羅氏Cobas 8000 e602檢測性激素6項(xiàng)的性能驗(yàn)證

張洪艷，王紅英

江蘇省蘇州市吳江區(qū)兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科,江蘇蘇州 215129

根據(jù)ISO15189 CNAS-CL03:2012《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則》的規(guī)定，在開展新的檢測項(xiàng)目，更換檢測系統(tǒng)或改變檢測試劑盒廠商時(shí)，實(shí)驗(yàn)室需對其相關(guān)方法學(xué)分析性能進(jìn)行驗(yàn)證，對廠商提供的評價(jià)資料主要性能進(jìn)行確認(rèn)，并每年定期對儀器進(jìn)行性能驗(yàn)證[1]。

Cobas 8000檢測系統(tǒng)為生化免疫分析一體的檢測設(shè)備，具有高效的分析能力。本室采用羅氏Cobas 8000 e602電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀進(jìn)行性激素6項(xiàng)檢測。為評估該檢測系統(tǒng)是否滿足臨床診療的需求，本文按照美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(CLSI)的標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)參考文獻(xiàn)[2]對檢測項(xiàng)目進(jìn)行性能驗(yàn)證，包括正確度、精密度、參考區(qū)間、線性范圍的驗(yàn)證。現(xiàn)將孕酮(PROG)、雌二醇(E2)、黃體生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)、泌乳素(PRL)及睪酮(T)的性能驗(yàn)證結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1標(biāo)本來源 本院門診、住院或健康體檢者的新鮮血清，標(biāo)本要求無溶血、脂血及黃疸。

1.2儀器與試劑 德國羅氏公司Cobas 8000 全自動免疫分析模組中e602電化學(xué)發(fā)光免疫分析模塊。羅氏原裝試劑PROG批號：45262154，E2批號：56325120，LH批號：26542527，F(xiàn)SH批號：56215201，PRL批號：22562542，T批號：25621058，用同時(shí)期配套羅氏質(zhì)控品及校準(zhǔn)品。

1.3方法

1.3.1儀器使用方法 按操作說明書的要求進(jìn)行系統(tǒng)維護(hù)保養(yǎng)，室內(nèi)質(zhì)控在控，然后再進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。

1.3.2精密度驗(yàn)證 將正常水平質(zhì)控、病理水平質(zhì)控每天各檢測3次，連續(xù)檢測5 d，各得15個(gè)檢測結(jié)果。收集實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，計(jì)算均值、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)(CV)。判斷標(biāo)準(zhǔn)：批內(nèi)精密度CV值<1/4允許總誤差(TEa)，批間精密度CV值<1/3TEa(25%)，TEa為25%，為通過。

1.3.3正確度驗(yàn)證 用國家衛(wèi)生健康委臨床檢驗(yàn)中心的室間質(zhì)評物，5個(gè)水平，均測3次，收集實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，求均值后與室間質(zhì)評的回報(bào)靶值比較計(jì)算其偏移[3]。判斷標(biāo)準(zhǔn)：偏倚值<1/2TEa，TEa為25%，能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)(PT)≥80%,表示正確度合格,為通過。

1.3.4線性范圍驗(yàn)證 依據(jù)NCCLS EP6-A2對線性范圍進(jìn)行驗(yàn)證。選擇足量的濃度盡量達(dá)到線性上限及線性下限的標(biāo)本各1例，高值標(biāo)本可用通用稀釋液或低值標(biāo)本稀釋成系列不同濃度的評價(jià)標(biāo)本；最好有6個(gè)或以上系列濃度的實(shí)驗(yàn)標(biāo)本，數(shù)據(jù)點(diǎn)數(shù)不得低于5個(gè)，濃度范圍遍布整個(gè)預(yù)期可報(bào)告范圍。將高值標(biāo)本(H)與低值標(biāo)本(L)以L、1H∶4L、2H∶3L、3H∶2L、4H∶1L，H的體積比例混合，每個(gè)濃度重復(fù)檢測3次，記錄結(jié)果。盡量在同一批次內(nèi)完成所有樣品的檢測，所有樣品應(yīng)當(dāng)以隨機(jī)的順序進(jìn)行檢測。

以直接測定結(jié)果計(jì)算得出的相應(yīng)濃度為Y，以通過稀釋測定的結(jié)果為X，經(jīng)回歸方法學(xué)統(tǒng)計(jì)，得到R2值。評判標(biāo)準(zhǔn)：以預(yù)期濃度為Y，測定均值為X，進(jìn)行線性回歸，求得方程Y=aX+b。a在0.9～1.1且R2≥0.95，b接近于0，所有數(shù)據(jù)在范圍內(nèi)則線性范圍通過驗(yàn)證。

1.3.5參考區(qū)間驗(yàn)證 收集20例健康人血清標(biāo)本及時(shí)檢測，要求其年齡、性別等均勻分布，對參考范圍進(jìn)行驗(yàn)證，只允許10%的數(shù)據(jù)超過所驗(yàn)證的參考范圍，否則需重新建立參考范圍。檢測前質(zhì)量控制要求：(1)體檢中心篩選合格候選個(gè)體；(2)標(biāo)本無肉眼可見溶血；(3)乙型肝炎表面抗原陰性，且于到達(dá)實(shí)驗(yàn)室后立即檢測。統(tǒng)計(jì)方式：通過率=測定結(jié)果在參考范圍內(nèi)的例數(shù)/總測定例數(shù)×100%，通過率≥90%為合格。

2 結(jié) 果

2.1精密度驗(yàn)證 精密度驗(yàn)證通過，見表1。

表1 批內(nèi)、批間精密度驗(yàn)證結(jié)果

2.2正確度驗(yàn)證 正確度驗(yàn)證通過，見表2。

表2 正確度驗(yàn)證統(tǒng)計(jì)結(jié)果

2.3線性范圍驗(yàn)證 線性范圍驗(yàn)證通過，見表3。

2.4參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果 所選20例體檢健康者，檢測結(jié)果有19例或20例在參考區(qū)間內(nèi)，即95%以上的結(jié)果在參考區(qū)間內(nèi)，參考區(qū)間的通過率在不同項(xiàng)目不同性別中均為100%，均符合≥90%的判斷驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)，該參考區(qū)間符合對健康人群的篩選，參考區(qū)間驗(yàn)證通過。

3 討 論

檢查性激素6項(xiàng)能夠大致判斷患者是否存在激素分泌異常，激素分泌異?？捎绊懟颊叩纳芰Α⑿陨钅芰?。目前，在社會壓力非常大的狀態(tài)下，女性月經(jīng)紊亂及不孕不育的患者數(shù)量呈明顯上升趨勢，故性激素6項(xiàng)檢查顯得尤為重要，而精確可靠的檢查結(jié)果能夠更好地滿足臨床醫(yī)生對疾病的診斷和治療要求。

檢測系統(tǒng)的驗(yàn)證項(xiàng)目通常包括正確度、精密度、線性范圍、參考區(qū)間等性能指標(biāo)。本研究結(jié)果表明，本實(shí)驗(yàn)室的各項(xiàng)指標(biāo)性能均驗(yàn)證通過，說明本實(shí)驗(yàn)室性激素6項(xiàng)檢測項(xiàng)目能為臨床提供準(zhǔn)確的檢測結(jié)果。據(jù)相關(guān)要求，醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室每年必須對所有檢測項(xiàng)目進(jìn)行1次驗(yàn)證，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。在實(shí)際工作中，本實(shí)驗(yàn)室已對目前所開展的18個(gè)電化學(xué)發(fā)光檢測項(xiàng)目進(jìn)行驗(yàn)證，以保證檢測結(jié)果達(dá)到質(zhì)量目標(biāo)要求。

精密度是在一定條件下所獲得的獨(dú)立的測定結(jié)果之間的一致性程度，以不精密度來間接表示，體現(xiàn)隨機(jī)誤差。本實(shí)驗(yàn)中各項(xiàng)批內(nèi)精密度及批間精密度均符合公認(rèn)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求[4-5]，能夠滿足臨床需求。

正確度是待測物的測定值與其真值的一致性程度，以偏倚來反映。筆者利用國家衛(wèi)生健康委臨床檢驗(yàn)中心的室間質(zhì)評物測量，將實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均值與室間質(zhì)評的回報(bào)靶值比較計(jì)算其偏移。結(jié)果顯示，本實(shí)驗(yàn)室性激素6項(xiàng)正確度均符合要求。

線性范圍就是同時(shí)檢測待檢項(xiàng)目上下限之間的不同濃度，看是否成線性關(guān)系，從而保證在該濃度范圍內(nèi)檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。以上線性范圍的驗(yàn)證可見，回歸方程a值均在0.9～1.1，且R2≥0.95,表明本儀器線性范圍良好，在線性范圍內(nèi)的檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠。不足之處在于，驗(yàn)證過程中缺乏極限的濃度要求，所以以后工作中仍需定期評審。

參考區(qū)間是指依據(jù)所有參考值的分布特性及臨床使用要求，選擇合適的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行歸納分析后確定的限值，包括參考上限和參考下限，90%以上的健康人群檢測結(jié)果在參考區(qū)間范圍內(nèi)，說明該參考區(qū)間符合對健康人群的篩選[6]。本研究中，參考區(qū)間驗(yàn)證均通過，說明本實(shí)驗(yàn)室的參考區(qū)間適用于健康人群篩查，符合臨床要求。

綜上所述，本實(shí)驗(yàn)室羅氏Cobas 8000 e602電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測性激素6項(xiàng)的性能驗(yàn)證均能達(dá)到相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)，能夠滿足臨床診斷和治療的需求[7]。