任利利 陶 靜 武海衛(wèi) 宗世祥 王傳珍 華 德 石 娟 劉漪舟 駱有慶

(1.北京林業(yè)大學(xué)林木有害生物防治北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 北京 100083； 2.山東省林業(yè)科學(xué)研究院 濟(jì)南 250014； 3.山東省煙臺(tái)市森林資源監(jiān)測(cè)保護(hù)服務(wù)中心 煙臺(tái) 264003； 4.山東省煙臺(tái)市牟平區(qū)自然資源局 煙臺(tái) 264100)

長(zhǎng)林小蠹Hylurgusligniperda(Fabricius, 1787)，異名：BostrichusligniperdaFabricius, 1787；BostrichuselongatusHerbst, 1793;BostrichusflavipesPanzer, 1795;HylesinusflavipesPanzer, 1795;Hylesinusligniperda(Fabricius, 1792);Hylurguselongatus(Herbst, 1793);Hylurgusflavipes(Panzer, 1795);HylurguslongulusKolenati, 1846。屬鞘翅目(Coleoptera)象蟲科(Curculionidae)小蠹亞科(Scolytinae)切梢小蠹族(Tomicini)林小蠹屬(HylurgusLatreille)，英文名為 red-haired pine bark beetle。

林小蠹屬在世界范圍內(nèi)已知有3種(Alonso-Zarazagaetal.， 2017)，寄主樹種大多為松屬(Pinusspp.)植物。歐洲報(bào)道一種為米林小蠹HylurgusmicklitziWachtl, 1881，主要危害阿勒頗松(Pinushalepensis)、 海岸松(P.pinaster)、 意大利松(P.pinea)和P.nigrasubsp.pallasiana(Wood, 1992; Brightetal., 1997; Alonso-Zarazagaetal.， 2017)； 印度分布一種(Wood, 1985)，HylurgusindicusWood, 1985，作者描述的4只雌性標(biāo)本采集于喜馬拉雅長(zhǎng)葉松(Pinusroxburghii)(原文中Pinuslongifolia為其異名)木段，除此新種記錄外，該種無其他研究報(bào)道。我國(guó)無該屬昆蟲分布的報(bào)道。

長(zhǎng)林小蠹原產(chǎn)歐洲南部及非洲北部的地中海沿岸。近90年來，已傳播至各大洲，包括歐洲全部，非洲北部及其南端，亞洲的日本、韓國(guó)、土耳其、斯里蘭卡，大洋洲的澳大利亞、新西蘭，南美洲的巴西、智利、烏拉圭以及北美洲的美國(guó)。據(jù)報(bào)道，傳入日本的時(shí)間推測(cè)早于1931年； 于 1942 年傳入澳大利亞， 1956 年傳入烏拉圭， 1973 年傳入南非， 1974年傳入新西蘭， 1987年傳入智利， 2000—2001年于紐約發(fā)現(xiàn)越冬種群并明確傳入美國(guó)， 2007 年在加州發(fā)現(xiàn)； 于2007 年傳入阿根廷， 2018年報(bào)道傳入韓國(guó)(Parketal.， 2017； Wood， 1992； Alonzo-Zarazagaetal., 2017； El-Khouryetal.， 2019； Swan， 1942； Schedletal., 1966； Schedl， 1982； Ciesla， 1988； Liuetal.， 2007)。我國(guó)沒有長(zhǎng)林小蠹分布的報(bào)道，但已將其列為進(jìn)境植物檢疫性有害生物，國(guó)際植物保護(hù)公約(IPPC)規(guī)定其為需要檢疫除害處理的種類(International Plant Protection Commission， 2005； 國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局， 2017)。

該蟲在世界范圍的寄主樹種超過20種(Eglitis, 2001)，包括： 2針?biāo)傻臍W洲赤松(P.sylvestris)、意大利黑松(P.brutia)、阿勒頗松、土耳其松(P.halepensisvar.brutia)、歐洲黑松(P.nigra)、P.nigrasubsp.pallasiana、奧地利黑松 (P.nigravar.austriaca)、克里木松(P.nigravar.caramanica)、海岸松、日本黑松 (P.thunbergii)、赤松(P.densiflora)， 2～3針?biāo)珊?針?biāo)傻臐竦厮?P.elliottii)、加那利松 (P.canariensis)、展葉松(P.patula)、輻射松(P.radiata)， 5針?biāo)傻纳剿?P.montezumae)、意大利松、北美喬松(P.strobus)， 其他寄主還包括冷杉屬(Abiesspp.)、落葉松屬(Larixspp.)、云杉屬(Piceaspp.)和黃杉屬(Pseudotsugaspp.)的部分樹種。

據(jù)國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道，長(zhǎng)林小蠹屬樹皮小蠹類，通常侵染新伐木、伐樁、衰弱木，健康樹也可受危害，是次期性害蟲中的先鋒種； 鉆蛀坑道于樹干基部、根頸和根部。受害樹木樹皮和根部外表可見長(zhǎng)林小蠹的侵入孔或羽化孔，幼蟲在坑道內(nèi)取食時(shí)，樹皮表面有暗色蛀屑排出(Browne, 1968； Ciesla, 1988)。長(zhǎng)林小蠹在法國(guó)一般1年2代，在智利1年3代，世代重疊使其在全年多數(shù)時(shí)間均能傳播與危害； 成蟲的活動(dòng)受到溫度、濕度和光照的影響。羽化后出孔前的成蟲具有蔽光性； 出孔后揚(yáng)飛期溫度高于20 ℃時(shí)具有正趨光性，侵入寄主或入土后恢復(fù)蔽光性； 濕度同時(shí)也會(huì)影響其趨光習(xí)性； 性成熟前有在新生松枝上鉆蛀補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)的習(xí)性(Fabreetal., 1974； Ciesla， 1988； Eglitis, 2001)。長(zhǎng)林小蠹雌蟲首先侵入根皮下，在根皮的形成層中筑造一個(gè)交配室并誘集雄蟲進(jìn)入，雌蟲與雄蟲交配后(一夫一妻制)，雌蟲建造 1 個(gè)長(zhǎng)而彎曲的母坑道，并在坑道兩端的刻痕中產(chǎn)卵，據(jù)報(bào)道每雌蟲最多產(chǎn)卵500粒(Fabreetal., 1974)。雌蟲可鉆蛀數(shù)條母坑道，單頭雌蟲蛀母坑道總長(zhǎng)度可達(dá)3 m。幼蟲在根皮下取食韌皮部與邊材，子坑道不規(guī)則，不會(huì)形成特定的坑道結(jié)構(gòu)； 幼蟲共4齡，老熟后化蛹，以幼蟲或成蟲越冬，春季羽化飛出后，時(shí)有群聚現(xiàn)象(Browne, 1968)。

另?yè)?jù)報(bào)道，除了直接危害松樹外，長(zhǎng)林小蠹可攜帶能侵染與危害寄主樹木的半帚霉屬(Leptographium)、蛇口殼屬(Ophiostoma)、鐮刀菌屬(Fusarium)、鏈格孢屬(Alternaria)、球殼孢屬(Sphaeropsis)等真菌(Davydenkoetal., 2014; Jankowiaketal., 2013; Kimetal., 2011; Rayetal.2006)，不僅易導(dǎo)致樹木的死亡，且嚴(yán)重影響成品木材的品質(zhì)。在歐洲，其是傘滑韌屬(Bursaphelenchus)幾種線蟲，如Bursaphelenchushellenicu、B.sexdentati和B.tusciae等的傳播媒介(Ambrogionietal., 1998; Mejrietal., 2016; Carletti, 2008; Carlettietal., 2008; Penasetal., 2006; 2004; Torrinietal., 2020)。長(zhǎng)林小蠹成蟲具有很強(qiáng)的自然傳播能力，可飛行達(dá)數(shù)千米； 在澳大利亞，該蟲 18個(gè)月內(nèi)傳播了 25 km(楊曉軍等， 2002)； 在智利，自 20世紀(jì) 80年代傳入該蟲后，到 1991年就已擴(kuò)散至輻射松的所有分布區(qū)(Mauseletal., 2006)。

長(zhǎng)林小蠹是我國(guó)口岸檢疫中截獲次數(shù)最多的林業(yè)害蟲之一，公開報(bào)道的海關(guān)截獲記錄顯示，多個(gè)省市口岸在來自智利、新西蘭、澳大利亞、巴西、烏拉圭等多國(guó)的原木、鋸材和集裝箱中，均截獲到了該蟲。最早于1986年4月14日，天津動(dòng)植物檢疫所曾在進(jìn)口的智利原木上截獲到該蟲(魏厚德等， 1991)。2019年4月19日，河北曹妃甸海關(guān)在進(jìn)口的新西蘭輻射松原木中截獲此蟲。2005—2015年間，我國(guó)口岸共截獲長(zhǎng)林小蠹4 049批次(梁振等， 2017年)，被認(rèn)為是重要的“林木殺手”。

目前我國(guó)對(duì)長(zhǎng)林小蠹生物學(xué)特性、適生性、防治技術(shù)等方面的研究少，認(rèn)知度低，極大地增加了檢疫、監(jiān)測(cè)和防治的難度。本研究利用形態(tài)學(xué)、分子生物學(xué)和危害特征分析的方法對(duì)其進(jìn)行了鑒定，首次發(fā)現(xiàn)并明確了該蟲在我國(guó)的入侵、定殖并嚴(yán)重危害，初步調(diào)查了其危害特性。

1 材料與方法

1.1 蟲源采集

樣品采集于山東省煙臺(tái)市牟平區(qū)沿海防護(hù)林帶(37.457 241°N，121.851 217°E)。2020年10月至11月，在日本黑松根皮下，采集到一種嚴(yán)重危害根部的小蠹，帶回北京林業(yè)大學(xué)森林保護(hù)學(xué)科檢疫實(shí)驗(yàn)室。

1.2 形態(tài)特征觀察

使用蔡司AxioZoom V16體式顯微鏡對(duì)該小蠹的幼蟲、蛹及成蟲形態(tài)特征進(jìn)行觀察、拍照。參考Balachowsky (1949)、Wood (1986)、袁克等(2007)、王仿等(2006)以及《中華人民共和國(guó)出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)〈長(zhǎng)林小蠹檢疫鑒定方法〉》(中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局， 2006)對(duì)該蟲形態(tài)特征進(jìn)行檢索與比對(duì)。

1.3 分子鑒定

隨機(jī)取不同寄主單株中的成蟲12頭和幼蟲5頭，分別提取單頭小蠹的基因組 DNA，用于分子鑒定。

DNA 提?。?使用微量 DNA 提取試劑盒 AxyPrep Multisource Genomic DNA Miniprep Kit，(Axygen，美國(guó))，按說明書步驟提取樣品 DNA； 使用超微量紫外線分光光度計(jì) NanoDrop 2000(Thermo Fisher Scientific Inc.，美國(guó))檢測(cè)樣品 DNA 濃度。

PCR 擴(kuò)增： 本試驗(yàn)以上述方法提取的 DNA 為模板，擴(kuò)增核糖體28S和線粒體 COⅠ基因片段。引物序列見表1。PCR 擴(kuò)增體系為： 2×Es Taq MasterMix(CWBIO，CW0690M)20 μL，正向引物 1 μL，反向引物 1 μL，DNA 模板 2 μL 和超純水 16 μL 共 40 μL。PCR 反應(yīng)程序?yàn)椋?94 ℃預(yù)變性 3 min； 94 ℃變性 45 s，參照表1中溫度退火 1 min，72 ℃延伸 1 min，共進(jìn) 行 40 次循環(huán)； 72 ℃延伸 10 min； 4 ℃保存。

表1 引物序列信息Tab.1 Primer sequence information

PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物測(cè)序： PCR 擴(kuò)增完成的產(chǎn)物送北京睿博興科生物技術(shù)有限公司進(jìn)行雙向測(cè)序。

序列比對(duì)： 拼接后的樣本28S和COⅠ序列進(jìn)行了Blast(NCBI)比對(duì)，使用Blastn、 Standard database、High similar sequences (mega blast 程序)。

面對(duì)激烈的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)，HM國(guó)際貨代企業(yè)應(yīng)當(dāng)努力增強(qiáng)實(shí)力，提高市場(chǎng)話語(yǔ)權(quán)以及服務(wù)專業(yè)性，為客戶爭(zhēng)取更多的利益。

基于28S序列建樹： 參考黃蓬英等(2018)、 McKenna等 (2009)、Sequeira等 (2002)、Jordal等 (2011)、Susoy等(2014)、Pistone等 (2016) 以及Pistone等 (2018) 的研究，隨機(jī)選取3條試驗(yàn)樣本序列(NCBI 登錄號(hào)MW725426、MW725427、MW725428)，下載 NCBI 數(shù)據(jù)庫(kù)中相關(guān)序列(表2)，使用Bothrosternusfoveatus作為外群。

表2 相關(guān)建樹序列信息Tab.2 Sequence information in tree construction

使用PhyloSuite (Zhangetal., 2020)及相關(guān)插件程序建樹，使用MAFFT (Katohetal., 2013)進(jìn)行多重序列比對(duì)，使用ModelFinder (Kalyaanamoorthyetal.， 2017)選擇最適建樹模型，使用IQ-TREE (Nguyenetal., 2015)構(gòu)建ML樹(Maximum likelihood)，參數(shù)如下： 5 000 ultrafast bootstraps, approximate Bayes 檢驗(yàn)和 Shimodaira-Hasegawa-like approximate likelihood-ratio 檢驗(yàn)(Hoangetal.， 2018)； 進(jìn)化樹文件由iTOL(https:∥itol.embl.de)使用Root mid point 模式成圖。

基于COⅠ序列的單倍型分析： 下載 NCBI 數(shù)據(jù)庫(kù)中長(zhǎng)林小蠹COⅠ序列JQ015131、JQ015128、JQ015130和JQ015129 (經(jīng)通訊聯(lián)系，明確為美國(guó)研究者上傳，樣本采集地不詳)， AY040292(新西蘭奧克蘭樣本)， HM002621(經(jīng)通訊聯(lián)系，明確為深圳口岸截獲來自新西蘭輻射松原木攜帶的樣本)。隨機(jī)選取樣品12條成蟲序列和5條幼蟲序列(NCBI 登錄號(hào)為MW726016、MW726017、MW726018、MW726019、MW726020、MW726021、MW726022、MW726023、MW726024、MW726025、MW726026、MW726027、MW726028、MW726029、MW726030、MW726031和MW726032)，多重序列比對(duì)方法同上，除去前后冗余堿基序列，所得長(zhǎng)林小蠹COⅠ序列長(zhǎng)度為676 bp。使用軟件DNAsp v6(Libradoetal., 2009)計(jì)算遺傳多樣性的參數(shù)，包括DNA序列變異位點(diǎn)數(shù)量、核苷酸多樣性、單倍型數(shù)量、單倍型多樣性以及各單倍型的種群組成。使用PopART(http:∥PopART.otago.ac.nz)構(gòu)建單倍型網(wǎng)絡(luò)圖。

1.4 危害特征觀察

2020年11月，在山東省煙臺(tái)市牟平區(qū)沿海防護(hù)林帶的被害日本黑松林內(nèi)進(jìn)行踏查和樹干、根解析。依據(jù)被害木樹冠顏色，選擇綠色樹冠5棵，黃綠色樹冠21棵，以及紅冠木5棵； 伐倒后將樣木根系用吊車從沙地中整體拔出，對(duì)該小蠹的危害特征進(jìn)行觀察與統(tǒng)計(jì)。

2 結(jié)果與分析

2.1 形態(tài)特征鑒別

2.1.1 切梢小蠹族的主要形態(tài)鑒別特征 復(fù)眼完整，縱橢圓形； 前胸背板前半部無瘤齒； 鞘翅2基緣呈并列雙凸弧線(圖1)。

圖1 長(zhǎng)林小蠹符合切梢小蠹族的關(guān)鍵形態(tài)特征Fig. 1 Hylurgus ligniperda conforms to the key morphological characteristics of the Tribe Tomicinia. 復(fù)眼橢圓形、完整(長(zhǎng)林小蠹)Compound eye oval, complete (H. ligniperda); b. 前胸背板及鞘翅基緣(長(zhǎng)林小蠹)Pronotum and elytra base (H. ligniperda).

2.1.2 長(zhǎng)林小蠹與常見相似屬種類的區(qū)別 1)與切梢小蠹屬(Tomicus)的區(qū)別 林小蠹屬前足基節(jié)窩相連； 前胸背板較狹長(zhǎng)，長(zhǎng)為寬的1倍左右，前1/3輕微縊縮； 鞘翅溝間部毛多列。切梢小蠹屬前足基節(jié)窩微分離； 前胸背板較粗壯，長(zhǎng)為寬的0.85倍，前1/3強(qiáng)烈縊縮； 鞘翅溝間部毛單列(圖2)。

圖2 長(zhǎng)林小蠹與切梢小蠹屬形態(tài)特征的對(duì)比Fig. 2 Comparison of the morphological characteristics of Hylurgus ligniperda and the Genus Tomicusa. 前足基節(jié)窩相連(長(zhǎng)林小蠹)Procoxae contiguous (H. ligniperda); b. 前足基節(jié)窩微分離(橫坑切梢小蠹)Procoxae moderately separated (Tomicus minor); c. 前胸背板較狹長(zhǎng)(長(zhǎng)林小蠹)Pronotum more slender (H. ligniperda); d. 前胸背板較粗壯(橫坑切梢小蠹)Pronotum stouter (T. minor); e. 鞘翅溝間部毛多列(長(zhǎng)林小蠹)Erect interstrial setae abundant, confused (H. ligniperda); f. 鞘翅溝間部毛單列(橫坑切梢小蠹)Erect interstrial setae in uniseriate rows (T. minor).

圖3 長(zhǎng)林小蠹與大小蠹屬形態(tài)特征的對(duì)比Fig. 3 Comparison of the morphological characteristics of Hylurgus ligniperda and the Genus Dendroctonusa. 觸角鞭節(jié)6節(jié)(長(zhǎng)林小蠹)Antennal funicle 6 segmented (H. ligniperda);b. 觸角鞭節(jié)5節(jié)(紅脂大小蠹) Antennal funicle 5 segmented (Dendroctonus valens).

3)與根小蠹屬(Hylastes)的區(qū)別 林小蠹屬鞘翅基緣隆起； 觸角鞭節(jié)6節(jié)； 體表被長(zhǎng)毛，無鱗片。根小蠹屬鞘翅基緣不隆起； 觸角鞭節(jié)7節(jié)； 體表被短剛毛或鱗片(圖4)。

圖4 長(zhǎng)林小蠹與根小蠹屬形態(tài)特征的對(duì)比Fig. 4 Comparison of the morphological characteristics of Hylurgus ligniperda and the Genus Hylastesa. 鞘翅基緣隆起，體表被長(zhǎng)毛(長(zhǎng)林小蠹)Crenulations on elytral bases usually well developed, body surface setae usually hairlike (H. ligniperda); b. 鞘翅基緣不隆起，體表被短剛毛或鱗片(黑根小蠹)Crenulations on elytral bases usually poorly developed，body surface setae scalelike or bristle (Hylastes parallelus);c. 觸角鞭節(jié)6節(jié)(長(zhǎng)林小蠹)Antennal funicle 6 segmented (H. ligniperda); d. 觸角鞭節(jié)7節(jié)(黑根小蠹)Antennal funicle 7 segmented (H. parallelus).

2.1.3 長(zhǎng)林小蠹的形態(tài)特征 1)成蟲 如圖5所示，體長(zhǎng)4～5.7 mm，體圓筒形，黃褐色至黑色。觸角鞭節(jié)6節(jié)，錘狀部4節(jié)，復(fù)眼長(zhǎng)橢圓形； 額面正下方有一黑色瘤； 頭腹面前咽縫三角區(qū)下陷。鞘翅基緣具顏色較深的鋸齒狀邊緣； 鞘翅溝上毎刻點(diǎn)的中央各具一黃色短茸毛； 溝間粗糙，具橫皺褶，每溝間具有4～5排排列不甚規(guī)則且向后斜伸的茸毛，鞘翅兩側(cè)的茸毛比前胸背板兩側(cè)的要短，且鞘翅上的茸毛愈向翅末愈長(zhǎng)，在斜面上，茸毛形成簇狀。

圖5 長(zhǎng)林小蠹識(shí)別的關(guān)鍵形態(tài)特征Fig. 5 The key morphological characteristics of the identification of Hylurgus ligniperdaa. 成蟲背面觀Adult dorsal view; b. 額面正下方有一黑色瘤Frons with a median tubercle; c. 頭腹面前咽縫三角區(qū)下陷Gular triangle with depression.

2)其他蟲態(tài)形態(tài)特征 老熟幼蟲體長(zhǎng)約4.1 ～ 5.9 mm； 體圓柱形，粗壯，弓曲，黃白色。頭部黃褐色，胸節(jié)和腹節(jié)均無足(圖6)。

圖6 長(zhǎng)林小蠹幼蟲和蛹的形態(tài)Fig. 6 The morphological characteristics of the larvae and pupae of Hylurgus ligniperda a. 蛹Pupae; b. 老熟幼蟲The last larval instar.

2.2 分子鑒定

采集于煙臺(tái)日本黑松根部的12頭成蟲小蠹樣本及5頭幼蟲樣本，屬同一單倍型。通過Blast比對(duì)，在28S 基因部分序列(647 bp)與已報(bào)道的長(zhǎng)林小蠹序列JX263769(新西蘭奧克蘭樣本)，MH005064(廈門口岸截獲來自于澳大利亞進(jìn)口輻射松原木攜帶樣本)，KJ531125(德國(guó)樣本)相似性分別為： 100%，99.85%和99.69%。在COⅠ 基因部分序列(676 bp)與已報(bào)道的長(zhǎng)林小蠹序列HM002621(深圳口岸截獲來自于新西蘭輻射松樣本)相似性達(dá)100%。

基于28S基因序列的最大似然樹結(jié)果顯示(圖7)，采集于山東煙臺(tái)的樣本序列(SDYT H1—3)，與口岸截獲來自于澳大利亞進(jìn)口輻射松原木攜帶的樣本序列、德國(guó)樣本序列、新西蘭奧克蘭樣本序列以100%的置信系數(shù)聚為一支。長(zhǎng)林小蠹一支以99%的置信系數(shù)與同屬種類米林小蠹聚為一支。

圖7 基于28S 基因序列的ML 系統(tǒng)發(fā)育樹 (圓圈代表ultrafast bootstrap置信系數(shù))Fig. 7 ML phylogenetic tree based on 28S gene sequence (circle represents ultrafast bootstrap support)

參與單倍型數(shù)據(jù)分析的3個(gè)來源的長(zhǎng)林小蠹樣本共計(jì)23個(gè)，其中山東煙臺(tái)17個(gè)樣本。線粒體COⅠ基因序列長(zhǎng)度為 676 bp，總體的核苷酸多樣性(Pi)為0.008 95，共含有變異位點(diǎn)17個(gè)； 共有6個(gè)單倍型； 所有樣本總體單倍型多樣性為0.395 3。山東煙臺(tái)樣本均屬于同一單倍型，與深圳口岸截獲來自于新西蘭輻射松的長(zhǎng)林小蠹樣本屬于同一單倍型(圖8)。

圖8 基于676 bp COⅠ片段的23個(gè)長(zhǎng)林小蠹樣本單倍型網(wǎng)絡(luò)Fig. 8 Haplotype network of 23 global Hylurgus ligniperda samples based on 676 bp COⅠ sequences Hap_1-6: 6個(gè)單倍型Six haplotypes.

經(jīng)過基于COⅠ和 28S 基因序列的DNA條碼分析，采集于山東煙臺(tái)的小蠹樣本為長(zhǎng)林小蠹，系首次發(fā)現(xiàn)該蟲在中國(guó)定殖。

2.3 危害特征

據(jù)初步調(diào)查，該蟲在牟平區(qū)的寄主樹種為我國(guó)引進(jìn)的外來樹種日本黑松。危害嚴(yán)重，在挖出的枯死松樹根系中，侵害株率達(dá)100%。長(zhǎng)林小蠹危害部位可從樹干下部至根系，單坑道長(zhǎng)達(dá)1.4 m； 距離干基1.8 m的主干上也可受害。成蟲也可直接穿越土壤侵害根系和羽化出孔，從土壤入侵根部時(shí)，可向干基部或根端部的方向挖掘坑道； 在側(cè)根上可侵害遠(yuǎn)離根際7.4 m處的根，可危害細(xì)至0.5 cm的根； 根系中危害深達(dá)土壤內(nèi)1.5 m(圖9a、b)。嚴(yán)重受害的樹木根系中，半米段根(根徑12 cm左右)的蟲口數(shù)可達(dá)62頭。被侵害的根皮表面可見侵入孔、羽化孔和通氣孔； 被侵害的根皮下充滿棕色細(xì)粉狀蟲糞； 母坑道長(zhǎng)，數(shù)量較多時(shí)交錯(cuò)在一起； 無明顯的子坑道； 蛹室明顯，分布于母坑道兩側(cè)。可見成蟲或幼蟲在坑道內(nèi)排隊(duì)或聚集鉆蛀； 也可見成蟲在坑道內(nèi)交配(圖9c—g)。該蟲可獨(dú)立危害樹冠呈黃綠色、流脂豐富的黑松根部，初步判斷其侵入順序早于與其混合危害的其他多種鉆蛀性害蟲，如褐梗天牛(Arthopalisrusticus)、梢小蠹(Cryphalussp.)、角脛象(Shirahoshizosp.)等； 發(fā)現(xiàn)受該蟲侵染的樹木中，藍(lán)變菌侵染嚴(yán)重。寄主新鮮的傷口對(duì)成蟲的誘集能力強(qiáng)， 2020年11月初仍有成蟲在林間活動(dòng)，已發(fā)現(xiàn)的越冬蟲態(tài)有老熟幼蟲、蛹和成蟲， 2021年3月初始見成蟲在林間活動(dòng)。

圖9 長(zhǎng)林小蠹危害特征初步觀察Fig. 9 Preliminary observation results of the damaging characteristics of Hylurgus ligniperdaa. 長(zhǎng)林小蠹危害特點(diǎn)示意Schematic diagram of the damaging characteristics of H. ligniperda; b. 長(zhǎng)林小蠹危害根部特點(diǎn)示意Schematic diagram of the damaging characteristics of H. ligniperda to roots; c. 危害后根皮下的蟲糞The beetle frass under the root bark; d. 成蟲聚集鉆蛀坑道Adults gathering and boring the tunnel; e. 坑道內(nèi)蛹室Pupal chambers in the tunnel； f. 聚集危害的幼蟲Larvae gathering and damaging; g. 坑道內(nèi)成蟲交配Mating of adults in the tunnel.

3 結(jié)論

經(jīng)過資料查證、近緣種形態(tài)鑒別、基因條碼比對(duì)、危害特征分析，以及原產(chǎn)地與入侵發(fā)現(xiàn)地自然生態(tài)地理和寄主樹種的一致性等一系列的核實(shí)比較與綜合判斷，可明確長(zhǎng)林小蠹這種外來有害物種已入侵我國(guó)，在我國(guó)山東煙臺(tái)定殖，并嚴(yán)重危害日本黑松。長(zhǎng)林小蠹危害性強(qiáng)，成蟲可直接進(jìn)入土壤侵入樹木根部，甚至可危害遠(yuǎn)離根基約7 m以上0.5 cm的細(xì)根，可先期侵害亞健康樹木并致死。該蟲隱蔽性危害，地上無明顯蟲糞等特殊易辨的危害特征，監(jiān)測(cè)、防控難度極大。長(zhǎng)林小蠹在世界各大洲之間的入侵歷史具有國(guó)際重大入侵生物的基本特點(diǎn)，即傳播擴(kuò)散時(shí)間長(zhǎng)、入侵地分布廣，且寄主樹種多、環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng)。本文為深入研究長(zhǎng)林小蠹的特征和快速鑒定方法奠定了基礎(chǔ)，便于提高鑒定、檢驗(yàn)檢疫的針對(duì)性和有效性； 初步調(diào)查了該蟲的危害特征，可為有效防控技術(shù)的研發(fā)提供路徑。同時(shí)，該蟲在膠東半島與松材線蟲混合發(fā)生的關(guān)系等也亟待研究。