影響胚胎恢復(劉廣振,2005),這些結(jié)果表明,產(chǎn)后黃體功能是影響生殖性能的關(guān)鍵因素之一。先前的研究已經(jīng)證明,日糧補充功能性原料或添加劑會導致血漿孕酮水平升高,如Petit 和Twagiramungu(2006)研究發(fā)現(xiàn),補充脂肪可以提高奶牛血漿孕酮水平,造成這種影響的機制可能與能量供應有關(guān),但也被認為與脂肪衍生亞油酸抑制前列腺素合成有關(guān)。此外,微量營養(yǎng)素被認為有助于黃體功能,如Kawashima等(2010)報道,β -胡蘿卜素的供應支持奶牛產(chǎn)后黃體活性的重建以及增強卵巢功能和孕酮合成。本研究重點研究了硒對奶牛產(chǎn)后采食量和孕酮水平的影響。眾所周知,硒是動物必需的微量礦物質(zhì),對動物繁殖性能有重要作用。嚴廷英(2015)報道了硒可降低泌乳奶牛子宮炎、卵巢囊腫發(fā)生率及從產(chǎn)犢到受孕的間隔時間。Molina等(2009)報道,給荷斯坦奶牛注射維生素E和硒2~4周可以提高產(chǎn)犢數(shù)及受胎率。但硒對生殖產(chǎn)生積極作用的機制和硒的靶組織尚不清楚。雖然一些與動物繁殖功能的酶已被證實與硒有關(guān),但這些酶對動物生殖功能的影響機理仍在研究中。因此,本研究旨在探討日糧添加富硒酵母對分娩后奶牛采食量、血液生化及激素水平的影響。
1.1 試驗設計與飼料管理試驗將分娩后28 d、平均初始體重為(616.97±4.51)kg的20頭奶牛隨機分為2組,每組5個重復,每個重復2頭,對照組飼喂基礎全混合日糧(以亞硒酸鈉的形式補充0.2 mg/kg硒),處理組飼喂基礎全混合日糧+2 g/kg富硒酵母(硒含量為100 mg/kg)。試驗從分娩后28 d持續(xù)至112 d。試驗期間奶牛自由采食全混合日糧,整個生產(chǎn)管理、環(huán)境條件維持一致。全混合日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。
表1 全混合日糧組成及營養(yǎng)水平
1.2 數(shù)據(jù)記錄分別在試驗當天、28、56和84 d(即分娩后28、56、84和112 d)早上飼喂前對每頭奶牛進行稱重,每天早上8點和下午2點各飼喂1次,記錄每天的飼喂量及剩余的飼料量。
1.3 樣品采集與分析試驗期間對奶牛稱重后立即頸靜脈采血10 mL,其中5 mL用于分離血漿,另外5 mL分離血清。血清樣品用商品試劑盒測定葡萄糖和尿素氮濃度,血漿樣品用于測定孕酮濃度,測定方法參考南京建成生工所試劑盒說明書進行。不同時期血漿硒濃度參考秦順義等(2007)的研究方法進行。
1.4 數(shù)據(jù)分析試驗數(shù)據(jù)采用SPSS軟件單因素方差分析,采用T檢驗進行多重比較,P<0.05表示差異顯著。
2.1 日糧添加富硒酵母對分娩后奶牛采食量和體重的影響由表2可知,對照組與富硒酵母組對奶牛分娩后28、56、84和112 d的采食量和體重的影響均無顯著差異(P>0.05)。
2.2 日糧添加富硒酵母對分娩后奶牛血清生化和血漿硒濃度的影響由表3可知,對照組與富硒酵母組對奶牛分娩后28、56、84和112 d血清葡萄糖和尿素氮濃度的影響均無顯著差異(P>0.05),與對照組相比,富硒酵母組奶牛分娩后28、56、84和112 d血漿硒濃度分別顯著提高57.60%、62.12%、62.01%和61.88%(P<0.05)。
表3 日糧添加富硒酵母對分娩后奶牛血清生化指標和血漿硒濃度的影響
2.3 日糧添加富硒酵母對分娩后奶牛血漿激素水平的影響由表4可知,對照組與富硒酵母組奶牛分娩后28、56、84和112 d血漿雌激素濃度及分娩后28和112 d血漿孕酮濃度的影響均無顯著差異(P>0.05)。與對照組相比,富硒酵母組奶牛分娩后56和84 d血漿孕酮濃度分別顯著提高66.15%和80.10%(P<0.05)。
表4 日糧添加富硒酵母對分娩后奶牛血漿激素水平的影響
產(chǎn)后對照組與富硒酵母組采食量和體重無顯著差異,說明試驗期間奶牛的能量攝入量無顯著差異。Cutulli等(2012)報道,能量負平衡、粗蛋白質(zhì)供過于求、產(chǎn)奶量高延緩了卵裂后卵巢功能的恢復,導致受胎率低。因此,試驗中除添加來源不同的硒外,硒處理組和對照組飼喂相同的營養(yǎng)水平,以研究硒對血漿孕酮水平的影響。綜合整個試驗結(jié)果看,兩組體重、采食量、血清葡萄糖、尿素氮濃度及不同階段血漿雌激素水平無顯著差異。而富硒酵母組奶牛在不同時期血漿中硒的濃度都顯著高于對照組。
因為參與膽固醇代謝(孕酮前體)的側(cè)鏈切割酶多次使用分子氧,產(chǎn)生自由基,因此,孕酮在生物合成過程中會產(chǎn)生過氧化物(Young等,1995)。硒是一種抗氧化劑,是谷胱甘肽過氧化物酶、磷脂氫過氧化物谷胱甘肽過氧化物酶和硫氧還蛋白還原酶的必要成分。根據(jù)這些信息,我們假設硒可以降解黃體中的過氧化物,從而維持其功能。為了提高奶牛受胎率,必須盡早恢復產(chǎn)后卵巢功能。在本研究中,日糧補充10 g/kg富硒酵母可以顯著提高分娩后56和84 d奶牛血漿中孕酮濃度,提示硒補充可以改善產(chǎn)后卵巢功能的早期恢復。盡管硒可以提高各種動物的繁殖性能,但其靶組織尚未確定。奶牛產(chǎn)后血漿孕酮濃度與受胎率呈正相關(guān),提示硒激活黃體功能可提高奶牛繁殖性能(Staples等,1998)。
據(jù)推測,過氧化物的產(chǎn)生可以誘導黃體組織進行黃體分解,研究發(fā)現(xiàn),在黃體退化過程中,過氧化氫或脂質(zhì)過氧化在黃體組織中積累(Hesla等,2012)。Kamada和Ikumo(2017)報道,在黃體細胞中添加硒降低了細胞內(nèi)脂質(zhì)過氧化物水平。因此,硒對過氧化產(chǎn)物的解毒作用可能有助于維持黃體的功能。孕酮濃度升高也與硒的抗氧化作用有關(guān)。在本研究中,我們并沒有對奶牛血清抗氧化酶及黃體進行活檢,或?qū)ζ溥^氧化脂含量進行評估,因為我們考慮到樣品的采集會影響孕酮含量的測定,但后續(xù)還需要進一步從黃體組織形態(tài)變化及抗氧化酶活方面進行評估。
全混合日糧添加2 g/kg富硒酵母可以顯著提高奶牛分娩后28~112 d血漿硒濃度及分娩后56和84 d血漿孕酮濃度,對奶牛采食量和體重無負面影響。