血清CTRP9、sRANKL、cathepsin S水平與冠心病嚴(yán)重程度的關(guān)系研究

石秀彩，馬妹花，張海娟，吳海濤，邵麗莉

邯鄲市第一醫(yī)院心血管內(nèi)科，河北邯鄲 056001

冠心病是臨床常見(jiàn)的嚴(yán)重心血管疾病，多發(fā)于中老年人，發(fā)病率呈逐年增長(zhǎng)的趨勢(shì)，嚴(yán)重危害人們的生命健康[1]。冠心病的病理特征為冠狀動(dòng)脈粥樣硬化形成的斑塊破裂/游離，形成動(dòng)脈血栓造成動(dòng)脈管腔堵塞，進(jìn)而發(fā)展為心肌缺血[2]。臨床研究表明，脂肪細(xì)胞因子在機(jī)體血壓、胰島素敏感程度、纖溶活性的調(diào)節(jié)中起著重要作用，且與冠心病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[3]。也有研究表明，在冠心病的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中，炎性反應(yīng)與粥樣硬化斑塊的產(chǎn)生、惡化、碎裂密切相關(guān)[4]。因此，研究炎性因子、脂肪細(xì)胞因子的表達(dá)水平與冠心病發(fā)生、發(fā)展及嚴(yán)重程度之間的關(guān)系對(duì)疾病的防治具有重要意義[5]。組織蛋白酶S(cathepsin S) 作為一種半胱氨酸蛋白，在人體內(nèi)可以通過(guò)降解膠原蛋白和彈力蛋白來(lái)加速血管壁重構(gòu)。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，cathepsin S能夠調(diào)節(jié)血管炎性反應(yīng)，與動(dòng)脈粥樣硬化、冠心病、心力衰竭等心血管疾病的發(fā)生密切相關(guān)[6]。腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白9(CTRP9)作為一種和脂聯(lián)素高度同源的新型脂肪細(xì)胞因子，主要由心血管組織和脂肪組織分泌，其在保護(hù)心肌、改善內(nèi)皮功能、舒張血管等方面發(fā)揮作用，CTRP9可以通過(guò)激活A(yù)MPK通路來(lái)減少心肌細(xì)胞凋亡，縮小心肌缺血再灌注后心肌梗死范圍；亦能通過(guò)AdipoR1/AMPK/eNOS/NO信號(hào)通路促進(jìn)血管舒張，抑制冠心病的發(fā)生、發(fā)展[7]?？扇苄院艘蜃?κB受體活化因子配體(sRANKL)是腫瘤壞死因子(TNF)受體配體家族成員，主要由T淋巴細(xì)胞和成骨細(xì)胞分泌，可通過(guò)誘導(dǎo)單核、巨噬細(xì)胞聚集-浸潤(rùn)的途徑來(lái)?yè)p傷血管，促進(jìn)粥樣斑塊生長(zhǎng)，誘導(dǎo)血管細(xì)胞凋亡并促進(jìn)血管鈣化，引起冠心病的發(fā)生、發(fā)展[8]。本研究對(duì)本院收治的冠心病患者進(jìn)行研究，探討血清CTRP9、sRANKL、cathepsin S水平與冠心病發(fā)生、發(fā)展及疾病嚴(yán)重程度之間關(guān)系，以期為冠心病的臨床治療提供研究基礎(chǔ)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取本院2018年1月至2019年12月收治的冠心病患者180例作為觀察組。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合美國(guó)心臟病學(xué)會(huì)2007年冠心病診斷標(biāo)準(zhǔn)[9]；(2)肝、腎功能正常；(3)無(wú)嚴(yán)重惡性腫瘤。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)既往接受冠狀動(dòng)脈介入治療；(2)入組前3個(gè)月內(nèi)接受過(guò)抗炎或抗凝治療；(3)甲狀腺功能異常；(4)合并嚴(yán)重惡性腫瘤或全身感染；(5)主動(dòng)申請(qǐng)退出本研究。另選取同期無(wú)冠心病家族史的體檢健康者100例作為對(duì)照組。觀察組男79例，女101例，年齡(56.38±7.23)歲，體質(zhì)量指數(shù)(24.08±1.13)kg/m2，吸煙史71例，飲酒史32例。對(duì)照組男41例，女59例，年齡(57.11±6.94)歲，體質(zhì)量指數(shù)(23.99±1.09)kg/m2，吸煙史38例，飲酒史21例。兩組一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有受試者對(duì)本研究知情并簽署知情同意書(shū)。

1.2方法 在受試者入組后采集空腹靜脈血，離心后收集血清，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)血清CTRP9、sRANKL、cathepsin S水平。所用試劑盒均購(gòu)買(mǎi)自杭州聯(lián)科生物科技有限公司并嚴(yán)格遵照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。通過(guò)彩超檢查評(píng)估冠心病患者血管病變支數(shù)，并分為單支病變組、雙支病變組及三支病變組。分析CTRP9、sRANKL、cathepsin S鑒別診斷冠心病的價(jià)值，并采用Logistic回歸模型分析CTRP9、sRANKL、cathepsin S與疾病嚴(yán)重程度的關(guān)系。

2 結(jié) 果

2.1兩組血清CTRP9、sRANKL、cathepsin S水平比較 觀察組血清CTRP9及sRANKL水平明顯低于對(duì)照組，cathepsin S水平明顯高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組血清CTRP9、sRANKL、cathepsin S水平比較

2.2不同血管病變支數(shù)患者血清CTRP9、sRANKL、cathepsin S水平比較 單支病變組、雙支病變組及三支病變組患者血清CTRP9、sRANKL、cathepsin S水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，其中單支病變組血清CTRP9及sRANKL水平最高，cathepsin S水平最低。見(jiàn)表2。

表2 不同血管病變支數(shù)患者血清CTRP9、sRANKL、cathepsin S水平比較

2.3CTRP9、sRANKL、cathepsin S與患者血管病變嚴(yán)重程度的關(guān)系 Logistic回歸分析結(jié)果顯示，CTRP9、sRANKL及cathepsin S是患者病變嚴(yán)重程度的獨(dú)立影響因素(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 CTRP9、sRANKL、cathepsin S與患者血管病變嚴(yán)重程度的關(guān)系

2.4各指標(biāo)對(duì)冠心病的診斷價(jià)值 ROC曲線分析結(jié)果顯示，CTRP9、sRANKL、cathepsin S及三者聯(lián)合應(yīng)用診斷冠心病的敏感度、特異度均較高，ROC曲線下面積(AUC)均大于0.85。見(jiàn)表4及圖1。

表4 各指標(biāo)對(duì)冠心病的鑒別診斷價(jià)值

圖1 各指標(biāo)診斷冠心病的ROC曲線

3 討 論

冠心病是臨床常見(jiàn)的疾病，多為冠狀動(dòng)脈粥樣硬化斑塊破潰后產(chǎn)生的急癥，而斑塊破裂則是在不穩(wěn)定斑塊的基礎(chǔ)上發(fā)生的，斑塊的分布形態(tài)及組成成分較為復(fù)雜，且在斑塊穩(wěn)定性中起著決定性作用，因而對(duì)冠心病患者疾病嚴(yán)重程度進(jìn)行及時(shí)有效的評(píng)估具有十分重要的意義[10]。有學(xué)者指出，動(dòng)脈粥樣硬化斑塊由覆蓋的纖維帽及脂質(zhì)粥樣物質(zhì)組成，其中富含脂質(zhì)的泡沫細(xì)胞、膽固醇結(jié)晶、細(xì)胞碎片是組成脂質(zhì)粥樣物質(zhì)的核心，斑塊核心成分、大小、纖維帽厚度決定斑塊穩(wěn)定性，不穩(wěn)定斑塊多數(shù)為偏心性，其中偏心性纖維帽邊緣較薄，可觀察到伴隨出現(xiàn)浸潤(rùn)性大量炎性細(xì)胞，如泡沫細(xì)胞、巨噬細(xì)胞。臨床上，及早對(duì)冠心病患者的發(fā)生、發(fā)展及疾病嚴(yán)重程度進(jìn)行評(píng)估，有助于及時(shí)采取手段進(jìn)行干預(yù)，具有重要的臨床指導(dǎo)意義[11-12]。傳統(tǒng)評(píng)估冠心病患者病情的方法主要為有創(chuàng)性檢查，包括選擇性冠脈造影術(shù)、血管內(nèi)超聲術(shù)、光學(xué)相干斷層成像技術(shù)等，但其臨床接受程度較低，臨床應(yīng)用受限，因而選擇無(wú)創(chuàng)檢測(cè)手段對(duì)冠心病患者病情進(jìn)行評(píng)估具有重要意義[13]。

CTRP9是體內(nèi)重要的同脂聯(lián)素(APN)結(jié)構(gòu)接近的旁系同源蛋白，在脂肪細(xì)胞中CTRP9表達(dá)水平較低，但在心臟細(xì)胞中其表達(dá)水平相對(duì)較高[14]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示，CTRP9可有效調(diào)節(jié)糖代謝并發(fā)揮抗動(dòng)脈粥樣硬化作用，降低肝細(xì)胞中的脂質(zhì)堆積，調(diào)節(jié)胰島素介導(dǎo)的葡萄糖攝取，改善新陳代謝[15]。有研究發(fā)現(xiàn)，RANK可與RANKL競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合，二者具有較高的親和力，RANK與RANKL相互作用可有效誘導(dǎo)核轉(zhuǎn)錄因子-κB向細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)移，誘發(fā)細(xì)胞內(nèi)級(jí)聯(lián)反應(yīng)信號(hào)[16]。RANKL存在跨膜結(jié)合蛋白和游離型多肽兩種形式，有研究顯示，隨著心臟病患者病情加重，其功能型RANKL結(jié)合能力增強(qiáng)，sRANKL水平降低，急性心血管事件發(fā)生與血清RANKL水平密切相關(guān)[17]。cathepsin S蛋白可有效誘導(dǎo)粥樣斑塊內(nèi)血管新生、降解細(xì)胞外基質(zhì)、增加斑塊不穩(wěn)定性、促進(jìn)泡沫細(xì)胞形成[18]。cathepsin S可有效抑制內(nèi)皮細(xì)胞蛋白酶激活受體，后者可以誘發(fā)內(nèi)皮功能不全并導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化，減少巨噬細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)外流，并可能加速泡沫細(xì)胞形成。

本研究結(jié)果顯示，觀察組血清CTRP9及sRANKL水平明顯低于對(duì)照組，cathepsin S水平明顯高于對(duì)照組；進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，血管單支病變、雙支病變及三支病變組患者血清CTRP9、sRANKL、cathepsin S水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，其中單支病變組CTRP9及sRANKL水平最高，cathepsin S水平最低。Logistic回歸模型分析結(jié)果顯示，CTRP9、sRANKL及cathepsin S是冠心病患者疾病嚴(yán)重程度的獨(dú)立影響因素。此外，各指標(biāo)診斷冠心病的ROC曲線分析結(jié)果顯示，CTRP9、sRANKL、cathepsin S鑒別診斷冠心病的敏感度及特異度較高，且AUC>0.85，提示CTRP9、sRANKL、cathepsin S及三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)冠心病有較好的鑒別診斷價(jià)值。此外，sRANKL及cathepsin S水平異?？赡芗又鼗颊唧w內(nèi)炎性反應(yīng)及增加動(dòng)脈粥樣硬化纖維帽不穩(wěn)定性。

綜上所述，血清CTRP9、sRANKL、cathepsin S水平是影響冠心病患者病情嚴(yán)重程度的獨(dú)立影響因素，可作為診斷冠心病的重要指標(biāo)。但本研究并未對(duì)患者進(jìn)行長(zhǎng)期隨訪，有待后續(xù)深入研究分析。