• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    基于SSR標(biāo)記的海南栽培檳榔遺傳多樣性分析

    2021-07-20 14:32齊蘭王世正黃麗云周煥起劉立云
    熱帶作物學(xué)報 2021年5期
    關(guān)鍵詞:遺傳多樣性檳榔聚類分析

    齊蘭 王世正 黃麗云 周煥起 劉立云

    摘 ?要:檳榔是海南重要的熱帶特色經(jīng)濟作物,具有很高的藥用價值,被列為“四大南藥”之首。但其基礎(chǔ)研究落后,缺乏對種質(zhì)資源的系統(tǒng)研究,遺傳多樣性尚不明確。利用SSR分子標(biāo)記技術(shù)對海南島58份栽培檳榔資源進行遺傳多樣性分析,旨在明確檳榔栽培種的親緣關(guān)系,為檳榔雜交育種、功能基因的挖掘提供理論依據(jù)。結(jié)果表明:從500對SSR引物中篩選出32對多態(tài)性好、條帶清晰的引物,在58份種質(zhì)資源中共檢測到79個等位基因,每個SSR位點2~5個,平均2.4688個,其中有效等位變異占觀測等位變異的58.92%。各引物PIC值變幅為0.0169~0.5969,平均值為0.2254,Shannon信息指數(shù)(I)為0.0496~1.2552,平均值為0.4496;Neis遺傳多樣性指數(shù)(Nei)變幅為0.0171~0.6492,平均值為0.2596,說明所選SSR引物在供試樣品中檢測等位基因遺傳多樣性偏低。利用UPGMA構(gòu)建58份栽培檳榔的遺傳聚類樹狀圖,第V組材料遺傳多樣性最豐富,其他分組群體遺傳多樣性較低,聚類結(jié)果說明海南栽培檳榔品種無明顯的區(qū)域劃分,表明海南檳榔不同地區(qū)間的種苗交流頻繁,總體遺傳多樣性水平較低,該研究為檳榔遺傳育種親本選擇提供依據(jù),也為今后引進種質(zhì)增補差異資源提供參考。

    關(guān)鍵詞:檳榔;SSR標(biāo)記;聚類分析;遺傳多樣性

    中圖分類號:S792.91 ? ? 文獻標(biāo)識碼:A

    Abstract: Arecanut (Areca catechu L.) is an important tropical economic and social importance plant in Hainan Prov-ince. It has high medicinal value and is listed as the first of the four south China medicinal plants. Areca is mostly planted in underdeveloped areas, and the basic research is weak. The germplasm diversity of areca from Hainan remains unclear due to lack of systemic research of germplasm. We analyzed the genetic diversity among 58 arecanut accessions from Hainan by SSR molecular marker technology to clarify the genetic relationship and provide a theoretical basis for the hybrid breeding and functional gene mining. The results showed that 32 primers with high polymorphism and clear bands were screened out from 500 SSR primers. A total of 79 alleles were detected from the 58 arecanut germplasm resources, and there were 2-5 loci per SSR, with an average of 2.4688 alleles at each marker, and the number of effective allele was accounted for 58.92% of the observed one. The range of PIC was 0.0169-0.5969, with an average of 0.2254. The Shannon index (I) of all primers ranged from 0.0496 to 1.2552, with an average of 0.4496. Neis genetic diversity index (Nei) was ranged from 0.0171 to 0.6492, with an average of 0.2596. The genetic diversity of alleles detected by SSR primers was low. UPGMA Cluster analysis showed that the genetic diversity of group V was the richest. Genetic analysis showed that the 58 arecanut were separated from the effect of regional isolation. The conclusion of frequent exchanges among different regions of arecanut in Hainan and lower genetic diversity in Hainan cultivars would provide theoretical guidance for the selection of parents in the genetic breeding of arecanut, while reference for collecting germplasm to supplement different resources in the future.

    Keywords: arecanut; SSR markers; clustering analysis; genetic diversity

    DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2021.05.014

    檳榔(Areca catechu L.)是棕櫚科檳榔屬多年生常綠植物,原產(chǎn)于馬來西亞,我國主要栽培于海南、云南以及臺灣等地,其中海南產(chǎn)量占全國總產(chǎn)的99%(未計臺灣省)[1]。檳榔是海南重要的熱帶特色經(jīng)濟作物,具有很高的藥用價值,被列為“四大南藥”(檳榔、砂仁、益智、巴戟)之首。含有多種人體所需的營養(yǎng)元素和有益物質(zhì),檳榔原果的主要成分為酚類、多糖、脂肪、粗纖維和生物堿,檳榔種子總生物堿含量達0.3%~ 0.6%,主要為檳榔堿,并含有少量檳榔次堿,是驅(qū)蟲的有效成分,還具有消積導(dǎo)滯、行氣利水、降血壓的功能[2-3]。

    我國檳榔栽培歷史悠久,尤其是在海南,形成了一些各具特色的地方品種,不同類型的檳榔在產(chǎn)量、品質(zhì)、果實形狀等方面存在很大差異[4],但是檳榔種質(zhì)資源基礎(chǔ)研究相對薄弱,對種質(zhì)資源的多樣性缺乏系統(tǒng)的比較和研究,存在種質(zhì)混雜,同名異物或者同物異名等情況[1]。隨著檳榔產(chǎn)業(yè)規(guī)模的不斷擴大,農(nóng)戶在引種時偏向于栽培商品喜好型品種,栽培品種單一,一些特有種質(zhì)正在逐步消失,遺傳基礎(chǔ)可能存在逐年變窄的趨勢。種質(zhì)資源的收集、保存和鑒定評價對作物新品種選育具有重要作用,種質(zhì)資源遺傳多樣性是檳榔遺傳育種的基礎(chǔ)和前提,因此,對來源于不同生態(tài)區(qū)域的檳榔種質(zhì)資源開展系統(tǒng)遺傳多樣性研究,對檳榔種質(zhì)資源評價和創(chuàng)新利用具有重要意義。

    DNA分子標(biāo)記目前廣泛應(yīng)用于作物種質(zhì)資源遺傳多樣性研究,其中SSR標(biāo)記具有共顯性、多態(tài)性豐富、可重復(fù)性好等優(yōu)點,已被廣泛應(yīng)用于水稻[5]、小麥[6]、甘薯[7]、綠豆[8]、新麥草[9]等大田作物及牧草,以及椰子[10-11]、油棕[12]等棕櫚科植物的遺傳多樣性評價研究。我國檳榔種質(zhì)資源的遺傳多樣性研究較少,任軍方[13]利用ISSR標(biāo)記對海南保亭的檳榔栽培居群進行遺傳多樣性分析,結(jié)果顯示海南保亭的檳榔多樣性水平較低。

    本研究調(diào)查收集海南不同地區(qū)、不同果形的58份栽培檳榔資源,利用SSR分子標(biāo)記技術(shù)進行海南栽培檳榔遺傳多樣性研究,明確目前海南栽培檳榔的遺傳基礎(chǔ),闡明不同材料間的親緣關(guān)系,為我國檳榔種質(zhì)資源鑒定評價、遺傳育種與改良奠定基礎(chǔ)。

    1 ?材料與方法

    1.1 ?材料

    試驗材料共58份,來自海南省各市縣栽培檳榔園,選取檳榔樹株型、果型中有差異的作為試驗樣品,其中P74為從臺灣引進的檳榔種質(zhì)資源,栽培在中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院椰子研究所檳榔種質(zhì)資源圃,資源圃內(nèi)編號為P74,其余樣品編號規(guī)則:按照各市縣在海南省的地理位置分為:西部地區(qū)(X)、中部地區(qū)(Z)、南部地區(qū)(N)、北部地區(qū)(B)、東部地區(qū)(D),加上樣品采集地市縣名稱拼音首字母縮寫,樣品基本信息見表1。

    1.2 ?方法

    1.2.1 ?DNA的提取 ?采集檳榔成齡植株葉片,裝入自封袋,置于放冰袋的泡沫盒帶回實驗室。葉片剪碎后,放入研缽加液氮磨樣,采用植物基因組DNA快速提取試劑盒[生工生物工程(上海)股份有限公司]提取葉片基因組DNA,風(fēng)干后,加入100 μL TE緩沖液溶解。吸取1 μL DNA原液,利用NanoDrop 2000微量紫外分光光度計檢測提取DNA質(zhì)量和濃度,工作液濃度稀釋至20 ng/μL,DNA原液和工作液儲存于?20 ℃冰箱備用。

    1.2.2 ?引物篩選 ?利用12份地理來源不同,形態(tài)差異較大的材料進行引物篩選,從500多對SSR引物序列中篩選特異性好,條帶清晰的引物32對,用于海南栽培檳榔品種基因型檢測(表2)。本研究用到的SSR引物是利用‘熱研一號檳榔品種的葉片、雌花和果實,通過轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)開發(fā)的SSR引物,引物序列由中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院椰子研究所楊耀東博士提供,引物由生工生物工程(上海)股份有限公司合成。

    1.2.3 ?PCR反應(yīng)和產(chǎn)物檢測 ?SSR分子標(biāo)記試驗PCR反應(yīng)體系參考齊蘭等[14]的方法,PCR反應(yīng)程序為:94 ℃預(yù)變性5 min;94 ℃變性30 s,58 ℃退火復(fù)性30 s,72 ℃延伸30 s,33個循環(huán);72 ℃延伸10 min,最后設(shè)置4 ℃保存。用已經(jīng)篩選出的多態(tài)性高且穩(wěn)定性好的SSR引物進行SSR-PCR擴增。擴增產(chǎn)物用8%聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測,銀染顯色,條帶清晰后在膠片觀察燈上進行拍照。

    1.3 ?數(shù)據(jù)處理

    對照Marker(D 2000)的分子量大小根據(jù)條帶有無來記錄跑膠結(jié)果,將SSR引物擴增出的DNA片段按照從大到小的順序依次排列,相同大小的分子量遷移處,有帶記為“1”,無帶記為“0”,缺失數(shù)據(jù)記為“9”,建立0-1形式的二進制數(shù)字矩陣,通過DataFormater軟件將0-1數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換成Popgen、Powermarker等軟件所需的數(shù)據(jù)模式[15]。

    采用Popgene 1.32軟件[16]計算檳榔種質(zhì)資源的觀測等位基因數(shù)(Na)、有效等位基因數(shù)(Ne)、期望雜合度(He)和觀測雜合度(Ho)、Shannons信息指數(shù)(I)和Neis遺傳多樣性指數(shù)(Nei)等遺傳參數(shù)。并計算分組群體間的遺傳多樣性和遺傳距離;利用Powermarker V3.25軟件[17]計算每對引物的多態(tài)性信息含量(polymorphic information content, PIC);采用Ntsys 2.11軟件[18],利用Clustering的SAHN程序中的非加權(quán)類平均法(UPGMA)進行聚類分析,通過Tree-plot程序生成遺傳聚類圖。

    2 ?結(jié)果與分析

    2.1 ?SSR標(biāo)記多態(tài)性分析

    檳榔DNA提取原液通過微量紫外分光光度計檢測其濃度,各檢測樣品DNA濃度范圍為610~1053 ng/μL,OD260/280比值介于1.8~2.0之間,說明提取樣品DNA的純度高,滿足SSR-PCR擴增要求。

    利用篩選的32對SSR引物,對58份檳榔種質(zhì)資源進行基因型檢測,結(jié)果顯示,32對引物共檢測到79個等位基因,每個SSR位點2~5個,平均2.4688個,其中有效等位變異占觀測等位變異的58.92%。觀測雜合度(Ho)變幅為0.0000~ 0.7586,平均值為0.1886,說明所檢測等位基因位點雜合度稍低;期望雜合度(He)變幅為0.0172~0.6549,平均值為0.2618,PIC值變幅為0.0169~0.5969,平均值為0.2254,中度及以上多態(tài)性信息位點(PIC>0.25)有13個。Shannons信息指數(shù)(I)的范圍為0.0496~1.2552,平均為0.4496;Neis遺傳多樣性指數(shù)(Nei)變幅為0.0171~0.6492,平均值為0.2596,說明SSR引物在供試樣品中檢測等位基因遺傳多樣性偏低(表3)。

    2.2 ?不同檳榔種質(zhì)資源遺傳聚類分析

    利用SSR標(biāo)記檢測基因型數(shù)據(jù)進行聚類分析,構(gòu)建親緣關(guān)系聚類圖(圖1)。從聚類分析樹狀圖可以看出,遺傳相似系數(shù)矩陣(GS)變化范圍為0.63~0.94。在遺傳相似系數(shù)為0.70處可以將海南栽培檳榔與臺灣種檳榔區(qū)分開。在遺傳相似系數(shù)0.82處(圖1中參考線所示),根據(jù)離散程度,將供試樣本分為5個組,其中第I組劃分為2個亞組,I-1和I-2組,將未聚類在一起的與其他樣品親緣關(guān)系較遠的4份材料劃為第Ⅴ組,分別是來自中部瓊中、五指山,北部定安以及1份臺灣種質(zhì)。

    第I組分為2個亞組,I-1組主要包括中部、北部和東部的材料,其中還有3份來自南部陵水的材料。亞組I-2組的材料來源相對分散,大多數(shù)是來自西部和中部地區(qū)的樣本,該組的材料來源相對復(fù)雜,占供試材料的2/3,基本覆蓋了海南島各地的樣品。其中有幾份來自不同地區(qū)的樣本

    遺傳距離很接近,遺傳相似系數(shù)達到0.95,推測這些材料可能來自相同的親本,說明海南栽培檳榔在不同地區(qū)的種苗交流很頻繁。第Ⅱ組和第Ⅲ組包含的材料相對分散,無明顯的區(qū)域性劃分,第IV組的3份材料來自南部的陵水和樂東。第V組的材料1份來自臺灣,另外3份與其他海南本地種資源遺傳差異較大,這4份材料各自成為1個分支,推測可能是早期從周邊東南亞國家引進的種質(zhì)。

    2.3 ?基于SSR標(biāo)記的檳榔分組群體遺傳多樣性與遺傳距離

    根據(jù)SSR標(biāo)記基礎(chǔ)上的遺傳聚類結(jié)果,將58份海南栽培檳榔種質(zhì)資源分為5組,由于第I組

    成員較多,明顯分為2個亞組,因此按照6個分組,即I-1、I-2、Ⅱ、Ⅲ、IV和V組,利用Popgene 1.32軟件分析檳榔種質(zhì)分組群體內(nèi)的遺傳多樣性參數(shù)(表4)。對分組群體SSR標(biāo)記多態(tài)性分析結(jié)果顯示,第V組的觀測等位基因數(shù)(Na)最高(2.2188),最低為第IV組(1.5312);有效等位基因數(shù)(Ne)最高為第V組(1.8001),最低為第Ⅱ組(1.2909);Shannons指數(shù)(I)最高的是第V組(0.6106),最低為第Ⅱ組(0.2753);Neis遺傳多樣性指數(shù)(Nei)最高為第V組(0.3828),最低為第Ⅱ組(0.1704);觀測雜合度(Ho)和期望雜合度(He)分別為0.1328~0.3047和0.1818~0.4375,均為第V組最高。結(jié)果表明,第V組的遺傳多樣性最豐富,其他幾組遺傳多樣性參數(shù)值稍低,說明海南本地栽培檳榔群體遺傳多樣性水平偏低。

    利用Popgene 1.32軟件計算6個分組群體間的遺傳一致度和遺傳距離,群體I-1和I-2組間的遺傳距離最?。?.0192),遺傳一致性系數(shù)最大(0.9810);群體IV和群體V的遺傳距離最大(0.1423),遺傳一致性系數(shù)最小(0.8673);總體來講不同分組群體的遺傳距離差異不大(表5),表明海南檳榔不同分組群體遺傳差異較小,需要引進國外種質(zhì)資源以拓寬其遺傳基礎(chǔ)。遺傳一致度和遺傳距離分別是從相同和相反方面度量群體間遺傳關(guān)系的遠近,遺傳距離系數(shù)大,相應(yīng)的遺傳一致性系數(shù)小,材料間的親緣關(guān)系比較遠;因此開展雜交育種時建議選擇親緣關(guān)系遠的組合,更有利于產(chǎn)生雜種優(yōu)勢。

    3 ?討論

    檳榔是熱帶亞熱帶地區(qū)一種重要的經(jīng)濟作物,栽培地區(qū)多為不發(fā)達地區(qū),基礎(chǔ)研究薄弱。印度是最早對檳榔開展系統(tǒng)性研究的國家,自1957年開始先后從中國等世界各地收集檳榔種質(zhì),已經(jīng)達到117份,保存在印度的維塔檳榔實驗站[19]。國內(nèi)外已開展檳榔種質(zhì)資源遺傳多樣性的分析研究,劉慧娟[20]利用10對RAPD標(biāo)記對海南20個檳榔主要種植縣市的74份樣品進行聚類分析,在遺傳相似系數(shù)為0.78左右檳榔群體被分為2組,第1組包括印度、柬埔寨樣品,還有部分中國云南與海南的樣品等,第2組樣品包括來自中國云南和海南樣品,說明海南栽培檳榔與周邊東南亞國家存在種苗交換現(xiàn)象。任軍方[13]利用ISSR標(biāo)記對海南保亭的檳榔居群進行遺傳多樣性分析,結(jié)果顯示保亭檳榔12個居群總的遺傳多樣性Neis指數(shù)為0.2878,表明海南保亭檳榔的多樣性水平比較低,可能是由于采樣區(qū)域太小。臺灣學(xué)者Hu等[21]開發(fā)了9對SSR引物,對臺灣屏東縣的36份檳榔材料進行了群體遺傳分析,預(yù)期雜合度和觀測雜合度分別為0.71~0.94和0.00~0.88。Sankaran等[22]利用11對RAPD標(biāo)記對10份印度檳榔種質(zhì)材料進行遺傳多樣性分析,PIC值范圍為0.17~0.60,UPGMA聚類分析顯示野生種檳榔與栽培種檳榔遺傳差異大。印度農(nóng)作物研究中心(Central Plantation Crops Research Institute, CPCRI)的Bharath等[23]利用RAPD標(biāo)記對60份檳榔種質(zhì)資源進行遺傳多樣性分析,遺傳相似系數(shù)介于0.68~0.93之間,印度本地收集材料聚類在一起,其他國家收集資源聚類在一起,聚類分析結(jié)果與地理來源有顯著相關(guān)性。RAPD標(biāo)記技術(shù)的一個缺點是實驗重復(fù)性差,反應(yīng)條件的變化常常導(dǎo)致擴增結(jié)果帶形的變化,結(jié)果可靠性較低[20]。而SSR標(biāo)記具有重復(fù)性高,可靠性強且品種間多態(tài)性豐富等特點。Ramaswamy等[24]利用檳榔葉片開展轉(zhuǎn)錄組測序,在檳榔基因組上鑒定到6853個含SSR位點的區(qū)域,可開發(fā)更多的SSR標(biāo)記用于檳榔種質(zhì)資源研究。

    本研究篩選了32對多態(tài)性SSR引物,在58份栽培檳榔材料中共檢測到79個等位基因,每個SSR位點2~5個,平均2.4688個。PIC值變幅為0.0169~0.5969,平均值為0.2254。Shannons信息指數(shù)(I)范圍為0.0496~1.2552,平均為0.4496;Neis遺傳多樣性指數(shù)平均值為0.2596,說明本研究所用SSR引物在供試樣品中檢測等位基因遺傳多樣性偏低,需要更多的SSR標(biāo)記來評估更多的遺傳資源。

    根據(jù)SSR分子標(biāo)記進行UPGMA遺傳聚類分析,從聚類分析圖可以看出,遺傳相似系數(shù)矩陣(GS)變化范圍為0.63~0.94。在遺傳相似系數(shù)為0.70處可以將海南栽培檳榔與臺灣檳榔種區(qū)分開,表明海南本地檳榔與臺灣檳榔種的遺傳差異較大。第V組的材料1份來自臺灣,另外3份與其他海南本地種資源遺傳距離較遠,該組的Shannons信息指數(shù)和Neis遺傳多樣性指數(shù)均為最高,表明該組樣品間遺傳差異較大。海南在20世紀(jì)90年代引種過東南亞部分國家或地區(qū)的檳榔品種,后期由于果實品質(zhì)不能滿足市場需求,在海南的種植面積越來越少,本次采集的這3份檳榔材料是否為從國外引種遺留下來的資源有待于進一步驗證。遺傳分析結(jié)果顯示海南栽培檳榔無明顯的地域聚類,說明海南島檳榔栽培種苗交流比較頻繁,且海南栽培檳榔遺傳基礎(chǔ)相對狹窄,其原因可能是農(nóng)民選種時喜歡商品性較好的品種,主栽優(yōu)良品種由于長時間的人工馴化、不同地區(qū)間資源共享,導(dǎo)致遺傳多樣性水平降低。因此,在今后的育種工作中應(yīng)積極引進國內(nèi)外的檳榔種質(zhì)資源以拓寬其遺傳背景。本研究明確了海南栽培檳榔品種的遺傳多樣性差異,為檳榔種質(zhì)資源保存利用及遺傳育種、改良、育種親本選擇提供理論指導(dǎo),也為檳榔種質(zhì)資源保護和今后引進種質(zhì)增補差異資源提供參考。

    參考文獻

    [1] 晏小霞, 王祝年, 王建榮. 檳榔種質(zhì)資源研究概況[J]. 中國熱帶農(nóng)業(yè), 2008(5): 34-36.

    [2] 鄭錦星, 李忠海, 袁列江, 等. 檳榔生理效應(yīng)研究進展[J]. 食品科技, 2006(9): 302-305.

    [3] 張春江, 呂飛杰, 陶海騰. 檳榔活性成分及其功能作用的研究進展[J]. 中國食物與營養(yǎng), 2008(6): 50-53.

    [4] 黃麗云, 劉立云, 李 ?艷, 等. 海南主栽檳榔品種鮮果性狀評價[J]. 熱帶作物學(xué)報, 2014, 35(2): 313-316.

    [5] 從夕漢, 施伏芝, 阮新民, 等. 東南亞62個秈型水稻親本SSR遺傳多樣性分析[J]. 核農(nóng)學(xué)報, 2016, 30(5): 859-868.

    [6] 李正玲, 胡 ?琳, 王會偉, 等. 河南省同名小麥地方品種SSR遺傳多樣性分析[J]. 麥類作物學(xué)報, 2016, 36(5): 564-570.

    [7] 聶立圓, 李愛賢, 秦 ?楨, 等. 基于SSR標(biāo)記的132份甘薯種質(zhì)指紋圖譜的構(gòu)建及遺傳多樣性分析[J]. 植物遺傳資源學(xué)報, 2018, 19(5): 904-911.

    [8] Chen H L, Qiao L, Wang L X, et al. Assessment of genetic diversity and population structure of mungbean (Vigna ra-diata) germplasm using EST-based and genomic SSR mark-ers[J]. Gene, 2015, 566(2): 175-183.

    [9] 張 ?晨, 云 ?嵐, 李 ?珍, 等. 新麥草種質(zhì)的SSR遺傳多樣性及群體結(jié)構(gòu)分析[J]. 植物遺傳資源學(xué)報, 2019, 20(1): 48-59.

    [10] Xia W, Xiao Y, Liu Z, et al. Development of gene-based simple sequence repeat markers for association analysis in Cocos nucifera[J]. Molecular Breeding, 2014, 34(2): 525-535.

    [11] Xiao Y, Luo Y, Yang Y D, et al. Development of microsa-tellite markers in Cocos nucifera and their application in evaluating the level of genetic diversity of Cocos nucifera[J]. Plant Omics, 2013, 6(3): 193 -200.

    [12] 周麗霞, 吳 ?翼, 肖 ?勇. 基于SSR分子標(biāo)記的油棕遺傳多樣性分析[J]. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報, 2017, 48(2): 216-221.

    [13] 任軍方. 利用ISSR標(biāo)記對海南保亭檳榔遺傳多樣性的研究[D]. ??冢?海南大學(xué), 2010.

    [14] 齊 ?蘭, 黃麗云, 王 ?澤, 等. 正交設(shè)計優(yōu)化檳榔SSR-PCR反應(yīng)體系及引物篩選[J]. 分子植物育種, 2019, 17(4): 1264-1269.

    [15] 樊文強, 蓋紅梅, 孫 ?鑫, 等. SSR數(shù)據(jù)格式轉(zhuǎn)換軟件DataFormater[J]. 分子植物育種, 2016, 14(1): 265-270.

    [16] Yeh F C, Boyle T J. Population genetic analysis of co-dominant and dominant markers and quantitative traits[J]. Belgian Journal of Botany, 1997, 129: 157.

    [17] Liu K, Muse S V. Powermarker: An integrated analysis environment for genetic marker data[J]. Bioinformatics, 2005, 21(9): 2128-2129.

    [18] Rohlf F J. NTSYS-pc: Numerical taxonomy and multi-variate analysis system[M]. New York: Exeter Software, Setauket, 1992.

    [19] Balasimha D, Rajagopal V. Arecanut[M]. Kasaragod: COCRI, 2004.

    [20] 劉慧娟. 海南檳榔種質(zhì)遺傳多樣性與檳榔黃化病發(fā)生關(guān)系研究[D]. 海口: 海南大學(xué), 2010.

    [21] Hu C H, Huang C, Hung K H. Isolation and characterization of polymorphic microsatellite loci from Areca catechu (Arecaceae) using PCR-based isolation of microsatellite arrays[J]. Molecular Ecology Resources, 2009, 9(2): 658-660.

    [22] Sankaran M, Chandrasekar P, Singh D R, et al. Assessment of genetic diversity among arecanut accessions by using RAPD markers[J]. Indian Journal of Horticulture, 2013, 70(3): 428-430.

    [23] Bharath B G, Ananda K S, Rijith J, et al. Studies on genetic relationships and diversity in arecanut (Areca catechu L.) germplasm utilizing RAPD markers[J]. Journal of Plantation Crops, 2015, 43(2): 117-125.

    [24] Ramaswamy M, Smita N, Naganeeswaranb A, et al. Tran-scriptome sequencing and de novo assembly in arecanut, Areca catechu L elucidates the secondary metabolite path-way genes[J]. Biotechnology Reports, 2018, 17: 63-69.

    責(zé)任編輯:謝龍蓮

    猜你喜歡
    遺傳多樣性檳榔聚類分析
    5月檳榔市場監(jiān)測分析
    8月海南氣候動蕩 農(nóng)作物減產(chǎn)劇增
    6月檳榔市場監(jiān)測分析
    讀書文摘(2017年10期)2017-10-16
    茄子種質(zhì)資源農(nóng)藝性狀遺傳多樣性分析
    農(nóng)村居民家庭人均生活消費支出分析
    基于省會城市經(jīng)濟發(fā)展程度的實證分析
    基于聚類分析的互聯(lián)網(wǎng)廣告投放研究
    “縣級供電企業(yè)生產(chǎn)經(jīng)營統(tǒng)計一套”表輔助決策模式研究
    18禁美女被吸乳视频| 香蕉av资源在线| 国产真实伦视频高清在线观看 | 欧美+亚洲+日韩+国产| 亚洲精品亚洲一区二区| 亚洲无线观看免费| 国产成人av激情在线播放| 亚洲一区二区三区不卡视频| 中文资源天堂在线| 麻豆一二三区av精品| 天堂网av新在线| 精品一区二区三区av网在线观看| 精品日产1卡2卡| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 精品久久久久久成人av| av女优亚洲男人天堂| 亚洲五月婷婷丁香| 国产黄色小视频在线观看| 午夜福利免费观看在线| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 老汉色av国产亚洲站长工具| 一个人观看的视频www高清免费观看| 国产成人av教育| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美 | 欧美zozozo另类| 又爽又黄无遮挡网站| 成人一区二区视频在线观看| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 国产老妇女一区| 国产免费男女视频| 看片在线看免费视频| 青草久久国产| 午夜福利视频1000在线观看| 欧美乱妇无乱码| 在线观看日韩欧美| 亚洲成人久久爱视频| bbb黄色大片| 可以在线观看的亚洲视频| 在线观看日韩欧美| 久久久国产成人精品二区| 久久伊人香网站| 欧美不卡视频在线免费观看| 婷婷六月久久综合丁香| 禁无遮挡网站| 可以在线观看毛片的网站| 国产一区二区三区视频了| 丰满人妻一区二区三区视频av | 欧美乱色亚洲激情| 国产男靠女视频免费网站| 成人特级av手机在线观看| 欧美日韩福利视频一区二区| 国产在线精品亚洲第一网站| 91久久精品电影网| 麻豆国产97在线/欧美| 午夜精品在线福利| 99热精品在线国产| 亚洲精品在线观看二区| 免费大片18禁| 婷婷丁香在线五月| 国产老妇女一区| 午夜免费观看网址| 久久午夜亚洲精品久久| 国产激情偷乱视频一区二区| 成人特级黄色片久久久久久久| 成人国产一区最新在线观看| 色综合站精品国产| 岛国在线免费视频观看| svipshipincom国产片| 亚洲av二区三区四区| 亚洲片人在线观看| 国产亚洲av嫩草精品影院| 国产色爽女视频免费观看| 亚洲成人免费电影在线观看| 国产一区二区在线av高清观看| 亚洲国产色片| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 国产av在哪里看| 亚洲性夜色夜夜综合| 最新在线观看一区二区三区| 手机成人av网站| 啦啦啦免费观看视频1| 18禁在线播放成人免费| 国产久久久一区二区三区| 一个人看的www免费观看视频| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 亚洲七黄色美女视频| 人妻久久中文字幕网| 日韩精品中文字幕看吧| 亚洲av免费在线观看| 午夜精品在线福利| 国产亚洲精品一区二区www| 国产野战对白在线观看| 一夜夜www| 色av中文字幕| 成年女人看的毛片在线观看| 亚洲熟妇熟女久久| 美女cb高潮喷水在线观看| 亚洲第一电影网av| 国产av麻豆久久久久久久| 亚洲国产精品久久男人天堂| 免费在线观看成人毛片| 一级黄片播放器| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 51国产日韩欧美| bbb黄色大片| 午夜精品一区二区三区免费看| 欧美最黄视频在线播放免费| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 18+在线观看网站| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 亚洲电影在线观看av| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 人妻夜夜爽99麻豆av| 国产一级毛片七仙女欲春2| 大型黄色视频在线免费观看| 国产一区二区在线观看日韩 | 18禁在线播放成人免费| 18美女黄网站色大片免费观看| 久久九九热精品免费| 无人区码免费观看不卡| 狂野欧美激情性xxxx| 国产精品亚洲av一区麻豆| 校园春色视频在线观看| 日本黄色片子视频| 成人亚洲精品av一区二区| 欧美丝袜亚洲另类 | 一个人免费在线观看的高清视频| 午夜亚洲福利在线播放| 亚洲成av人片免费观看| 99久国产av精品| av专区在线播放| 亚洲色图av天堂| 色哟哟哟哟哟哟| 婷婷六月久久综合丁香| 免费观看的影片在线观看| 日韩大尺度精品在线看网址| 久久国产乱子伦精品免费另类| 99国产精品一区二区蜜桃av| 国产欧美日韩精品一区二区| avwww免费| 桃红色精品国产亚洲av| 久久久久久久久中文| 亚洲精品成人久久久久久| 一个人观看的视频www高清免费观看| 九色国产91popny在线| 国产乱人视频| 欧美在线一区亚洲| 免费人成在线观看视频色| 婷婷精品国产亚洲av在线| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 两人在一起打扑克的视频| 国产精品永久免费网站| 国产在线精品亚洲第一网站| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国产毛片a区久久久久| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 国产高清激情床上av| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 国产亚洲av嫩草精品影院| 一本一本综合久久| 亚洲精品456在线播放app | 亚洲国产精品合色在线| 国产伦精品一区二区三区四那| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 在线天堂最新版资源| 神马国产精品三级电影在线观看| 精品国产三级普通话版| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 99在线人妻在线中文字幕| 国产高清有码在线观看视频| 男人的好看免费观看在线视频| 精品久久久久久成人av| 国产av麻豆久久久久久久| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 亚洲成人免费电影在线观看| 欧美又色又爽又黄视频| 88av欧美| 久久草成人影院| 日本黄色视频三级网站网址| 一夜夜www| 99热这里只有是精品50| eeuss影院久久| 好男人在线观看高清免费视频| 在线播放无遮挡| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 欧美不卡视频在线免费观看| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 亚洲不卡免费看| 国产高潮美女av| 国产黄色小视频在线观看| 国产精品一区二区免费欧美| 午夜福利欧美成人| 一级黄片播放器| 免费av不卡在线播放| 99在线人妻在线中文字幕| 老司机午夜福利在线观看视频| 亚洲电影在线观看av| 俄罗斯特黄特色一大片| xxx96com| 午夜福利18| 日韩高清综合在线| 国产探花极品一区二区| 一二三四社区在线视频社区8| 少妇的丰满在线观看| 国产午夜福利久久久久久| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 亚洲国产精品久久男人天堂| 亚洲自拍偷在线| 国产亚洲精品久久久com| 一本综合久久免费| 欧美黑人欧美精品刺激| 又爽又黄无遮挡网站| 国产午夜福利久久久久久| 免费观看人在逋| 亚洲在线观看片| 色在线成人网| 国产麻豆成人av免费视频| 激情在线观看视频在线高清| 极品教师在线免费播放| 高潮久久久久久久久久久不卡| 日韩欧美精品v在线| 欧美乱妇无乱码| 亚洲欧美日韩东京热| 老汉色av国产亚洲站长工具| 色尼玛亚洲综合影院| 欧美又色又爽又黄视频| 久久午夜亚洲精品久久| 精品不卡国产一区二区三区| 69av精品久久久久久| 真人做人爱边吃奶动态| 国产高清视频在线观看网站| 欧美一级毛片孕妇| 欧美+亚洲+日韩+国产| 免费看十八禁软件| 天天一区二区日本电影三级| 国产一区二区激情短视频| 亚洲男人的天堂狠狠| 两个人的视频大全免费| www.www免费av| 人人妻人人看人人澡| 丰满的人妻完整版| 人妻久久中文字幕网| 91字幕亚洲| 久久精品91无色码中文字幕| www日本在线高清视频| 99在线人妻在线中文字幕| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 久久九九热精品免费| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 哪里可以看免费的av片| 国产综合懂色| 国产精品av视频在线免费观看| 国产中年淑女户外野战色| 欧美区成人在线视频| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 18+在线观看网站| 久久久久久久久久黄片| 亚洲久久久久久中文字幕| 亚洲精品在线观看二区| 免费大片18禁| 三级毛片av免费| svipshipincom国产片| h日本视频在线播放| 国内揄拍国产精品人妻在线| 色播亚洲综合网| 久久人妻av系列| 欧美日韩综合久久久久久 | 午夜免费激情av| 99久国产av精品| 久久久久久人人人人人| 免费观看的影片在线观看| 激情在线观看视频在线高清| 男女之事视频高清在线观看| 波多野结衣巨乳人妻| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 国产综合懂色| 国产精品久久久久久精品电影| 国产单亲对白刺激| 国产三级在线视频| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 久久6这里有精品| 少妇的逼水好多| 亚洲av美国av| 级片在线观看| 免费av毛片视频| 国产v大片淫在线免费观看| 好男人电影高清在线观看| 黄片大片在线免费观看| 欧美最新免费一区二区三区 | 桃红色精品国产亚洲av| 国产精品亚洲一级av第二区| 欧美成人一区二区免费高清观看| 99久久九九国产精品国产免费| 俄罗斯特黄特色一大片| 在线观看舔阴道视频| 天堂√8在线中文| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 国产一区在线观看成人免费| 99久久综合精品五月天人人| 丁香欧美五月| 国产v大片淫在线免费观看| av天堂在线播放| 99在线视频只有这里精品首页| 精品不卡国产一区二区三区| 国模一区二区三区四区视频| 成年版毛片免费区| 欧美在线一区亚洲| 欧美日韩精品网址| 免费人成视频x8x8入口观看| 伊人久久精品亚洲午夜| 我要搜黄色片| 国产探花极品一区二区| а√天堂www在线а√下载| 欧美高清成人免费视频www| АⅤ资源中文在线天堂| 怎么达到女性高潮| АⅤ资源中文在线天堂| 脱女人内裤的视频| 国产欧美日韩精品亚洲av| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 国产高清激情床上av| 欧美成人免费av一区二区三区| 亚洲真实伦在线观看| 午夜激情欧美在线| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 99热6这里只有精品| 日韩免费av在线播放| 午夜精品在线福利| 我的老师免费观看完整版| 俺也久久电影网| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 久久久久国内视频| 在线天堂最新版资源| 中国美女看黄片| 亚洲av二区三区四区| 91久久精品国产一区二区成人 | 淫秽高清视频在线观看| 99久久精品一区二区三区| 久久精品影院6| 最近最新中文字幕大全电影3| 国产精品久久久久久精品电影| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 欧美在线黄色| 日韩欧美在线二视频| 午夜a级毛片| 特大巨黑吊av在线直播| 男女下面进入的视频免费午夜| 99久久综合精品五月天人人| avwww免费| 欧美另类亚洲清纯唯美| 亚洲美女视频黄频| 精品久久久久久久久久久久久| 在线观看一区二区三区| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 久久精品国产自在天天线| 成熟少妇高潮喷水视频| 一区福利在线观看| 国产av一区在线观看免费| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 亚洲av电影不卡..在线观看| 日本 av在线| 内地一区二区视频在线| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 日本三级黄在线观看| 午夜a级毛片| 内地一区二区视频在线| 国产精品一及| 欧美一级a爱片免费观看看| 国产高清视频在线观看网站| 国产精品野战在线观看| 舔av片在线| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 天天躁日日操中文字幕| 欧美区成人在线视频| 99riav亚洲国产免费| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 国模一区二区三区四区视频| 国产极品精品免费视频能看的| 欧美乱妇无乱码| 老汉色∧v一级毛片| 麻豆成人午夜福利视频| 国产爱豆传媒在线观看| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 美女 人体艺术 gogo| 欧美又色又爽又黄视频| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 村上凉子中文字幕在线| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| av欧美777| 亚洲国产中文字幕在线视频| 久久久久久久久大av| 国产色爽女视频免费观看| 国产精品一区二区三区四区久久| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 99久久九九国产精品国产免费| 老鸭窝网址在线观看| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 高清毛片免费观看视频网站| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 国产美女午夜福利| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| www国产在线视频色| 男人舔女人下体高潮全视频| 亚洲第一电影网av| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 哪里可以看免费的av片| 看黄色毛片网站| 深爱激情五月婷婷| 国产毛片a区久久久久| 一个人观看的视频www高清免费观看| 免费看光身美女| 欧美激情在线99| 99国产精品一区二区三区| 免费人成视频x8x8入口观看| 精品国产亚洲在线| 熟女人妻精品中文字幕| 9191精品国产免费久久| 亚洲内射少妇av| 欧美成人免费av一区二区三区| 老司机在亚洲福利影院| 亚洲av电影在线进入| 国产综合懂色| av欧美777| 成年免费大片在线观看| 悠悠久久av| 亚洲五月天丁香| 久久久久免费精品人妻一区二区| 99热只有精品国产| xxxwww97欧美| 国产黄片美女视频| 综合色av麻豆| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 日韩欧美 国产精品| 国产精品久久视频播放| 岛国在线观看网站| 国产亚洲精品久久久com| 日本免费一区二区三区高清不卡| 最新在线观看一区二区三区| 午夜a级毛片| 国产色爽女视频免费观看| 麻豆国产97在线/欧美| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 丝袜美腿在线中文| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 国产精品久久久人人做人人爽| 欧美国产日韩亚洲一区| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 色综合站精品国产| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 色播亚洲综合网| 欧美最新免费一区二区三区 | 中文字幕熟女人妻在线| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 国产99白浆流出| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 日韩欧美在线二视频| 欧美黑人欧美精品刺激| 日韩欧美国产在线观看| 成年女人永久免费观看视频| 日韩国内少妇激情av| 最近最新免费中文字幕在线| 悠悠久久av| 最新在线观看一区二区三区| 99久久精品热视频| 免费观看精品视频网站| 最近视频中文字幕2019在线8| 日本熟妇午夜| www.www免费av| 亚洲专区中文字幕在线| 狂野欧美激情性xxxx| 一进一出好大好爽视频| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 18禁美女被吸乳视频| 亚洲成人免费电影在线观看| 热99re8久久精品国产| 啦啦啦免费观看视频1| 最近最新中文字幕大全电影3| 成人特级av手机在线观看| 岛国在线观看网站| tocl精华| 久久人人精品亚洲av| 国产精品永久免费网站| 成年女人永久免费观看视频| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 久久午夜亚洲精品久久| 午夜福利18| 级片在线观看| 一个人免费在线观看的高清视频| 精品福利观看| 日韩有码中文字幕| 美女大奶头视频| 黑人欧美特级aaaaaa片| 亚洲性夜色夜夜综合| 少妇熟女aⅴ在线视频| 禁无遮挡网站| 村上凉子中文字幕在线| 成熟少妇高潮喷水视频| 久久精品影院6| 99国产精品一区二区三区| 国产亚洲精品久久久com| 欧美日本亚洲视频在线播放| 精品久久久久久久久久久久久| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 99久久九九国产精品国产免费| 精品一区二区三区视频在线 | 国产aⅴ精品一区二区三区波| 国产精品爽爽va在线观看网站| 国产黄片美女视频| 女警被强在线播放| 热99在线观看视频| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 岛国在线免费视频观看| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 91麻豆av在线| 亚洲熟妇熟女久久| 日韩精品中文字幕看吧| 亚洲人成电影免费在线| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 成人欧美大片| 夜夜爽天天搞| 亚洲专区中文字幕在线| 日韩欧美在线二视频| 久久久久久久午夜电影| 波野结衣二区三区在线 | 不卡一级毛片| 99久国产av精品| 国产av不卡久久| 国产精品乱码一区二三区的特点| 国产欧美日韩一区二区精品| 午夜福利欧美成人| 国产激情偷乱视频一区二区| 亚洲五月天丁香| 神马国产精品三级电影在线观看| 日韩欧美国产在线观看| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 国产午夜福利久久久久久| 又爽又黄无遮挡网站| 亚洲精品色激情综合| 国产探花极品一区二区| 午夜精品久久久久久毛片777| 男人舔女人下体高潮全视频| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 最近最新免费中文字幕在线| 99国产极品粉嫩在线观看| 国产精品永久免费网站| av在线天堂中文字幕| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 全区人妻精品视频| 美女高潮的动态| www.999成人在线观看| 伊人久久精品亚洲午夜| 麻豆国产av国片精品| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 99精品在免费线老司机午夜| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 亚洲成人久久性| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 90打野战视频偷拍视频| 欧美日韩综合久久久久久 | 免费电影在线观看免费观看| 国产免费男女视频| 成人性生交大片免费视频hd| 国产精品久久久人人做人人爽| 中文资源天堂在线| 国产精品嫩草影院av在线观看 | av福利片在线观看| 日本黄色片子视频| 免费高清视频大片| 国产黄片美女视频| 夜夜夜夜夜久久久久| 国产成年人精品一区二区| 亚洲国产精品合色在线| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 美女黄网站色视频| 亚洲欧美日韩东京热| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 国产精品免费一区二区三区在线| 亚洲欧美日韩东京热| 一进一出抽搐动态| 国产精品免费一区二区三区在线| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 精品免费久久久久久久清纯| 欧美一区二区精品小视频在线| 在线播放国产精品三级| 日本免费a在线| 日韩免费av在线播放| 日韩欧美国产在线观看| 日日干狠狠操夜夜爽| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 在线播放国产精品三级| 日本免费a在线| 亚洲专区中文字幕在线| 最新美女视频免费是黄的| 亚洲av熟女| 国产av在哪里看| 欧美最黄视频在线播放免费| 欧美成人一区二区免费高清观看| 国产真实伦视频高清在线观看 | 国产精品一区二区免费欧美| 91久久精品国产一区二区成人 | 国产美女午夜福利| 日韩欧美三级三区| 免费无遮挡裸体视频|