臨床標(biāo)本差異性對(duì)微生物檢驗(yàn)陽(yáng)性檢出結(jié)果的影響

王茜

在臨床當(dāng)中,微生物檢驗(yàn)實(shí)為其中的關(guān)鍵檢驗(yàn)項(xiàng)目,用途多樣,不僅用作診斷感染性疾病,而且還用于病情評(píng)估,能夠?yàn)楦腥绢?lèi)疾病病情評(píng)估、疾病診斷及預(yù)后預(yù)測(cè)等,提供準(zhǔn)確且可靠依據(jù),但需要指出的是,因微生物有著比較多的種類(lèi),以及比較復(fù)雜的檢驗(yàn)步驟,當(dāng)前所用到的微生物檢驗(yàn)技術(shù)的質(zhì)量已經(jīng)難以滿(mǎn)足現(xiàn)實(shí)需要,特別是臨床微生物檢驗(yàn)過(guò)程中取樣檢測(cè)標(biāo)本時(shí),仍未能得到規(guī)范化,臨床微生物檢驗(yàn)過(guò)程中,通常需要檢驗(yàn)多種臨床樣本,而臨床樣本不同,其在具體的微生物檢驗(yàn)結(jié)果上,也會(huì)存在著比較大的差異［1］。因此,采取切實(shí)措施,強(qiáng)化病原微生物檢測(cè)工作,提高陽(yáng)性檢出率,已經(jīng)成為臨床微生物檢驗(yàn)工作當(dāng)中的核心任務(wù)。本文圍繞以2018 年8 月～2020 年9 月為時(shí)間節(jié)點(diǎn),選取臨床標(biāo)本,測(cè)定其微生物陽(yáng)性率,然后進(jìn)行比較,從中剖析陽(yáng)性檢出率出現(xiàn)差異的主要原因,探討臨床微生物檢驗(yàn)工作當(dāng)中所存在的突出問(wèn)題,以期為感染性疾病控制提供幫助,現(xiàn)就此探討如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018 年8 月～2019 年8 月在本院進(jìn)行檢驗(yàn)的臨床標(biāo)本7850 份,2019 年9 月～2020 年9 月在本院進(jìn)行檢驗(yàn)的臨床標(biāo)本10609 份。在所有臨床標(biāo)本當(dāng)中,9578 份為呼吸道標(biāo)本,3529 份為腦脊液、胸腹水與血液樣本,954 份為大便標(biāo)本,4398 份其他非呼吸道標(biāo)本,包含中段尿、傷口分泌物、穿刺液等。所選取標(biāo)本在檢測(cè)前,均未被污染。

1.2 方法 如痰液樣本,在采集時(shí),需要在清晨完成,叮囑患者把痰液吐在帶蓋容器當(dāng)中(干燥無(wú)菌),采集量≥1 ml；如果是尿液樣本,需要在清晨進(jìn)行采集,對(duì)中段尿液進(jìn)行采集,采集量為5 ml。在采集血液樣本前,患者需要在采集前一天禁食(6 h),采集清晨采血(肘靜脈血),采集血量為5～10 ml。

把細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本接種到瓊脂培養(yǎng)基當(dāng)中,于特定溫度(35℃)下孵育,平板靜置72 h,接種普通肉湯管增菌,于孵育箱(35℃)中靜置48 h,如果沒(méi)有細(xì)菌生長(zhǎng),便為陰性；若發(fā)現(xiàn)存在細(xì)菌生長(zhǎng),即陽(yáng)性。依據(jù)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)范》,采用VITEK 2 Compact 型全自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析儀(法國(guó)梅里埃公司),依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化流程開(kāi)展各項(xiàng)操作,嚴(yán)格控制質(zhì)量。質(zhì)控菌株選用銅綠假單胞菌ATCC27853、大腸埃希菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌ATCC25923。

1.3 觀察指標(biāo) 比較兩個(gè)時(shí)間段呼吸道、血培養(yǎng)、其他非呼吸道、大便微生物標(biāo)本陽(yáng)性率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS21.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2018 年8 月～2019 年8 月呼吸 道、血培養(yǎng)、其他非呼吸道標(biāo)本以及合計(jì)樣本陽(yáng)性率均高于2019 年9月～2020 年9月,血培養(yǎng)標(biāo)本陽(yáng)性率低于2019 年9月～2020 年9 月,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。兩個(gè)時(shí)間段大便標(biāo)本比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩個(gè)時(shí)間段微生物標(biāo)本陽(yáng)性率比較［n,n(%)］

3 討論

伴隨信息技術(shù)的持續(xù)推新與完善,醫(yī)學(xué)微生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)在此背景下,正在變得越發(fā)具有微量化、微機(jī)化、自動(dòng)化,而且還朝向分子生物學(xué)領(lǐng)域不斷發(fā)展,已經(jīng)成為當(dāng)前臨床中診治感染性疾病的重要支撐,特別是傳染性疾病,其應(yīng)用價(jià)值更為凸顯。但需要指出的是,針對(duì)微生物檢驗(yàn)而言,其仍然無(wú)法從根本上滿(mǎn)足當(dāng)前臨床檢驗(yàn)的各種需求,而在各種原因當(dāng)中,最主要原因是臨床標(biāo)本檢驗(yàn)有著比較低的陽(yáng)性率。本文分兩個(gè)時(shí)間段對(duì)臨床標(biāo)本的微生物檢驗(yàn)陽(yáng)性率進(jìn)行比較,從中得知,在這兩個(gè)時(shí)間段內(nèi)所收集的臨床標(biāo)本,有著不同的微生物檢驗(yàn)陽(yáng)性率,究其原因,可能與如下因素相關(guān)：①采集微生物標(biāo)本存在不規(guī)范情況。有報(bào)道［2］指出,之所以會(huì)出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果不符合于臨床診斷的情況,有75%由分析前原因所致,其中,針對(duì)分析前原因而言,其主要包含標(biāo)本運(yùn)輸、患者準(zhǔn)備、檢驗(yàn)申請(qǐng)及標(biāo)本采集等,當(dāng)存在比較多的潛在因素,以及環(huán)節(jié)比較復(fù)雜時(shí),容易出現(xiàn)各種問(wèn)題。要想從根本上確保分析前質(zhì)量,需要由醫(yī)療機(jī)構(gòu)統(tǒng)一組織、執(zhí)行。對(duì)于臨床科室內(nèi)工作的醫(yī)務(wù)人員來(lái)講,其無(wú)論是對(duì)采集標(biāo)本的基本要求上,還是在所需注意事項(xiàng)上,均存在了解不足的情況,或者是未能?chē)?yán)格遵照采集標(biāo)本的基本要求來(lái)操作,其最終結(jié)果可能會(huì)引發(fā)標(biāo)本不合格情況,降低病原微生物的檢測(cè)率,或者所檢測(cè)對(duì)象并非是致病微生物,如此一來(lái),除了難以提供準(zhǔn)確的病原信息之外,還會(huì)對(duì)臨床醫(yī)生診治造成誤導(dǎo)。比如大便培養(yǎng)、中段尿培養(yǎng)等,通常情況下,由患者本人對(duì)標(biāo)本自行留取,若護(hù)理人員存在解釋不足,或者是宣傳不到位的情況,那么會(huì)降低患者正確留取標(biāo)本的意識(shí),非常容易出現(xiàn)未取到異常標(biāo)本以及標(biāo)本量不足等情況,從而降低微生物陽(yáng)性檢出率。針對(duì)微生物檢驗(yàn)標(biāo)本來(lái)分析,需要在用藥開(kāi)始前進(jìn)行采集［3,4］。而對(duì)于痰標(biāo)本,在進(jìn)行分離、培養(yǎng)操作時(shí),可用綿纖接種方法行此操作。在開(kāi)展厭氧培養(yǎng)過(guò)程中,痰標(biāo)本需采用標(biāo)本的氣管穿刺法來(lái)進(jìn)行各項(xiàng)操作；針對(duì)尿標(biāo)本來(lái)講,需要通過(guò)膀胱穿刺操作來(lái)得到；對(duì)于大便樣本,盡可能避免與空氣接觸。通過(guò)血培養(yǎng)對(duì)病原微生物進(jìn)行檢測(cè),乃是對(duì)諸如敗血癥、菌血癥等血液病進(jìn)行診斷的關(guān)鍵依據(jù),但在當(dāng)前臨床中,在采集血培養(yǎng)標(biāo)本時(shí),存在采血量少及采血時(shí)機(jī)不當(dāng)?shù)惹闆r,比如成年人,其在具體的采血量上,需要在8～10 ml 之間,選擇在發(fā)熱高峰前,或者是發(fā)病初期進(jìn)行采集最為合宜［5-7］。②保存、運(yùn)送微生物標(biāo)本存在不規(guī)范情況。在保存、運(yùn)送微生物標(biāo)本時(shí),其基本原則就是對(duì)可能被非致病微生物污染的情況進(jìn)行預(yù)防、使病原微生物保持良好的活力等［8,9］。需要強(qiáng)調(diào)的是,在檢測(cè)微生物標(biāo)本時(shí),如果其檢測(cè)目的不同,那么需要采用與之相匹配的運(yùn)送、保存方法。比如用厭氧菌進(jìn)行培養(yǎng)所得到的標(biāo)本,需運(yùn)送方法便比較特殊,即需做到即刻送檢,不能與空氣接觸,不然會(huì)造成厭氧菌的大量死亡,從而降低陽(yáng)性率。③檢驗(yàn)人員缺乏相關(guān)經(jīng)驗(yàn)。針對(duì)臨床微生物檢驗(yàn)而言,其多需要借助生理學(xué)、形態(tài)學(xué)的生化反應(yīng)來(lái)進(jìn)行,各步驟均需要有良好的判斷力。所以,工作人員不斷積累個(gè)人經(jīng)驗(yàn),豐富基礎(chǔ)知識(shí),尤為重要［10］。可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室需要,依據(jù)自身實(shí)驗(yàn)條件,編寫(xiě)詳細(xì)且實(shí)用的標(biāo)準(zhǔn)操作程序手冊(cè),為全體工作人員工作提供指導(dǎo)。

在本次研究當(dāng)中,2018 年8 月～2019 年8 月的總陽(yáng)性率高于2019 年9 月～2020 年9 月,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。但需要指出的是,本次研究未包含人型支原體、真菌學(xué)等的陽(yáng)性報(bào)告,一年前,此些項(xiàng)目的陽(yáng)性率起伏情況對(duì)本研究是否會(huì)有影響,仍需深究。

綜上所述,檢驗(yàn)人員需要做好與臨床醫(yī)生之間的溝通與聯(lián)系,不斷學(xué)習(xí)新知,豐富自己的專(zhuān)業(yè)知識(shí),強(qiáng)化操作技能,促進(jìn)個(gè)人理論水平的提升；此外,還需要不斷改進(jìn)操作技術(shù),促進(jìn)微生物檢驗(yàn)質(zhì)量的提升,最終達(dá)到提升臨床微生物檢驗(yàn)陽(yáng)性率的目的,為臨床疾病診治提供可靠依據(jù)。